目的 :构建人白细胞介素 7(h IL - 7)的真核表达载体。方法 :从人脾脏组织的总 RNA中 ,用 RT- PCR方法扩增出编码成熟 h IL- 7的 c DNA,将其克隆于 p MD18- T质粒中 ,并进行序列测定。再将 h IL - 7c DNA以正义及反义插入真核、原核双...目的 :构建人白细胞介素 7(h IL - 7)的真核表达载体。方法 :从人脾脏组织的总 RNA中 ,用 RT- PCR方法扩增出编码成熟 h IL- 7的 c DNA,将其克隆于 p MD18- T质粒中 ,并进行序列测定。再将 h IL - 7c DNA以正义及反义插入真核、原核双重表达载体 p BK- CMV质粒 ,转化至大肠杆菌 DH5α。最后将表达的 lacz- h IL - 7重组蛋白行SDS- PAGE电泳 ,并作考马斯亮蓝染色分析 ,western blot鉴定。结果 :h IL- 7序列测定结果与预期一致。p BK-CMV- h IL- 7(正义插入 )的克隆表达重组蛋白 ,western blot证实此蛋白为 IL- 7。结论 :成功构建了 h IL- 7的真核表达载体 ,为进一步研究 h IL- 7的抗肿瘤作用创造了条件。展开更多
目的表达、复性和纯化重组人白细胞介素7(recombinant human interleukin-7,rhIL-7)蛋白,为其功能研究打下基础。方法在已经对IL-7基因TA克隆的基础上进行亚克隆,插入pET-21b载体中,构建rhIL-7的原核表达载体,阳性克隆经测序成功后转化...目的表达、复性和纯化重组人白细胞介素7(recombinant human interleukin-7,rhIL-7)蛋白,为其功能研究打下基础。方法在已经对IL-7基因TA克隆的基础上进行亚克隆,插入pET-21b载体中,构建rhIL-7的原核表达载体,阳性克隆经测序成功后转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,优化rhIL-7蛋白表达条件,并对表达的蛋白进行复性及纯化,利用免疫印迹鉴定重组蛋白。结果表达的蛋白与预期相对分子质量17 400相符,经优化后确定蛋白表达条件为:诱导温度为37℃、IPTG诱导浓度为1.0 mmol/L、诱导时间为2 h,且rhIL-7的复性效率较好(约50%),纯化后蛋白纯度高达95%以上,并经Western blot证实表达的蛋白为rhIL-7。结论成功获得高纯度的rhIL-7复性蛋白。展开更多
目的:探讨白细胞介素(IL)-7和IL-37在湿疹患者外周血单一核细胞(PBMC)中m RNA的表达及与湿疹面积及严重度指数(EASI)、部分实验室指标的相关性。IL-7、IL-37在湿疹发生发展中的作用机制及白芍总苷(TGP)在湿疹中的治疗作用。方法:采用实...目的:探讨白细胞介素(IL)-7和IL-37在湿疹患者外周血单一核细胞(PBMC)中m RNA的表达及与湿疹面积及严重度指数(EASI)、部分实验室指标的相关性。IL-7、IL-37在湿疹发生发展中的作用机制及白芍总苷(TGP)在湿疹中的治疗作用。方法:采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法测定PBMC中IL-7、IL-37 m RNA的表达量并进行分析。结果:湿疹患者PBMC中IL-7 mRNA和IL-37 mRNA表达量显著高于健康对照组(均P<0.01);IL-7和IL-37 m RNA表达量与EASI评分之间均呈正相关(r=0.417,P<0.05);湿疹患者IL-7 m RNA表达量与嗜酸性粒细胞计数呈正相关(r=-0.029,P<0.05);经TGP治疗2周后湿疹患者IL-7和IL-37 mRNA表达量降低(P<0.05);治疗4周后湿疹患者IL-7和IL-37 m RNA表达量比治疗2周后明显降低(P<0.05)。结论:IL-7在湿疹发生发展过程中可能起一定的促炎作用,而IL-37可能起一定的抗炎作用;TGP可能通过IL-7及IL-37两因子或其传导通路对湿疹产生治疗作用。展开更多
白细胞介素（IL）-7与IL-15作为IL-2家族细胞因子，近年来由于其调控T细胞分化与增殖及其在免疫记忆形成与维持过程中的重要作用而备受关注。IL7和IL-15均具有与IL-2相似的异三聚体结构，共同参与两面神激酶（Januskinase，JAK；是一类...白细胞介素（IL）-7与IL-15作为IL-2家族细胞因子，近年来由于其调控T细胞分化与增殖及其在免疫记忆形成与维持过程中的重要作用而备受关注。IL7和IL-15均具有与IL-2相似的异三聚体结构，共同参与两面神激酶（Januskinase，JAK；是一类非跨膜型的酪氨酸激酶）／信号转导子和转录激活子（signal transducer and activator of transcription，STAT）信号通路，并参与调节辅助性T淋巴细胞（Th）1／Th2型细胞因子的平衡。相对于IL-2，IL-7和IL-15在维持机体T淋巴细胞抗结核感染中可持续发挥作用，且在结核病发生发展过程中的动态变化使其有望实现对结核病的鉴别诊断。此外，IL-7和IL-15能提高机体二次免疫应答的水平，因而在结核病预防或治疗性疫苗研究方面发挥的作用亦值得期待。展开更多
文摘目的 :构建人白细胞介素 7(h IL - 7)的真核表达载体。方法 :从人脾脏组织的总 RNA中 ,用 RT- PCR方法扩增出编码成熟 h IL- 7的 c DNA,将其克隆于 p MD18- T质粒中 ,并进行序列测定。再将 h IL - 7c DNA以正义及反义插入真核、原核双重表达载体 p BK- CMV质粒 ,转化至大肠杆菌 DH5α。最后将表达的 lacz- h IL - 7重组蛋白行SDS- PAGE电泳 ,并作考马斯亮蓝染色分析 ,western blot鉴定。结果 :h IL- 7序列测定结果与预期一致。p BK-CMV- h IL- 7(正义插入 )的克隆表达重组蛋白 ,western blot证实此蛋白为 IL- 7。结论 :成功构建了 h IL- 7的真核表达载体 ,为进一步研究 h IL- 7的抗肿瘤作用创造了条件。
文摘目的:探讨白细胞介素(IL)-7和IL-37在湿疹患者外周血单一核细胞(PBMC)中m RNA的表达及与湿疹面积及严重度指数(EASI)、部分实验室指标的相关性。IL-7、IL-37在湿疹发生发展中的作用机制及白芍总苷(TGP)在湿疹中的治疗作用。方法:采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法测定PBMC中IL-7、IL-37 m RNA的表达量并进行分析。结果:湿疹患者PBMC中IL-7 mRNA和IL-37 mRNA表达量显著高于健康对照组(均P<0.01);IL-7和IL-37 m RNA表达量与EASI评分之间均呈正相关(r=0.417,P<0.05);湿疹患者IL-7 m RNA表达量与嗜酸性粒细胞计数呈正相关(r=-0.029,P<0.05);经TGP治疗2周后湿疹患者IL-7和IL-37 mRNA表达量降低(P<0.05);治疗4周后湿疹患者IL-7和IL-37 m RNA表达量比治疗2周后明显降低(P<0.05)。结论:IL-7在湿疹发生发展过程中可能起一定的促炎作用,而IL-37可能起一定的抗炎作用;TGP可能通过IL-7及IL-37两因子或其传导通路对湿疹产生治疗作用。
文摘白细胞介素（IL）-7与IL-15作为IL-2家族细胞因子，近年来由于其调控T细胞分化与增殖及其在免疫记忆形成与维持过程中的重要作用而备受关注。IL7和IL-15均具有与IL-2相似的异三聚体结构，共同参与两面神激酶（Januskinase，JAK；是一类非跨膜型的酪氨酸激酶）／信号转导子和转录激活子（signal transducer and activator of transcription，STAT）信号通路，并参与调节辅助性T淋巴细胞（Th）1／Th2型细胞因子的平衡。相对于IL-2，IL-7和IL-15在维持机体T淋巴细胞抗结核感染中可持续发挥作用，且在结核病发生发展过程中的动态变化使其有望实现对结核病的鉴别诊断。此外，IL-7和IL-15能提高机体二次免疫应答的水平，因而在结核病预防或治疗性疫苗研究方面发挥的作用亦值得期待。
