猫泛白细胞减少症病毒A91S变异株对猫的致病性及基因组特征研究

猫泛白细胞减少症病毒(feline panleukopenia virus, FPV)是一种对猫危害严重的病原。近年来,一种VP2 91位氨基酸残基由A突变为S的FPV变异株(FPV A91S变异株)已经在国内广泛流行,但目前还未见该变异株对猫致病性的报道,本试验旨在探究FPV A91S变异株对猫的感染特性及其分子特征。利用F81细胞分离FPV A91S变异株,并研究其血凝特性、对猫的致病性及其基因组特征。成功分离到一株FPV A91S变异株,纯化后病毒滴度为10~(4.6 )TCID_(50)·mL^(-1);该毒株能在pH 6.0~6.5、4和37℃条件下有效凝集猪红细胞;分离株经口服成功感染幼猫,引起呕吐、腹泻、白细胞急剧降低、眼睑脓性分泌物等症状,并在5 d内导致猫死亡;大体和组织病理变化发现严重的肠道和肺出血。获得该毒株近乎全长的基因组序列,其VP2蛋白的关键位点氨基酸符合典型FPV特征。除了VP2 A91S的突变外,其NS1蛋白也有3个独特的氨基酸突变(D23N、I443V和H596Q),这些特征导致FPV A91S毒株在进化树中单独聚为一支,具有独特的遗传进化趋势。本研究首次探究了FPV A91S变异株的血凝性和对猫的致病性,为进一步了解FPV的生物学特性和遗传变异提供参考。

芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的作用机制研究

运用网络药理学结合分子对接技术探讨芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的作用机制.通过中药系统药理学数据库与分析平台数据库(TCMSP)和SwissTargetPrediction数据库综合相关文献报道获得芪胶升白胶囊功能靶标,在GeneCards数据库中获取白细胞减少症的治疗靶点,并对两者取交集靶点后,在DAVID数据库中进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.收集我院住院期间使用芪胶升白胶囊的白细胞减少症患者,比较使用前、后白细胞水平变化.采用动物实验验证网络药理学预测芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的核心靶点.芪胶升白胶囊与白细胞减少症交集靶点有124个,GO富集分析主要在基因表达调控、凋亡过程、细胞增殖等方面,KEGG富集分析主要在PI3K-Akt信号、细胞衰老、TNF信号通路、细胞凋亡、IL-17信号通路、NF-kappa B信号通路等方面.通过“药物-活性成分-靶点-通路-疾病”网络图分析发现,槲皮素、木犀草素、金雀异黄素、山柰酚、β-谷甾醇、非瑟酮、甘草素、8-异戊烯-山奈酚、花萼素、β-胡萝卜素作为芪胶升白胶囊的核心活性成分,可作用于PTGS2、RXRA、PIK3CG、CDK2、TNF、IL6、AKT1、CASP3、MAPK1、BCL2关键靶点,发挥治疗白细胞减少症的作用.临床研究发现,芪胶升白胶囊可明显升高住院期间白细胞减少症患者的白细胞水平,有效率达60.00%.动物实验发现,芪胶升白胶囊可明显升高小鼠白细胞水平(P<0.05),降低外周血TNF-α、IL-6水平(P<0.05).结果表明,芪胶升白胶囊中活性成分可作用于TNF-α、IL-6等关键靶点,参与免疫炎症等通路发挥治疗白细胞减少症的作用.

基于卫气理论辨治化疗后白细胞减少症

白细胞属于中医“卫气”范畴,卫气根于下焦,生于中焦,宣发于上焦,其生成输布与三焦都有关系,在脏则与肺、脾、肾关系密切。化疗后白细胞减少症是临床常见的抗肿瘤药物不良反应,中医药从卫气理论出发,治疗化疗后白细胞减少症,疗效确切、优势显著。

辽宁沈阳株猫泛白细胞减少症病毒VP2基因扩增及生物信息学分析

【目的】通过生物信息学方法分析1株2022年辽宁沈阳地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus, FPV)LN3株VP2蛋白的分子特征。【方法】利用FPV胶体金试纸条对临床上表现呕吐、腹泻等症状的患病猫粪便进行检测,提取该病猫粪便的病毒DNA进行FPV VP2基因PCR扩增及测序,使用Seqman软件对序列进行拼接。将所获序列与NCBI数据库中FPV和犬细小病毒(Canine parvovirus, CPV)的VP2基因进行相似性比对及遗传进化分析。使用生物信息学软件对该毒株VP2蛋白进行预测,包括理化性质、亲/疏水性、跨膜区、糖基化位点、亚细胞定位、二级结构、三级结构等。【结果】FPV LN3株VP2基因全长1 755 bp,编码584个氨基酸;与GenBank上登录的15株FPV同属一个大分支,相似性为98.9%~99.7%;与CPV处于不同分支上。生物信息学软件预测显示,FPV LN3株VP2蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构;含有7个潜在N-糖基化位点、86个O-糖基化位点和50个磷酸化位点;VP2蛋白在细胞质、细胞核、线粒体中的可能性分别为43.5%、34.8%和21.7%;VP2蛋白二级结构中无规则卷曲、α-螺旋、延伸链、β-转角分别占61.82%、8.90%、24.32%及4.97%,三级结构预测结果与其一致;VP2蛋白共有20个抗原表位。【结论】VP2是FPV遗传变异的关键基因,FPV LN3株VP2蛋白属于亲水性、非跨膜稳定蛋白,共存在20个抗原表位。试验结果为进一步研究FPV VP2蛋白功能及研发新型疫苗提供理论依据。

扶正升白汤对小细胞肺癌化疗后白细胞减少症患者的影响

目的:探讨扶正升白汤对小细胞肺癌化疗后白细胞减少症患者白细胞计数、卡诺夫斯凯计分(KPS)的影响。方法:选取2020年1月至2021年3月河北中医药大学附属沧州中西医结合医院收治的需进行化疗的小细胞肺癌患者(化疗后白细胞减少)120例为研究对象,通过随机数字表法分为观察组(60例,皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子+扶正升白汤)和对照组(60例,皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子)。比较两组患者的临床疗效、中医证候积分、白细胞计数、中性粒细胞绝对值和KPS评分。结果:观察组患者的总有效率为88.33%(53/60),高于对照组的70.00%(42/60),差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前相比,两组患者治疗后中医证候积分降低,白细胞计数、中性粒细胞绝对值升高,KPS评分升高;且观察组患者治疗后上述指标优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:扶正升白汤能显著提高小细胞肺癌化疗后白细胞减少症患者的白细胞计数,改善临床症状,提高KPS评分。

麦粒灸联合中药治疗肺癌放疗后白细胞减少症的疗效观察

目的 观察麦粒灸联合地榆升白片治疗肺癌放疗后白细胞减少症的临床疗效。方法 将92例肺癌放疗后白细胞减少症患者,随机分为观察组和对照组,每组46例。在常规对症治疗的基础上,对照组给予地榆升白片治疗,观察组在对照组基础上给予麦粒灸治疗。观察两组治疗前后中医证候积分、白细胞计数和中性粒细胞计数、T细胞亚群水平的变化,并比较两组临床疗效及骨髓抑制程度。结果 观察组总有效率为91.3%,显著高于对照组的78.3%(P<0.05)。两组治疗后中医证候积分较治疗前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。两组治疗后血白细胞计数和中性粒细胞计数均较治疗前升高(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05)。两组治疗后CD3^(+)T细胞百分比、CD4^(+)T细胞百分比、CD4^(+)/CD8^(+)比值显著降低(P<0.05),CD8^(+)T细胞百分比升高(P<0.05),且观察组优于对照组(P<0.05)。观察组骨髓抑制总发生率为34.8%,低于对照组的60.9%(P<0.05)。结论 在常规对症治疗的基础上,麦粒灸联合地榆升白片可改善肺癌放疗后白细胞减少症,临床疗效显著。

灸法对化学治疗后白细胞减少症患者有效性及安全性的系统评价再评价

目的对灸法治疗化学治疗(简称“化疗”)后白细胞减少症患者有效性及安全性的系统评价进行再评价。方法检索中国知网、PubMed、EMBASE等数据库中有关灸法治疗恶性肿瘤化疗后白细胞减少症的系统评价,检索时限为建库至2023年4月6日。由2名研究者筛选文献及提取资料,使用AMSTAR 2量表、GRADE系统、PRISMA 2020量表分别评价方法学质量、证据质量及报告质量。结果共纳入5篇文献,方法学质量均为低级。纳入文献的14个结局指标中,2个中级质量、4个低级质量、8个极低级质量。纳入文献的报告质量中,有4篇存在一定信息缺陷,1篇报告信息相对完整。结论灸法治疗化疗后白细胞减少症有较好的临床疗效,但纳入文献的方法学质量、证据质量和报告质量存在一定缺陷,未来仍需科学且严谨的系统评价,以及更多严格设计的大样本随机对照试验进一步验证。

三例猫泛白细胞减少症的诊断和治疗

猫泛白细胞减少症又称猫瘟,是一类急性、高度接触性传染病。疫苗接种不全或未接种疫苗的猫容易感染猫瘟,其传染源多样且致死率高,是目前临床上比较常见且危害性大的一类传染病。本文对三例猫泛白细胞减少症病例的检查、诊断、治疗、转归及预后进行讨论,详细分析其血常规、生化、传染病、血气等实验室检查项目并进行诊断,遵守支持性护理+对症治疗的治疗思路,采用抗病毒药物治疗,两例病例成功救治,一例死亡。本文详细总结了三例猫泛白细胞减少症病例的诊断及治疗方案,旨在对该病的症临床诊断和治疗提供参考。

猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定及VP2基因的遗传变异分析

为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,分离鉴定到1株FPV,命名为FPVBJ-CP/2022株。对决定病毒宿主范围和抗原性的VP2基因系统进化树分析表明,分离株与FPVJF-3株、FPVBeijing-01/2018聚为一支,与FPV疫苗株、CPV群亲缘关系较远。VP2蛋白主要功能位点分析结果显示,VP2蛋白中决定病毒抗原性和宿主嗜性的10个关键位点氨基酸均未发生突变,但该分离株的VP2蛋白序列与GenBank其他FPV毒株的VP2蛋白相比,91位氨基酸由丙氨酸(A)突变为丝氨酸(S),505位氨基酸由天冬酰胺(N)突变为天冬氨酸(D),该突变是否对FPVBJ-CP/2022株VP2蛋白的功能和生物学特性造成改变,有待于进一步研究。论文通过对毒株的遗传变异分析,为更好地预防和控制FPV感染提供了研究基础。

猫泛白细胞减少症病毒YX01株的分离鉴定及致病性分析

用F81细胞从疑似感染猫泛白细胞减少症病毒(FPV)猫的组织样本中分离出1株FPV毒株,命名为FPV YX01株,通过电镜观察、血凝试验以及化学试剂(20%乙醚和0.1 mol/L HCl)处理,分析了FPV YX01株的生物学特性;基于VP2基因序列,分析了FPV YX01株的遗传进化,通过动物回归试验评价了该分离毒株的致病力。结果显示,FPV YX01毒株感染F81细胞后,细胞出现萎缩拉丝、脱落、生长缓慢等典型病变;电镜观察可见FPV YX01病毒粒子呈圆形,表面无囊膜结构,直径约25 nm,可被FPV特异性抗体识别;遗传进化分析发现,YX01毒株VP2蛋白中决定FPV血凝活性和毒力的关键氨基酸位点未发生突变,且YX01毒株与意大利EU498695毒株高度同源;动物回归试验显示,感染YX01毒株可引起猫出现食欲减退、腹泻、体温双相热、肠胀气、肝脏出血以及白细胞数量急剧减少等猫泛白细胞减少症的典型临床症状,同时病理切片可见肝脏和肠组织出血、炎性细胞浸润等现象。研究结果分离到1株具有较强致病力的FPV毒株YX01株,为FPV调查、检测、试剂研发及抗体制备提供了物质基础。

北京部分地区猫泛白细胞减少症病毒、疱疹病毒和杯状病毒流行病学调查分析

为了解北京地区猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、疱疹病毒(FHV)和杯状病毒(FCV)的流行情况,并统计分析年龄和疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率的相关性,本调查于2021年1月—2023年6月收集北京地区多家宠物医院疑似感染FPV(313份)、FHV(1869份)或FCV(1638份)和体检动物样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)进行检测,并对结果进行统计分析。结果显示,FPV、FHV和FCV阳性率分别为57.51%、39.43%和42.31%;0~6月龄猫FPV阳性率显著高于>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~6月龄猫更易感染FPV;0~6月龄猫FHV阳性率显著高于>6~12月龄、>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~6月龄猫更易感染FHV;0~6月龄和>6~12月龄猫FCV阳性率显著高于>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~12月龄猫更易感染FCV;免疫猫FPV、FHV和FCV阳性率极显著低于未免疫猫(P<0.01),说明疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率呈强相关性,进一步表明疫苗免疫可有效降低FPV、FHV和FCV阳性率。因此,建议在0~6月龄及时进行猫三联疫苗免疫,可有效降低猫感染FPV、FHV和FCV的风险,更有利于宠物健康。

地榆升白片改善抗精神病药所致白细胞减少症的疗效分析

目的 探讨地榆升白片、鲨肝醇片两种药物单独使用改善抗精神病药所致白细胞减少症,并评价其临床疗效和安全性。方法 采用回顾性研究方法,选取2020年12月至2022年12月江西省精神病院因服用抗精神病药所致的白细胞减少症患者共60例,服用地榆升白片的患者为研究组,服用鲨肝醇片的患者为对照组,每组30例。比较两组在治疗前、治疗后1月、治疗后2月临床疗效,外周血白细胞数目和不良反应发生情况。结果 患者外周白细胞计数在治疗前后差异有统计学意义(P<0.05),治疗后1个月与2个月差异无统计学意义(P>0.05)。研究组平均总有效率高于对照组,且治疗后1个月与2个月研究组的升白作用优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组不良反应发生率低于对照组。结论 地榆升白片治疗抗精神病药所致白细胞减少症效果确切,治疗安全性较高,为抗精神病药所致白细胞减少症提供适宜治疗方案。

隔姜灸干预在肺癌化疗患者白细胞减少症脾肾阳虚证中的预防性应用

目的:研究隔姜灸干预在肺癌化疗患者白细胞减少症脾肾阳虚证中的预防性应用的价值。方法:选取2021年1月至2022年12月郑州市人民医院收治的100例肺癌化疗患者为研究对象,按随机数表法将其分为对照组(n=50)和研究组(n=50),对照组进行常规干预,研究组预防性应用隔姜灸干预。比较两组患者干预14d后的白细胞减少症脾肾阳虚证发生率差异,探究两组患者干预前、干预14d后中医证候积分、白细胞计数(white blood cell count,WBC)、中性粒细胞计数(neutrophil count,NEUT)的差异,分析两组患者在干预期间的不良反应发生率。结果:干预14d后,研究组的白细胞减少症脾肾阳虚证发生率显著低于对照组(P<0.05);两组患者干预14d后中医证候积分较干预前升高,但研究组升高幅度低于对照组(P<0.05);两组患者干预14d后WBC、NEUT均较干预前降低,但研究组降低幅度低于对照组(P<0.05);在干预期间,两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在肺癌化疗中预防性应用隔姜灸干预,能降低白细胞减少症脾肾阳虚证发生率,改善脾肾阳虚的症状,减轻骨髓抑制,增加白细胞、中性粒细胞数量,安全可靠。

八十六例猫泛白细胞减少症病例发病情况调查

为了解猫泛白细胞减少症病例的临床发病情况,对2023年上海喜乐缘宠物诊所确诊的86例猫泛白细胞减少症病例的年龄、品种、免疫情况、饲养环境、发病季节、临床症状等进行调查分析。调查结果表明,猫泛白细胞减少症患猫中,幼猫占比(76.74%)远高于成年猫(23.26%),未免疫猫、首次免疫猫、二次免疫猫、初免齐全猫占比分别为40.70%、34.88%、11.63%和12.79%,流浪猫占比(45.35%)高于家养猫(33.72%)及猫舍饲养猫(20.93%),具有国外血统品种的猫占比(70.93%)高于国内品种猫(29.07%);临床症状较为多样,主要表现为食欲不佳、精神沉郁、发热、呕吐、腹泻。

2021—2023年唐山地区猫泛白细胞减少症的流行病学调查

为了解唐山地区猫泛白细胞减少症的流行情况,采用临床检查、血常规检测和胶体金试纸条检测等方法对唐山地区10家宠物医院的1546例猫泛白细胞减少症疑似病例进行调查分析。结果显示:2023年猫泛白细胞减少症阳性率最低,为10.40%。3~8月龄猫的猫泛白细胞减少症阳性率最高,且7月龄以下患猫出现严重的昏睡、发烧、厌食的症状更为明显。该调查分析为唐山地区猫泛白细胞减少症的防治提供参考依据。

黄芪建中汤加味治疗恶性肿瘤化疗后白细胞减少症脾肾亏虚证的临床观察

目的:观察黄芪建中汤加味治疗恶性肿瘤化疗后白细胞减少症脾肾亏虚证的疗效。方法:选取60例恶性肿瘤化疗后白细胞减少症脾肾亏虚证患者,随机分为对照组和观察组。对照组采用利可君片口服治疗,观察组采用黄芪建中汤加味治疗。比较两组患者治疗前、治疗第7日、治疗第14日和治疗结束后第7日外周血白细胞计数。通过比较两组患者治疗前后电解质、肾功能、肝功能、心肌酶谱、心电图等安全指数,评估用药安全。结果:观察组总有效率为96.67%(29/30),高于对照组的70.00%(21/30),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗第7、14日,两组患者白细胞计数均高于本组治疗前,且观察组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗期间两组患者均无不良反应发生。结论:黄芪建中汤加味治疗恶性肿瘤化疗后白细胞减少症脾肾亏虚证具有良好疗效,可以明显改善患者的临床症状。

芪胶升白胶囊和地榆升白片对放射治疗后白细胞减少症的临床评价

目的:探讨芪胶升白胶囊和地榆升白片两种药物单独使用对放射治疗后白细胞减少症患者白细胞水平的影响,并评价其临床疗效及用药安全性。方法:选取2018年6月~2020年5月期间于本院进行放射治疗的180例患者作为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组90例。观察组给予芪胶升白胶囊治疗,对照组给予地榆升白片治疗,比较两组在用药1周、4周及8周后的临床疗效、白细胞水平及不良反应发生情况。结果:用药8周后,观察组治疗总有效率(92.2%)高于对照组(88.9%,P>0.05)。用药1周后,两组白细胞水平均接近正常;用药4周后,观察组白细胞水平高于对照组(P<0.05);用药8周后,两组白细胞水平比较无统计学差异(P>0.05)。两组在用药期间均发生皮疹、发热、乏力、恶心、呕吐等不良反应,且对照组不良反应总发生率(18.9%)与观察组(15.6%)比较无统计学差异(P>0.05)。结论:芪胶升白胶囊和地榆升白片对放射治疗后白细胞减少症患者具有较好的临床疗效,且安全性高,均可在临床上广泛使用。

基于网络药理和实验验证探究中药通过健脾作用治疗白细胞减少症的作用机制

目的运用数据挖掘、网络药理学和实验验证探讨中药通过健脾作用治疗白细胞减少症的用药规律、药效物质基础及潜在的作用机制。方法在中国知网、万方数据知识服务平台、维普网和PubMed数据库中检索健脾中药复方治疗白细胞减少症的临床文献,运用古今医案云平台在线分析软件和SPSS Modeler 18统计分析软件寻找核心药物组;利用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)、GeneCards数据库、OMIM数据库检索、Cytoscape 3.7.2软件、STRING数据库获取关键基因和主要有效成分,利用Metascape进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;采用MTT法检测细胞增殖率,采用qPCR法检测关键基因mRNA水平表达。结果共筛选得到90篇有效文献,共计91首中药复方,党参-当归-黄芪为核心药物组合。肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、JUN为核心靶点,槲皮素、木犀草素、山奈酚、芒柄花素、豆甾醇为主要有效成分,其主要作用机制可能通过癌症的途径、TNF信号通路、p53信号通路等来实现。健脾中药黄芪、党参、当归提取物和有效成分芒柄花素、槲皮素对人单核细胞白血病细胞(THP-1)具有促进增殖作用,芒柄花素对化疗诱导的THP-1细胞生长具有促进增殖的作用,芒柄花素能够抑制炎症细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α和刺激抗炎因子IL-10、原癌基因JUN的分泌。结论初步揭示黄芪等多种中药通过多成分、多靶点发挥健脾作用,参与抗肿瘤、抗炎、免疫调节等相关信号通路,治疗白细胞减少症。

芪精颗粒主药定量近红外快检模型的建立及其治疗白细胞减少症的作用

目的基于近红外光谱技术(NIRS)快速检测芪精颗粒中主要药味黄芪和黄精的含量,并比较不同主药含量芪精颗粒治疗白细胞减少症的作用。方法制备不同黄芪和黄精用量的芪精颗粒样本,采用近红外光谱技术结合偏最小二乘法(PLS)建立芪精颗粒中黄芪和黄精用量的近红外快检模型。模型检测采用标准正交变量变换(SNV)预处理,检测波长范围在4000~10000 cm^(-1)。SD大鼠根据白细胞数随机分为:空白对照组、模型组(皮下注射CTX 100 mg/kg)、地榆升白片阳性药对照组、15个不同黄芪和黄精用量给药组,连续给药14 d。在给药后第5,9,11,14天测定血液常规指标、脾腺指数和胸腺指数。结果建立的模型校正均方差(RMSEC)、预测均方差(RMSEP)、交叉验证均方差(RMSECV)、R^(2)值依次为0.0964,0.0846,0.8674,0.9262。给药第14天,与模型组比较,黄芪和黄精用量各6~15 g的给药组血常规指标发生变化,其中黄芪和黄精用量各10~15 g给药组与正常组相比无显著性差异。与模型组比较,各给药组小鼠脾脏和胸腺指数显著性增加(P<0.05),其中黄芪和黄精用量各10~15 g给药组与阳性药组无显著性差异。各指标的总评OD值随黄芪和黄精在处方中的百分含量增高而增高,在百分含量19%处有一个高处的拐点,在百分含量24%处达到最高。结论利用NIRS技术结合多种化学计量学建立的定性定量模型对制剂中黄芪和黄精含量的预测准确度较高。通过近红外模型预测值能间接比较不同主药含量芪精颗粒改善白细胞减少症的作用。

一例幼猫泛白细胞减少症的诊断与治疗

猫泛白细胞减少症是危害猫科动物最严重的传染病之一,发病率和死亡率均较高,其多发于幼猫。总结一例幼猫泛白细胞减少症病例的临床诊断和治疗方案,为该病的诊疗提供参考。