IgY联合乳酸杆菌防治阴道白色念珠菌感染的实验研究

目的:观察特异性抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌的体内外生物学效应,探讨将二者复合应用的可能性。方法:分离人阴道上皮细胞,用抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌对阴道上皮细胞预处理后进行白色念珠菌黏附抑制试验;建立小鼠白色念珠菌性阴道炎模型,通过阴道局部给抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌来观察其疗效。结果:抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌均能抑制白色念珠菌黏附阴道上皮细胞,并能减少白色念珠菌在小鼠阴道内的定植和减轻小鼠阴道局部的炎症反应。结论:特异性抗白色念珠菌IgY具有良好的体内外生物学效应且优于单独使用乳酸杆菌,二者复合应用效果最佳。

β-石竹烯通过上调PPARγ/PGC-1α/UCP1通路促进肥胖小鼠白色脂肪棕色化作用

目的探究β-石竹烯(BCP)对肥胖小鼠白色脂肪棕色化的作用及其机制。方法雄性昆明小鼠高脂饮食辅以丙硫氧嘧啶生理盐水溶液[14.4 mg/(kg·d)]腹腔注射建立肥胖小鼠模型。肥胖模型小鼠随机分为模型组(Model组)和BCP给药组(BCP-50组),正常饮食小鼠设为对照组(Control组),每组8只。BCP给药组按50 mg/kg早晚灌胃给药各一次,其余组用吐温80水溶液灌胃,持续4周。4周给药结束后进行口服糖耐量实验,实验结束禁食过夜后处死小鼠,快速收集血液样本和脂肪组织用于后续实验检测。试剂盒检测血清学相关指标;苏木精-伊红染色观察脂肪组织形态;免疫组化染色观察脂肪组织解偶联蛋白1(UCP1)表达;Western blot检测附睾白色脂肪(eWAT)中过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活剂1-α(PGC-1α)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、UCP1和大麻素受体2(CNR2)蛋白的表达。结果与Model组相比,BCP-50组肥胖小鼠的体质量显著减轻(P<0.05),摄食量减少(P<0.01),胰岛素抵抗得到改善(P<0.0001),肥胖小鼠血清中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和非酯化脂肪酸(NEFA)含量降低(P<0.0001和P<0.01),总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量无明显变化。此外,BCP-50组肥胖小鼠的脂肪系数和eWAT比重降低(P<0.05);eWAT和BAT中脂肪细胞减小,UCP1蛋白表达升高(P<0.01和P<0.05);除了UCP1外,BCP-50组肥胖小鼠eWAT中PGC1α、PPARγ和CNR2蛋白的表达水平也明显升高(P<0.01,P<0.05和P<0.001)。结论BCP通过上调PPARγ/PGC-1α/UCP1通路表达促进白色脂肪棕色化,从而改善肥胖。

基于抑菌实验和网络药理学探讨D-柠檬烯、2-茨醇对白色念珠菌的抑制作用

目的:采用抑菌实验研究蛇床子-冰片药对成分中的D-柠檬烯及2-茨醇的体外抗白色念珠菌作用,并运用网络药理学预测D-柠檬烯和2-茨醇治疗念珠菌病的核心靶点和通路。方法:以白色念珠菌为研究对象,K-B纸片扩散法分别测定0.5、1.0、1.5 mg的D-柠檬烯、2-茨醇、制霉菌素的药液抑菌圈直径;采用试管双倍稀释法和棋盘法,测定D-柠檬烯、2-茨醇的最低抑菌浓度(MIC)以及两两联用的MIC,计算出联合抑菌分数(FIC)。通过Pubchem、SwissTargetPrediction数据库预测D-柠檬烯、2-茨醇的有效靶点;通过GeneCards、OMIM数据库检索念珠菌病相关的疾病靶点;运用Venny软件获得两种化学成分和念珠菌病的共同靶点;运用Cytoscape 3.9. 0软件构建“成分-靶点-疾病”网络;利用STRING数据库构建蛋白互作PPI网络;利用R软件进行GO功能及KEGG通路富集分析。结果:D-柠檬烯的MIC为5 mg/mL,2-茨醇的MIC为2.5 mg/mL。D-柠檬烯与2-茨醇联用的FIC指数为0.75,呈相加作用。网络药理学筛选得到两种成分相关作用靶点152个,疾病靶点893个,两者交集靶点为24个;网络拓扑分析得到核心靶点为肿瘤坏死因子(TNF)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、雌激素受体(ESR1)等;KEGG分析得到核心通路为C型凝集素受体信号通路(C-type lectin receptor signaling pathway)、Fc epsilon RI信号通路(Fc epsilon RI signaling pathway)、催乳素信号通路(prolactin signaling pathway)等。结论:D-柠檬烯、2-茨醇对白色念珠菌均有抑制作用,且2种组分药物联合使用具有一定的协同作用。网络药理学预测初步提示D-柠檬烯、2-茨醇可能通过作用于TNF、PPARG、ESR1等核心靶点调控C型凝集素受体信号通路(C-type lectin receptor signaling pathway)、Fc epsilon RI信号通路(Fc epsilon RI signaling pathway)等以治疗念珠菌病。

不同禁食模式联合运动训练对小鼠白色脂肪棕色化的影响

为了探讨间歇性禁食联合运动训练对白色脂肪棕色化的影响,本实验将5~6周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为6组:对照组、运动组、隔日禁食组、隔日禁食运动组、限时禁食组、限时禁食运动组。实验6周后测定小鼠血脂水平,并通过Western blot检测小鼠双侧腹股沟脂肪、肾周脂肪、附睾周脂肪、肩胛间棕色脂肪及左侧骨骼肌样本中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated-adenosine monophosphate activated protein kinase,p-AMPK)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)、氧化物酶体增殖物激活受体γ辅活化因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-1 alpha,PGC-1α)、解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)、特异性蛋白含Ⅲ型纤连蛋白域蛋白5(active fibronectin type Ⅲ domain containing protein 5,FNDC5)以及鸢尾素和PR结构域蛋白16(PR domain-containing 16,PRDM16)的表达水平,分析两种间歇性禁食模式联合运动训练对小鼠白色脂肪棕色化相关通路蛋白表达量的影响,以及不同脂肪组织中发生棕色化作用的程度。结果显示,各实验组总胆固醇水平与对照组相比均显著降低;限时禁食组和限时禁食运动组中的甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平与对照组相比均显著降低(P<0.05);隔日禁食组、隔日禁食运动组、限时禁食组和限时禁食运动组中的p-AMPK、PPARγ、PGC-1α、UCP1、FNDC5和PRDM16在不同脂肪组织和骨骼肌中的表达量与对照组相比均有不同程度的升高,其中限时禁食运动组中p-AMPK、PPARγ、PGC-1α和UCP1在棕色脂肪、腹股沟脂肪和肾周脂肪组织中的相对表达量与对照组相比均显著升高。上述结果表明,间歇性禁食及联合作用能够促进白色脂肪组织棕色化,其机制可能与PPARγ/PGC-1α/UCP1通路激活有关,其中限时禁食法联合运动的作用效果相对最佳。

爱媛类芽孢杆菌抗菌肽对白色念珠菌生物膜的抑制作用机制

研究爱媛类芽孢杆菌抗菌肽对白色念珠菌生物膜的抑制作用,采用微量二倍稀释法和时间-杀菌曲线测定抑制效果,显微镜观察对白色念珠菌芽管和菌丝形成的影响,2,3-二(2-甲氧基-4-硝基-5-磺酸基苯基)-2H-四唑-5-甲酰苯胺法研究对生物膜、预成型生物膜形成和成熟生物膜清除率的影响,荧光探针观察对生物膜结构和膜内菌体状态的影响,平板涂布法和实时聚合酶链式反应测定生物膜内活菌数量和相关基因表达水平。结果表明,抗菌肽对白色念珠菌的最小抑菌浓度为8.28 AU/mL。抗菌肽能降低白色念珠菌的芽管形成率,阻止菌丝的生成,使其以酵母形式存在。抗菌肽对生物膜的形成和清除产生影响,能在较短时间内破坏生物膜的结构完整性,导致菌体受损和死亡,减少膜内菌落数量。在基因水平上,抗菌肽可降低多个生物膜形成相关的基因(如ALS1、ALS3、HWP1、EFG1、ECE1和UME6)的表达水平,从而抑制生物膜的形成。研究证明抗菌肽能够有效抑制白色念珠菌生物膜形成、成熟膜清除、成膜基因表达等,结果可为白色念珠菌新型抑菌物质的开发奠定理论基础,为食品病原微生物污染防治和食品质量安全保障提供依据。

罕见的白色泡沫状分泌物结膜炎1例并文献复习

结膜炎是眼科门诊最常见的疾病,眼睛红、有分泌物是常见的主诉,分泌物根据病因不同可见脓性、黏脓性、浆液性、黏稠丝状、水样等。南昌大学第二附属医院眼科接诊1例分泌物呈白色泡沫状(类似肥皂泡沫)的患儿,结合该患者的诊治经过以及中国知网、万方、Pubmed、GeenMedical等数据库检索的相关文献,将其临床特征和诊治过程报告如下。

益糖康对db/db小鼠白色脂肪棕色化及PINK1/Parkin通路的影响

目的观察益糖康对db/db小鼠白色脂肪棕色化及脂肪组织PINK1/Parkin通路的影响。方法将30只6周龄db/db小鼠随机分为模型组、益糖康组(30 g/kg)和利拉鲁肽组(200μg/kg),另将10只同周龄C57BL/6小鼠作为正常组,分别予相应药物或生理盐水灌胃5周。给药期间定时检测小鼠体质量及空腹血糖(FBG),对小鼠肝脏、白色及棕色脂肪进行称重,生化分析仪测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,HE染色观察腹股沟白色脂肪组织(iWAT)形态,免疫组化染色检测iWAT棕色化标志性蛋白解偶联蛋白-1(UCP1)表达,Western blot检测iWAT棕色化相关蛋白UCP1、PR结构域蛋白16(PRDM16)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)及线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin、Beclin-1、p62蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠体质量及肝脏、白色脂肪、棕色脂肪质量明显增加(P<0.01),FBG及血清TC、TG、LDL-C含量明显升高(P<0.01),HDL-C含量明显降低(P<0.01);iWAT脂肪细胞出现大空泡、直径明显增大,部分细胞挤压变形,边缘不清晰,iWAT UCP1、PRDM16、PGC-1α、p62蛋白表达降低(P<0.01),PINK1、Parkin、Beclin-1蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组比较,益糖康组及利拉鲁肽组小鼠体质量及肝脏、白色脂肪质量明显减少(P<0.01),FBG及血清TC、TG、LDL-C含量明显降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C含量明显升高(P<0.01);iWAT脂肪细胞直径减小、数目增多、形态规则,iWAT UCP1、PRDM16、PGC-1α、p62蛋白表达升高(P<0.01),PINK1、Parkin、Beclin-1蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论益糖康能改善db/db小鼠糖脂代谢,促进白色脂肪棕色化,可能通过影响PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬发挥作用。

迈向白色景观:寒地城市中小河流滨水空间居民冬季户外活动的环境特征偏好研究

城市中小河流滨水空间是承载居民户外活动的重要载体,寒地冬季严酷的气候条件使河流由蓝色水域空间转变成白色冰雪空间,特殊的水体形态使居民的活动水平产生较大变化。聚焦寒地城市中小河流滨水空间的居民冬季户外活动,构建可达性、场所特征、服务设施和维护管理4类维度下的17项环境特征要素指标,通过问卷调查与Kano模型得出户外活动的环境特征偏好要素序列,基于行为类型讨论要素指标对冬季户外活动的影响。结果显示,河流白色景观对提升冬季健康福祉具有重要意义,对维护管理提出了更高的要求。寒地滨水空间的流动行为更关注步行体验,强调线性路径的空间畅通和微气候舒适,驻留行为更关注冬季运动和防风防寒设施的配给。研究成果可为寒地城市居民健康福祉的规划建设提供决策支持。

新疆白杨河铀矿区白色云母短波红外光谱及电子探针成分特征

铀是我国战略性关键金属资源之一,对科技发展和国家安全具有重要意义。新疆白杨河铀矿床是我国重要的热液型铀矿床,铀成矿过程中广泛发育白色云母。已有研究表明,白杨河铀矿床白色云母短波红外光谱蕴含着丰富的地质信息,记录了其形成热液环境及其与矿化的关系,但其短波红外光谱变化规律及其地质影响因素研究依然薄弱。因此,运用短波红外光谱技术和电子探针微区分析等分析方法对矿床白色云母进行分析研究。研究表明:白杨河铀矿床白色云母Al-OH特征吸收峰波长在2190和2220 nm之间漂移变化,电子探针化学组分表明其发生了明显的Tschermak(契尔马克)替换,Al-OH特征吸收峰波长直接受Mg和Fe含量以及Fe/(Fe+Mg)比值的影响,也受围岩成分的影响。Al-OH特征吸收峰波长较短的白色云母反映了相对高温的热液流体环境,而Al-OH特征吸收峰波长较长的白色云母则代表了相对低温的热液流体环境。白杨河铀矿床铀矿化点附近白色云母具有相对较短的Al-OH特征吸收峰波长、较大的ISM(伊利石光谱成熟度)值和较低的FWHM 2200(半峰宽)值。综合白色云母的Al-OH特征吸收峰波长、ISM值和FWHM2200值的空间变化规律,可以推断白杨河铀矿床的热液矿化中心位于杨庄花岗斑岩与上泥盆统火山岩的北部接触带。这不仅对完善白杨河铀矿床成因和深部与外围勘探具有重要的实际意义,对其他热液型金属矿产勘查亦具有重要的参考价值。

新能源汽车空调出风中白色粉沫的形成机理分析

通过能谱、金相检测,对路试车空调出风中夹杂的白色粉末进行了分析,确认该粉末是蒸发器腐蚀后形成的铝氧化物。红外检测和耐腐蚀性试验结果表明,在潮湿环境中,蒸发器在Cu的催化作用下发生了电偶腐蚀。采取了更换材料和采用耐腐蚀性更强的钝化、亲水药水的解决措施,有效解决了蒸发器腐蚀,导致空调出风时吹出白色粉末的问题。

白色脂肪棕色化在治疗肥胖中的研究进展

肥胖是全球性的公共卫生问题,与多种代谢性疾病的发病高度相关。肥胖主要是由于人体对于热量的摄入大于消耗,脂肪组织过度积聚所导致的。脂肪组织大致分为棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)和白色脂肪组织(white adipose tissue,WAT),通过某些诱导因素可以提高白色脂肪组织中的一些转录因子及蛋白(解偶联蛋白1、过氧化物酶体增殖物活化受体γ和PR结构域蛋白16等)的表达,从而诱导白色脂肪组织棕色化,能显著促进机体的能量消耗,从而能够有效地治疗肥胖。因此探究其白色脂肪棕色化的相关机制以及诱导因素对治疗肥胖具有十分重要的意义。该文从运动、饮食、现代医学研究、中药、针灸等角度论述了治疗肥胖与白色脂肪棕色化之间的关系,以期对临床中治疗肥胖和白色脂肪棕色化的研究提供参佐。

差分拉曼光谱结合化学计量学对白色购物纸袋的检验研究

目的建立差分拉曼光谱用于无损识别白色购物纸袋的方法。方法对收集到的60种不同品牌、不同规格的白色购物纸袋进行拉曼光谱测定,对样品的拉曼光谱图进行预处理,根据光谱图对样品进行初步分类,并结合化学计量方法对样品进行分组。应用Fisher判别分析方法对分类结果进行验证。最后应用RBF模型对未知样本进行分类判别。结果结合样品中所含的碳酸钙、滑石粉、硫酸钡的不同,可初步将白色购物纸袋样品分为五大类,采用K-均值聚类方法继续细分,通过Fisher判别方法对样品分结果进行验证,判别准确率为100%。应用神经网络RBF模型对未知样本进行判别分析,准确率达到89.48%。结论该方法简便易行,为白色购物纸袋的分类提供了科学的依据,也为公安基层工作的开展提供了便捷的办法。

基于代谢组学研究XLS对白色念珠菌的代谢变化及抑菌机制

目的:血链球菌提取物XLS是从口腔血链球菌中提取的具有抑菌作用的胞内蛋白,本文通过非靶向代谢组学技术检测分析XLS作用于白色念珠菌所产生的代谢变化,并初步分析其作用机制。方法:(1)非靶向代谢组样本制备:实验组:0.5 mg/mL XLS与白色念珠菌共培养12 h对照组:单纯白色念珠菌培养12 h,每组6个生物学重复。(2)利用非靶向代谢组学技术对两组样本进行代谢变化研究,运用多变量分析[主成分分析(principal components analysis,PCA)和偏最小二乘法判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)]和单变量分析(t检验)比较两组样本之间的差异。结果:PLS-DA和PCA分析结果显示两组样本差异性显著。本研究筛选出160个正离子差异代谢物,其中68个代谢物上调,92个代谢物下调;90个负离子差异代谢物,其中52个代谢物上调,38个代谢物下调。通过京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析发现,富集显著的通路主要包括抗坏血酸与醛酸代谢通路、氨基酸合成、嘌呤嘧啶代谢通路。此外,还发现了一些与氧化应激反应相关的代谢物,与对照组相比,其在实验组均表达上调。结论:(1)XLS对白色念珠菌的氨基酸代谢、脂质代谢、嘌呤嘧啶代谢等过程产生显著影响;(2)XLS可能通过引起白色念珠菌菌体的氧化应激反应导致白色念珠菌细胞的氧化损伤,从而抑制白色念珠菌的生长繁殖。

EGCG对高脂饮食GK大鼠白色脂肪米色化的诱导作用与机制研究

脂肪组织类型与人体代谢密切相关,通过饮食或营养干预将白色脂肪细胞转变为产热的米色脂肪细胞是一种减少脂肪积蓄、调节代谢的安全策略。目前关于白色脂肪组织米色化作用的研究多聚焦于肥胖群体,为探究EGCG对非肥胖代谢紊乱群体的内脏白色脂肪组织米色化的诱导作用及相关机制,采用非肥胖型自发性2型糖尿病模型Goto-Kakizaki(GK)大鼠,给予每日高脂饮食,并进行40 mg·kg^(-1)和80 mg·kg^(-1)EGCG灌胃干预,检测GK大鼠的体质量、摄食量、脂肪组织细胞形态及米色化相关基因表达水平、UCP1蛋白表达水平,并进行转录组测序。结果表明,80 mg·kg^(-1)EGCG灌胃干预对GK大鼠摄食量和体质量无明显影响,但能够促使脂肪细胞呈现向多房型脂肪细胞转变趋势,并显著上调米色化相关的Pparg、Ppargc1a、Ucp1基因表达水平和UCP1蛋白表达水平,具有诱导高脂饮食GK大鼠内脏附睾白色脂肪组织米色化的作用,且表现出调节脂质代谢的潜力。结合转录组分析结果表明,EGCG对高脂饮食GK大鼠白色脂肪组织米色化的诱导作用机制可能与PPAR信号通路、PI3K/Akt信号通路和MAPK信号通路有关。

益生元通过促进白色脂肪棕色化缓解肥胖的研究进展

益生元作为一种膳食补充剂,是一类能够调控宿主肠道微生态并产生健康效应的物质,包括多酚、多糖、功能性低聚糖等。该文以益生元为切入点,对白藜芦醇、儿茶素、花青素、姜黄素等益生元类物质促进白色脂肪棕色化的作用、机理等方面进行总结,旨在为益生元类物质对促进白色脂肪棕色化改善肥胖以及代谢类疾病方面的应用研究提供理论参考。

白色念珠菌水溶物诱导的川崎病模型心脏与脾脏病理学特征

目的 探讨白色念珠菌水溶物(candida albicans watersoluble fraction, CAWS)诱导的川崎病(Kawasaki disease, KD)模型心脏与脾脏病理学特征,为KD病理机制提供研究基础。方法 采用腹腔注射CAWS构建C57BL/6小鼠KD模型,取心脏、主动脉和脾脏标本,测体、心脏和脾脏质量;应用HE染色观察心脏、主动脉和脾脏的形态学变化;运用qRT-PCR和免疫荧光法检测脾脏中成熟巨噬细胞标志物(F4/80)、TNF-α和IL-1β的表达水平,分析其临床病理学特征并复习相关文献。结果 与对照组相比,模型组小鼠的心脏和体质量无明显差异,但脾脏质量明显增加(P<0.05)。模型组小鼠的心肌间质出现单核细胞浸润,主动脉血管壁的弹性纤维结构紊乱并伴黏液样变性,脾脏红白髓结构紊乱,大量巨噬细胞浸润。模型组小鼠脾脏F4/80(2.58倍,P<0.000 1)、TNF-α(1.43倍,P<0.001)、IL-1β(3.62倍,P<0.000 1)的mRNA水平和免疫荧光染色强度均显著高于对照组。结论 CAWS诱导的KD模型小鼠心脏和主动脉出现类似KD的病理变化,脾脏显著肿大、巨噬细胞浸润并伴TNF-α和IL-1β表达增加。

中国北方侏罗系烧变岩露头区白色砂岩特征与成因分析

中国北方烧变岩广泛发育,常见侏罗系煤层于中生代、新生代自燃形成的烧变岩。在烧变岩露头区,白色砂岩常与红色烘烤岩伴生,但国内外对其关注不够,成因不明。本次研究对伊犁、准噶尔、吐哈、鄂尔多斯等盆地周缘烧变岩区野外露头进行了观察,采集白色砂岩样品进行薄片鉴定、扫描电镜及能谱等测试与分析,对白色砂岩岩石学、矿物学特征进行观察和描述,认为中国北方侏罗系白色砂岩常分布在烧变岩的上覆、下伏或侧边位置,颜色多以灰白为主,结构疏松,孔隙发育,碎屑颗粒以石英、长石矿物为主,填隙物主要为高岭石,发育特殊的流体流动所致的孔洞构造;据其与烧变岩的空间相关性,推测白色砂岩的形成与煤层自燃有密切联系,煤层自燃导致高岭石大量生成、有色金属矿物或金属离子含量变化,这是砂岩呈现白色的主要诱因,因此烧变岩区所见白色砂岩为特殊类型的低温烘烤岩,其形成模式有3种:河谷下切型、裂隙下切型和山丘下渗型。

不同诱导周期对人白色前脂肪细胞分化水平的影响研究

目的通过诱导人白色前脂肪细胞(human white adipose tissue stromal vascular fraction,hWAT-SVF)分化为成熟脂肪细胞,检测不同分化周期中hWAT-SVF细胞成脂标志物的表达水平,为完善和优化人前脂肪细胞分化模型提供数据支持。方法将hWAT-SVF细胞培养6天至融合状态,采用3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、地塞米松、胰岛素等诱导细胞分化,在分化的第0、3、6、9、12天收集细胞,观察细胞大小和形态等变化,检测脂滴、中性脂质和甘油三酯(triglyceride,TG)的生成情况,以及脂肪生成相关基因和蛋白[过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)和脂滴包被蛋白1(perilipin 1,PLIN1)]等的表达水平。结果经诱导分化后,hWAT-SVF细胞形态明显变大变圆,脂滴和TG含量显著升高,成脂标志物如PPARγ、FABP4、PLIN1等的表达水平显著上调,表明成功将hWAT-SVF细胞诱导为成熟脂肪细胞。分化第3天PPARγ;以及分化第9天成熟脂肪细胞标志物(FABP4和PLIN1)蛋白表达水平分别显著升高1.8、21、14.3倍。结论在分化第9天,hWAT-SVF细胞已具备成熟脂肪细胞的特征。本研究成功缩短了人源前脂肪细胞分化模型的构建周期,为研究脂肪生成效应及机制提供了一种有效的细胞模型。

FGF21类似物通过抑制线粒体自噬促进白色脂肪细胞“棕色化”的机制研究

目的:探讨成纤维细胞生长因子21(FGF21)长效类似物PF-05231023通过抑制白色脂肪组织(WAT)线粒体自噬对WAT“棕色化”的作用以及其中涉及的分子机制。方法:(1)使用高脂饮食(HFD)复制小鼠肥胖模型,18只C57BL/6J小鼠被分为3组:正常对照(NC)组、HFD组和PF-05231023干预(PF+HFD)组,每组6只。饲养12周后麻醉小鼠,摘眼球取血,分离血清,检测小鼠血清中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度胆固醇脂蛋白(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平;收集小鼠腹股沟WAT(iWAT)、附睾WAT(eWAT)和肝脏,一部分组织用于Western blot实验,检测“棕色化”相关指标解偶联蛋白1(Ucp-1)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)以及线粒体自噬相关指标PTEN诱导激酶1(Pink1)、parkin、beclin-1和微管相关蛋白1轻链3-II(LC3-II)蛋白表达水平,另一部分固定于多聚甲醛中,用于后续HE和免疫组织化学染色。(2)3T3-L1细胞采用经典的“鸡尾酒”方法诱导成为成熟的脂肪细胞。CCK-8法检测不同浓度PF-05231023干预对细胞活力的影响。用PF-05231023干预3T3-L1细胞48 h,收集细胞团块用于Western blot实验检测“棕色化”相关指标Ucp-1和PGC-1α以及线粒体自噬相关指标Pink1、parkin、beclin-1和LC3-II蛋白表达水平。油红O染色检测细胞积累。免疫荧光染色检测Ucp-1蛋白含量。随后将3T3-L1细胞分为正常组、PF-05231023干预组、Pink1激动剂MTK458干预组和MTK458+PF-05231023干预组,收集细胞团块用于Western blot实验检测上述指标。结果:(1)PF-05231023干预不影响小鼠能量摄入并且能降低HFD诱导肥胖小鼠的体重、肝重和脂肪重量(P<0.05),降低脂质积累(TC、TG和LDL-C)和肝损伤(ALT和AST)并减轻肝脏空泡样变性和脂肪细胞面积大小(P<0.05);(2)与HFD组相比PF-05231023干预增加了iWAT和eWAT中Ucp-1和PGC-1α蛋白表达水平(P<0.01),免疫组织化学染色结果中PF-05231023干预组比HFD组Ucp-1蛋白含量更高;(3)PF-05231023干预可呈剂量依赖式增加诱导成熟的3T3-L1细胞中Ucp-1和PGC-1α的蛋白表达水平(P<0.01),减少细胞脂质积累,免疫荧光染色结果显示PF-05231023干预后诱导成熟的3T3-L1细胞中Ucp-1蛋白含量增加;(4)PF-05231023干预可抑制iWAT、eWAT和诱导成熟的3T3-L1细胞中线粒体自噬相关指标Pink1、parkin、beclin-1和LC3-II蛋白表达水平(P<0.05);(5)MTK干预可增加Pink1、parkin和beclin-1和LC3-II蛋白表达水平,增加Ucp-1蛋白表达水平,与MTK干预组比,MTK和PF-05231023共同干预后可部分降低Pink1、parkin、beclin-1和LC3-II蛋白表达水平,部分恢复Ucp-1蛋白表达水平(P<0.01)。结论:(1)PF-05231023干预能够改善HFD诱导小鼠的肥胖和相关代谢紊乱;(2)PF-05231023干预能够抑制WAT和诱导成熟的3T3-L1细胞线粒体自噬,并通过抑制线粒体自噬促进“棕色化”;(3)其机制可能与抑制Pink1-parkin信号通路有关。

蛇床子-海螵蛸对白色念珠菌性阴道炎模型大鼠阴道黏膜修复的影响

[目的]观察蛇床子-海螵蛸对白色念珠菌性阴道炎模型大鼠阴道黏膜修复的影响,比较蛇床子-海螵蛸和蛇床子治疗白色念珠菌性阴道炎模型大鼠阴道黏膜的作用差异。[方法]取40只SPF级SD雌鼠(体质量180~220 g),并将大鼠随机分为空白组、模型组、蛇床子组、蛇床子-海螵蛸组,每组10只,建立白色念珠菌阴道炎(VVC)大鼠模型,空白组和模型组均采用生理盐水冲洗阴道,蛇床子组及蛇床子-海螵蛸组使用5 g生药/mL的发酵药物进行阴道灌洗治疗,每只每次阴道灌洗1 mL,每日1次,共灌洗10 d。采用pH试纸测定大鼠阴道pH值、苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠阴道组织学病理、酶联免疫吸附测定法(ELISA)法检测大鼠阴道组织中白细胞酯酶(LE)、乙酰胺葡萄糖苷酶(OGA)蛋白水平及进行转录组学分析修复阴道黏膜机制。[结果]成功建立VVC大鼠模型,与空白组比较,模型组大鼠阴道黏膜结构不完整,黏膜厚度降低、炎症浸润加剧,pH值及LE、OGA活性因子蛋白水平显著升高(P<0.01);与模型组相比,蛇床子-海螵蛸组及蛇床子组上述指标均下降(P<0.01),蛇床子-海螵蛸组上述指标均低于蛇床子组(P<0.05),且蛇床子-海螵蛸组炎症细胞浸润减少、阴道黏膜结构得到了一定恢复,黏膜厚度增加,而蛇床子组无明显的阴道黏膜修复作用;根据转录组结果可知,与模型组相比,蛇床子-海螵蛸发酵组差异基因一共523个,KEGG富集通路表达上调的主要为过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路、细胞色素P450等。表达下调的主要为破骨细胞分化、白介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子(TNF)等信号通路。[结论]蛇床子海螵蛸能够有效修复VVC模型大鼠阴道黏膜结构,能通过调节阴道pH值,改善阴道菌群,修复并保护阴道黏膜结构。蛇床子-海螵蛸可能是通过调控PPAR通路以及细胞P450酶,达到修复阴道黏膜的作用。