白花丹素介导sirt1-FOXO1通路对糖尿病肾病大鼠氧化应激损伤的影响

目的探究白花丹素通过沉默信息调节因子2相关酶(sirt)1-叉头框蛋白(FOX)O1通路对糖尿病肾病(DN)大鼠氧化应激损伤的影响。方法120只SD大鼠随机分为对照组、DN组、白花丹素低剂量组、白花丹素高剂量组、EX-527组(sirt1抑制剂,5 mg/kg)、白花丹素高剂量+EX-527组,每组20只。检测大鼠24 h尿蛋白、空腹血糖(FBG)、血肌酐(SCr)、血β2微球蛋白(β2-MG)及肾组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;测定大鼠左肾指数;过碘酸雪夫(PAS)染色观测肾脏病理变化;TUNEL法检测肾组织细胞凋亡;Western印迹法检测sirt1-FOXO1通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,DN组24 h尿蛋白、FBG、Scr、β2-MG水平、左肾指数、MDA、IL-1β、IL-6水平均显著升高,肾组织匀浆SOD、CAT水平、肾组织sirt1、FOXO1蛋白均显著降低(P<0.05)。与DN组相比,白花丹素低、高剂量组24 h尿蛋白、FBG、Scr、β2-MG水平、左肾指数、MDA、IL-1β、IL-6水平均显著降低,肾组织匀浆SOD、CAT水平、肾组织sirt1、FOXO1蛋白显著升高(P<0.05);EX-527组24 h尿蛋白、FBG、Scr、β2-MG水平、左肾指数、MDA、IL-1β、IL-6水平均显著升高,肾组织匀浆SOD、CAT水平、肾组织sirt1、FOXO1蛋白均显著降低(P<0.05);EX-527可部分削弱白花丹素高剂量对DN大鼠氧化应激损伤的缓解作用。结论白花丹素可能通过激活sirt1-FOXO1通路,缓解DN大鼠氧化应激损伤。

白花丹素通过抑制JAK2/STAT3通路减弱焦亡对抗脓毒症心肌损伤

目的基于网络药理学探讨白花丹素是否通过减轻焦亡来抑制脓毒症心肌损伤的机制。方法通过网络药理学方法获得白花丹素与疾病的关键靶点,进行GO、KEGG分析,通过分子对接验证结合能。将小鼠随机分为4组,8只/组:Sham组、盲肠结扎组(CLP)、白花丹素(PLB,2 mg/kg)+CLP组和PLB(4 mg/kg)+CLP组。采用CLP诱导脓毒症小鼠心脏损伤。超声心动图和HE染色检测心肌功能和形态的变化;检测小鼠血清CK-MB、LDH、MDA和心肌ROS水平,ELISA检测小鼠血清IL-1β和IL-18水平。Western blotting测定心肌STAT3、GSDMD、Caspase-11、JAK2、P-STAT3、P-JAK2、GSDMD-N和HMGB1的蛋白水平。结果从交集的10个基因中筛选出5个核心靶点,分子对接显示,白花丹素与STAT3、p-STAT3和JAK2结合较好。与Sham组相比,CLP组的CO、LVEF、LVFS和SV水平下降(P<0.01)。血清CK-MB、LDH、MDA、心肌炎症因子和ROS水平升高(P<0.01),HE染色结果显示心脏损伤;相关蛋白水平升高(P<0.05)。与CLP组相比,白花丹素处理组的心超功能指标水平升高(P<0.05);血清CK-MB、LDH、MDA、炎症因子和心肌ROS水平降低(P<0.01);相关蛋白水平降低(P<0.05)。结论白花丹素减轻小鼠脓毒症心肌损伤作用,其机制可能与抑制STAT3减轻焦亡有关。

白花丹醌抑制肝癌类干细胞增殖迁移及干性转录因子的表达

目的:探索白花丹醌(Plumbagin, PLB)对肝癌类干细胞增殖迁移及干性转录因子表达的影响。方法:采用多细胞肿瘤球体模式培养富集肝癌类干细胞,设置肝癌细胞组与肝癌类干细胞组,PLB浓度0、5、7.5、10μmol/L组,药物作用时间为24 h,采用MTT法、平板克隆实验、悬浮干细胞成球实验和划痕实验检测细胞增殖、体外成球和迁移能力;qRTPCR和Western blotting检测干性基因和干性蛋白的表达。结果:成功富集肝癌HepG2类干细胞,与肝癌HepG2细胞组比较,肝癌HepG2类干细胞组细胞克隆形成率降低、划痕愈合率和体外成球率升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与PLB 0μmol/L组比较,PLB 5、7.5、10μmol/L组,肝癌HepG2类干细胞克隆形成率、体外成球率和划痕愈合率均降低,EpCAM、BMI1、cMYC、Oct4、Nanog干性相关基因及Notch信号通路mRNA的表达水平降低,cMYC蛋白表达水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:PLB可抑制肝癌HepG2类干细胞增殖、迁移及体外成球能力,从而抑制肝癌细胞干性,其机制可能与下调EpCAM、BMI1、cMYC、Oct4、Nanog干性相关基因和Notch信号通路mRNA的表达水平,以及cMYC蛋白的表达水平有关。

RP-HPLC测定民族药材白花丹不同药用部位中白花丹醌的含量

目的：建立白花丹药材中白花丹醌的含量测定方法并考察白花丹不同药用部位中的含量。方法：色谱条件：KromasilCi8柱（4．6mm×200mm，5μm），柱温30℃。流动相甲醇．水（65：35），检测波长213nm，流速1mL·min^-1。结果：白花丹醌在0．0208—0．104μg，峰面积与进样量具有良好的线性关系，回归方程y=-14．29＋9138．9X，r=0．9999，平均回收率为98．7％。白花丹各部位中白花丹醌的含量分别为：根0．394％，茎0．050％，叶0．031％。结论：本法简便、准确、重复性好，可用于控制白花丹药材质量。

白花丹化学成分的研究

目的:研究白花丹Plumbago zeylanicaLinn.地上部分的化学成分。方法:对白花丹95%乙醇提取物的乙酸乙酯部分进行色谱分离,通过理化性质和波谱分析鉴定化合物的结构。结果:从白花丹中分离得到9个化合物,分别鉴定为白花丹醌(Ⅰ),isoshinanolone(Ⅱ),白花丹酸(Ⅲ),β-谷甾醇(Ⅳ),对羟基苯甲醛(Ⅴ),反式桂皮酸(Ⅵ),香兰子酸(Ⅶ),2,5-二甲基-7-羟基-色原酮(Ⅷ),3-吲哚甲醛(Ⅸ)。结论:化合物Ⅴ,Ⅶ,Ⅷ和Ⅸ为首次从白花丹属植物中分离得到。

HPLC测定不同采收途径及不同部位白花丹中白花丹醌的含量

目的:分析不同采收途径及不同部位的白花丹中白花丹醌含量,寻找富集白花丹醌的药用部位和白花丹的最佳采收途径。方法:采用HPLC法测定不同采收途径白花丹和不同部位中白花丹醌的含量:色谱柱为Hypersil ODS(25cm×4.6mm,25μm),流动相为甲醇-水(65∶35),流速为1.0mL/min,检测波长为213nm,柱温30℃。结果:白花丹醌在0.01μg～0.32μg含量范围呈线性关系,Y=18211600X+10434.57758,r=0.99946,RSD=1.28%(n=6);新鲜的白花丹根部、茎部及叶中白花丹醌的含量分别为0.026%、0.006%和0.014%;干燥的白花丹根部、茎部及叶中白花丹醌的含量分别为0.324%、0.082%和0.174%;枯萎的白花丹茎部、叶及穗中白花丹醌的含量分别为0.002%、0.001%和0.003%。结论:干燥组白花丹中白花丹醌含量高于新鲜组和枯萎组,白花丹根部的白花丹醌含量最高,其次是穗,叶、茎。本法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于控制白花丹药材的质量。

RP-HPLC测定不同产地白花丹中白花丹醌的含量

目的分析不同产地白花丹药材中白花丹醌含量的差异。方法采用KromasilC18柱（4.6mm×200mm,5μm）,柱温：30℃,流动相：甲醇-水（65∶35）,检测波长：213nm,流速：1mL·min^-1。结果白花丹醌在0.0104-0.3328μg,峰面积与进样量具有良好的线性关系,回归方程为Y=-22.32＋9527.9X,r=0.9999,平均回收率为98.7%。结论本法简便、准确、重复性好,可用于控制白花丹药材质量。

HPLC法测定云南不同产地白花丹的不同部位中白花丹醌的含量

目的:建立白花丹药材中白花丹醌的反相高效液相色谱测定方法,以分别考察云南不同产地白花丹药材的不同部位中白花丹醌的含量。方法:色谱柱为 Kromasil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(70:30),流速为1.0mL·min^(-1),检测波长为254 nm,柱温为25℃。结果:白花丹醌在25.3～253μg·mL^(-1)范围内,具有良好的线性关系,r=0.9998;平均回收率为99.0%,RSD=1.4%(n=6)。不同产地白花丹药材地上部分的白花丹醌含量分别为0.046%(嘎洒),0.079%(勐养),0.134%(嘎东),0.032%(曼东),0.047%(曼阁),0.057%(曼老);根部的白花丹醌含量分别为0.842%(嘎洒),1.04%(勐养),1.44%(嘎东),0.763%(曼东),0.639%(曼阁),1.97%(曼老)。结论:本法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于控制白花丹药材质量。

白花丹素的提取及其抗氧化活性研究

[目的]从白花丹中提取活性成分白花丹素,研究抗氧化活性并探讨作用机理。[方法]利用柱层析法从白花丹的乙醇提取液中分离得到其活性成分白花丹素,通过核磁共振、红外光谱,质谱等谱学方法鉴定化合物结构;运用磷钼酸盐法测定不同浓度白花丹素的总抗氧化能力;运用碘量法测定不同浓度白花丹素抑制花生油脂过氧化的能力。[结果]白花丹素表现出较强的总抗氧化能力,能明显抑制油脂过氧化,且呈正相的剂量效应和时间效应,各处理浓度的抗氧化能力也基本表现出优于BHT(1.0 mg/ml)的抗氧化能力。[结论]白花丹素萘醌环的酚羟基是抗氧化作用的主要活性基团,白花丹素的抗氧化能力是抗肿瘤作用的重要机制之一。

不同溶剂索氏提取的白花丹叶中白花丹醌的含量测定

[目的]测定不同方法提取的白花丹鲜叶中白花丹醌的含量并加以比较,优选出最佳提取溶剂。[方法]采用索氏提取法,选用不同的溶剂提取白花丹鲜叶中的白花丹醌,并通过HPLC测定其含量,从而确定最佳提取溶剂。[结果]测得用氯仿、石油醚(II)、浓度95%乙醇、无水甲醇提取白花丹醌的含量依次为0.511%、0.341%、0.233%和0.191%;用氯仿提取的白花丹醌含量(提取率)最高。[结论]不同方法提取的白花丹鲜叶中白花丹醌的含量差异明显。

白花丹鲜叶与干叶中白花丹醌含量测定

[目的]比较白花丹新鲜叶及干燥叶中白花丹醌含量的高低。[方法]采用水蒸气蒸馏法提取白花丹叶中的白花丹醌,用高效液相色谱仪检测鲜叶及干燥叶中白花丹醌的含量。[结果]白花丹鲜叶与干燥叶中白花丹醌的含量分别为0.0275%和0.0088%。[结论]白花丹醌的含量新鲜叶比干燥叶高。

白花丹花和果实中白花丹醌含量的分析

[目的]检测白花丹花和果实中白花丹醌的含量,为白花丹花和果实的临床应用及开发提供依据。[方法]采用无水甲醇(50 ml)冷浸药材粉末24 h后,再利用超声提取(50 min),通过高效液相色谱法(HPLC)测定白花丹花和果实中白花丹醌的含量。[结果]白花丹花及果实中白花丹醌的含量分别为0.005 9%和0.009 5%。[结论]白花丹花和果实均含活性成分白花丹醌,具有开发利用价值。

白花丹素和白花丹素-铜配合物体外抗肿瘤活性研究

目的:观察白花丹素及白花丹素-铜配合物对肿瘤细胞株的生长抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:采用MTT法检测不同浓度的白花丹素及白花丹素-铜配合物对体外培养的多种肿瘤细胞株的生长抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50)。结果:白花丹素-铜配合物对大多数肿瘤细胞株的抑制率大于白花丹素,但抗肿瘤谱小于白花丹素,推测白花丹素-铜配合物的抗癌活性强于白花丹素,但抗肿瘤谱缩小,可能与白花丹素-铜配合物的配位关系、构效关系有关。结论:白花丹素及白花丹素-铜配合物具有体外抗肿瘤活性。

白花丹鲜茎与干茎中白花丹醌含量测定

采用水蒸气蒸馏法提取白花丹茎中的醌类化合物,并测定化合物中白花丹醌的含量。结果表明,白花丹鲜茎与干燥茎中白花丹醌的含量分别为0.0423%、0.0420%。

HPLC测定不同方法提取白花丹叶中白花丹醌的含量

[目的]优选白花丹鲜叶中白花丹醌的最佳提取方法。[方法]分别采用超声提取法、索氏提取法和水蒸气蒸馏提取法提取白花丹鲜叶中的白花丹醌,然后采用HPLC测定其含量,比较分析测定结果,优选出最佳提取方法。[结果]测得超声提取法、索氏提取法和水蒸气蒸馏提取法提取白花丹醌的含量依次为0.036 3%、0.051 1%和0.017 5%;采用索氏提取法提取的白花丹醌含量最高。[结论]优选出白花丹鲜叶中白花丹醌的最佳提取方法为索氏提取法。

白花丹醌的提取分离鉴定

目的对多民族药材白花丹(Phum bago zeylanicaL.)中的白花丹醌进行提取分离和鉴定。方法用硅胶柱层析分离;用TLC,IR,MS,NMR等技术鉴定结构。结果从白花丹中分离得到桔黄色针状结晶,根据理化性质、薄层色谱及光谱数据分析,鉴定为白花丹醌(P lumbagin)。结论为建立白花丹药材的质量控制方法打下了物质基础,对白花丹临床用药安全及进一步开发具有极其重要的意义。

桂林产白花丹茎不同月份白花丹醌含量测定

采用高效液相色谱法(HPLC),对桂林产的白花丹茎中不同月份的白花丹醌含量进行了测定。结果表明:在流动相为甲醇-水(70:30),检测波长为254nm的条件下,白花丹醌在0.00048～0.0240mg.mL-1之间线性关系良好;回收率为96.9%～100.0%,白花丹茎中白花丹醌含量10月份最高,这时也是白花丹茎生物产量的高峰期,说明10月份是白花丹茎的最佳采收期。

HPLC同时测定白花丹中白花丹醌及香草酸的含量

目的：建立同时测定白花丹中白花丹醌和香草酸含量的方法,为药材的质量评价提供科学依据.方法：采用高效液相色谱法,以甲醇-0.15％磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为260 nm,流速为1.0 ml/min.结果：白花丹醌在9.95～199μg范围内与峰面积值呈现良好的线性关系,r=0.9998,平均回收率为99.52％;香草酸在10.1～202 μg范围内与峰面积值呈现良好的线性关系,r=0.9997,平均回收率为99.58％;白花丹中白花丹醌平均含量为0.0310％,香草酸平均含量为0.0124％.结论：本法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于控制白花丹药材的质量.

白花丹化学成分和药理活性研究进展

白花丹是我国以及许多东南亚国家的传统药材,研究表明白花丹含萘醌类、香豆素类、有机酸类、甾醇类等多种化学成分并具有广泛的药理活性,包括抗炎抑菌作用、抗氧化作用、抗肿瘤作用、抑制葡萄糖酵解作用、肝损伤保护作用以及对中枢神经系统的兴奋作用等。对国内外有关白花丹的化学成分、生物合成和药理作用等方面进行了系统的综述,为开发利用有药用价值的天然产物提供科学依据。