吸附无细胞百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂Ⅲ期临床人体接种反应和血清学效果观察报告

吸附无细胞百、白、破混合制剂（ＤＴａｃＰ）于１９９５年６月至１９９７年９月在广东省４个市和陕西省大荔县进行了Ⅲ期临床人体接种反应和血清学效果观察，全程基础免疫婴幼儿６４９６１例，加强注射３８８６０例，总计为１０３８２１例，接种反应轻微，未发现有严重异常反应者。ＤＴａｃＰ在基免后１年和加强注射前抗ＰＴ和抗ＦＨＡ的抗体水平分别为１０１ＥＵ／ｍｌ和５１３ＥＵ／ｍｌ；加强注射后１个月，抗ＰＴ和抗ＦＨＡ的抗体水平显著增长，分别为２４３４ＥＵ／ｍｌ和３１１３ＥＵ／ｍｌ；加强免疫后１年，抗ＰＴ和抗ＦＨＡ的抗体水平均能维持在较高的抗感染水平，分别为２０１ＥＵ／ｍｌ和５８６ＥＵ／ｍｌ；ＤＴａｃＰ抗白喉和抗破伤风的抗体水平，不论是在基免后还是在加强注射后１个月或１年，其≥００１ＨＡＵ／ｍｌ的例数均为１００％，均显著超过儿童抗白喉和抗破伤风感染要求的保护水平（００１ＨＡＵ／ｍｌ）。

无细胞百日咳菌苗毒性试验参考苗制备条件的探讨

将不同灭活条件下制备的无细胞百日咳毒性试验参考苗进行了检测。结果表明，以浓度０．１％Ｆｏｒｍａｌｉｎ溶液２５℃灭活９６－１２０小时制备的无细胞百日咳菌苗毒性试验参考苗，凝集效价仍可达到百日咳Ⅰ相血清原效价；不耐热毒素试验呈阴性；毒性试验ＢＷＤＵ／ｍｌ为７５．９－１２８．４；ＬＰＵ／ｍｌ为２．１－６．０；ＨＳＵ／ｍｌ为３．９－５．７；稳定性良好。

用[3.3]法质反应平行线分析计算百日咳菌苗效力单位

用微机QRP法和W W法计算 2 49批百日咳菌苗的效力 ,结果二者在总体上差异无显著意义。 2 0 9批配对数据分析表明 ,二者合格的符合率为 81.34 % ,不合格的符合率为 14.83% ,总符合率为 96 .17% ,不符合率占3.83%。在这 3.83%中 ,皆为用W W法。用W W法计算在合格边缘而用QRP法计算合格的制品 ,因此 ,微机QRP法计算的合格率显著高于W W法。用W W法不能计算的占 2 .81% ,用QRP法则很易完成 ,差异也有显著意义。QRP法计算的直线性平行性检验不成立的为 13.2 5 % ,5批经过复试 ,此 2种检验皆获通过。

无细胞百日咳菌苗质量控制指标的探讨

本文介绍了美国、日本关于无细胞菌苗质量控制的检定项目，并就两国不同的质量控制体系进行分析和比较。特别对无细胞百日咳菌苗的效力测定和毒性试验存在的问题提出看法。同时对国内如何加强对无细胞菌苗的质量控制提出建议，以进一步开展研究工作，从而制定出中国国内无细胞百日咳菌苗质量控制的合适指标。

无毒性逆转的无细胞百日咳菌苗制备

将百日咳菌培养物上清液,经一段硫酸铵盐析提取百日咳主要保护性抗原 FHA 和 PT,用蔗糖密度梯度离心去除内毒素,以戊二醛解毒制成无细胞百日咳菌苗。该菌苗对家兔不产生热原反应,对小鼠毒性低,不引起明显的白细胞增多及组胺致敏活性,小鼠免疫后对百日咳毒菌脑腔攻击具有很好的保护作用,并可产生较高的抗体应答。菌苗经37℃保存3个月未出现毒性逆转现象,质量稳定,为大批量制造质量均一的无细胞百日咳菌苗提供了可能性。

不同减毒方法对无细胞百日咳菌苗减毒效果的比较研究

采用５种不同的化学减毒方法对无细胞百日咳菌苗的ＰＴ组分减毒效果进行了比较研究，选择出对菌苗的抗原性破坏小、减毒效果确切、减毒时不产生变性蛋白凝块的改进的甲醛减毒方法。

百日咳菌苗免疫力水平测定两种统计方法的比较

利用生物统计软件对兰州生研所１２年间生产的１４７批百日咳菌苗原液的免疫力进行质反应平行线测定分析（平行线法），并与《中国生物制品规程》９５版中ＷｉｌｓｏｎＷｏｒｃｅｓｔｅｒ法（Ｗ－Ｗ）比较，结果表明，质反应平行线测定法的各剂量反应百分率落在经验区间内；ＥＤ５０可信限区间为０．０１６～０．０１４；相对效价９５％可信限区间为０７７５～０．６５５。按合格、不合格、复试三个水平对１４７批百日咳菌苗的免疫力进行了分析与评价。并以中国百日咳菌苗免疫力试验用参考品为对照，对待检菌苗的稳定性及实验一致性进行了质量检测，计得总体回归系数分别为１．５８７９（ｘ２＝６０．９０）和１．３８４９（ｘ２＝１６３．２４）；总体ＥＤ５０分别为０．０１４和０．０１５；待检菌苗总体相对效价０７１４，两法的ＥＤ５０值间及相对效价值间存在很好的相关性（ｒ＝０．８３７６及ｒ＝０．９９４０）。

培养基除菌过滤在百日咳菌苗生产中的应用

经一系列试验证实百日咳菌大罐培养浓度的下降与培养基中不耐热营养因子不足有关，将培养基的高压灭菌方式改为除菌过滤，保留热不稳定营养因子，可以提高百日咳菌大罐培养浓度；优化酸沉淀条件后，提高了菌苗回收率，从而节省了大量培养基，缩短了生产时间，获得了良好的经济效益。

三种百日咳菌苗的人体反应及血清学效果观察

百日咳菌体菌苗的免疫接种,降低了百日咳的发病率,有效地控制了百日咳的流行。由于菌体菌苗的接种反应大,并可发生罕见的神经系统并发症,致使百日咳菌苗的使用受到了限制。

无细胞百日咳菌苗发酵罐培养

为扩大生产，采用５００立升发酵罐培养无细胞百日咳菌苗，发现随着培养时间的延续，菌体浓度的增大，培养液的ｐＨ值升高，ＰＴ，ＦＨＡ活性，血凝效价逐渐增加，Ｏ２溶压下降，ＣＯ２溶压上升，ｐＨ值达８．２时，ＰＴ活性达最高，为３００ＥＵ／ｍｌ较现用扁瓶培养方法高５倍，ｐＨ值继续上升时，ＰＴ活性开始下降，ＦＨＡ活性及血凝效价具有相似的变化。通过测定培养液ｐＨ值以确定收获时间，可获得富含ＰＴ，ＦＨＡ。

亿万儿童的福音──新一代百日咳菌苗的问世

亿万儿童的福音──新一代百日咳菌苗的问世何长民（卫生部兰州生物制品研究所，兰州７３００４６）百日咳是由百日咳杆菌引起的一种严重的急性呼呼道传染病，在人群中长期存在，传播分布很广，严重威胁婴幼儿的健康。但是，目前世界各国对这一疾病尚无完全有效的化学治疗...

吸附精制百日咳菌苗人体免疫接种反应及血清学效果观察研究

前言自百日咳杆菌首次制成菌苗预防人类百日咳这一严重威胁婴幼儿生命的疾病以来,至今已有50多年的历史。目前世界各国大部地区仍在使用百日咳Ⅰ相菌制作的灭活全细胞菌苗。然而该菌苗对人体的毒性作用较重,异常反应的发生率较高,特别对极少数儿童可引起神经系统症状,甚至严重的脑损伤导致死亡,从而有的国家在全国范围内停用该菌苗,然而因停用反引起发病倍增,几年后又不得不恢复使用,但付作用的问题仍引人关注,许多国家都在努力研制付作用较小的组分菌苗。

中国标准百日咳菌苗效价的标定

中国标准百日咳菌苗#1#2系于1978年用百日咳I相菌CMCC 58004(型1、2、3)、CMCC 58031(型1、2)制备。该两批标准品曾用WHO标准百日咳菌苗#1、日本标准百日咳菌苗#28及英国百日咳菌苗参考制品#2为标准,对其效价进行了标化。1980～1981年又送至日本-N.I.H、美国F.D.A实验室核检,标化的结果经统计学分析,其效价每安瓶分别为16及21国际单位。反馈的信息证明,该标准品的质量及稳定性令人满意。

吸附精制百日咳菌苗免疫持久性研究

继吸附精制百日咳菌苗人体免疫接种反应及血清学效果观察之后，我们又进一步进行了吸附精制百日咳菌免疫持久性研究，通过吸附精制百日咳菌苗与吸附全细胞百日咳菌苗在人体接种后血清抗ＬＰＦ及抗ＦＨＡ水平比较发现，经全程基础免疫后，两组的抗体水平升高到了一定水平，但一年后抗体水平又大为降低，吸附精制百日咳菌苗组抗ＬＰＦ由基免后的５２．４０ＥＵ／ｍｌ在一年后降至１９．０８ＥＵ／ｍｌ；抗ＦＨＡ由１３１．３７ＥＵ／ｎｌ降至４６．４４ＥＵ／ｍｌ。全细胞百日咳菌苗组抗ＬＰＦ由基免后的５８．７１ＥＵ／ｍｌ一年后降至１６．１２ＥＵ／ｍｌ；抗ＦＨＡ由４６．２５ＥＵ／ｍｌ降至２８．９７ＥＵ／ｍｌ。两种疫苗的两种抗体水平均明显下降，尤其抗ＬＰＦ的水平又降至抗百日咳感染水平（２０ＥＵ／ｍｌ）以下，提示基础免疫后，进一部的加强免疫是必要的。加强免疫后，吸附精制百日咳菌苗组的抗ＬＰＦ及抗ＦＨＡ又分别升高至４９．７５ＥＵ／ｍｌ和１１４．４５ＥＵ／ｍｌ，全细胞百日咳菌苗组的抗ＦＨＡ升高至５５．７１ＥＵ／ｍｌ。进一步证实了加强免疫的必要性。研究中发现，基础免疫后，随着时间的推移，吸附精制百日咳菌苗组的抗体水平较全细胞百日咳菌苗组下降较慢，而加强免疫后，?

百日咳及百日咳菌苗的研究现状

本文从百日咳的流行病学、实验室诊断、药物预防、百日咳菌苗作用的评价与对策以及菌苗接种的有关问题等方面,对百日咳的研究进展进行了综述.

百日咳菌苗研究方向研讨会在京召开

百日咳菌苗研究方向研讨会,于1989年3月28～29日在北京生物制品研究所召开。会议首先由北京所刘德铮同志介绍了1989年9月在丹麦召开的第5届国际百日咳菌苗研究会的情况。随后,由长春所王钧同志介绍了百日咳无细胞菌苗在瑞典流行病学调查的结果。与会代表结合我国目前百日咳菌苗的研究现状进行了认真地分析和讨论,主要内容概括如下:

吸附精制百日咳菌苗完成Ⅰ期人体反应观察

由中国生物制品总公司组织,由长春、北京、上海、成都和武汉生物制品研究新联合组成的无细胞百日咳菌苗研制协作组,应用发酵罐培养、分别用甲醛和戊二醛解毒制成两种吸附精制百日咳菌苗,经卫生部新药生物制品审评委员会审议,获准进行Ⅰ期和Ⅱ期人体反应观察。上述两种菌苗已在曲阜市完成了Ⅰ期人体反应观察。两种菌苗分别注射20名0.5～2周岁儿童。

无细胞百日咳菌苗的效力试验

近十年来,已研究开发了若干种无细胞百日咳菌苗,并有望取代当今使用中的全细胞菌苗。百日咳菌苗有多种抗原,如百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、菌毛混合物(Fim2+3)及69KDa外膜蛋白是无细胞菌苗之所需组分。最近在美国开展了旨在比较全细胞和13种无细胞菌苗免疫原性和反应原生力2期临床试验。这些无细胞菌苗或只含有PT,或由PT与上述的1种或1种以上的抗原组合而成,并已通过化学处理或对其菌体作遗传学修饰消除了毒注。进入2期临床试验的无细胞菌苗。

全细胞百日咳菌苗与含凝集原的无细胞菌苗的第二期现场试验

由英国“应用微生物学及研究中心”研制的无细胞百日咳菌苗,含有凝集原2及3,百日咳毒素和丝状血凝素。188名婴儿进入一项随机的双盲试验,以联合白喉及破伤风类毒素的无细胞或全细胞菌苗按3、5及8～10个月的间隔进行接种。两组的局部反应相以,但在接种无细胞菌苗后,具有全身反应的婴儿显著地少于全细胞菌苗。对无细胞菌苗凝集原和毒素组分的抗体平均对致滴度高于全细胞菌苗。接种第三剂菌苗后一年,无细胞组抗体的持久性亦较好。