靶向表皮生长因子受体的百秋李醇纳米颗粒抑制非小细胞肺癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用及机制

目的探讨靶向表皮生长因子受体(EGFR)的百秋李醇(PA)纳米颗粒对非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤生长的抑制作用及其机制。方法①利用二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-EGFR靶向肽AA1(DSPE-PEG-AA1)脂质体负载PA,构建靶向EGFR的PA脂质体纳米颗粒(EGFR-PA-NP)。②将人NSCLC A549细胞(2×106个/只)接种于裸鼠腋下,建立肺癌异种皮下移植瘤裸鼠模型。10只模型裸鼠随机分为PA脂质体纳米颗粒(PA-NP)组和EGFR-PA-NP组(n=5),分别尾静脉注射给予20 mg·kg^(-1)相应药物,24 h后剥取肿瘤、癌旁、肝、肺、心、脑、肾、脾、胃、小肠等组织,液相色谱-质谱(LC-MS)法检测药物在体内的组织分布情况。③20只模型裸鼠随机分为模型组(100μL)、PA组(15 mg·kg^(-1))、PA-NP组(15 mg·kg^(-1))和EGFR-PA-NP组(15 mg·kg^(-1))(n=5),分别尾静脉注射给予相应干预,隔日1次,共28 d。28 d后观察药物对裸鼠皮下移植瘤生长的影响。通过原位末端转移酶标记(TUNEL)检测法检测皮下移植瘤中肿瘤细胞凋亡情况,免疫荧光染色法检测皮下移植瘤中血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)表达情况,免疫组化染色法和Western blot法检测皮下移植瘤中蛋白激酶B(Akt)、磷酸化(p)-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和p-mTOR表达水平。结果①制备的EGFR-PA-NP粒径为(122±6.90)nm、Zeta电位为(-24.28±3.76)mV、包封率为85.24%、载药量为8.09%,符合纳米颗粒特征。②LC-MS法检测药物组织分布结果显示,EGFR-PA-NP组药物在裸鼠瘤体内的富集量是PA-NP组的3倍,显著高于PA-NP组(P<0.05)。③在裸鼠A549皮下移植瘤模型中,PA组、PA-NP组和EGFR-PA-NP组裸鼠瘤体体积明显小于模型组(P<0.05),而EGFR-PA-NP组瘤体体积明显小于PA-NP组(P<0.05)。与PA-NP组相比,EGFR-PA-NP组肿瘤中凋亡细胞数量显著增加(P<0.05),CD31蛋白表达水平显著降低(P<0.05),并且p-Akt、p-mTOR表达水平显著降低(P<0.05)。结论EGFR-PA-NP能够通过促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管新生发挥抗肺癌作用,其机制与抑制Akt/mTOR通路激活相关。

不同地域来源广藿香中百秋李醇合成相关基因表达差异研究

广藿香是我国岭南地区传统名贵中草药,其主要活性物质是百秋李醇,属于三环倍半萜化合物,在植物体内形成过程较复杂,目前已有研究主要集中在百秋李醇合成的相关基因。研究对7种不同地域来源的广藿香种质中的4个百秋李醇合成调控相关基因(PatPTS、PatFPS、PatHMGR、PattTpsCF2)进行了表达差异分析,同时测定了不同来源广藿香样品中的百秋李醇含量。结果表明:在所检测的样品中,4个百秋李醇合成调控相关基因表达量与百秋李醇含量均存在地域差异;PatPTS、PatFPS、Pat Tps CF2在不同来源广藿香样品中的表达差异与百秋李醇含量呈正相关;Pat HMGR基因在广东高要和广东石牌2个广藿香样本中表现为高表达,而在其他广藿香样本中表达差异与百秋李醇含量呈正相关。此次研究结果可为不同来源广藿香药效成分快速鉴定和分子育种提供理论依据。

藿香清胃胶囊中百秋李醇含量的测定

为了建立毛细管柱气相色谱法测定藿香清胃胶囊中百秋李醇的含量。样品经正己烷超声提取后采用气相色谱法进行含量测定。色谱柱为DB-5毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm);柱温采用程序升温,初始温度为180℃,保持7 min,再以40℃/min的速率升温至280℃,保持5 min;进样口温度为280℃;FID检测器温度为280℃;载气为氮气,色谱柱流量为3.0 mL/min,分流比为5∶1;进样量为1μL。结果显示,百秋李醇在0.2312μg~6.9360μg/mL的浓度范围内与峰面积呈良好线性关系(相关系数r=0.9994);平均回收率为99.35%,RSD=1.16%(n=9)。该方法操作简单方便,灵敏度高,可作为藿香清胃胶囊中百秋李醇含量的检测方法。

海南广藿香药材中百秋李醇和广藿香酮的含量测定

目的建立海南广藿香药材百秋李醇和广藿香酮的含量测定方法。方法采用气相色谱法同时测定11批海南广藿香药材百秋李醇和广藿香酮含量。结果广藿香药材的质量与生长地点有直接关系。结论该方法快速、稳定可靠,可以用于广藿香药材质量评价。

气相色谱法测定藿香清胃片中百秋李醇的含量

目的建立藿香清胃片中百秋李醇的GC含量测定方法。方法色谱柱:HP-5柱(30m×0.32mm×0.25μm),以交联5%苯基甲基聚硅氧烷为固定相;柱温采用程序升温:起始150℃,保持23min,8℃/min升至230℃,保持2min;气化温度:280℃;检测器温度:280℃;载气为氮气,流量25mL/min,流速为0.9mL/min;进样量1μL,分流比为5∶1。结果百秋李醇在0.057～1.140mg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,r=0.9994;平均回收率为99.38%,RSD=1.82%(n=5)。结论该方法简单、灵敏、重现性好,可作为藿香清胃片的质量控制指标之一。

GC法测定藿香正气水中百秋李醇含量

目的建立藿香正气水中广藿香油指标成分百秋李醇的定量测定方法。方法采用气相色谱法,弹性石英毛细管HP-5色谱柱;氢火焰离子化检测器。结果 GC方法学考察结果表明,百秋李醇在4.4×10-5~1.1×10-3mg范围内线性关系良好（r=0.9996）;平均加样回收率为97.82%,RSD为1.4%。结论该方法准确、灵敏、结果可靠,可作为藿香正气水质量控制方法。

毛细管GC法测定藿香精油中百秋李醇的含量

目的建立藿香精油中百秋李醇的含量测定方法。方法采用SE30(30m×0.25mm×0.25μm)石英毛细管色谱柱,以正十二烷为内标,进样口温度210℃,检测器温度300℃的气相色谱测定百秋李醇含量。结果百秋李醇在17.55～117.0mg/mL浓度范围内,峰面积与内标峰面积之比值与浓度呈良好的线性关系(r=0.9997);平均回收率为98.59%,RSD=1.02%(n=6)。结论方法准确、简便、灵敏、快速。

气相色谱法测定广藿香油中百秋李醇含量

建立了气相色谱仪测定广藿香油中百秋李醇含量的方法。用毛细管色谱柱DB-5MS（30m×O．32mm．0．25μm），正十八烷为内标，氢火焰离子化检测器进行检测，内标法定量。百秋李醇含量在0．2-2．0mg／mL范围内，百秋李醇峰面积和内标物峰面积之比与百秋李醇质量浓度呈良好的线性关系，相关系数r=0．9997。方法的检出限为1μg／mL，加标回收率为90．0％～100．6％，测定结果的相对标准偏差为1．22％（n=6）。研究表明，本法简便、快速、测定结果准确可靠，精密度优于外标法。

不同光照强度对广藿香中百秋李醇含量的影响

为探讨不同光照强度对广藿香[Pogostemon cablin(Blanco)Benth.]中百秋李醇含量变化的影响,采用气相色谱法对广藿香样品中的百秋李醇含量进行了测定分析。结果表明,遮阴率达80%时,广藿香中百秋李醇的含量为0.057 0%,高于全光照处理样品的0.032 5%,表明遮阴有利于广藿香中百秋李醇的积累。通过各个遮阴处理之间的多重比较,发现各遮阴处理的百秋李醇含量相互之间差异不显著(P>0.05)。因此,适当的遮阴处理对获得高品质的广藿香药材有一定的促进作用。

GC法同时测定复方麝香注射液中薄荷脑、龙脑、百秋李醇和麝香酮的含量

目的:建立同时测定复方麝香注射液(麝香、广藿香、冰片、薄荷脑等)中薄荷脑、龙脑、百秋李醇和麝香酮等4种成分含量的气相色谱方法。方法:以正十八烷为内标物;气相色谱柱为Rtx-Wax(30m×0.25mm×0.25μm);FID检测器,采用程序升温,内标法测定样品中4种主要成分含量。结果:复方麝香注射液中的薄荷脑、龙脑、百秋李醇、麝香酮和正十八烷等5种成分,在同一色谱条件下获得了良好的分离,薄荷脑、龙脑、百秋李醇、麝香酮平均回收率分别为99.76%(RSD=1.48%)、99.36%(RSD=1.99%)、99.15%(RSD=1.67%)、98.87%(RSD=1.57%)。结论:本方法灵敏、准确、分离度、重现性好,可用于控制复方麝香注射液的质量。

气相色谱法测定感冒解表口服液中百秋李醇含量的研究

目的:建立气相色谱法测定感冒解表口服液中百秋李醇含量的方法.方法:样品经提取挥发油后用气相色谱法测定.色谱条件:以10%PEG-20M作固定液,程序升温.以正十八烷为内标,FID检测.结果:线性范围0.2～1.7mg、缺味空白无干扰,加样回收率为97.7%,RSD为2.87(n=5).结论:用程序升温气相色谱法测定本法简便,灵敏度高,重现性好,可用于质量控制.

气相色谱外标法、内标法测定广藿香中百秋李醇含量的比较

目的:建立气相外标法测定广藿香中百秋李醇的含量。方法:色谱柱为弹性石英毛细管柱ZB-5(30 m×0.32 mm×0.25μm);程序升温:初始温度190℃,保持6 min,以40℃·min^(-1)的速率升温至230℃,保持2 min,进样口温度为280℃,检测器温度为280℃;分流为20:1,进样量:1μl。。结果:百秋李醇在0.011 0～0.552 5 mg·ml^(-1)的范围内呈良好线性关系(r=0.999 9);平均回收率为100.1%,RSD=2.0%(n=6)本试验所建立的外标法测得的13批样品中百秋李醇含量都高于内标法。结论:该方法准确简便、环保、重复性好,较原方法更能准确地测定广藿香中百秋李醇的含量。

不同干燥方法对广藿香中百秋李醇含量影响的近红外光谱分析

目的:优选广藿香的最佳产地加工方法。方法:采用近红外光谱定量分析模型对传统干燥法、阴干法、烘干法处理的样品中的百秋李醇含量进行测定。结果:阴干法药材中百秋李醇含量最高,传统干燥法药材中百秋李醇含量最低。结论:为保证药材的质量,在对广藿香进行产地加工时应采用阴干法或烘干法。

一种从广藿香油中快速分离纯化广藿香酮和百秋李醇的方法

目的:建立从广藿香油中快速分离高纯度广藿香酮和百秋李醇的方法。方法:利用水蒸气蒸馏法提取广藿香挥发油,分别采用碱溶酸沉法和包结物晶析法对广藿香酮和百秋李醇进行分离,并运用GC-MS法检验纯度。结果:在短时间内获得了高纯度的广藿香酮和百秋李醇。结论:所建立的方法快速、简便,为广藿香酮和百秋李醇的实际应用提供了一种思路。

GC测定藿胆丸中百秋李醇的方法学考察

目的:考察藿胆丸中百秋李醇的提取及含量测定方法。方法:以百秋李醇含量为指标,单因素考察提取溶剂与提取方法,再以溶剂体积、提取时间、提取温度为考察因素进行L_9(3~4)正交试验,用气相色谱法测定百秋李醇含量。结果:藿胆丸中百秋李醇的提取方法为石油醚体积:150 mL,水浴温度:85℃,提取时间:45 min;气相色谱法测定百秋李醇含量,在0.235～3.52 mg·mL^(-1)范围内呈现良好的线性关系。结论:该提取方法和含量测定方法稳定,可靠,操作简单,可用于测定藿胆丸中的百秋李醇的含量。

运用近红外光谱法建立广藿香中百秋李醇的定量模型

目的建立广藿香百秋李醇的近红外定量模型,快速测定广藿香百秋李醇含量。方法用气相色谱法测定102批广藿香的百秋李醇含量,采集并用一阶导和标准归一化预处理近红外光谱,结合偏最小二乘法建立百秋李醇的定量模型。结果本实验建立的校正模型,内部交叉验证决定系数达到0.991 10,校正均方差为0.012 9,预测均方差为0.012 8,内部交叉验证均方差为0.033 15。结论本实验建立的近红外定量模型稳定,准确可靠,可快速对广藿香百秋李醇含量进行测定。

广藿香百秋李醇分子调控及合成生物学研究进展

百秋李醇是广藿香主要活性成分之一,也是《中国药典》中评价广藿香药材的重要指标,可通过天然提取或合成生物学工程两种方式获得。广藿香中百秋李醇含量低,是其规模化应用的瓶颈。本文从百秋李醇的合成途径、分子调控机制和合成生物学工程三方面综述近年来相关研究进展,为百秋李醇的开发与应用提供参考。

GC法测定广藿香提取物中百秋李醇和广藿香酮的含量

目的 :建立广藿香中百秋李醇和广藿香酮的含量测定方法。方法 :采用气相色谱法对广藿香药材提取物进行分析 ,以内标法同时测定广藿香中百秋李醇和广藿香酮的含量。结果 :百秋李醇在 1 0 2～ 6 35mg/ml范围内 ,广藿香酮在 0 5 5～ 4 36mg/ml的范围内呈良好线性关系。结论 :所建立的方法稳定可靠 ,可用于该药材的质量控制。

GC法测定马香苓口服液中百秋李醇含量研究

试验旨在建立测定马香苓口服液中百秋李醇含量的研究方法。本研究采用气相色谱法,其色谱条件是使用色谱柱HP-5毛细管柱;柱温采用程序升温(初始温度150℃,保持18 min,以50℃/min速率升至280℃,保持5 min);进样口温度为280℃;载气:高纯氮气;流速1 mL/min;进样量1μL,分流比20∶1;检测器为氢火焰离子化检测器,温度为280℃;氢气流速40 mL/min,空气流速370 mL/min;分别进行系统适用性试验、专属性试验、线性范围考察、检测限和定量限的确定、精密度试验、稳定性试验、重复性试验、加样回收率试验、耐用性试验,并对10批样品进行了含量测定。结果显示,专属性溶液中的溶剂峰、药液的杂质峰与主成分峰能达到有效分离且分离度符合要求(R≥1.5),表明该方法系统适用性良好;阴性对照溶液未检出色谱峰,表明样品中其他成分不干扰测定;百秋李醇定量限和检测限分别为2.842和0.812μg/mL;百秋李醇检测质量浓度在15.86~1015μg/mL范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(y=0.869x-10.45,R^2=0.999,n=7)。精密度试验、稳定性试验(日内和日间精密度)、重复性试验的平均RSD分别为0.90%、1.63%和1.83%、2.90%,其RSD均在可控范围内(RSD≤3%);平均加样回收率为95.36%,RSD=2.82%(n=6),表明所建立的气相色谱法检测百秋李醇的含量回收率良好;进行耐用性试验,最终验证所建立的色谱方法可以稳定检测百秋李醇的含量。经方法学验证,该方法准确稳定,简便可行,能够作为马香苓口服液君药广藿香中百秋李醇的含量控制方法,同时也为该制剂质量控制提供了一种有效的检测方法,暂定本品中广藿香药材按百秋李醇计不少于47.53μg/mL。