秦皮甲素和秦皮乙素的药理研究进展

秦皮为一种传统中药,其毒性低、临床应用范围广,常被运用于治疗目赤肿痛、湿热泻痢、赤白带下、血崩不止等病症。药理研究发现香豆素类化合物是秦皮的主要活性成分,其中秦皮甲素和秦皮乙素最具代表性。众多的研究显示,秦皮甲素和秦皮乙素在抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等方面展现出丰富的药理学活性,其潜在的开发利用价值日益受到关注。该文通过查阅国内外相关文献,对秦皮甲素和秦皮乙素的主要药理作用研究进行归纳,以期为秦皮的研发及临床运用提供参考依据。

秦皮甲素的提取工艺及活性进展研究

秦皮(Cortex fraxini)是常见的药食同源的天然植物产物,在预防及治疗疾病等方面有着重要的影响,其活性成分秦皮甲素(Esculin)具有抗炎,抗氧化,抗肿瘤,降高尿酸及利尿等多方面明显的药理活性作用。秦皮甲素的提取方法包括回流法、液固萃取法、超声提取法和微波提取法等。分离纯化方法有大孔树脂吸附法等。本文对秦皮甲素的提取分离、纯化以及其多种药理活性的国内外研究进展展开论述,旨在为秦皮甲素的深入研究及充分开发利用等方面提供理论基础。

地骨皮甲素调节IL-33/ST2信号对中耳炎大鼠的研究

目的探讨地骨皮甲素调节IL-33/ST2信号对中耳炎大鼠免疫功能及钠通道的研究。方法50只SD大鼠,随机分为NO组(正常大鼠灌胃生理盐水),MO组(模型大鼠灌胃生理盐水),OS组(模型灌胃40 mg·kg^(-1)地骨皮甲素),ST组(模型灌胃0.2 mL 1 kg·L^(-1)IL-33/ST2信号抑制剂),UN组(模型灌胃40 mg·kg^(-1)地骨皮甲素和0.2 mL 1 kg·L^(-1)IL-33/ST2信号抑制剂)。听性脑干反应检测听力水平,HE染色检测中耳黏膜组织病理形态,ELISA法检测免疫功能相关指标,Real-time PCR法检测中耳黏膜组织上皮钠通道mRNA表达,免疫印迹法检测IL-33/ST2信号相关蛋白表达。结果与NO组相比,MO组纯音听力阈值、IL-4含量、IL-33、ST2蛋白表达升高(P<0.05),INF-γ含量、α-ENaC、β-ENaC、γ-ENaC mRNA表达降低(P<0.05),与MO组比较,OS组、ST组、UN组纯音听力阈值、IL-4含量、IL-33、ST2蛋白表达降低(P<0.05),INF-γ含量、α-ENaC、β-ENaC、γ-ENaC mRNA表达升高(P<0.05),且ST组与OS组相比无明显差异(P>0.05),UN组比ST组降低明显(P<0.05);与NO组相比,MO组中耳黏膜出现病理变化,与MO组相比,OS组、ST组、UN组病理症状明显改善。结论地骨皮甲素可显著改善中耳炎大鼠免疫功能,促进钠通道表达,其作用机制可能与抑制IL-33/ST2信号通路有关。

高效液相色谱紫外等吸收波长法快速测定秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素

研究建立了一种快速、环保和节约对照品的秦皮化学成分含量测定方法。秦皮样品采用25%(v/v)乙醇水溶液超声提取5 min。样品提取溶液采用Poroshell 120 EC-C18色谱柱(50 mm×4.6 mm, 2.7μm)进行分析,0.1%甲酸水溶液-乙腈(94∶6, v/v)等度洗脱,流速1.5 mL/min。采用紫外分光光度仪对等浓度的秦皮甲素和秦皮乙素进行紫外光谱扫描,初步筛选得到2个对照品的等吸收波长,并用高效液相色谱仪对筛选得到的等吸收波长进行确证,从而获得2个对照品的等吸收检测波长341 nm。新建立的高效液相色谱紫外等吸收波长法的方法验证结果显示,秦皮甲素和秦皮乙素在各自的浓度范围内具有良好的线性关系(r=1.000 0),检出限和定量限分别为1.5μmol/L和3.0μmol/L,平均加标回收率分别为99.0%(RSD=1.4%)和97.5%(RSD=0.9%)。通过比较高效液相色谱紫外等吸收波长法和传统高效液相色谱外标法对10批秦皮样品中秦皮甲素和秦皮乙素的含量测定结果,显示两种方法测定结果一致。此外还采用t检验对该方法与《中国药典》2020版方法的含量测定结果进行比较,对比结果表明两种测定方法无显著性差异(P>0.05)。该方法耗时10 min,有害溶剂消耗0.5 mL,只使用1个对照品,具有快速、简便、环保和对照品消耗少的特点,适用于秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的含量测定,为秦皮质量评价的技术提升提供了依据。

基于3D建模技术的仿古皮甲设计研究

利用3D建模技术复原古代皮甲的形制结构、编缀方法、制作工艺及制作仿古皮甲实物,达到更真实还原古代皮甲装备形制的目的。方法以古籍资料文献为依托,总结皮甲复原的工艺流程,利用3D建模技术模拟秦代皮甲的结构全貌,运用现代制革技术及染色工艺,从形制、色彩、组装、染色等方面尽可能复刻制作出符合史料记载的秦代皮甲。得出结论:利用3D建模技术复原仿古皮甲的科学方法,其仿制皮甲实物效果精细逼真,对研究古代皮甲制作工艺及古法制革文化可提供一定的参考。

三种微波萃取秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的方法

以秦皮甲素和秦皮乙素的含量为指标,研究了3种微波萃取秦皮的方法.3种方法分别为家用微波炉连续引入溶剂萃取法、微波谐振腔连续引入溶剂萃取法和实验室专用微波炉萃取法.结果表明,溶剂浓度、辐射时间、微波功率、样品粒度等均对萃取有影响.3种微波萃取法与索氏萃取法相比,提取效率高且可省时节能.

秦皮甲素、秦皮乙素与血清白蛋白的相互作用

用荧光光谱法研究了中药有效成分秦皮甲素、秦皮乙素与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)的相互作用。结果表明:秦皮甲素、秦皮乙素对血清白蛋白的荧光有较强的猝灭作用,其荧光猝灭为单一的静态猝灭过程,其作用机制属能量转移机制。求得不同温度下反应的结合常数K。由反应焓变、熵变确定它们间的结合主要是静电引力。依据非辐射能量转移机理,求出了其结合位置和能量转移效率。

藏药八味秦皮丸中秦皮甲素、秦皮乙素和麝香酮的定量测定

目的建立八味秦皮丸(秦皮、针铁矿、草莓、多刺绿绒蒿、寒水石、美丽风毛菊、朱砂、麝香)质量标准中的定量测定项。方法采用高效液相色谱法测定秦皮甲素和秦皮乙素,色谱柱为依利特C18柱(4.6mm×250mm);流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(27∶73);体积流量为1.0 mL/min;柱温为室温;检测波长为344.4 nm。采用气象色谱法测定麝香酮,色谱柱为HP-5毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm);载气为氮气(99.99%);检测器温度为250℃;分流比为40∶1;程序升温150℃开始以10℃/min速度升温至170℃保持4 min,然后以15℃/min速度升温至230℃保持5 min。结果秦皮甲素、秦皮乙素进样量分别在0.200～2.502μg、0.120～1.503μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率分别为100.71%、100.38%,RSD分别为0.65%、0.87%(n=6);麝香酮进样量在15.20～152.0μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.27%,RSD为0.74%(n=6)。结论该方法灵敏、准确、专属性强,可用于八味秦皮丸中秦皮甲素、秦皮乙素、麝香酮的定量测定。

不同地理种源秦皮的树皮及叶中秦皮甲素、秦皮乙素的含量测定

目的 :测定不同地理种源秦皮的树皮及叶中秦皮甲素和秦皮乙素的含量。方法 :采用HPLC法 ,以乙腈 水 (15∶85 )为流动相 ,使用NovapakC18柱 ,检测波长 348nm ,外标法。结果 :进样量与峰面积线性关系良好 ,秦皮甲素与秦皮乙素的r值分别为 0 .9992 ,0 .9994 ,平均回收率分别为 98.2 % ,99.2 % ,RSD分别为 2 .2 4 % ,2 .15 %。因地理种源不同而造成的秦皮质量差异明显存在 ,陕西产秦皮质量上乘。结论 :本法操作快速、简便、易行 ,精密度、重复性、稳定性好 ,适用于秦皮含量的分析测定。

秦皮甲素对实验性溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜细胞因子的影响

【目的】研究秦皮甲素对实验性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠肠黏膜的保护作用及其机制。【方法】选用40只SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(SASP组)和秦皮甲素组(EH组),每组10只。模型组、SASP组和EH组均采用三硝基苯磺酸(TNBS,剂量为100 mg/kg)灌肠法复制大鼠UC模型,SASP组和EH组分别灌胃给予SASP(剂量为600 mg/kg)和秦皮甲素(剂量为100 mg/kg)进行治疗。治疗结束后,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)的水平。比较各组大鼠一般状态、肠黏膜损伤情况和血清TNF-α、IL-10水平。【结果】秦皮甲素能显著改善UC大鼠的一般状态,显著缓解其结肠组织炎症。模型组大鼠结肠黏膜疾病活动指数(DAI)评分和组织学损伤指数(TDI)评分较正常组显著增高(P<0.01),各给药组DAI评分和TDI评分较模型组显著降低(P<0.01)。模型组大鼠血清中TNF-α水平显著升高,IL-10水平显著降低(均P<0.01)。与模型组比较,SASP组和EH组TNF-α水平显著降低,IL-10水平显著增高(均P<0.01)。【结论】秦皮甲素对TNBS诱导的大鼠UC有良好的治疗作用,其作用可能是通过抑制TNF-α分泌,上调IL-10表达,改善肠道免疫平衡紊乱而实现的。

秦皮甲素在Caco-2细胞模型中吸收机制的研究

目的:研究秦皮甲素在Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法:用Caco-2细胞单层模型研究秦皮甲素的双向转运,考察时间、药物浓度对秦皮甲素吸收的影响。采用高效液相色谱法检测秦皮甲素浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果:秦皮甲素在Caco-2细胞模型中,从单层细胞层顶端到基底端的转运与基底端到顶端的转运大致相同;随着秦皮甲素质量浓度的增加,顶端到基底端方向的吸收量近似线性增加,基底端到顶端方向的分泌量近似线性增加。结论:秦皮甲素在Caco-2细胞模型中吸收主要是被动转运。

高效液相色谱法测定秦皮浓缩颗粒中秦皮甲素的含量

采用高效液相色谱法测定秦皮浓缩颗粒中秦皮甲素的含量。色谱柱：Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋ ＣＬＣ－ＯＤＳ－Ｃ１８柱）；检测波长：２５４ｎｍ；流动相：甲醇－水－冰醋酸（３１：６９：０．５）；流速：１．８ｍＬ／ｍｉｎ；柱温：４０℃；线性关系在０．９２～４．６０μｇ范围内，ｒ＝０．９９９６，平均加样回收率为９８．４２％，ＲＳＤ为１．７０％。

不同来源地骨皮药材中地骨皮甲素和乙素及阿魏酸的含量测定分析

目的测定并比较不同来源地骨皮药材(包括野生、栽培和市售)中地骨皮甲素、乙素和阿魏酸的含量。方法采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法测定3种来源的地骨皮药材中地骨皮甲素/乙素和阿魏酸的含量。色谱柱为Synergi 4u Hydro-RP80A柱(250 mm×4.6 mm,4μm);流动相为乙腈-0.5%三氟乙酸水溶液梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为278 nm。结果来源于栽培的宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)地骨皮中地骨皮甲素/乙素含量普遍较高,均大于9.090 mg/g;来源于野生的枸杞(Lycium chinense Mill.)地骨皮以产于山西、陕西和宁夏的地骨皮甲素/乙素含量较高,在8.969~15.012 mg/g之间,呈现出一定的规律性;阿魏酸含量最高的4个样品均存在于来源为枸杞(Lycium chinense Mill.)的地骨皮中,其他样品中阿魏酸的含量均为7.459~39.258μg/g,无明显的规律性。结论地骨皮甲素/乙素可作为地骨皮质量控制的特征指标,且含量不应低于1 mg/g,建立的方法准确可靠,且专属性强,可为地骨皮的质量控制及其开发利用提供一定的科学依据。

三维荧光光谱法结合交替三线性分解算法同时分辨及定量测定秦皮中的秦皮甲素和秦皮乙素成分

用三维荧光分析结合交替三线性分解算法对秦皮中药成分进行定性定量分析,为直接测定秦皮甲素和秦皮乙素提供了一种快速简洁的方法。相关系数r分别为1.000和0.998。多次测定结果的相对误差分别为2.01%和2.21%。

HPLC法测定秦皮中秦皮甲素、秦皮乙素的含量

采用高效液相色谱法测定中药秦皮中泰皮甲素、秦皮乙素的含量．固定相为十八烷基硅烷健合硅胶柱，流动相为甲醇—水（24：76），检测波长348nm．浓度在16μg／ml～176μg／ml范围内线性关系良好，相关系数分别为0．9995，0．9994，加样回收率秦皮甲素99．1±1．5％（n=5），秦皮乙素99．8±2．5％（n=5）。本方法日内精密度和日间精密度分别为0．8％和6．2％．该方法简便、快速、准确。

多基原秦皮药材中秦皮甲素和秦皮苷的纯化工艺研究

目的建立一种适合纯化不同基原的秦皮药材中秦皮甲素和秦皮苷的工艺。方法以D101C大孔树脂为分离和纯化载体,以秦皮甲素和秦皮苷的含量为指标,建立并评价相关工艺参数。结果按照建立的工艺,分别以3种基原的秦皮药材为材料,采用确定的工艺处理,提取物中秦皮甲素和秦皮苷的转移率达到了80%以上,其质量分数可以提高5倍。结论该工艺适合多种基原的秦皮中秦皮甲素和秦皮苷的纯化。

秦皮甲素大鼠体内药代动力学研究

目的:建立并确证LC/MS/MS法测定人血浆中秦皮的方法,并用以研究大鼠口服痛风利灵胶囊后秦皮甲素的药代动力学过程。方法:采用HPLC/MS/MS的方法进行血浆样品的测定,色谱柱为Aglient Zobax C18(2.1mm×150mm),流动相为甲醇-0.1%甲酸(含5mmol/L甲酸铵)=30∶70,流量为0.25mL/min;柱温为30℃。电喷雾ESI源,多反应监测(MRM):秦皮甲素,[M+H]+,m/z 341.27→179.1;替硝唑,[M+H]+,m/z 248.3→120.9。8只大鼠,雌雄各半,分别灌胃给予50mg/kg痛风利灵胶囊内容物(含秦皮甲素43mg/kg),于给药前及给药后多点抽取静脉血进行检测。结果:秦皮甲素的线性范围为12.5～1800ng/mL,日内、日间变异系数均小于10%。大鼠口服痛风利灵胶囊后,秦皮甲素药时曲线均分别符合一房室开放模型,T1/2为1.21h。结论:本实验建立的血药浓度测定方法简便、灵敏、特异,适用于大鼠血浆中秦皮甲素浓度的测定及药动学研究。

秦皮甲素两种给药途径在大鼠体内药代动力学研究

目的研究秦皮甲素两种给药途径在大鼠体内的药代动力学。方法秦皮甲素经大鼠灌胃(ig)和腹腔注射(ip)给药(100 mg/kg)后,采集不同时间点的大鼠血样,采用HPLC测定秦皮甲素在大鼠血浆中的浓度并计算其药代动力学参数。结果秦皮甲素灌胃给药和腹腔注射给药两种途径的药动学均符合一级吸收一室开放模型,其关键药物动力学参数分别为AUC_(0→∞)=(3.76±0.44)mg·h/L,(149.64±20.71)mg·h/L;Ke=(0.83±0.22)/h,(1.38±0.13)/h;C_(max)=(2.63±0.60)mg/L,(164.37±16.94)mg/L;T_(max)=(0.17±0.00)h,(0.17±0.00)h;T_(1/2(ke))=(0.88±0.21)h,(0.51±0.05)h;MRT=(1.69±0.31)h,(0.99±0.06)h。结论秦皮甲素两种给药途径的主要药动学参数有显著性差异,腹腔注射给药代谢速度较高,可以更加有效地降低血尿酸。

秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的荧光测定

本文根据胶束的增溶增敏作用，用β-环糊精（β-cyclodextrin）为胶束试剂，对秦皮中秦皮甲素、秦皮乙素的含量进行了测定，用国产930型荧光光度计实现了高灵敏的检测。秦皮甲素和秦皮乙素线性范围分别为2×10－8～8×10－6g／mL和2×10－9～8×10-6m／mL；检出限分别为3．78×10-10g／mL和5．54×10-11g／mL；秦皮甲素的平均回收率为96．6％，秦皮乙素的平均回收率为96．8％。测定效果良好。