不同毛色ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊皮肤组织中黑色素分布及ASIP蛋白的表达定位

为了研究ASIP基因在中国美利奴细毛羊被毛颜色形成过程中的作用机制,试验分别选取体况良好的3只野生型纯白色中国美利奴细毛羊,20只纯白色、8只棕色和10只黑色ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊背部的皮肤组织,通过H.E.染色对比样本皮肤组织结构及黑色素分布差异;采用免疫组织化学染色检测ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊白色、棕色、黑色3种皮肤组织中ASIP蛋白的表达定位情况。结果表明:野生型与ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊的皮肤均由表皮、真皮、皮下结缔组织3部分组成,且表皮层最薄,各毛色皮肤结构组成无差异;黑色素颗粒主要分布于黑色、棕色ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊皮肤组织的毛囊、毛干中,且黑色较棕色皮肤组织中分布的黑色素颗粒更为密集,而在白色被毛的野生型和ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊皮肤组织中均未发现黑色素颗粒;ASIP蛋白在白色被毛的ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊的表皮、毛囊外根鞘、毛乳头周围的毛基质中大量存在,在棕色、黑色皮肤组织中几乎不存在。说明ASIP蛋白在特定部位的表达情况与ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊的白色被毛毛色的发生相关。

鸡皮肤组织的冷冻保存以及复苏后成纤维细胞的培养

试验旨在探究程序化低温保存时两种渗透性冷冻保护剂对鸡皮肤组织保存的影响。从孵化9 d的鸡胚中分离皮肤组织,剪碎为1 mm^(3)大小的组织块,对组织块冷冻保存后复苏培养并统计复苏率,通过CCK8试验、EDU试验检测冻存复苏后细胞的增殖能力、PI染色检测细胞周期分布、JC-1检测线粒体膜电位检测,qRT-PCR检测标记基因的差异表达。结果显示:使用15%二甲基亚砜和20%甘油冻存的组织块复苏效率分别为(95.8±1.4)%和(92.5±2.5)%,显著高于其他冷冻保护剂组合(P<0.05)。CCK8和EDU试验中,15%的二甲基亚砜和20%甘油冻融组织块培养的细胞与对照组相比细胞增殖速度无显著差异(P>0.05);与对照组相比,15%二甲基亚砜和20%甘油冻融组织块培养的成纤维细胞G1、G2、S期都未有显著差异(P>0.05);线粒体膜电位检测显示20%甘油保存的组织块培养的成纤维细胞其膜电位与对照组相比出现了显著下降(P<0.05),15%二甲基亚砜和20%甘油冻融组织块培养的成纤维细胞标记基因的表达水平与对照组相比无显著差异(P>0.05)。结果表明,15%二甲基亚砜和20%甘油冻存的鸡皮肤组织块复苏效率无显著差异,但是15%二甲基亚砜的冻存效果要优于20%甘油。

SD大鼠、小鼠创面新生皮肤组织石蜡切片的制备方法

目的:探索有效的SD大鼠、小鼠创面新生皮肤组织石蜡切片的制备方法。方法:取21只雄性SD大鼠、21只雄性SD小鼠制作创伤模型,在不同愈合时间取创面新生皮肤组织制作石蜡切片,对石蜡切片制作过程中的关键步骤进行控制,包括固定、脱水、浸蜡、包埋、切片、脱蜡、复水、染色、脱水、封藏等。比较不同愈合时间皮肤组织石蜡切片的差异。结果:实验制得组织切片染色均匀,细胞排列紧密,无裂缝,细胞核染色清晰,呈暗红色,成纤维细胞、毛囊、毛细血管和肌肉组织结构均清晰可见。随着愈合时间的延长,皮肤表皮层增厚,毛囊越来越多且分化程度提高,成纤维细胞数量增加。结论:该制备方法可以有效保证石蜡切片的质量并判定皮肤愈合程度。

卧床患者长期卧床对皮肤组织的影响与防护措施研究

本文主要探讨卧床患者长期卧床对皮肤组织的影响与防护措施。方法 本文结合相关理论和研究分析了卧床患者长期卧床对皮肤组织的影响,并提出了防护措施。结果 通过分析探讨可以得出,卧床患者长期卧床会对皮肤组织造成不可逆转的损伤,特别是在皮肤压疮和皮肤营养不良方面。相关措施在于合理的体位调整和皮肤护理等。结论 研究卧床患者长期卧床对皮肤组织的影响和防护措施能为提高护理水平和促进患者康复提供有益的指导。通过有效预防皮肤压疮和改善皮肤营养不良,可以减轻患者的痛苦,并提高生活质量。

皮肤组织病理制片流程的具体操作和质量控制

皮肤组织病理在皮肤病诊断中具有重要作用,而皮肤组织病理切片质量的好坏直接影响诊断的准确性,进而影响疾病的诊断和治疗。近年来,陆军军医大学第一附属医院皮肤科皮肤病理技术室通过对皮肤组织病理切片的质量管理以提高皮肤组织病理诊断水平,从而减少了皮肤组织病理诊断中的差错,提高了皮肤病的诊断准确率。

银屑病患者血清和皮肤组织中血管性血友病因子的表达水平及临床意义

目的探讨银屑病患者血清和皮肤组织中血管性血友病因子(vWF)的表达水平及临床意义。方法招募2021年1月至2022年12月吕梁市人民医院收治的寻常型银屑病患者30例(银屑病组),另选择30例皮肤组织正常的外科手术患者作为对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定两组受试者血清vWF表达水平;采用免疫组化染色法检测两组皮肤组织vWF表达水平。分析血清vWF表达水平与皮肤组织vWF表达强度及银屑病面积严重指数(PASI)评分的相关性。结果银屑病组血清vWF表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。在皮肤的表皮部位以及真皮部位的炎症细胞和内皮细胞中,银屑病组的vWF表达强度较对照组更高,中、重度表达占比更大,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,银屑病患者血清vWF表达水平与PASI评分呈正相关(r=0.432,P=0.009)。单因素方差分析结果显示,银屑病患者血清vWF表达水平与真皮和表皮中vWF的表达强度无显著关联(P>0.05)。结论银屑病患者血清vWF表达水平升高,与PASI评分呈正相关。

皮肤组织胆固醇与动脉粥样硬化关系的研究进展

心血管疾病(CVD)是世界上疾病负担的主要原因而动脉粥样硬化性心血管疾病(ASCVD)约占全球CVD死亡人数的三分之二[1]。胆固醇代谢紊乱是动脉粥样硬化的重要病理基础。20世纪70年代,尸检发现动脉粥样硬化患者同时存在脂质在皮肤沉积。皮肤组织胆固醇(SkinTc),特别是角质层(SC)胆固醇,被认为是组织胆固醇的替代指标,能在一定程度上反映胆固醇在血管中的蓄积情况。

疏肝通络汤结合理疗对乳腺癌术后患者上肢淋巴水肿及皮肤组织TGF-β1、类糜蛋白酶的影响

目的:探讨疏肝通络汤结合理疗对乳腺癌术后患者上肢淋巴水肿(breast cancer-ralated lymphedema,BCRL)及皮肤组织内转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、类糜蛋白酶的影响。方法:将女性BCRL患者76例依照随机数字表法分为联合组与对照组各38例,对照组予理疗,联合组予疏肝通络汤联合理疗。观察两组患者治疗前后患侧上肢淋巴流量、水分及脂肪含量,患侧前臂、上臂周径,患侧肩关节活动情况,患侧上肢中医症状积分及皮肤组织TGF-β1、类糜蛋白酶水平,以及不良反应发生情况。结果:治疗后联合组患者患侧上肢淋巴流量大于对照组(P<0.05),水分含量小于对照组(P<0.05),两组患者患侧上肢脂肪含量比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后联合组患者患侧前臂、上臂周径均小于对照组(P<0.05),患侧肩关节内收、外展、前屈、后伸角度均大于对照组(P<0.05);治疗后联合组患者烦躁易怒、情绪抑郁及脘腹胀痛、脉涩、舌黯积分均小于对照组(P<0.05)。两组均未见明显不良反应。结论:疏肝通络汤结合理疗在促进BCRL患者患侧上肢淋巴回流,缓解局部水肿及炎性反应,抑制TGF-β1、类糜蛋白酶生成,提高患肢功能,改善中医症状方面效果优于理疗,且安全可靠。

猪不同颜色皮肤组织中MLANA mRNA的表达分析

为了解MLANA mRNA在猪黑、白色皮肤中的表达差异,提取剑白香猪黑、白色皮肤组织的RNA,分别逆转录合成MLANA cDNA,以RPS18基因作为内参,采用实时荧光定量PCR检测MLANA mRNA在皮肤组织中的相对表达量。结果:MLANA mRNA在黑色皮肤中的表达量比白色皮肤高,差异极显著(P<0.01),推测MLANA基因与猪黑色皮肤的形成有关。

miR-196a在剑白香猪不同颜色皮肤组织中的表达及靶基因预测

为探究miR-196a在剑白香猪不同颜色皮肤组织中的表达及其靶基因的富集情况,试验采集剑白香猪的白色和黑色皮肤组织,采用qRT-PCR技术检测2种颜色皮肤组织中miR-196a的表达水平,运用MEGA11软件比对分析miR-196a与其他物种间的保守性,通过在线软件PicTar、TargetScan预测其靶基因,利用DAVID数据库对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果:miR-196a在剑白香猪白色皮肤组织中的表达量极显著高于黑色皮肤组织(P<0.01);GO功能分析表明,生物过程、细胞定位、分子功能分别富集于38、13、27个条目;KEGG通路富集分析表明,miR-196a靶基因主要富集于蛋白质消化吸收、癌症miRNAs、黑色素生成等通路,其中黑色素生成通路包括NRAS、ADCY9、CALM3基因。结论:推测miR-196a与剑白香猪皮肤颜色遗传相关。

银屑病皮肤组织DNA甲基化研究进展

银屑病(Psoriasis,PSO)是一种以角质形成细胞过度增殖为特征的慢性炎症性皮肤病。银屑病的发病与遗传、免疫和环境因素有关。环境可以通过表观遗传修饰与基因组相互作用。DNA甲基化是研究较深入的表观遗传调控机制之一,参与了银屑病的发病机制。鉴于银屑病的病变特征及目前银屑病DNA甲基化的主要研究方向,我们总结了目前银屑病皮肤组织DNA甲基化的相关文献,从皮肤组织全基因组DNA甲基化和已被验证的候选靶基因两个方面进行了综述,这篇综述有助于理解DNA甲基化在银屑病中的重要作用,促进DNA甲基化在银屑病诊断和治疗中的应用。

香猪不同颜色皮肤组织中miR-615的表达分析

为探究miR-615在香猪不同颜色皮肤组织中的表达情况,采集香猪不同颜色的皮肤组织,提取皮肤组织中的RNA反转录合成cDNA,采用qRT-PCR分析不同颜色皮肤组织中miR-615的表达水平。结果:miR-615在香猪白色皮肤组织中的表达量极显著高于黑色皮肤组织(P<0.01)。结论:推测miR-615可抑制黑色素的生成,与香猪白色皮肤的形成有关。

皮肤组织损伤修复的研究进展

皮肤组织的损伤常由机械性、物理性、化学性和生物性等因素引起．机体对形成的损伤进行修补的过程称为组织修复。传统理论上将组织损伤修复过程分为炎症期、肉芽组织形成期和组织塑型期：但随着分子生物学的发展．对组织损伤修复的认识逐步深入．有关组织修复过程目前又被看作是各种修复细胞的增殖、分化、迁移、凋亡和消失的过程。同时．组织修复还是一系列不同类型的修复细胞、结构蛋白和生长因子等形成网络式交互作用的结果。由损伤周围的同种细胞进行结构和功能修复称为再生．若完全恢复伤前组织的结构和功能．称为完全再生：由纤维结缔组织来修复．称为纤维修复或瘢痕修复。

湿润烧伤膏治疗外伤性小面积浅层皮肤组织缺损的临床疗效

目的对比观察湿润烧伤膏治疗外伤性小面积浅层皮肤组织缺损的临床疗效。方法将首都医科大学良乡教学医院2008年12月-2011年12月收治的56例外伤性小面积浅层皮肤组织缺损患者随机分为两组,湿润烧伤膏组35例,采用湿润烧伤膏换药治疗,普通换药组21例,采用西医传统换药疗法治疗,对比观察两组患者的创面愈合时间和创面感染率。结果湿润烧伤膏组患者创面疗效优良率为82.9%,普通换药组患者创面疗效优良率为57.1%,两组对比,P<0.05,差异具有统计学意义;湿润烧伤膏组患者创面平均愈合时间为15.3 d±3.6 d,普通换药组创面平均愈合时间为21.5 d±4.3 d,两组对比,P<0.05,差异具有统计学意义;治疗过程中,湿润烧伤膏组患者创面均无感染,普通换药组中有3例患者创面发生感染,两组对比,P<0.05,差异具有统计学意义。结论湿润烧伤膏治疗外伤性小面积浅层皮肤组织缺损的疗效显著,方法简便,值得临床推广应用。

砷中毒患者皮肤组织中DNA修复基因的表达变化

目的检测DNA修复基因MGMT、XRCC1、hMSH2mRNA在燃煤型砷中毒患者皮肤组织中的表达变化,探讨其表达与砷性皮肤癌发生发展及临床病理特征之间的关系。方法应用原位杂交技术检测了61例砷中毒患者皮肤组织中MGMT、XRCC1、hMSH2mRNA的表达变化。结果随着砷中毒患者皮肤病变的发展,MGMT、XRCC1、hMSH2mRNA的表达逐渐降低,癌变组MGMT和XRCC1mRNA阳性表达率与一般病变组比较差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01)。结论MGMT、XRCC1、hMSH2作为DNA损伤修复基因,在砷性皮肤病变过程中起重要作用;砷可能通过抑制砷中毒患者皮肤组织中MGMT、XRCC1等DNA修复基因的表达,影响基因组DNA稳定性和DNA修复功能而导致对皮肤的致癌作用。

利用胶原构建皮肤组织工程支架的研究

目的 利用胶原构建皮肤组织工程支架。 方法 用 Na2 S、弹性蛋白酶预处理胎牛皮得到胶原纤维 ;经蛋白酶 M降解胶原纤维后 ,0 .5 mol/ L 醋酸溶液溶解得到酸溶性胶原 ;再用蛋白酶 N处理上述酸溶性胶原 ,最终得到生物相容性良好的胶原溶液 ;将胶原溶液构建皮肤组织工程支架。通过 SDS- PAGE试验 ,分析酸溶性胶原分子量及基本结构 ;用皮肤组织工程支架材料包覆大鼠创面 ,观察创面愈合情况 ,研究支架材料对大鼠创伤愈合的影响 ;在支架材料上种植成纤维细胞 ,观察细胞扩增情况 ,以及支架材料对细胞移植影响。 结果 通过特异性蛋白酶 M处理得到的酸溶性胶原 ,显示典型的 型胶原 SDS- PAGE图谱 ;构建的皮肤组织工程支架呈多孔海绵状 ,孔径为 5 0～ 2 0 0 μm;在支架材料上种植成纤维细胞扩增情况良好 ;用于修复大鼠创面 ,具有促进创面愈合作用。 结论 酸溶性胶原经蛋白酶 N处理后 ,生物相容性良好 ,适合于皮肤组织工程支架的构建 ,并具有良好生物活性。

不同毛色山羊皮肤组织Agouti基因mRNA及其编码ASIP差异表达研究

旨在探讨Agouti基因调控山羊毛色机制,采用SYBR Green real-time PCR和蛋白免疫印迹方法分别检测了不同毛色山羊皮肤组织中Agouti基因mRNA及其所编码ASIP蛋白的差异表达。结果表明,Agouti基因mRNA在白色、黑色、棕色山羊皮肤组织中的表达量依次为白色>黑色>棕色;mRNA表达量在棕色和白色、棕色和黑色山羊皮肤之间均存在显著差异(P<0.05),在白色和黑色山羊皮肤之间差异不显著(P>0.05)。ASIP在白色、黑色、棕色山羊皮肤组织中的表达量:白色>棕色>黑色;ASIP表达量在白色和黑色山羊皮肤组织之间存在显著差异(P<0.05),但在白色和棕色、棕色和黑色山羊皮肤组织之间差异均不显著(P>0.05)。研究结果提示,Agouti基因在不同毛色山羊皮肤组织中可能存在不同调控机制。

皮肤组织热水烫伤传热分析

目的研究生物组织热水烫伤过程的传热规律及影响因素并由此进行烫伤程度预测。方法基于Pennes生物传热方程 ,建立热水洒落皮肤组织所致烫伤过程的一般模型 ,研究生物组织内部的温度变化规律 ,并对生物组织烫伤程度进行预测。结果通过数值计算 ,得到生物组织内部的温度分布 ,以及生物组织烫伤发生的开始时间。研究表明 ,皮肤及内部组织初始温度分布、热水与皮肤表面的对流换热系数及热水的温度对于烫伤的发生有显著影响。结论该模型可用于生物组织热水烫伤过程传热分析和烫伤预测 。

藏绵羊不同毛色皮肤组织miRNA表达谱及靶基因分析

【目的】藏绵羊又称藏系绵羊,是中国三大粗毛羊品种之一,主要分布在西藏及其毗邻的高寒牧区,如青海、甘肃、四川、云南等地。藏绵羊由于其被毛纤维粗长,毛质细腻且保暖性好,是制造藏式地毯的上好原料。而毛色作为一种重要的经济性状,同时制约羊毛的经济价值。然而,目前对于绵羊毛色的分子调控机制尚不明确,以藏绵羊为研究对象,对其不同颜色皮肤组织(黑色和白色)进行转录组测序,旨在探讨miRNA在藏绵羊不同毛色皮肤组织转录后水平中发挥的作用及其可能参与的调控通路。【方法】选取2只具有黑白花毛色的健康藏绵羊,减去体侧被毛使皮肤完全裸露并用75%酒精消毒处理,屠宰后快速切取皮肤组织并保存在组织样品保存液中防止RNA降解,提取RNA后通过miRNA测序和生物信息学分析,获得藏绵羊不同毛色(黑色和白色)皮肤组织miRNA表达谱,筛选组织差异表达miRNA并预测相关靶基因。通过靶基因分析,获得与调控藏绵羊毛色性状可能相关的信号通路。【结果】黑色和白色皮肤组织共获得85.76兆条原始读长,经过滤后得到85.08兆条clean reads;共鉴定出334个已知的miRNA和59个新的miRNA;从中获得23个差异表达miRNA,其中14个差异表达miRNA在白色皮肤组织中表达显著上调,9个表达下调。miR-2284b和miR-744仅在藏绵羊白色皮肤中表达,而miR-23b、miR-411a-5p、miR-30c、miR-423-3p和miR-324-5p则仅在藏绵羊黑色皮肤中表达,但表达量相对较低。表达量最高的miRNA为miR-10a,而倍数差异最大的为miR-23b。其中,miR-10a可参与调节多种信号通路,其作用涉及增殖、分化、凋亡、细胞粘附等各个方面,目前并无调控绵羊毛色方面的相关报道,但其功能及作用机制的研究仍在不断扩展。miR-23b则与Wnt、Notch等信号通路有关,这些信号通路中的部分基因也和黑色素的生成有密切关系。结合倍数差异和miRNA表达量分析,miR-411a-5p、miR103和miR-200b可能也和毛色调控密切相关。本研究共预测出981个靶基因可能参与毛色调控,多数基因和WNT信号通路、MAPK通路、EDNRB信号通路及黑素原生成通路(melanogenesis pathway)相关,其中黑素原生成通路显示和WNT信号通路、KIT信号通路及EDNRB信号通路相互关联。黑素原生成通路显示藏绵羊不同毛色可能最终通过MITF基因调控下游的TYR基因(酪氨酸酶基因)影响黑色素的合成。同时,筛选7个差异表达miRNA进行定量验证,结果表明,5个miRNA在黑色皮肤组织中上调表达,2个miRNA在白色组织中上调表达,定量结果与测序结果一致。【结论】获得了藏绵羊皮肤组织miRNA表达谱,并通过生物信息学分析得到可能和调控毛色性状相关的miRNA和信号通路。这些结果表明,藏绵羊毛色性状可能受到多种miRNA的调控并涉及多个信号通路,这有助于更进一步了解毛色转录后水平的调控过程,并对进一步的功能验证奠定基础。

基于转录组数据的蒙古牛皮肤组织抗寒相关信号通路及候选基因的筛选

本研究旨在通过对冬夏两季蒙古牛皮肤组织进行转录组测序和生物信息学分析,找到与蒙古牛抗寒性状相关的信号通路及候选基因。用Ion ProtonTMSequencer分别对冬季和夏季成年蒙古牛的皮肤组织进行转录组测序,随后对转录组数据进行处理、与参考基因组比对、差异表达分析、GO和KEGG富集分析以及候选基因筛选,并用Real-time PCR方法对转录组数据进行可靠性检测。结果显示,冬季组和夏季组分别得到86 954 060和69 837 009条reads;冬季组与参考基因组的唯一比对率为73.21%,夏季组为75.55%;冬夏两组共有182个差异表达基因(DEGs),与夏季组相比,其中117个在冬季组中上调,65个在冬季组中下调;Real-time PCR分析显示,转录组测序结果可靠;GO分析结果显示,细胞组分、分子功能、生物学过程分别富集到21、39和224个term;KEGG分析结果显示,差异表达基因(DEGs)显著地富集在脂类代谢、凝血、酪氨酸代谢、类固醇合成和视黄醇代谢相关通路上;共筛选出8个候选基因。综上表明,脂类代谢、凝血、黑色素合成相关通路和基因,以及与毛发发生相关的基因可能在蒙古牛抗寒过程中发挥重要作用。