人皮肤角质形成细胞的胰蛋白酶消化分离及无血清培养

目的 探索用DMEM SF培养基对经胰蛋白酶两步消化分离的人角质形成细胞进行培养的方法和条件。方法 取临床整形外科手术后剩余皮肤 ,用 0 2 5 %的胰蛋白酶经冷和温两步消化分离后 ,用DMEM SF完全培养基于 5 %CO2 、37℃培养 ,绘制生长曲线 ,并用单克隆抗角蛋白抗体和鼠 IgG免疫组化试剂盒进行细胞鉴定。结果 用胰蛋白酶两步消化分离的角质形成细胞在DMEM SF培养基中可正常生长 2周以上 ,生长曲线显示细胞在第 4天进入对数生长期 ,第 10天进入停滞期。鉴定显示角质形成细胞占 95 %以上。来源于 3个不同个体的皮肤角质形成细胞经等量混合后培养与单独培养相比 ,细胞生长无统计学差异。结论 用胰蛋白酶对人皮肤进行冷和温两步消化分离的角质形成细胞 ,在DMEM SF完全培养基中生长状况良好 ,其他细胞污染少 ,实验成本低廉 ,操作简单。

黄芪多糖对中波紫外线辐射皮肤角质形成细胞损伤的影响

目的观察黄芪多糖对中波紫外线(UVB)辐射损伤皮肤角质形成细胞(Ha Ca T细胞)的影响,初步探讨其作用机制。方法采用UVB辐射Ha Ca T细胞进行造模。分为空白对照组、模型组、阳性对照组及黄芪多糖低、中、高剂量组,各药物组给予相应药物干预。MTT法测定细胞活力;生化比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量。结果与空白对照组比较,模型组SOD、CAT、GSH-Px含量降低,MDA、TNF-α、IL-6含量升高(P<0.05);与模型组比较,各药物组SOD、GSH-Px、CAT含量升高,MDA、TNF-α、IL-6含量降低(P<0.01)。结论黄芪多糖可在一定程度上减轻UVB对Ha Ca T细胞氧化应激性损伤。

藏雪莲多糖通过P38丝裂原激活蛋白激酶通路减轻中波紫外线辐射后皮肤角质形成细胞凋亡引起炎性损伤的研究

目的探讨藏雪莲(SSB)多糖是否通过P38丝裂原激活蛋白激酶(P38MAPK)通路减轻中波紫外线(UVB)辐射后皮肤角质形成细胞(Ha Ca T细胞)凋亡引起炎性损伤。方法 2014年10月—2015年3月,提取SSB多糖,体外培养Ha Ca T细胞,将Ha Ca T细胞分为低剂量辐射组(30 m J/cm2,辐射1 h,A组)和高剂量辐射组(60 m J/cm2,辐射1 h,B组);将A组和B组又分别分为对照组(1组)、辐射组(UVB,2组)、低剂量SSB多糖组(UVB+SSB 10 mg/ml,3组)和高剂量SSB多糖组(UVB+SSB 40 mg/ml,4组)。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测并比较白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、P38MAPK、P53、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)水平。结果 A2组IL-6、TNF-α、P38MAPK、P53、Bax、Caspase-3水平高于A1组,Bcl-2水平低于A1组(P<0.05);A3组IL-6、TNF-α、P38MAPK、Caspase-3水平高于A1组(P<0.05);A4组TNF-α、Bcl-2水平高于A1组(P<0.05);A3组、A4组IL-6、TNF-α、P38MAPK、P53、Bax、Caspase-3水平低于A2组,Bcl-2水平高于A2组(P<0.05);A4组IL-6、TNF-α、Caspase-3水平低于A3组,Bcl-2水平高于A3组(P<0.05)。B2组IL-6、TNF-α、P38MAPK、P53、Bax、Caspase-3水平高于B1组,Bcl-2水平低于B1组(P<0.05);B3组IL-6、TNF-α水平高于B1组,Bcl-2水平低于B1组(P<0.05);B4组IL-6、Bcl-2水平高于B1组,TNF-α、Caspase-3水平低于B1组(P<0.05);B3组、B4组IL-6、TNF-α、P38MAPK、P53、Bax、Caspase-3水平低于B2组,Bcl-2水平高于B2组(P<0.05);B4组IL-6、TNF-α、Caspase-3水平低于B3组,Bcl-2水平高于B3组(P<0.05)。结论 SSB多糖通过P38MAPK通路减少UVB辐射后Ha Ca T细胞凋亡,进而减轻Ha Ca T细胞的炎性损伤。

机械损伤对人皮肤角质形成细胞氧化应激和前列腺素E2分泌的影响

目的探讨机械损伤对人皮肤角质形成细胞前列腺素E2(PGE2)分泌的影响及其可能的机制。方法将体外培养的人皮肤角质形成细胞(HaCaT)分为损伤组、NADPH氧化酶(NOX)抑制剂氯化二亚苯基碘鎓(DPI)预处理组和抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理组,三组细胞经划痕法建立体外机械损伤细胞模型,以未建模的HaCaT细胞作为对照组。于建模后不同时点收集损伤组、DPI预处理组和对照组的细胞及各组细胞的培养上清液,分别采用荧光探针技术和化学发光法测定细胞内活性氧(ROS)的生成和NOX活性,以酶联免疫吸附试验检测各组细胞培养上清液中前列腺素E2(PGE2)的质量浓度。结果建模后各时点,损伤组和DPI预处理组细胞内ROS生成和NOX活性均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);DPI预处理组建模后各时点细胞内ROS生成和NOX活性均显著低于损伤组(P<0.05或P<0.01)。各组细胞培养上清液中PGE2质量浓度的检测结果显示:建模后各时点,损伤组、DPI预处理组和NAC预处理组均显著高于对照组(P<0.01),DPI预处理组和NAC预处理组均显著低于损伤组(P<0.01)。结论机械损伤后人皮肤角质形成细胞的PGE2分泌量增加,其机制可能与细胞内ROS生成增加和NOX活性升高所介导的氧化应激有关。

rhFGF-7对体外培养人皮肤角质形成细胞增殖的影响

目的建立一种人皮肤角质形成细胞分离和培养的方法,研究重组人成纤维细胞生长因子7(rhFGF-7)对人皮肤角质形成细胞增殖的影响。方法取环切术后包皮,分别用胰酶和dispaseⅡ酶消化法分离表皮,用无血清培养基进行无滋养层培养,采用免疫细胞化学方法对培养的细胞进行鉴定,并用细胞计数法测定细胞的生长曲线,MTT法检测rhFGF-7对人皮肤角质形成细胞增殖的影响。结果与胰酶消化分离表皮相比,dispaseⅡ酶消化获得的表皮,其细胞贴壁率高,增殖速度快,且成纤维细胞污染少;荧光显微镜下细胞胞浆呈黄绿色,为角蛋白阳性染色;培养的角质形成细胞可持续增殖至第8代,10ng/mL的rhFGF-7促角质形成细胞增殖作用最显著。结论所建立的人皮肤角质形成细胞分离和培养方法,可获得高纯度的人皮肤角质形成细胞,rhFGF-7可促进体外培养人皮肤角质形成细胞的增殖。

甘草酸对UVB诱导人皮肤角质形成细胞凋亡的影响

目的:研究甘草酸对UVB(中波紫外线)诱导人皮肤角质形成细胞(Ha Ca T细胞)凋亡的影响。方法:以不同浓度的甘草酸作用于Ha Ca T细胞,噻唑蓝比色(MTT)法筛选药物的有效安全浓度;用总剂量为30 m J/cm-2的UVB照射Ha Ca T细胞,制备光老化模型,MTT法检测细胞增殖率;流式细胞仪检测各组细胞总凋亡率;实时定量PCR(RT-PCR)及蛋白免疫印迹(Western Blot)法分别检测Caspase-3、Caspase-9 m RNA和蛋白表达水平。结果:1×10-5、1×10-6、1×10-7mol/L甘草酸为最佳有效安全浓度。与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低(P<0.01),细胞总凋亡率显著显著升高(P<0.01),Caspase-3、Caspase-9 m RNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与UVB组比较,1×10-5、1×10-6、1×10-7mol/L甘草酸+UVB组细胞增殖率显著升高(P<0.01),细胞总凋亡率显著显著降低(P<0.05,P<0.01),Caspase-3、Caspase-9 m RNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:甘草酸能抑制UVB诱导的Ha Ca T细胞凋亡,其机制与其降低细胞总凋亡率,抑制Caspase-3、Caspase-9 m RNA和蛋白的表达有关。

皮肤角质形成细胞肿瘤中PCNA的表达及其与肿瘤转移的关系

目的 :探讨皮肤角质形成细胞肿瘤中增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达及其与肿瘤转移的关系。方法 :用 ABC免疫组化技术观察48例皮肤鳞状细胞癌 (SCC)、41例基底细胞癌 (BCC)及 1 5例角化棘皮瘤 (KA)手术切除标本。结果 :PCNA在 SCC中的表达明显高于 BCC及 KA(P<0 .0 1 ) ,但其在 BCC与 KA中的表达差异无显著性 (P>0 .0 5)。 PCNA在低分化 SCC中的表达明显高于高分化者 (P<0 .0 1 ) ,但其表达在淋巴结转移组与无转移组之间的差异无显著性 (P>0 .0 5)。结论 :PCNA在 SCC、BCC及 KA中的表达差异有非常显著性 ;其表达与 SCC的分化程度有关 ,但与淋巴结转移似无关。

体外培养对人皮肤角质形成细胞蛋白质组的影响

目的:探讨体外长期培养对人皮肤角质形成细胞蛋白质组的影响。方法:制备原代和第7代体外培养的人皮肤角质形成细胞的总蛋白样品进行双向凝胶电泳。采用PDQuest图像分析软件对获得的双向凝胶电泳图谱进行分析。串联飞行时间质谱鉴定选取的差异表达蛋白质点。半定量RT-PCR对差异表达蛋白质的mRNA水平进行确证。结果:获得了蛋白质分离效果较好的双向凝胶电泳图谱,串联飞行时间质谱鉴定选取的2个在第7代角质形成细胞中表达显著下调的蛋白质分别为PA-FABP(psoriasis-associated fatty acidbinding protein5)和Galectin-7,半定量RT-PCR确证第7代角质形成细胞中PA-FABP和Galectin-7的基因转录水平较原代角质形成细胞相应的基因转录水平显著降低。结论:体外长期培养人皮肤角质形成细胞可能影响一些与细胞的脂肪酸代谢及细胞凋亡相关蛋白的表达。

皮肤角质形成细胞中TRPV1受体激活后的蛋白质组差异分析

目的研究皮肤角质形成细胞中辣椒素受体TRPV1激活后细胞中蛋白质组学的变化,并鉴定差异蛋白质。方法皮肤角质形成细胞株HaCaT细胞经辣椒素(CAP)刺激24 h后,提取蛋白样品,采用双向凝胶电泳技术分离HaCaT细胞总蛋白,用PDQuest软件分析对照组和CAP刺激组蛋白组图谱的表达差异点,再运用串联飞行时间质谱(MALDl—TOF.MS)鉴定差异蛋白。结果 CAP刺激HaCaT细胞后,磷酸甘油醛异构酶、烯醇化酶、6-磷酸葡萄糖酸内酯酶和组织蛋白酶D蛋白表达水平增高,角蛋白14和60S酸性核糖体蛋白P2表达量降低,这些蛋白可能在TRPV1激活后影响细胞功能的过程中有重要作用。结论利用蛋白质组学技术,研究皮肤角质形成细胞株HaCaT细胞中TRPV1受体激活后蛋白表达差异,为研究TRPV1受体的作用机制,以及为研发针对性药物,提供新的线索和方向。

皮肤角质形成细胞的无血清培养方法

目的探索建立少量成年自体皮肤角质形成细胞体外无血清培养体系,为自体组织工程皮肤的构建与移植奠定物质基础。方法:无菌条件下,取2cm×2cm 兔耳皮肤组织块,Dispase 消化,分离真表皮,表皮以胰蛋白酶+EDTA 消化获得角质形成细胞,以含钙和不含钙的角质形成细胞培养液(K-SFM),按不同细胞密度接种于24孔板,观察细胞生长状况;免疫组化鉴定,MTT 法测定不同血清浓度对角质形成细胞增殖分化的影响。结果:在适当的 Ca^(2+)浓度下,少量自体角质形成细胞能够在无血清培养液 k-SFM 中培养扩增,最多可传4～6代。添加血清后可明显加速细胞分化。结论:无血清培养体系适用于少量成年自体角质形成细胞的体外连续培养扩增,培养的细胞可用于自体组织工程皮肤的构建。

Ⅳ型胶原与层粘蛋白在皮肤角质形成细胞肿瘤中的表达

目的 :探讨皮肤角质形成细胞肿瘤中 型胶原和层粘蛋白的表达及其与肿瘤转移的关系。方法 :用 ABC免疫组化技术观察 48例皮肤鳞状细胞癌、40例基底细胞癌及 1 5例角化棘皮瘤手术切除标本。结果 : 型胶原和层粘蛋白在高分化或无淋巴结转移的鳞状细胞癌中的表达明显高于低分化或有淋巴结转移者 (P<0 .0 1 )。基底细胞癌中 型胶原和层粘蛋白的表达类似于鳞状细胞癌 (P>0 .0 5) ,但其表达明显高于有转移的鳞状细胞癌 (P<0 .0 1 )。角化棘皮瘤中 型胶原和层粘蛋白的表达一般呈连续性 ,未见明显缺乏。结论 :皮肤癌的癌分化、淋巴结转移与

胺丁羟磷酸盐抑制皮肤角质形成细胞的增殖作用

目的 探讨胺丁羟磷酸盐(ALD)对皮肤角质形成细胞(KCs)增殖的影响及中间产物是否拮抗其影响。方法 一定浓度的ALD、甲羟戊酸(MVA)、胆固醇(CH)、法尼基焦磷酸(FPP)、香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)单独或联合处理KCs,细胞活力测定实验(MTS)法分析各处理组对KCs细胞增殖的影响;利用流式细胞术检测各加药组对细胞周期的影响;Western blot分析各加药组对细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)、Cyclin E和细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制剂(P21)及磷酸化的蛋白激酶B(pAKT)和磷酸化的胞外信号调节激酶1/2(pERK1/2)表达量的影响。结果 MTS实验表明ALD对KCs增殖有显著抑制作用,而上游产物MVA与其有协同效应;下游产物中仅CH有部分补救作用。流式细胞术检测结果显示KCs被ALD阻滞在细胞分裂间期G1期,而仅CH可减弱ALD导致的G1期阻滞。Western blot结果表明ALD显著下调Cyclin B1,同时上调Cyclin E和P21的表达。此外,ALD能促进磷脂酰基酶3-激酶-蛋白激酶B(P13K-AKT)信号通路,抑制丝裂原激活蛋白激酶-胞外信号调节激酶(MAPKS-ERK1/2)信号通路的激活。结论 ALD显著抑制原代KCs的增殖,CH对这种抑制有部分的补救作用。

玉屏风多糖组分对皮肤角质形成细胞的作用研究

目的研究中药方剂玉屏风的多糖组分在体外对角质形成细胞的免疫调节作用。方法利用Real-time PCR法检测玉屏风多糖组分对激活的皮肤角质形成细胞中各炎症因子表达的调控作用;分别用Real-time PCR法和Elisa法对聚角蛋白微丝蛋白(Filaggrin)在mRNA和蛋白水平的表达进行检测;用Western bolt法检测多糖组分对NF-κB信号通路的调节作用。结果玉屏风多糖组分明显抑制激活的皮肤角质形成细胞分泌炎症因子,促进Filaggrin的表达,并对NF-κB信号通路有明显的抑制作用,该信号通路对炎症和免疫细胞的活化有重要作用。结论玉屏风多糖组分在体外对皮肤角质形成细胞有免疫调节作用,能够减缓皮肤局部炎症的发展,为玉屏风方剂的进一步开发应用奠定理论基础。

法尼基转移酶抑制剂和香叶基香叶基转移酶抑制剂对皮肤角质形成细胞增殖的抑制作用

目的探讨法尼基转移酶抑制剂(FTI)和香叶基香叶基转移酶抑制剂(GGTI)对皮肤角质形成细胞(KCs)增殖的影响。方法使用不同浓度的FTI、GGTI对KCs进行处理,细胞活力测定实验(MTS)法分析KCs增殖受各处理组的影响;利用流式细胞术检测各加药组细胞周期受一定浓度FTI、GGTI的影响;Western blot分析各加药组细胞周期蛋白CyclinB1、CyclinE和P21及pAKT和pERK1/2表达量受一定浓度FTI、GGTI的影响。结果MTS显示FTI、GGTI对KCs增殖有抑制作用,并呈浓度依赖性,FTI(5μmol/L)、GGTI(5μmol/L)时KCs细胞活力最小,抑制率分别为14.7%、24.5%。流式周期结果表示FTI、GGTI阻滞KCs在G1、G2、S各期不明显。Western blot结果表明FTI、GGTI均能够下调CyclinB1,并且可以上调P21和CyclinE的表达。同时,FTI、GGTI能促进P13K-AKT信号通路的激活,抑制MAPKS-ERK1/2信号通路的激活。结论FTI、GGTI对原代KCs的增殖有抑制作用。

PEI-Fe_3O_4纳米颗粒载siRNA向人皮肤角质形成细胞系HaCaT的递送

人皮肤角质形成细胞（keratinocytes）是人皮肤表皮层的主要组成部分,在皮肤表皮的稳态维系和创面修复中起关键性作用。目前,自体角质形成细胞的体外培养与移植技术已应用于临床。

皮肤镜和反射式共聚焦显微镜在角质形成细胞皮肤肿瘤中的应用

角质形成细胞皮肤肿瘤(KSC)是一类发病率逐年上升的肿瘤,与年紫外线辐射量直接相关,根据不同阶段可以分为光线性角化病(actinic keratosis, AK)、鲍温病(Bowen′s disease, BD)和侵袭性鳞状细胞癌(invasive squamous cell carcinoma, SCC)。KSC的诊断主要通过组织病理学确诊,但早期筛查以及后期随访,无创诊断显得尤为重要。皮肤镜(dermoscopy)和反射式共聚焦显微镜(reflectance confocal microscopy, RCM)属于在体观测皮肤表面以及表皮以下细微结构的无创诊断技术,在皮肤疾病诊断中具有极高的应用价值。本文主要总结并探讨KSC在皮肤镜和RCM下的表现特征以及皮肤镜和RCM在KSC的诊断、筛查和随访中的应用。

甘草苷对中波紫外线诱导人皮肤角质形成细胞凋亡的影响

目的：研究甘草苷对中波紫外线（UVB）诱导人皮肤角质形成细胞（Ha Ca T）凋亡的影响。方法：以不同浓度的甘草苷作用于Ha Ca T细胞,噻唑蓝（MTT）比色法筛选甘草苷的有效安全浓度;用30 m J·cm-2的UVB作用于Ha Ca T细胞,建立光老化模型,MTT比色法检测光老化Ha Ca T细胞增殖率;流式细胞术检测各组细胞中活性氧自由基（ROS）含量和总凋亡率;实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测光老化Ha Ca T细胞中半胱氨酸天冬氨酸-3（Caspase-3）,半胱氨酸天冬氨酸-9（Caspase-9）mRNA表达水平;蛋白免疫印记法（Western blot）检测光老化Ha Ca T细胞中B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量。结果：筛选出甘草苷的最佳有效安全浓度为1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1。与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低（P〈0.01）,细胞中ROS含量和总凋亡率显著升高（P〈0.01）,Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著升高（P〈0.01）;Bcl-2蛋白表达量显著降低（P〈0.01）,Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著升高（P〈0.01）。与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草苷＋UVB组细胞增殖率显著升高（P〈0.01）;细胞中ROS含量和总凋亡率显著降低（P〈0.05,P〈0.01）,Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著降低（P〈0.05,P〈0.01）;Bcl-2蛋白表达量显著升高（P〈0.05,P〈0.01）,Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论：甘草苷能通过促进抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达,减少促凋亡相关细胞因子Caspase-3,Caspase-9 mRNA和蛋白的表达,从而抑制UVB诱导的Ha Ca T细胞凋亡。

N-乙酰氨基葡萄糖对皮肤角质形成细胞透明质酸合成的影响

透明质酸是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖（NAG）构成的线性多糖，是细胞外基质的主要成分之一。透明质酸通过和其他基质分子相互作用，维持细胞外基质的稳定性和弹性，当透明质酸的含量降低时，皮肤皱纹亦随之形成，弹性下降 。皮肤中的透明质酸主要由皮肤角质形成细胞和成纤维细胞产生。我们研究了外源性NAG对成人皮肤角质形成细胞human epidermal keratinocytes（adult），HEKa]透明质酸合成的作用，探讨其作用的分子机制和进一步应用的可能性。

砷对人皮肤角质形成细胞抗氧化能力影响

目的研究亚砷酸钠(NaAsO2)对人皮肤角质形成细胞(HaCaT)抗氧化能力的影响。方法用流式细胞仪检测细胞内二氯荧光素(DCF)的荧光强度;用改良硫代巴比妥酸荧光法测定细胞内丙二醛(MDA)含量;用Nitrite-kit法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性;用紫外速率直接法测定过氧化氢酶(CAT)的活性。结果各实验组(2.5,5,10和20μmol/LNaAsO2)的DCF荧光强度均显著增高(P<0.05),分别是对照组的1.3,1.6,1.7和1.8倍;各实验组的MDA含量显著增高(P<0.05),分别是对照组的1.1,1.4,1.5和2.2倍;10和20μmol/LNaAsO2组SOD活性显著下降,分别为对照组的78%和61%;10和20μmol/LNaAsO2组SIOD和CAT活性显著下降,分别为对照组的50%和34%。结论砷可以引起人皮肤细胞的氧化损伤,降低抗氧化能力。

慢性砷暴露对人皮肤角质形成细胞药物转运相关蛋白mRNA表达和砷代谢的影响

目的探讨慢性砷暴露对人皮肤角质形成细胞(human keratinocytes,HaCaT)药物转运蛋白mRNA表达和砷代谢的影响。方法将HaCaT细胞随机分为慢性对照(不予以砷处理)组和慢性砷暴露(100 nmol/L亚砷酸钠染毒28周)组,培养于含10%胎牛血清和1%双抗的培养基中,收集处于对数生长期的细胞,采用实时荧光定量(real-time quantitative PCR)法检测细胞多药耐药相关蛋白mRNA的表达水平。将处于对数生长期的HaCaT对照细胞和慢性砷暴露细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、2.5、5、10、20、30、40、50、60、80、100、150μmol/L亚砷酸钠的培养基中孵育24 h,采用MTS法检测细胞活性。将慢性砷暴露组细胞和对照细胞予以10μmol/L亚砷酸钠处理24 h,采用氢化物发生-原子吸收分光光度法检测细胞砷蓄积和砷排放量。结果与对照细胞相比,慢性砷暴露HaCaT细胞多药耐药相关蛋白ABCC2和ABCC4 mRNA表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);而ABCC1、ABCC3、ABCC5、ABCG1、ABCG2 mRNA的表达水平均无显著变化。与对照细胞相比,慢性砷暴露HaCaT经各浓度急性砷处理后细胞存活率均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照细胞相比,10μmol/L亚砷酸钠染毒24 h后,慢性砷暴露细胞内的砷蓄积量降低,而砷排放量升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论慢性砷暴露的HaCaT细胞药物转运蛋白mRNA的表达升高,砷排出能力增强,对砷毒性产生耐受性。