基于PLS-DA的盘龙七及其易混品大盘龙七差异性成分分析

目的:确定盘龙七及其同名异物药材大盘龙七的差异性成分并建立其含量测定方法。方法:采用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)结合超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)分析盘龙七和大盘龙七差异性成分,并建立差异性成分定性、定量分析方法。结果:PLS-DA结果显示以t检验(P<0.05)和变量重要性投影(VIP)值(VIP>1.0)为标准,筛选出盘龙七和大盘龙七差异性成分共296个。对排名靠前的差异性成分进行表征分析,进一步筛选出符合碎片裂解规律及文献记载的差异性成分共8个,其中绿原酸、没食子酸、岩白菜素3个成分含量差异最显著。结论:该方法能有效分析盘龙七和大盘龙七的差异性,为盘龙七及大盘龙七的质量评价及定性、定量分析提供参考。

盘龙七片联合塞来昔布胶囊对腰椎间盘突出症患者的影响

目的:探讨盘龙七片联合塞来昔布胶囊对腰椎间盘突出症(LDH)患者的影响。方法:选取2023年3月—2024年2月武威市第二人民医院收治的100例LDH患者。根据随机数表法将其分为常规组和试验组,各50例。两组均予常规针灸、理疗等对症治疗,常规组在此基础上给予塞来昔布胶囊,试验组在常规组基础上给予盘龙七片。比较两组治疗后临床疗效,治疗前后腰痛程度、腰椎功能、炎症因子、氧化应激指标。结果:试验组总有效率(94.00%)高于常规组(80.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组视觉模拟评分法(VAS)评分、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分均降低,试验组VAS评分、ODI评分均低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均降低,试验组IL-1β、IL-6和TNF-α水平均低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组超氧化物歧化酶(SOD)水平升高,丙二醛(MDA)水平降低,试验组SOD水平高于常规组,MDA水平低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:盘龙七片联合塞来昔布胶囊治疗LDH效果确切,能抑制炎症与氧化应激反应,减轻疼痛,改善腰椎功能。

盘龙七片配合腰椎小关节松解治疗风湿痹阻型腰椎管狭窄症

目的：探讨盘龙七片配合腰椎小关节松解术治疗风湿痹阻型腰椎管狭窄症的临床疗效.方法：自2012年2月至2013年2月,对120例风湿痹阻型腰椎管狭窄症患者的临床资料进行回顾性研究.按治疗方法不同将120例腰椎管狭窄症患者分为盘龙七片组和对照组,各60例.盘龙七片组男26例,女34例;年龄46 ～65岁,平均（60.40±3.36）岁;病程2～15年,平均7.6年,采用口服盘龙七片配合腰椎小关节松解治疗.对照组男24例,女36例;年龄48～63岁,平均（61.20±2.47）岁;病程3～14年,平均6.9年,单独腰椎小关节松解治疗.分别于治疗前、治疗后4周、3个月随访时采用JOA评分（15分法）和Oswestry下腰痛功能障碍指数（ODI）对患者的临床疗效进行评价.结果：所有患者获得随访,时间4～7个月,平均5.6个月.术后3个月时,对照组有7例症状复发,盘龙七片组仅1例复发.治疗后4周及3个月时,盘龙七片组ODI、JOA评分明显优于对照组（P＜0.05）.结论：对于风湿痹阻型腰椎管狭窄症患者,采用腰椎小关节松解配合口服盘龙七片法,辅以腰背肌功能锻炼,可缓解腰部及下肢疼痛症状,改善下腰椎功能状态,是保守治疗此类疾病的良好治疗手段.

HPLC法测定盘龙七中岩白菜素的含量

[目的]建立盘龙七中岩白菜素含量的测定方法。[方法]采用高效液相色谱法,以Kromasil-C18为色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,乙腈-0.2%磷酸溶液（V/V,10∶90）为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为275 nm,柱温为35℃,测定盘龙七中岩白菜素的含量。[结果]岩白菜素在0.248~1.240μg/ml范围内呈良好的线性关系（r=0.997 9）,平均回收率为100.95%,RSD为2.47%（n=6）。[结论]该方法处理简单,重复性好,结果准确,可用于盘龙七中岩白菜素的含量测定。

盘龙七中岩白菜素的超声提取工艺研究

采用超声辅助乙醇提取盘龙七中的岩白菜素,考察了提取溶剂浓度、提取时间、提取次数和料液比对岩白菜素提取率的影响。结果表明,超声提取岩白菜素的最佳工艺为:50%乙醇,提取3次,提取时间30 min,料液比为1∶8 g/m L。在此条件下,岩白菜素提取率为2.64%(RSD=1.0%,n=5)。

盘龙七片联合塞来昔布胶囊治疗早期膝骨关节炎的有效性及安全性

目的评价塞来昔布胶囊、盘龙七片及二者联合用药治疗早期膝关节骨关节炎的有效性及安全性。方法选取2017年8月—2018年9月西安交通大学第二附属医院收治的120例早期膝关节骨关节炎患者,随机分为3组:塞来昔布组给予口服塞来昔布胶囊,盘龙七片组给予口服盘龙七片,联合用药组给予口服塞来昔布胶囊+盘龙七片,3组均治疗8周。记录并比较3组患者治疗前后VAS疼痛评分、WOMAC疼痛评分、关节僵硬积分、日常活动困难度积分及临床疗效、不良反应发生情况。结果治疗4周和8周后,3组的VAS评分、WOMAC各项评分及总分均较治疗前明显下降(P均<0.05),且联合用药组的VAS评分和WOMAC评分中关节僵硬评分、活动困难评分及总分均明显低于塞来昔布组和盘龙七片组(P均<0.05),塞来昔布组的VAS评分和WOMAC各项评分及总分均明显低于盘龙七片组(P均<0.05);治疗8周后,塞来昔布组的WOMAC总分明显低于盘龙七片组(P<0.05)。治疗4周和8周后,联合用药组的治疗总有效率明显高于塞来昔布组和盘龙七片组(P均<0.05)。治疗8周后,3组不良反应的发生率差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论口服盘龙七片可有效缓解早期膝关节骨关节炎患者的关节疼痛和僵硬,改善关节功能,盘龙七片联合塞来昔布胶囊相对于单一用药效果更明显,且不增加不良反应的发生。

盘龙七片治疗急慢性软组织损伤的近期疗效分析

目的:观察盘龙七片治疗急、慢性软组织损伤的近期疗效。方法:将700例急、慢性软组织损伤的患者随机分为治疗组和对照组,治疗组360例,口服盘龙七片治疗;对照组340例,用舒筋活血汤口服治疗,10天为一个疗程。一个疗程结束后评定近期疗效。结果:两组治疗前疼痛、肿胀、压痛、功能受限等积分差异无显著性意义(P>0.05);治疗后两组在功能受限等体征方面差异有显著性意义(P<0.05),在疼痛、肿胀等症状和压痛等体征方面的差异有非常显著性意义(P<0.01);两组近期疗效评价差有异显著性(P<0.01)。结论:盘龙七片是治疗急、慢性软组织损伤的有效药物。

响应面法优化盘龙七中岩白菜素的提取工艺

为优化盘龙七药材中岩白菜素的超声提取工艺,在单因素实验的基础上,利用响应面分析方法建立了盘龙七岩白菜素的超声提取功率、超声提取时间、乙醇浓度和提取温度的二次响应曲面方程。结果表明,对盘龙七岩白菜素提取率影响的大小次序为:超声提取温度、超声功率、乙醇浓度和超声提取时间。盘龙七岩白菜素超声提取工艺的最佳条件为:提取温度为59℃、超声功率270 W、乙醇浓度75%,提取时间40 min/次,料液比1∶30,提取3次,在此条件下盘龙七岩白菜素得率为6.429%,与模型预测值6.432%高度相符。

盘龙七片调节Wnt/β-catenin通路对大鼠胫骨骨折愈合的影响

目的探讨盘龙七片对大鼠胫骨骨折愈合的促进作用及可能作用机制。方法选用58只8周龄、SPF级SD雄性大鼠为实验大鼠,分为造模大鼠(n=48)与Sham组大鼠(n=10)。建立胫骨骨折模型大鼠,并将模型大鼠分为Model组、盘龙七片组(Treat组)、β-catenin抑制剂组(XAV-939)及盘龙七片+β-catenin抑制剂组(Treat+XAV-939组)4组,每组10只。X光片观察大鼠胫骨骨折愈合状况;骨密度测定仪检测胫骨骨矿物质密度值(BMD);HE染色观察大鼠骨折部位结构变化;酶联免疫吸附法检测血清中ALP、bFGF、TNF-α、IL-1β;免疫印迹法检测骨组织中p-糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、Wnt3、β-链蛋白(β-Catenin)及淋巴增强因子1(LEF1)蛋白表达。结果与Sham组相比,Model组骨组织影像学愈合评分、BMD、ALP、bFGF水平、Wnt3、β-Catenin、LEF1蛋白表达降低,TNF-α、IL-1β水平升高;与Model组相比,Treat组骨组织影像学愈合评分、BMD、ALP、bFGF水平、Wnt3、β-Catenin、LEF1蛋白表达升高,TNF-α、IL-1β水平降低;Treat+XAV-939组骨组织影像学愈合评分、BMD、ALP、bFGF水平、Wnt3、β-Catenin、LEF1蛋白表达高于XAV-939组,TNF-α、IL-1β水平低于XAV-939组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论盘龙七片可促进大鼠胫骨骨折愈合,其机制与抑制Wnt/β-catenin通路、缓解骨折大鼠机体炎症反应有关。

盘龙七片治疗强直性脊柱炎的临床研究

目的对盘龙七片治疗强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的疗效进行为期6个月的临床观察,以评价其治疗AS的疗效和安全性。方法门诊和住院治疗的AS患者104例采用随机数字表法分为治疗组和对照组各52例。对照组采用非甾体类抗炎药(NSAID)和柳氮磺吡啶(sulfasalazine,SSZ)治疗,治疗组在此基础上加用盘龙七片(panlongqipian,PLQ)治疗,观察临床症状、BathAS活动指数(BASDAI)、BathAS功能指数(BASFI)、ESR和CRP等实验室检查及不良反应。分别于治疗3个月复诊和治疗6个月随访。结果两组治疗第3、6个月与治疗前比较,腰骶痛明显减轻(P<0.05),腰背晨僵时间显著缩短(P<0.05),BASDAI和BASFI明显降低(P<0.05),ESR和CRP亦显著下降(P<0.05);治疗组第3、6个月腰背晨僵时间、BASDAI、BASFI、ESR和CRP与对照组比较,差异均有显著性(P<0.05)。不良反应以胃肠道反应为主,两组比较差异无显著性(P>0.05)。结论PLQ治疗AS疗效显著,且不良反应轻微,可用于AS的辅助治疗。

盘龙七中黄酮抗氧化活性的评价研究

以黄酮清除率为指标,以抗坏血酸为对照,运用紫外-可见分光光度法和荧光光谱法测定了黄酮对自由基的清除能力,评价盘龙七中黄酮的抗氧化活性。紫外-可见分光光度法测定黄酮对羟自由基的最大清除率达97.5%;对超氧阴离子的最大清除率达98.0%,对亚硝酸盐的最大清除率为60.0%;荧光光谱法测定黄酮对羟自由基的最大清除率为83.9%,对超氧阴离子的最大清除率为87.0%,且盘龙七中黄酮的抗氧化活性均优于抗坏血酸。盘龙七中黄酮对三种自由基的清除能力顺序为超氧阴离子>羟自由基>亚硝酸盐。对盘龙七中总黄酮的抗氧化活性进行了评价,可为盘龙七药材的抗氧化性能的深入开发和利用提供理论依据和实验参考。

盘龙七片调控SIRT1/NF-κB通路对骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的观察盘龙七片对骨关节炎(osteoarthritis,OA)小鼠沉默信息转录调控因子(silent information regulator type 1,SIRT1)/核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路及软骨细胞凋亡的影响。方法手术切除右膝关节内侧半月板和前交叉韧带复制小鼠OA模型。将小鼠分为正常对照组,模型组,阳性对照组,盘龙七片低、中、高剂量组。通过番红O-快速绿染色观察膝关节结构变化,进行Mankin评分评估关节炎严重程度,流式细胞术检测软骨细胞凋亡指数,qRT-PCR检测Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达水平,Western blot法检测软骨细胞SIRT1、NF-κB蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型组小鼠膝关节软骨细胞凋亡率增加,Bax、Caspase-3 mRNA和NF-κB蛋白表达水平显著增加,Bcl-2 mRNA和SIRT1蛋白表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组与盘龙七片低、中、高剂量组小鼠膝关节软骨细胞凋亡率显著降低,Bax、Caspase-3 mRNA和NF-κB蛋白表达水平显著降低,Bcl-2 mRNA和SIRT1蛋白表达水平显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05),盘龙七片的作用呈明显的剂量依赖性。结论盘龙七片可抑制OA小鼠膝关节软骨细胞凋亡,其作用机制可能与调节SIRT1/NF-κB信号通路相关。

盘龙七片对膝骨性关节炎患者疗效与外周血Th17细胞及相关细胞因子的关系

目的探讨膝骨性关节炎患者不同中医证型患者外周血Th17细胞和相关的细胞因子(IL-17、IL-1β和IL-6)的水平与盘龙七片疗效的关系。方法选取淤血阻滞、阳虚寒凝、肾虚髓空三种中医证型患者各25、24和26例,正常对照组24例,患者采用盘龙七片治疗,每日3次,每次3片,治疗前和治疗6周后,留取正常对照组和患者外周血,采用流式细胞术和ELIS法检测Th17细胞和血清细胞因子IL-17、IL-1β和IL-6浓度,并进行疗效评估。结果肾虚髓空、阳虚寒凝、瘀血阻滞三种中医证型患者Th17细胞比例和细胞因子浓度均高于正常对照组,且呈现逐渐增高的趋势,差异有统计学意义(P<0.05);三种中医证型有效治疗者,Th17细胞比例和细胞因子浓度显著降低,差异有统计学有统计学意义(P<0.05);三种中医证型患者疗效呈现增高的趋势,肾虚髓空型高于另外两种证型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论膝骨性关节炎患者外周血Th17细胞比例和细胞因子IL-17、IL-1和IL-6浓度与盘龙七片的疗效有关,可作为中医证型和预后的参考指标。

HPLC测定不同产地盘龙七中没食子酸的含量

[目的]建立高效液相色谱法测定盘龙七中没食子酸含量的方法,并测定14个不同产地盘龙七中没食子酸的含量.[方法]高效液相色谱法,Inertsil ODS-3C18（4.6×150 mm,5μm）色谱柱,流动相为甲醇-0.4％磷酸溶液（7∶93）,流速1.0 ml/min,检测波长271 nm,柱温30 ℃.[结果]没食子酸在5.3～ 53.0 μg/ml范围内呈良好的线性关系,Y=31 446X-15 550（R2 =0.999 9）,平均加样回收率99.995％,RSD为1.704％.不同产地盘龙七中没食子酸的含量不同,其含量随产地的不同而显示出明显差异,其变化范围在1.704 4～8.639 3 mg/g.[结论]该研究建立的没食子酸含量测定方法简便、准确、重复性好,可用于不同产地盘龙七药材的质量控制.文县产盘龙七中没食子酸含量较丰富,具有进一步的开发利用价值.

盘龙七片治疗膝骨性关节炎有效性临床对照观察研究

目的:观察盘龙七片治疗膝骨性关节炎疗效。方法:将120例膝骨性关节炎的患者随机分为治疗组和对照组,治疗组60例,口服盘龙七片每次3片,每日3次;对照组60例,口服盐酸氨基葡萄糖胶囊250mg,每日3次。两组均为6周1个疗程。1个疗程结束后评定其疗效。结果:2组治疗前年龄和性别等一般资料及关节压痛、平地行走痛、静息痛、晨僵等积分无显著性差异(P>0.05);治疗后2组在关节压痛、平地行走痛、静息痛、晨僵等症状体征方面均有改善,治疗组疗效优于对照组,且两组疗效有显著性差异(P<0.05)。结论:盘龙七片是治疗膝骨性关节炎的有效药物。

盘龙七片对膝骨关节炎大鼠关节软骨的保护作用及对Wnt通路的调控机制

目的探讨盘龙七片对膝骨关节炎(KOA)大鼠关节软骨的保护作用及对Wnt通路的调控机制。方法选用96只SPF级8周龄雄性SD大鼠构建膝骨关节炎大鼠模型,观察大鼠活动状态,并经CT验证。实验分为假手术组、模型组、塞来昔布组和低、中、高剂量盘龙七片组6组,每组16只。按照实验分组给药,观察各组大鼠软骨形态并进行大体评分,行HE染色,酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠滑膜中TNF-α、IL-1β及MMP-13水平,蛋白印迹(WB)法测定软骨中Wnt-4、β-catenin水平。结果手术后,大鼠出现膝骨关节炎症状并经CT验证。与假手术组相比,模型组大鼠膝骨关节可见裂纹,表面呈毛刺状、暗黄色,软骨可见增生、赘生物;HE染色可见软骨细胞数减少,骨赘、血管增生,结构混乱不清,表面凹陷,深层结缔组织可见明显裂隙,潮线消失;大体评分、TNF-α、IL-1β、MMP-13、Wnt-4及β-catenin水平显著升高(均P<0.05)。与模型组相比,经低、中、高剂量盘龙七片治疗后,大鼠膝骨关节软骨表面趋向光滑,色泽逐渐明亮,增生、赘生物减少;HE染色可见软骨细胞数逐渐增多,结构趋向分明,裂隙减少,伴有少量炎症细胞浸润;大体评分、TNF-α、IL-1β、MMP-13、Wnt-4及β-catenin水平明显降低(均P<0.05)。结论盘龙七片可缓解KOA大鼠症状,具有一定的临床应用价值,这提示盘龙七片可能成为治疗KOA的候选药物。

盘龙七中儿茶素的含量测定

[目的]建立HPLC测定盘龙七中儿茶素含量的方法。[方法]采用超声波辅助提取,HPLC法测定,色谱条件为:色谱柱为Kroma-sil-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为无水甲醇-水-冰醋酸(15:84:1,V/V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为276 nm。[结果]儿茶素的线性范围为0.624～3.12 μg/ml(r=0.9993),平均回收率为100.05%,RSD为1.73%(n=6)。[结论]该测定方法简便、准确,可用于盘龙七中儿茶素的含量测定。

盘龙七片缓解关节炎软骨细胞损伤和炎症反应

目的探讨盘龙七片对关节炎软骨细胞增殖、凋亡、基质降解和炎症反应的影响及其机制。方法采用膝关节穿刺注射木瓜蛋白酶法制备膝骨关节炎大鼠模型,并分离培养骨关节炎软骨细胞。骨关节炎软骨细胞分为:对照组(正常培养),30,60,90,120μg/ml组(盘龙七片处理24 h),盘龙七片+PCAT-1组(转染pcDNA3.1-PCAT-1后60μg/ml盘龙七片处理24 h),盘龙七片+pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1后60μg/ml盘龙七片处理24 h)。CCK-8法测定各组细胞增殖。Hoechst 33258测定各组细胞DNA含量。TUNEL法测定各组细胞凋亡。Western blot检测细胞中ACAN、COL2A1、MMP-13和Caspase-3蛋白表达量。ELISA检测各组上清液炎症因子IL-1β和TNF-α表达水平。RT-qPCR检测lncRNA前列腺癌相关转录本1(prostate cancer-asso-ciated transcript 1,PCAT-1)表达量。结果与对照组比较,30μg/ml组中细胞增殖、凋亡、DNA含量、炎症因子(IL-1β和TNF-α)水平、ACAN、COL2A1、MMP-13和Caspase-3蛋白表达量均没有明显的变化;60,90,120μg/ml组骨关节炎软骨细胞增殖、DNA含量、ACAN和COL2A1蛋白表达显著上升(P<0.05),骨关节炎软骨细胞凋亡、IL-1β和TNF-α水平、MMP-13和Caspase-3蛋白表达显著下降(P<0.05);60μg/ml组中PCAT-1表达量显著降低(P<0.05)。与盘龙七片+pcDNA3.1组比较,盘龙七片+PCAT-1组中细胞增殖和ACAN表达量显著下降,IL-1β和TNF-α水平、MMP-13和Caspase-3蛋白表达量显著升高(P<0.05)。结论盘龙七片可能通过PCAT-1促进骨关节炎软骨细胞增殖及抑制细胞凋亡、炎症反应和细胞基质降解,为解析盘龙七片治疗骨关节炎的药理机制提供依据。

盘龙七的体外抗氧化活性研究

以维生素C为对照,采用流动注射-化学发光法、紫外可见分光光度法和荧光光谱法测定盘龙七提取物对羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O_2^-)、过氧化氢(H_2O_2)的清除能力,研究其体外抗氧化活性。结果表明,流动注射-化学发光法测定盘龙七水提物和醇提物在鲁米诺-碳酸盐缓冲液-邻苯三酚体系中的IC50值分别为0.17μg·mL^(-1)和0.03μg·mL^(-1),在鲁米诺-碳酸盐缓冲液-H_2O_2体系中的IC50值分别为15.06μg·mL^(-1)和0.03μg·mL^(-1);紫外可见分光光度法测定盘龙七水提物和醇提物对·OH的清除率分别为91%和98%,对·O_2^-的清除率分别为96%和97%;荧光光谱法测定盘龙七水提物和醇提物对·OH的清除率分别为92%和91%,对·O_2^-的清除率分别为97%和94%。盘龙七具有较高的抗氧化活性,其对·OH、·O_2^-、H_2O_2等3种自由基的清除作用随浓度的增加逐渐增强,呈良好的线性关系。该研究为盘龙七药材的深度开发以及抗氧化性能研究提供了理论基础。