石榴酒发酵过程中真菌种群演替及风味物质代谢规律解析

应用高通量测序技术分析石榴酒发酵过程中真菌种群演替规律,并结合气相色谱-质谱法分析石榴酒中挥发性风味物质形成规律。结果表明:石榴酒发酵过程中主要真菌种群包含酵母属、有孢汉逊酵母属、毕赤酵母属、假丝酵母属及曲霉菌属等。有孢汉逊酵母属是石榴汁中的优势真菌,占总真菌种群相对丰度的57.84%~60.13%。酵母属是发酵4~8 d时期的主要酵母种群,占总真菌种群相对丰度的90.00%~97.26%。Granger因果分析表明酵母属是导致石榴酒中异丁醇、异戊醇等高级醇含量高的主要因素;非酿酒酵母,如有孢汉逊酵母、毕赤酵母等则对石榴酒中月桂酸乙酯、乙酸乙酯等酯类物质起主要贡献。本研究系统解析了石榴酒发酵的真菌种群结构及功能,对提升石榴酒品质及发酵可控性提供理论基础。

普洱茶中真菌种群的分离与分子鉴定

采用平板稀释法以孟加拉红(DRBC)和18%的甘油琼脂(DG18)两种培养基对60个普洱茶样品中的真菌种群进行了分离,种群分离结果显示:样品中真菌种群数量变化值范围为1.6×103～1.16×105cfu/g;应用分子生物学的手段,对分离到的71株真菌做了分子鉴定,鉴定结果表明:这些真菌分别属于19个属,40个种,主要是曲霉属13种,青霉属7种,其他属20种。数量上占优势的真菌种群是酵母和曲霉属的不同种。这些真菌的安全性有待进一步评估。

套袋对葡萄果实表面真菌种群结构及烂果的影响

为了探讨葡萄套袋后葡萄果实表面真菌种群结构变化及套袋对烂果的影响,以玫瑰香品种为试材,对套袋葡萄果面真菌进行了分离鉴定,并对套袋造成的葡萄烂果情况进行了调查,分析了不同套袋处理果实真菌种群的变化和对烂果的影响。结果表明,在葡萄套袋环境下,套袋果实表面所带真菌主要有曲霉菌、链格孢菌、根霉菌、毛霉菌、炭疽菌;不同套袋处理果实表面真菌种群结构不同,套塑料袋处理中真菌的分离频率最高,套纸袋的分离频率最低;不同套袋处理造成的葡萄烂果情况不同,套纸袋的果实烂果率仅为4.8%,而套塑料袋的烂果率则高达49.1%。

铝胁迫对酸性红壤中真菌种群多样性的影响

通过聚合酶链式反应-限制性片段长度多态（PCR-RFLP）技术构建了红壤真菌的内转录间隔区（Internal Transcribed Spacer,ITS）rDNAs文库,比较分析了红壤地区典型森林土和农田土真菌群落结构对铝胁迫的响应,构建了6个土壤样品的真菌ITS rDNAs文库。从这6个克隆文库中随机挑取克隆进行了PCR-RFLP指纹图谱分析,共获得77个独特的真菌操作分类单元（OperationalTaxanomicalUints,OTUs）。对77个OTUs的代表性克隆测序并利用Blast工具进行分析（相似性95%～100%）。研究结果表明森林土壤和农田土壤样品中真菌类群79.2%（61）属于子囊菌门（Ascomycota）、担子菌门（Basidiomycota）和球囊菌门（Glomeromycota）,20.8%（16）属于未分类的簇（Unclassifiedfungi）,其中担子菌门真菌在两种土壤中具有明显优势。物种多样性指数（Simpson、Shannon和Chao1）分析表明,铝胁迫降低了土壤真菌种群的多样性,农田土壤中真菌的种群多样性明显高于森林土壤。而且随着铝胁迫浓度的增加,担子菌门真菌在两种土壤中丰度明显下降,子囊菌门真菌的丰度显著上升,在高铝处理浓度处理的土壤中演变为优势种群。

毛白杨落叶的分解及叶上小型真菌种群的演替

毛白杨(Populus tomentosa Carr.)在我国以黄河中、下游为分布中心。它作为绿化树种而广为种植。其落叶主要在地表层的土壤(5—15cm)中分解。各种不同的土壤微生物参与落叶的实质性分解,其中真菌起主要作用。落叶分解的研究在国内报道较少。落叶分解过程中叶上小型真菌种群的研究,国内尚无完整的工作。本文报道了毛白杨落叶在一年内的分解和叶上小型真菌种群的演替,并探讨了温度和湿度对分解的影响。

陕西关中西部玉米穗粒腐病寄藏真菌种群研究

在陕西关中西部１１个县（区）调查、采集了２５４份玉米穗粒腐病穗标样，分离得到１１０６个菌株。鉴定为１４个种，分属１１个属。其中串株镰刀菌出现频次最高，占３７．８８％，其次为禾谷镰刀菌，占２２．０６％。简要描述了一些主要种的培养特征和危害特征。

豫南茶园芽及叶栖真菌种群的演替

对豫南茶园芽及叶栖真菌种群的演替进行了研究。结果表明,该区芽叶栖真菌有26属40种,多数为半知菌,部分为子囊菌,少数为接合菌。其中,细交链孢霉(Alternaria tenuis)、茶园赤星病菌(Cercospora the-ae)、旋丝毛壳菌(Chaetomium bostrychodes)、黑腐菌(Guignardia camelliae)、茶炭疽病菌(Gloeosporium the-ae-sinensis)、茶褐斑大茎点霉(Macrophoma abensis)、茶枝腐病菌(M.theaecola)、茶轮斑病菌(Pestalotiopsistheae)、多色拟盘多毛孢菌(P.versicolor)、木霉(Trichoderma spp.)10种真菌为优势种。茶园芽叶栖真菌种群演替与季平均温度及降雨量密切相关,春秋季节真菌种类丰富,夏冬季节种类较少。

苹果果实套袋后真菌种群结构的变化

为探讨苹果套袋后果实在袋内微域环境下不同生长期和不同部位真菌种群结构变化及其对果实安全性的影响,以红富士苹果为试材,利用选择性培养基,对套袋苹果袋内真菌进行了分离、鉴定和分类,分析了套袋和不套袋果实不同生长期、不同部位真菌种群的变化。结果表明,在红富士苹果套袋微域环境下,不同部位、不同时期的主要真菌是链格孢霉(Alternaria),且在套袋后的整个生长季一直存在,7月后的不同时期,分别分离出青霉(Penicilli-um)、木霉(Trichoderma)和曲霉(Aspergillus);不同部位真菌种群结构有差异,除链格孢霉外,非皮孔处其他真菌的出现均要早于皮孔处;不同时期真菌种群结构,青霉和木霉在不同部位分离出的时间有异,且持续存在时间也不一致,曲霉仅在非皮孔部位于摘袋后分离出。与不套袋果相比,套袋后真菌的种类仅多了曲霉,而且没有表现出致病能力。因此认为,套袋后微域环境下产生的真菌类群对果实的安全性没有直接影响。

宁夏沙坡头人工植被区土壤真菌种群的动态研究

[目的]研究宁夏沙坡头人工植被区不同沙丘土样在不同时间、不同土层真菌的变化情况。[方法]以9个沙地土样与1个土壤土样作比较,对不同时间、不同土层真菌的种类、数量和分布进行了比较分析。[结果]同一样地环境、不同空间层次以及不同样地环境、相同空间层次草地土壤真菌数量变化均较大,而各土壤类型的真菌数量分布均以翠柳沟(天然荒漠草原)最多、流沙最少;在不同固沙地类型中,翠柳沟真菌种类和数目最多。[结论]人工植被区土壤真菌的数量随固沙年代的增加而增加,因此加强沙地的植被建设和人工管理有助于改善沙漠化现状。

茂谷柑黄化植株根系及根区土壤真菌种群分析

为探索南宁市茂谷柑黄化植株与真菌种群的相关性,采集健康植株和不同黄化症状植株的根系样品及根区土壤样品,用高通量测序技术分析真菌种群。结果发现,所有样品均以肉座菌目(子囊菌门)为主,根区土壤样品中肉座菌目相对丰度高于根系样品。除了黄化植株2根区土壤样品外,肉座菌目中的主要科是丛赤壳科,但绝大多数丛赤壳科没有被注释到属或种。在黄化植株2根区土壤样品中,肉座菌目的几乎所有序列为肉座菌科木霉属的螺旋木霉Trichoderma spirale。除了肉座菌目,不同样品的特异优势目有差异。感染黄龙病植株,根系样品的特异优势目是地星目(担子菌门),所有序列均为地星科拟鸟巢属中的一种拟鸟巢菌Nidulariopsis iowensis;根区土壤样品的特异优势目是粪壳菌目(子囊菌门),多数序列为毛壳菌科毛壳菌属的球毛壳菌Chaetomium globosum。在落叶严重的黄化植株(叶片均匀黄化,植株上果实多,具有红鼻子果症状特点,树盘下有三叶鬼针草Bidens pilosa为主的高秆草本杂草)的根区土壤样品中,被孢霉目(接合菌门)是特异优势目,但仅部分序列注释到被孢霉科,所有序列均未被注释到属或种。健康植株的根系样品及根区土壤样品均未出现特异优势真菌目。可见,茂谷柑健康植株的真菌种群稳定,黄化症状表现与植株根系及根区土壤中的真菌种群有相关性。

大兴安岭被松栎柱锈菌侵染的蒙古栎叶上真菌种群的分布与多样性

蒙古栎是重要的森林植物,其叶常常被松栎柱锈菌（Cronartium quercuum）侵染.真菌与植物的共生关系是森林生态系统稳定和发展的重要基础,而真菌的多样性往往与森林生态系统的健康有着不可忽视的密切联系.本研究通过对被松栎柱锈菌侵染的蒙古栎叶上真菌的分离、培养,确定真菌的种类、组成和优势种群,以期为蒙古栎资源的开发、利用和松瘤锈病的发病规律提供科学依据.

藏茶渥堆过程中真菌种群的鉴定

为了提高藏茶品质和改进工艺,对雅安藏茶渥堆过程中存在的真菌种群进行了分类鉴定。结果表明:藏茶渥堆过程中主要存在着黑曲霉(Aspergillusniger)、塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)、总状枝毛霉(M.racemosusFres.)、炭黑曲霉(Aapergillus carbonarius)、根霉(Rhizopus Ehrenberg)、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)和简单枝霉(ThamnidiumsimplexBrefeld)等7种真菌。

藏茶贮存过程中真菌种群的鉴定

为探索藏茶贮存过程中品质变化与微生物种群的关系,对雅安藏茶贮存过程中存在的真菌种群进行了分类学地位鉴定。结果表明,藏茶贮存过程中主要存在的真菌种群为曲霉属的黑曲霉、青霉属的光孢青霉菌、娄地青霉菌和巴恩正青霉菌以及根霉属的根霉菌5大类种群。这些微生物均可直接或间接地影响藏茶贮存过程中的品质形成。

松栎柱锈菌侵染蒙古栎叶上的真菌种群分布

作者在黑龙江省和内蒙古自治区4个地区采集松栎柱锈菌Cronartium quercuum侵染蒙古栎Quercus mongolica的越冬和当年病叶,分离、培养和鉴定其上的真菌种群。结果表明:从4个地区共分离到18个属(种)真菌,不同地区的病叶上,真菌种群分布均有所不同,优势属也不同。大兴安岭地区越冬病叶上链格孢Alternaria为优势属,当年病叶上粉红单端孢Trichothecium roseum和毛霉属Mucor为优势属(种);兴凯湖地区越冬病叶上优势属也是链格孢,当年病叶上青霉菌Penicillium为优势属;内蒙古地区当年病叶上枝孢属Cladosporium为优势属;五大连池当年病叶上粉红单端孢为优势种。所有真菌在PDA培养基上均比在玉米粉培养基上生长良好,不同培养基上分离得到的真菌种群也存在差异。4个地区均分离到具有生防作用的粉红单端孢。

牡丹江市行道旱垂柳林的真菌种群调查与研究

城市行道旱垂柳林生态系统物种丰富,由于人为因素和城市小气候的强烈干扰,具有独特的真菌种群和分布规律,其中黄伞(Pholiota adipose(Fr.))和林地蘑菇(Agaricus silvaticus Schaeff.ex Fr.)等极具研究和开发价值。

连作马铃薯根际土壤真菌种群结构及其生物效应

连作障碍已成为马铃薯产业发展的主要限制因素,为了探明马铃薯连作障碍的机理,减轻连作障碍对产量的影响,采用大田试验与PCR-DGGE分子指纹图谱技术相结合的方法,研究马铃薯连作对根际土壤真菌种群结构的影响及其生物效应.结果表明:随着连作年限的增加,根际土壤中真菌DGGE图谱的条带数量增加,连作1～5年处理的操作分类单元(OTU)分别比对照(轮作)增加了38.5%、38.5%、30.8%、46.2%和76.9%,说明马铃薯连作使根际土壤中真菌优势种群的个体数明显增多.随着连作年限的增加,各处理间真菌种群结构的相似性越来越低.通过真菌DGGE条带的克隆测序比对发现,随着连作年限的增加,马铃薯根际土壤土传病害病原菌尖孢镰刀菌和茄病镰刀菌的数量明显增加,而球毛壳菌作为一种生防菌,连作5年时数量明显减少.连作使根际土壤中病原真菌种群过渡成为优势种群,根际微生态环境恶化,从而作用于根系,使根系活力和吸收面积下降,最终导致块茎产量大幅度下降.

乙草胺和甲胺磷对农田黑土可培养真菌数量及种群结构的影响

应用传统及PCRDGGE方法(denaturinggradientgelelectrophoresis),分别对不同浓度乙草胺、甲胺磷胁迫下黑土中可培养真菌CFU(colonyformingunits)、种群丰富度(richness)及种群结构动态变化规律进行了研究.结果表明,在实验室微域条件下,乙草胺对黑土可培养真菌CFU的影响随处理浓度的增加而抑制作用增强,表现出由低浓度(50mg·kg-1)时的刺激生长到高浓度(250mg·kg-1)时的长期抑制效应;250mg·kg-1甲胺磷在8周处理过程中对土壤可培养真菌生长具有显著的刺激效应,使可培养真菌CFU比对照增加10倍,但50和150mg·kg-1甲胺磷处理对土壤可培养真菌CFU无显著影响.种群丰富度系数分析结果表明,高、中浓度乙草胺处理可使土壤可培养真菌种群丰富度不可逆地降低.土壤真菌rDNA特异PCRDGGE聚类分析结果表明,不同浓度乙草胺、甲胺磷处理均不同程度地对土壤可培养真菌的种群组成和结构造成影响,其中甲胺磷尤为显著.

深水型水库热分层诱导水质及真菌种群结构垂向演替

水体真菌种群在调控水库生态系统健康过程中发挥重要作用,为探明热分层诱导深水型水库水体真菌种群结构垂向演替特征,采集金盆水库主库区0.5、10、25、40、60和70 m水深水样,分析水质参数、并运用高通量DNA测序技术诊断水库水体真菌种群结构垂向异质性.结果表明,金盆水库表层水温最高为22.33℃,底层最低为7.21℃(P<0.05).水体溶解氧(DO)随水深增加显著降低(P<0.05),电导率、总磷(TP)和铁含量随着水深增加显著升高(P<0.05),垂向形成稳定的变温层、斜温层和等温层结构.水体真菌种群高通量DNA测序共发现1 247个OTUs,隶属4门14纲39属,主要包括接合菌门(Zygomycota)、担子菌门(Basidiomycota)、子囊菌门(Ascomycota)和壶菌门(Chytridiomycota).等温层水体真菌种群Shannon指数和Chao 1多样性指数最高,分别为3.45和360,显著高于斜温层水体(P<0.05).红酵母属(Rhodotorula,27.23%)、链格孢属(Alternaria,24.28%)、分子孢子菌属(Cladosporium,22.98%)、链格孢属(Alternaria,32.00%)、亚隔孢壳属(Didymella,17.47%)和分子孢子菌属(Cladosporium,28.17%)分别是0.5、10、25、40、60、70 m的优势菌属,不同水深均存在大量未知真菌(Unclassified).热图(heat map)结果表明,热分层期间金盆水库水体真菌种群结构垂向分布差异显著、不同水层具有不同的真菌种群结构.主成分分析(PCA)表明水温、DO、TP、电导率是调控水体真菌种群结构垂向异质性的主要水质因子.该研究结果为水源水库热分层期间水质与真菌群落的偶联机制提供科学依据.

生物炭不同施用量对烟草根际土壤真菌群落结构的影响

【目的】为探明生物炭施用量对烟草旺长期根际土壤真菌种群结构、多样性和生态功能的影响,以期为改善烟草根际土壤微生态环境以及为生物炭在植烟土壤中的应用提供参考。【方法】以烟草品种“红花大金元”为试验材料,在施肥减量10%的前提下,设置施用生物炭250 g/株(A1)、300 g/株(A2)和350 g/株(A3)3种处理,并以常规施肥为对照。采用Illumina MiSeq高通量测序技术对不同处理旺长期烟株根际土壤真菌ITS1基因进行测定。【结果】施用生物炭可以改变土壤真菌α多样性和种群结构,在所有土壤样品中A3处理真菌多样性及丰富度最高。门水平上,各处理主要优势菌门为子囊菌门(Ascomycota)和担子菌门(Basidiomycota),其中子囊菌门相对丰度与生物炭施用量呈负相关,担子菌门相对丰度与生物炭施用量呈正相关。纲水平上,施用生物炭降低了粪壳菌纲(Sordariomycetes)和散囊菌纲(Eurotiomycetes),提高了伞菌纲(Agaricomycetes)和银耳纲(Tremellomycetes)的相对丰度。属水平上,施用生物炭显著降低了青霉菌属(Penicillium)、枝孢瓶霉属(Cladophialophora)、螺旋聚孢霉属(Clonostachys)等真菌相对丰度;提高了镰刀菌属(Fusarium)、Saitozyma、锥盖伞属(Conocybe)、附球菌属(Epicoccum)等真菌相对丰度。FUNGuild真菌功能预测发现,各样本根际土壤真菌的功能类型以腐生营养型与腐生营养型—共生营养型为主。生物炭处理中植物病原相对丰度均低于对照。【结论】烟株施用生物炭350 g/株有效改善了根际土壤真菌群落结构,有利于维持土壤真菌的多样性和丰富度、降低土壤病原真菌的丰度,可为植烟区合理施用生物炭提供技术指导。

泸州老窖古酿酒作坊夏季空气真菌分布特征

通过定点取样研究了泸州老窖古酿酒作坊群中3个代表性作坊及其周围环境夏季空气真菌的群落结构和分布特征.结果表明:(1)泸州老窖3个古作坊空气真菌平均浓度为(3.52×103±0.27×103)CFU/m3,变幅在0.94×103～7.01×103CFU/m3之间;3个作坊内外环境真菌浓度不一,营沟头作坊内平均值高于作坊外(P<0.05),什字头作坊和新街子作坊内则低于作坊外(P<0.05).(2)作坊内的真菌种类略低于作坊外.在古酿酒作坊内共检测出真菌14个类属,优势种群为曲霉属(Aspergillus)、酵母菌(Yeasts)、青霉属(Penicillum)和无孢菌(Nonsporing),芽枝霉属(Cladosporium)和短梗霉属(Aureobasidiu)分别在营沟头和什字头作坊占有优势;作坊外检测出真菌16个类属,优势种群为青霉属、无孢菌、芽枝霉属、曲霉属和短梗霉属。其中青霉属和无孢菌在3个作坊内外环境均无显著差异.(3)古酿酒作坊内、外环境的空气真菌表现出明显的交流现象.在作坊内,青霉属、芽枝霉属、链格霉属(Alternaria)等杂菌占有一定比例;而在作坊外,曲霉属、根霉属(Rhizopus)、酵母菌等酿酒功能菌浓度处于相对较高水平.