硫氧还蛋白1、活化T细胞趋化因子在脑梗死病人血清中的水平及与认知功能、预后的关系

目的探究硫氧还蛋白1(Trx1)、活化T细胞趋化因子(RANTES)在脑梗死病人血清中的水平及与认知功能、预后的关系。方法选取2020年3月至2022年6月在无锡市人民医院诊治的168例脑梗死病人作为观察组,及同期165例健康体检志愿者作为对照组进行研究。参照蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分对所有病人的认知能力进行评估,分为认知功能障碍组112例,认知功能正常组56例;根据改良Rankin量表(MRS)评分分为预后良好组90例,预后不良组78例。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清Trx1、RANTES水平;Spearman法分析脑梗死病人血清中Trx1、RANTES水平与MoCA评分的相关性;对影响脑梗死病人发生认知功能障碍及预后的因素进行logistic回归分析;受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清Trx1、RANTES水平对脑梗死病人发生认知功能障碍的诊断价值。结果与对照组相比,观察组病人血清Trx1水平显著降低[(6.78±1.62)μg/L比(11.05±1.89)μg/L,P<0.05],RANTES水平明显升高[(35.12±4.84)ng/L比(23.51±3.28)ng/L,P<0.05];认知功能障碍组脑梗死病人血清Trx1水平明显低于认知功能正常组[(6.02±1.59)μg/L比(8.30±1.68)μg/L,P<0.05],RANTES水平显著高于认知功能正常组[(38.57±5.25)ng/L比(28.22±4.02)ng/L,P<0.05];与预后良好组对比,预后不良组脑梗死病人血清Trx1水平明显降低[(5.42±1.55)μg/L比(7.96±1.68)μg/L,P<0.05],血清RANTES水平显著升高[(38.58±5.29)ng/L比(32.12±4.45)ng/L,P<0.05];脑梗死病人血清Trx1水平与MoCA评分呈正相关(rs=0.40,P<0.05),RANTES水平与MoCA评分呈负相关(rs=−0.56,P<0.05);logistic回归分析显示,受教育程度、Trx1是影响脑梗死病人发生认知功能障碍及预后的保护因素(P<0.05),脑梗死区域、RANTES是影响脑梗死病人发生认知功能障碍及预后的危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清Trx1、RANTES、二者联合诊断脑梗死病人发生认知功能障碍的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.82、0.94、0.97,二者联合诊断均优于其各自单独诊断(Z_(二者联合-Trx1)=4.00,P<0.001;Z_(二者联合-RANTES)=2.03,P=0.021)。结论脑梗死病人血清Trx1水平降低,RANTES水平升高,二者均与认知功能及预后有密切关系。

血清网膜素-1、硫氧还蛋白1、小窝蛋白-1对高血压脑出血的诊断与预后评估价值

目的探究血清网膜素-1(Omentin-1,OMTN)、硫氧还蛋白1(Thioredoxin-1,Trx1)、小窝蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)在高血压脑出血(hypertensive intra cerebral hemorrhage,HICH)患者中的表达及其对预后的预测价值。方法回顾性分析行微创血肿清除术82例HICH患者作为研究对象,根据治疗后30 d恢复情况分为预后良好组(n=48例)、预后不良组(n=34例),比较2组入院时血清OMTN、Trx1、Cav-1水平及格拉斯哥昏迷量表(Glasgow coma scale,GCS)评分、Graeb脑室出血评分,并分析其相关性。采用受试者工作曲线分析预测价值,分析入院时各指标不同水平患者不良结局的危险度。结果预后良好组OMTN水平高于预后不良组,血清Trx1、Cav-1水平低于预后不良组(P<0.05);预后不良组入院时GCS评分低于预后良好组,Graeb评分高于预后良好组(P<0.05);血清Trx1、Cav-1水平与GCS评分呈负相关,与Graeb评分呈正相关,OMTN水平与GCS评分呈正相关,与Graeb评分负相关;各指标单独预测预后不良的AUC均>0.6,但各指标联合诊断的AUC最大,为0.857(P<0.05);入院时OMTN、Trx1、Cav-1高水平HICH患者预后不良的危险度是低水平的0.242、2.462、3.440倍。结论HICH患者入院时OMTN水平降低,血清Trx1、Cav-1水平升高,各指标联合检测对预后不良预测价值较高,可作为临床评估HICH患者预后情况的辅助指标。

谷氧还蛋白1和硫氧还蛋白1基因在云南乌金猪不同组织中的表达特点及L-组氨酸对其在氧化应激细胞中表达的影响

本试验旨在研究抗氧化基因谷氧还蛋白1(GRX1)、硫氧还蛋白1(TRX1)在云南乌金猪脑垂体、下丘脑、甲状腺、胸腺、胰腺、生殖腺、肝脏、皮肤、十二指肠、空肠、回肠11种组织中的差异表达,探讨L-组氨酸对乌金猪氧化应激细胞中GRX1、TRX1基因表达的调节作用。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测乌金猪组织中GRX1、TRX1基因表达;以过氧化氢(H2O2)为氧化应激源建立氧化应激细胞模型,探讨L-组氨酸对GRX1、TRX1基因表达的调节作用。结果表明:1)GRX1、TRX1基因在乌金猪被检测组织中均有表达,肝脏表达量最高,其次是皮肤、空肠,其他组织中的表达量相对较低;2)乌金猪组织中TRX1基因表达量明显高于G RX1基因表达量;3)细胞培养结果表明,受到H2O2刺激时,氧化应激细胞中GRX1、TRX1基因产生过表达,L-组氨酸对氧化应激细胞或非应激细胞中GRX1、TRX1基因表达具有调节作用,其适宜浓度约为280μg/mL。乌金猪GRX1、TRX1基因表达具有明显组织特异性,H2O2可诱导氧化应激细胞中GRX1、TRX1基因产生过表达,添加适宜浓度的L-组氨酸可以调节氧化应激细胞或非应激细胞中GRX1、TRX1基因表达。结果提示,通过营养途径可诱导乌金猪体内G RX1、TRX1基因的表达,这是缓解机体氧化应激损伤和增强抗氧化能力的一种有效方式。

硫氧还蛋白1、触珠蛋白在非小细胞肺癌患者血清中的表达及临床意义

目的:探讨硫氧还蛋白1(Trx1)、触珠蛋白(Hp)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的表达及临床意义。方法:选取2016年1月至2018年12月我院呼吸科收治的非小细胞肺癌患者186例(实验组),另选取我院健康体检人员80例(对照组),检测两组血清Trx1、Hp水平,分析不同临床病理特征血清Trx1、Hp差异,分析血清Trx1、Hp对预测非小细胞肺癌发生的诊断效能。结果:实验组患者血清Trx1、Hp水平分别高于对照组血清Trx1、Hp水平,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC患者肿瘤直径≥3 cm、肿瘤低分化、TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期)、存在淋巴结转移分别与患者肿瘤直径<3 cm、肿瘤中+高分化、TNM分期(Ⅰ+Ⅱ期)、无淋巴结转移血清Trx1、Hp水平相比,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果示:Trx1、Hp联合检测NSCLC曲线下面积为0.840,敏感度和特异度分别为0.882和0.827。Kaplan-Meier分析示:血清Trx1、Hp低水平NSCLC患者的生存率高于高水平患者(P<0.05)。结论:血清Trx1、Hp在NSCLC中表达水平升高,血清Trx1、Hp水平变化与NSCLC病情进展有关,血清Trx1、Hp联合检测对预测NSCLC发生、预后有重要意义。

硫氧还蛋白1对胃癌细胞系BCG823生长的影响

目的探讨硫氧还蛋白1(thioredoxin-1,Trx1)对胃癌细胞系细胞周期及增殖速度的影响。方法对BCG823、AGS、MNK45、NUGC3、PHM82五种胃癌细胞系的质粒转染效率进行测定,选择出转染效率高的细胞系;并用实时PCR(RT-PCR)测定胃癌细胞系中Trx1的表达水平,选择出表达较低的细胞系。将所构建的Trx1真核重组表达载体pcDNA3.1myc-His-Trx1转染入上述实验筛选出的胃癌细胞系,使细胞中Trx1过表达,用流式细胞仪检测过表达Trx1的胃癌细胞进入S期的比例。结果 BCG823、AGS两种细胞系的转染效率高,满足实验需要。BCG823的Trx1表达较AGS低[BCG823细胞系的ΔCT(Trx-GAPDH)=1.43,AGS细胞系的ΔCT(Trx-GAPDH)=1.10,ΔCT值与表达量成反比],选择BCG823作为实验对象。转染pcDNA3.1myc-His-Trx1的细胞Trx1表达升高(与内参蛋白的比值为0.45±0.02和0.26±0.03,n=3,t=9.127,P=0.000),进入S期的细胞比例升高(转染带有Trx1质粒的细胞进入S期的比例为28.54%,而转染了空载体者进入S期的比例为22.24%,χ2=104.759,P=0.000)。结论 Trx1表达水平上调可以促进胃癌细胞进入S期。

重症颅脑损伤患者血清硫氧还蛋白1与颅内压改变的相关性

目的监测重症颅脑损伤患者动态血清硫氧还蛋白1(TRX1)与颅内压(ICP)的变化情况,分析TRX1水平与ICP的相关性。方法回顾性分析2019-01—2020-02濮阳市人民医院确诊并完成治疗的40例重症颅脑损伤患者的临床资料,将其纳入观察组,选取同期40例轻中型颅脑损伤患者纳入对照组,监测并记录2组患者颅脑损伤后12 h、24 h、48 h血清TRX1水平与ICP水平,检验血清TRX1水平与ICP的相关性,分析重症颅脑损伤后不同时点血清TRX1对患者ICP的影响。结果入院后12 h、24 h,2组患者ICP、TRX1水平呈升高趋势发展,但在入院后48 h 2组患者ICP、TRX1水平均有回降,各时点观察组ICP、TRX1水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);经双变量Pearson直线相关性检验显示,不同时点颅脑损伤患者的ICP水平与TRX1水平均呈正相关(r>0,P<0.05);一般线性回归分析显示,血清TRX1水平过表达是重症颅脑损伤患者ICP水平的影响因素(P<0.05)。结论重症颅脑损伤患者ICP显著升高,可能与患者血清TRX1的过表达有关,未来可以考虑通过动态监测血清TRX1水平判断其ICP升高情况或风险,以期为重症颅脑损伤早期治疗提供新思路。

硫氧还蛋白1与炎性相关性疾病

硫氧还蛋白1是体内抗氧化系统最重要的成员之一,对氧化应激起着关键性作用。它通过直接抗氧化作用和由带有关键信号分子的蛋白质之间的相互作用而间接施加影响。该文综述了硫氧还蛋白1的结构、生物学功能和有关炎性机制,以及该蛋白在免疫、神经、呼吸、心血管、消化系统等炎性相关性疾病的基础研究。

老年重型颅脑损伤患者血清硫氧还蛋白1表达对颅内压的影响

目的分析老年重型颅脑损伤患者血清硫氧还蛋白(Trx)1与颅内压水平的关系。方法选取2019年5月至2020年5月收治的65例重型颅脑损伤患者,对比入院即刻,入院3、6、24 h颅内压与Trx1表达情况,并分析各时点两者之间的关系。结果老年重型颅脑损伤患者颅内压、Trx1表达随着入院时间的延长呈不断升高趋势,各时点颅内压、Trx1表达差异有统计学意义(P<0.05);经相关性检验得知,老年重型颅脑损伤患者颅内压与Trx1呈正相关(P<0.001);将老年重型颅脑损伤患者各时点的颅内压作为因变量,将对应各时点的Trx1作为自变量,经线性回归分析结果显示,入院6 h与入院24 h,老年重型颅脑损伤患者Trx1表达对患者颅内压有明显影响(P<0.001),其中以入院6 h带来的影响最为显著。结论重型颅脑损伤患者损伤后颅内压与Trx1表达密切相关,临床可适时监测患者血清Trx1表达,以评估患者颅内压变化情况,并对Trx1过表达患者予以合理有效的干预,可能对改善重型颅脑损伤患者颅内压波动、促进良性预后有一定积极意义。

硫氧还蛋白1基因修饰骨髓间充质干细胞对心肌梗死大鼠血管生成及心功能恢复的研究

目的通过体外细胞分子生物学实验,观察硫氧还蛋白1(TRX1)基因修饰骨髓间充质干细胞对心肌梗死大鼠血管生成及心功能恢复的影响。方法选取150只健康雄性Wistar大鼠,其中50只为空白对照组,50只诱导心肌梗死组,50只诱导心肌梗死+间充质干细胞移植组。造模24 h后,通过尾静脉注射已分离大鼠骨髓间充质干细胞,注射细胞数量为(1~2)×106。细胞移植后1周、2周、4周(每个时间点,每组各15只大鼠),观察大鼠血管生成及心功能变化。结果相比于诱导心肌梗死组大鼠,随着细胞移植时间的延长,诱导心肌梗死+间充质干细胞移植组大鼠新生血管密度及心功能均显著恢复,组间差异具有统计学意义(P <0. 05)。并且在移植4周后,诱导心肌梗死组大鼠心功能与空白对照组相比,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论骨髓间充质干细胞高表达TRX1促进心肌梗死大鼠血管生成及心功能恢复。

肾小球系膜细胞中硫氧还蛋白1过表达对基质金属蛋白酶9表达的影响

为进一步探讨硫氧还蛋白1(thioredoxin1,Trx1)过表达对高糖环境下肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase9,MMP9)表达的影响.采用RT-PCR和明胶酶谱法检测细胞中MMP-9 mRNA和酶活性的变化,用脂质体介导瞬时转染法转染正义Trx1及反义Trx1,观察高糖环境Trx1过表达对MMP9表达的影响.结果表明,HBZY-1高糖组与正常糖组比较,MMP9 mRNA在12h,24h,48h时表达增加(P<0.05),同时酶活性于12h、24h、48h也明显增高(P<0.01).转染正义Trx1组细胞,MMP-9 mRNA水平及MMP9酶活性,在高糖组与正常糖组差异无统计学意义(P>0.05);但转染反义Trx1组和未转染组细胞的MMP9 mRNA水平及酶活性,高糖组均比正常糖组表达增加,差异有统计学意义(P<0.01).提示Trx1过表达可抑制高糖环境诱导的肾小球系膜细胞MMP9高表达.

硫氧还蛋白1 mRNA和精氨酸酶mRNA作为幽门螺杆菌高致病性标志物的应用价值

目的探讨硫氧还蛋白1(Trx1)mRNA、精氨酸酶mRNA在幽门螺杆菌(Hp)感染的不同疾病胃窦组织中的表达量,分析二者作为Hp高致病性标志物的应用价值。方法选取2020年9月至2021年7月于北京大学第三医院等7家医院接受内镜检查且Hp阳性的198例患者的胃窦组织,其中慢性胃炎106例(慢性胃炎组)、溃疡病31例(溃疡病组)、胃癌61例(胃癌组)。另选取同期于北京大学第三医院接受内镜检查且Hp阴性的48例患者的胃窦组织。采用实时荧光定量聚合酶链反应测定Trx1 mRNA、精氨酸酶mRNA相对表达量。分析二者作为筛选高致病性Hp标志物及预测Hp感染者临床结局的价值。结果Hp阴性胃窦组织中均未检出Trx1 mRNA、精氨酸酶mRNA表达。198例Hp阳性胃窦组织中均检出Trx1 mRNA,溃疡病组和胃癌组Trx1 mRNA相对表达量均高于慢性胃炎组[1.81(0.04,3.48)、0.51(0.21,2.80)比0.14(0.03,0.79)](均P<0.05);149例检出精氨酸酶mRNA阳性,溃疡病组和胃癌组精氨酸酶mRNA相对表达量均高于慢性胃炎组[0.94(0.31,1.75)、1.78(0.42,3.21)比0.38(0.08,1.14)](均P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,Trx1 mRNA筛选出高致病性Hp的曲线下面积为0.666、最佳截断值为1.95;精氨酸酶mRNA筛选出高致病性Hp的曲线下面积为0.642、最佳截断值为3.63。149例Trx1 mRNA、精氨酸酶mRNA表达的Hp阳性患者中,Trx1 mRNA+精氨酸酶mRNA串联预测溃疡病+胃癌的特异度、阳性预测值最高,误诊率最低;Trx1 mRNA+精氨酸酶mRNA并联预测溃疡病+胃癌的敏感度、阴性预测值最高,漏诊率最低。结论Trx1 mRNA和精氨酸酶mRNA联合检测可用于筛选高致病性Hp,预测Hp感染结局。

福建酸竹提取物通过调节硫氧还蛋白1减轻紫外线诱导的皮肤光损伤的研究

为预防或缓解光老化和其他紫外线引起的皮肤病提供潜在治疗试剂并为皮肤光损伤的防治寻找有效的靶目标提供理论依据,文章采用蛋白质印迹法、细胞凋亡检测、活性氧检测实验等方法对福建酸竹提取物(Bamboo extract,BEX)对紫外线照射所致光损伤皮肤所产生的作用进行研究。结果表明,BEX可通过调节硫氧还蛋白系统(Thioredoxin,TXN)以及调控其家族蛋白硫氧还蛋白1(TXN1),对短波紫外线UVB诱导的光损伤皮肤有保护作用。

血清硫氧还蛋白1及纤维胶凝蛋白3水平与老年高血压脑出血患者血肿周围水肿和预后的关系研究

目的探讨血清硫氧还蛋白1(Trx1)、纤维胶凝蛋白3(ficolin-3)水平与老年高血压脑出血(HICH)患者血肿周围水肿(PHE)和预后的关系。方法收集362例老年HICH患者为观察对象,比较不同PHE严重程度组(轻度组195例,中度组112例,重度组55例)血清Trx1和ficolin-3水平,并比较死亡组(64例)和生存组(298例)血清Trx1和ficolin-3水平。绘制血清Trx1和ficolin-3水平预测老年HICH患者30 d死亡的ROC曲线。采用Logistic回归分析老年HICH患者30 d死亡的影响因素。分别以ROC曲线中血清Trx1和ficolin-3水平的最佳截断值将患者进行分组,进行不同血清Trx1和ficolin-3水平组老年HICH患者的30 d生存分析。结果不同PHE严重程度组患者血清Trx1和ficolin-3水平存在显著差异[Trx1水平:轻度组(3644.05±725.37)ng/L,中度组(3869.67±804.17)ng/L,重度组(4386.24±873.74)ng/L;ficolin-3水平:轻度组(7892.80±1412.34)μg/L,中度组(7516.24±1459.87)μg/L,重度组(6605.00±1311.08)μg/L],随着疾病严重程度增加,血清Trx1水平升高,ficolin-3水平降低(P<0.05)。死亡组患者血清Trx1水平高于生存组[(4404.22±814.19)ng/L vs(3702.57±756.74)ng/L],ficolin-3水平低于生存组[(6635.03±1152.38)μg/L vs(7783.72±1458.22)μg/L,P<0.05]。ROC分析显示,血清Trx1和ficolin-3水平预测老年HICH患者30 d死亡的AUC分别为0.762和0.743(P<0.05)。Logistic回归分析显示,出血量(OR=3.048)、破入脑室(OR=7.575)、PHE(OR=3.525,19.233)、高水平Trx1(OR=3.893)和低水平ficolin-3(OR=6.697)是老年HICH患者30 d死亡的危险因素(P<0.05)。生存分析显示,高水平Trx1组患者的30 d生存率低于低水平Trx1组,低水平ficolin-3组患者30 d生存率低于高水平ficolin-3组(χ2=48.483、54.112,P<0.05)。结论血清Trx1和ficolin-3水平与老年HICH患者PHE严重程度和预后密切相关,高水平血清Trx1和低水平ficolin-3是患者30 d死亡的独立危险因素,二者可作为该病患者死亡的良好预测指标。

血清硫氧还蛋白1对判断脑外伤严重程度及其预后的价值

目的分析血清硫氧还蛋白1(thioredoxin 1,Trx1)水平同脑外伤病情严重程度和预后的关系。方法选择东莞市松山湖中心医院84例脑外伤患者,按照格拉斯哥昏迷指数(Glasgow coma scale,GCS)将其分为A组(重度,GCS为3~8分,n=29)、B组(中度,GCS为9~12分,n=31)、C组(轻度,GCS为13~15分,n=24),所有患者随访后均按照死亡和持续性神经退行性病变发生情况分为D组和E组,分别在入院时、30 d后测量患者的脑白质FA值和血清Trx1指标,比较各组间上述指标,分析血清Trx1对患者预后的影响。结果C组入院时的血清Trx1水平、脑白质各区FA值均比A组、B组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。入院30 d后各组的脑白质各区FA值均比入院时明显增加,差异具统计学意义(P<0.05),C组30 d后的脑白质各区FA值和血清Trx1水平均比A组、B组明显增加,差异具统计学意义(P<0.05);D组的血清Trx1水平比E组的明显降低,差异具统计学意义(P<0.05),血清Trx1水平同患者死亡和持续性神经退行性病变的发生相关(r=0.824,P<0.05);Trx1水平同患者右侧扣带束、右侧内囊前肢、左侧扣带束、胼胝体压部FA值相关(r分别为0.841,0.759,0.710,0.708,P<0.05)。结论Trx1同脑外伤患者的病情严重程度密切相关,可预测患者脑白质的恢复和预后情况。

颅脑外伤患者血清调节激活正常T细胞表达和分泌的细胞因子、神经元特异性烯醇化酶和硫氧还蛋白1的变化及意义

目的 观察颅脑外伤(TBI)患者血清调节激活正常T细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、硫氧还蛋白1(Trx1)变化并分析其意义。方法 2018年2月至2020年2月我院收治的重型TBI患者162例(观察组),记录其入院格拉斯哥昏迷指数(GCS)评分,住院期间主要不良事件发生情况,患者30 d存活情况。另选择同期体检健康者56例作为对照组。测定两组血清RANTES、NSE、Trx1水平,Pearson相关性分析法分析血清RANTES、NSE、Trx1与GCS评分的关系;受试者工作特征(ROC)曲线评估血清RANTES、NSE、Trx1对TBI预后的预测效能。结果 观察组血清RANTES、NSE高于对照组,Trx1水平低于对照组(P<0.05);观察组入院GCS评分为(5.07±1.23)分,与血清RANTES、NSE呈负相关(r=-0.306、-0.344,P<0.05),与Trx1水平呈正相关(r=0.359,P<0.05)。发生不良事件的患者血清RANTES、NSE高于未发生者,Trx1低于未发生者(P<0.05);三者联合对TBI患者预后预测的曲线下面积为0.906,敏感度为86.25%,特异度为81.74%。结论 TBI患者早期血清RANTES、NSE水平增加,Trx1水平明显减少。血清RANTES、NSE、Trx1水平与TBI病情有关。三者联合检测能较好的预测TBI患者短期预后。

血清硫氧还蛋白1对颅脑损伤患者预后的预测价值研究

目的研究血清硫氧还蛋白1(Trx1)对颅脑损伤(TBI)患者预后的预测价值。方法回顾性选择2016年3月至2019年10月期间东莞市松山湖中心医院收治的67例TBI患者作为TBI组,同期体检的80例健康志愿者作为对照组。检测2组对象血清Trx1的含量。TBI组患者随访6个月,根据格拉斯哥预后评分分为1~3分的预后良好组和4~5分的预后不良组,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Trx1对TBI患者预后的预测价值,采用logistic回归分析TBI患者预后的影响因素。结果TBI组患者血清Trx1的含量(2.36±0.49)ng/mL,明显低于对照组(5.12±1.14)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05),且预后不良患者的血清Trx1含量(2.22±0.33)ng/mL,明显低于预后良好患者(2.66±0.63)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析显示,血清Trx1含量对TBI患者的预后具有预测价值、曲线下面积为0.7212。Logistic回归分析显示,GCG评分、APACHEⅡ评分、合并脑疝、Trx1是TBI患者预后的影响因素。结论TBI患者血清Trx-1含量减少且与预后不良有关。

低温通过冷诱导RNA结合蛋白/硫氧还蛋白1通路减轻心肺复苏后神经元氧化应激损伤

目的探讨心跳骤停心肺复苏后脑损伤(BIC)模型中,治疗性低温(TH)对神经元氧化应激损伤的作用及相关机制。方法雄性SD大鼠60只,7~10周,体重280~320 g。采用随机数字表法分为五组:假手术组(S组)、BIC组、低温治疗组(TH组)、沉默冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)后低温治疗组(THC组)和空载后低温治疗组(THN组),每组12只。采用经食管连续快速起搏诱发室颤,心跳骤停4 min后,行心肺复苏术(CPR),建立BIC模型。于BIC模型制备后1 d,采用免疫荧光法检测海马活性氧簇(ROS)荧光强度,Western blot法检测海马CIRP、硫氧还蛋白1(Trx1)、磷酸化凋亡信号调节激酶1(ASK1)蛋白含量及其下游p38和c-Jun N-末端激酶(JNK)磷酸化含量。于BIC模型制备后3 d,采用原位末端标记(TUNEL)法检测海马神经元凋亡细胞百分比。结果与S组比较,BIC模型制备后1 d BIC组ROS荧光强度明显升高,CIRP含量明显降低,p-ASK1、p-p38含量明显升高;TH组和THN组ROS荧光强度均明显升高,CIRP含量明显升高,p-JNK含量明显降低;THC组ROS荧光强度明显升高,CIRP、Trx1含量明显降低,p-ASK1、p-p38含量明显升高(P<0.05)。与BIC组比较,BIC模型制备后1 d TH组和THN组ROS荧光强度明显降低,CIRP、Trx1含量明显升高,p-ASK1和p-JNK含量明显降低;TH组p-p38含量明显降低;THC组ROS荧光强度明显降低,p-ASK1和p-p38含量明显升高(P<0.05)。与THC组比较,BIC模型制备后1 d TH组和THN组ROS荧光强度明显降低,CIRP、Trx1含量明显升高,p-ASK1、p-p38和p-JNK含量明显降低(P<0.05)。与S组比较,BIC模型制备后3 d BIC组、TH组、THC组和THN组神经元凋亡细胞百分比明显升高(P<0.05)。与BIC组比较,BIC模型制备后3 d TH组、THC组和THN组凋亡细胞百分比明显降低(P<0.05)。与THC组比较,BIC模型制备后3 d TH组和THN组凋亡细胞百分比明显降低(P<0.05)。结论TH可以减轻BIC模型制备后神经元氧化应激反应以及减少神经元凋亡,沉默CIRP后该作用减弱,显示TH复苏神经元的机制可能与激活CIRP/Trx1/ASK1通路有关。

硫氧还蛋白1/硫氧还蛋白相互作用蛋白对腹膜间皮细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体的调控及机制研究

目的探究硫氧还蛋白1(Trx1)/硫氧还蛋白相互作用蛋白(Txnip)对腹膜间皮细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体的调控作用及可能机制。方法前瞻性采用随机数字表法将人腹膜间皮细胞(HMrSV5)分为三组,一组采用10%胎牛血清(FBS)培养液(空白组)、一组采用转染小干扰RNA(siRNA)阴性对照的4.25%腹膜透析液(PDS)与10%FBS培养液(si-NC组),一组采用转染靶向沉默Txnip siRNA的4.25%PDS与10%FBS培养液(si-Txnip组)。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫印迹法(WB)测定各组Trx1、Txnip、NLRP3 mRNA与蛋白表达水平;采用MTT法测定各组培养不同时间点细胞增殖情况;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定上清液白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平和半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)活性。结果si-NC组、si-Txnip组培养1、2、3 d HMrSV5增殖活性均低于空白组(P<0.05);并且si-Txnip组培养1、2、3 d HMrSV5增殖活性均高于si-NC组(0.402±0.009比0.372±0.010、0.554±0.016比0.482±0.008、0.700±0.013比0.590±0.010),差异有统计学意义(P<0.05)。si-NC组、si-Txnip组Txnip、NLRP3 mRNA表达均高于空白组(P<0.05);并且si-Txnip组Txnip、NLRP3 mRNA表达低于si-NC组(1.43±0.32比2.80±0.43、2.38±0.35比3.42±0.40),si-Txnip组Trx1 mRNA表达低于空白组、高于si-NC组(2.24±0.35比3.50±0.38、1.18±0.23),差异有统计学意义(P<0.05)。si-NC组、si-Txnip组Txnip、NLRP3蛋白表达均高于空白组(P<0.05);si-Txnip组Txnip、NLRP3蛋白表达低于si-NC组(0.453±0.108比0.754±0.116),si-Txnip组Trx1蛋白表达低于空白组、高于si-NC组(0.514±0.112比0.753±0.125、0.297±0.010),差异有统计学意义(P<0.05)。si-NC组、si-Txnip组上清液IL-1β、IL-6水平均高于空白组[(0.45±0.07)、(0.35±0.06)μg/L比(0.23±0.05)μg/L,(3.00±0.38)、(2.32±0.30)μg/L比(1.95±0.34)μg/L],si-Txnip组上清液IL-1β、IL-6水平低于si-NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。si-Txnip组上清液caspase-1活性小于si-NC组、大于空白组[(0.87±0.26)U比(1.65±0.40)、(0.62±0.20)U],差异有统计学意义(P<0.05)。结论Trx1/Txnip系统中下调Txnip能明显抑制腹膜间皮细胞NLRP3炎症小体及功能。

精胺氧化酶靶向调控硫氧还蛋白还原酶1促进结肠癌恶性进展

目的探讨精胺氧化酶(spermine oxidase,SMOX)靶向调控硫氧还蛋白还原酶1(thioredoxin reductase 1,TR1)对结肠癌恶性进展的影响。方法收集2018年9月至2019年6月就诊于南京市第一医院的30例结肠癌患者的结肠癌组织及其癌旁组织。采用免疫组织化学染色检测组织中的SMOX表达。采用Western blot实验检测结肠癌细胞株(HCT116、SW480、DLD-1、SW620、Caco-2、HCT-15、T84和LS123)和正常结肠细胞株NCM460的SMOX表达。利用基因表达谱互作分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)网站查询SMOX在结肠癌组织与癌旁组织中的表达情况和SMOX表达水平与患者总生存的关系。采用Western blot实验检测上述细胞和组织中代谢产物亚精胺合成酶的水平。利用2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)结合流式细胞术和组织免疫荧光实验分别检测结肠细胞和组织中代谢副产物活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。选取SMOX表达水平最高的结肠癌细胞株HCT116和SW480为实验对象,构建慢病毒载体,用PLKO.1-puro-shCtrl、PLKO.1-puro-shSMOX、PLKO.1-puro-shSMOX+pcDNA3.1和PLKO.1-puro-shSMOX+pcDNA3.1-TR1分别转染细胞,分别为shCtrl组、shSMOX组、shSMOX+pcDNA3.1组和shSMOX+TR1组。Western blot实验检测HCT116和SW480细胞shCtrl组和shSMOX组SMOX与TR1的表达情况,以及HCT116细胞shSMOX+pcDNA3.1组和shSMOX+TR1组的TR1表达水平。利用细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测细胞增殖活力。碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染结合流式细胞术检测肿瘤细胞周期变化。PI/异硫氰酸荧光素-膜连蛋白(PI/fluorescein isothiocyanate-Annexin V,PI/FITC-Annexin V)双染结合流式细胞术检测细胞凋亡/坏死情况。Transwell体外侵袭实验分析细胞侵袭能力。shCtrl组、shSMOX组、shSMOX+pcDNA3.1组和shSMOX+TR1组的HCT116细胞稀释至浓度为1×107个/mL的细胞悬液分别向裸鼠右侧腋窝皮下注射0.2 mL细胞悬液,建立裸鼠结肠癌移植瘤模型。4周后处死裸鼠,分离组织,剥取肿瘤称重。运用免疫组织化学染色检测裸鼠结肠肿瘤组织中Ki-67阳性细胞数。结果SMOX在8种结肠癌细胞株和结肠癌组织中的表达水平均高于正常结肠细胞株和癌旁组织,且与不良预后有关(均P<0.05)。与正常结肠细胞和癌旁组织比较,8种结肠癌细胞和结肠癌组织中的代谢产物亚精胺合成酶和ROS水平随SMOX的高表达同步升高(均P<0.05)。与shCtrl组比较,shSMOX组G_(0)/G_(1)期细胞数目增多,PI/Annexin V双阳性细胞数目增加,细胞增殖活性降低,侵袭数量减少,SMOX和TR1表达水平降低(均P<0.05)。与shSMOX组和shSMOX+pcDNA3.1组比较,shSMOX+TR1组TR1表达水平升高,S期细胞数目增多,PI/Annexin V双阳性细胞数目减少,细胞增殖活性升高(均P<0.05)。裸鼠结肠癌移植瘤模型显示,注射后14 d,与shCtrl组比较,shSMOX组和shSMOX+pcDNA3.1组肿瘤体积和重量均降低,结肠肿瘤组织中Ki-67阳性细胞数减少,而shSMOX+TR1组肿瘤体积、重量和结肠肿瘤组织中Ki-67阳性细胞数则较shSMOX+pcDNA3.1组增加(均P<0.05)。结论SMOX在结肠癌细胞和组织中表达上调,可能通过靶向提高TR1的表达促进细胞周期运转,抑制细胞凋亡,促进细胞增殖和侵袭能力及肿瘤生长,进而促进结肠癌恶性进展。

硫氧还蛋白-1与血管性认知功能障碍的相关性

目的:探讨硫氧还蛋白-1(Srxn1)在血管性认知功能障碍(VCI)大鼠模型发病过程中的变化。方法:将52只健康雄性SD大鼠随机分为5组,对照组6只不予任何处理;假手术组6只仅分离双侧颈总动脉;13只为常规手术组,运用改良2-V0法结扎双侧颈总动脉;Srxn1-siRNA手术组(13只)和核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)-siRNA手术组(14只)均采用改良2-V0法结扎双侧颈总动脉,术前24 h于侧脑室分别注射Srxn1、Nrf2基因干扰片段,建立VCI大鼠模型;根据Morris水迷宫定位航行实验评价各组大鼠空间学习记忆能力;检测各组脑脊液中超氧化物歧化酶(SOD)活力、脑脊液丙二醛(MDA)含量、Srxn1浓度,海马组织中Srxn1、Nrf2蛋白表达水平。结果:常规手术组大鼠的逃避潜伏期长于对照组,单位时间内穿越平台的次数、平台象限滞留的时间较对照组大鼠减少,差异有统计学意义(P<0.05);第4、5天,Srxn1-siRNA手术组及Nrf2-siRNA手术组大鼠逃避潜伏期长于常规手术组,单位时间内穿越平台的次数、平台象限滞留的时间较常规手术组减少,差异有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠脑海马组织中Srxnl、Nrf2蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,假手术组脑脊液SOD活力值、Srxn1浓度差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Srxn1的表达水平变化可能与VCI的发病关系不密切。