超声与碱性氨基酸联合改善大豆分离蛋白功能

为考察超声和碱性氨基酸(BAA)联合处理(简称联合处理)对大豆分离蛋白(SPI)结构和功能性质的影响,对比了超声或BAA单独处理对SPI表面疏水性和荧光光谱、Zeta电位、平均粒径、游离巯基、总巯基、相对溶解度、二级结构、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、乳化性、乳化稳定性进行了测试,并对其中部分测定结果进行了相关性分析。结果表明,联合处理后SPI的乳化性和相对溶解度均比BAA单独处理显著提高(差异显著性P<0.05);联合处理提升了SPI表面电荷量,增强了粒子之间的静电斥力;使更多的疏水基团暴露在极性环境中,改善了SPI的亲水/疏水基团比例,有利于提升SPI乳化能力;使游离巯基暴露量增加,总巯基含量下降;有利于SPI向有序分子结构转变。超声或BAA单独处理和联合处理均不会引起SPI亚基结构的改变。表面疏水性与相对溶解度和乳化性的相关度分别为0.960和0.861,呈极显著正相关性,Zeta电位与相对溶解度的相关度为–0.974,呈极显著负相关性。

碱性氨基酸调控对牦牛肉糜制品品质特性的影响

为探究氨基酸种类及其添加量对牦牛肉糜制品品质特性的影响,并得到能改善牦牛肉糜制品品质的最佳氨基酸类别及添加量,该文以添加不同比例L-赖氨酸(Lys)、L-精氨酸(Arg)和L-组氨酸(His)的牦牛肉糜为试验对象,测定分析牦牛肉糜的食用品质、乳化特性、流变性及微观结构等指标。结果表明,0.60%(质量分数)的Lys、Arg、His能增加牦牛肉糜的色泽、保水性、质构特性,以及牦牛肉糜的乳化稳定性和流变性(储能模量和损耗模量)(P<0.05);低场核磁结果显示,Lys、Arg、His能使牦牛肉糜的自由水向不易流动水或结合水转变,其中以Lys的效果最好;扫描电子显微镜显示Lys、Arg、His能使牦牛肉糜的微观结构从结构松散、空隙较大转变为结构致密、空隙较小,Lys和Arg的效果较好。综合来看,0.60%的Lys对牦牛肉糜的品质改善效果最佳。

碱性氨基酸对β-乳球蛋白结构和致敏性的影响

碱性氨基酸是一种自身带正电荷的小分子,可与蛋白质上的负电残基发生静电吸引,也可与蛋白侧链上某些基团构成空间位阻,进而导致蛋白质结构的改变。β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,β-Lg)可引发过敏反应,通过不同碱性氨基酸对β-Lg进行处理,研究其结构和致敏性的变化规律。以L-精氨酸(L-Arg)、L-赖氨酸(L-Lys)和L-组氨酸(L-His)单独或混合处理的β-Lg为研究对象,通过电泳、圆二色谱、光谱等技术分析其结构的变化;采用酶联免疫吸附法、细胞实验等方法评价其抗氧化活性、免疫球蛋白E(immune globulin E,IgE)/免疫球蛋白G(immune globulin G,IgG)结合能力和KU812细胞释放组胺和白介素-6的能力。结果表明,L-Arg、L-Lys和L-His处理β-Lg后,改变了β-Lg的二级结构、紫外吸收强度、内源荧光强度和表面疏水性,同时增加其ABTS阳离子自由基清除能力、降低IgE/IgG结合能力以及KU812细胞中组胺和白细胞介素-6的分泌能力。因此,L-Arg、L-Lys和L-His破坏β-Lg的构象过敏表位,降低其致敏性,顺序依次为L-His、L-Lys和L-Arg。研究结果为低致敏性牛乳制品的研发提供重要的理论指导。

鸡不同肠段碱性氨基酸转运载体mRNA表达的差异性研究

为研究肉鸡肠道不同肠段碱性氨基酸转运载体rBAT(系统b0,+)、y+LAT2(系统y+L)、CAT1(系统y+)、CAT4(系统y+)mRNA表达的差异性,以快大型黄羽肉鸡为动物模型,采集30日龄接近平均体重黄羽肉鸡的十二指肠、空肠、回肠和结直肠样品,采用相对定量RT-PCR方法研究不同肠段rBAT、y+LAT2、CAT1、CAT4mRNA表达丰度。结果显示:结直肠rBAT、y+LAT2的mRNA表达丰度极显著低于十二指肠、空肠和回肠(P<0.01),其在回肠表达丰度高于空肠、十二指肠,差异不显著(P>0.05)。结直肠CAT1 mRNA表达丰度极显著高于十二指肠、空肠和回肠(P<0.01),回肠极显著高于空肠(P<0.01),高出十二指肠27.9%(P=0.111)。结直肠CAT4 mRNA的表达丰度极显著高于其他各个肠段(P<0.01),十二指肠、空肠、回肠CAT4 mRNA的表达丰度依次降低,但相互之间无显著差异。结果表明,位于肠上皮黏膜细胞顶端的碱性氨基酸转运系统b0,+和基底部位的系统y+L转运载体mRNA的表达在肠道中的分布类似,显著区别于系统y+。

猪肠道碱性氨基酸转运载体(CAT1)mRNA表达的组织特异性和发育性变化

本研究旨在探讨不同品种猪肠道碱性氨基酸转运载体（CAT1）mRNA表达的组织特异性和发育规律。试验选取1、7、26、30、60、90和150日龄长白和蓝塘公猪各5头（同一品种同一日龄且体重接近），共70头，测体重后屠宰，采集十二指肠、空肠、回肠和结肠组织样品。以18S基因为内标，用实时荧光定量RT-PCR法（SYBR Green Ⅰ试剂盒）检测CAT mRNA在60日龄长白猪十二指肠、空肠、回肠和结肠表达的组织特异性，以及在长白和蓝塘猪不同日龄其十二指肠、空肠、回肠表达的发育性变化。结果显示：60日龄长白猪CAT1 mRNA的表达丰度从十二指肠到回肠呈逐渐升高的趋势，到结肠开始下降，回肠极显著高于其他3个肠段（P〈0．01），十二指肠最低；十二指肠和空肠CAT mRNA的表达在1～26d（即哺乳期）都呈上升的趋势，随后都开始有所下降；蓝塘猪十二指肠CAT1 mRNA的表达丰度在150d时显著低于其他各个阶段（P〈0．05），而长白猪90和150d都显著低于其他各阶段（P〈0．05）；空肠CAT1 mRNA的表达在26～150d各阶段都差异不显著，而26d显著高于1和7d（P〈0．05）；1～60d长白和蓝塘猪回肠CAT1 mRNA的表达都呈逐渐上升的趋势，60d后都显著下降（P〈0．05）。两品种猪不同日龄时十二指肠和空肠CAT1 mRNA的表达量都没有显著差异（P〉0．05）；长白猪回肠CAT mRNA表达在26d时显著高于蓝塘猪（P〈0．05）；在90和150d时，长白猪都显著低于蓝塘猪（P〈0．05），其他各阶段没有显著差异。结果说明，CAT mRNA在不同肠段及不同发育阶段的表达存在明显的差异，这可能与肠腔中氨基酸的浓度和氨基酸的需要水平及相关激素水平有关。

强酸型离子交换纤维PVF-g-SO_3H对碱性氨基酸的分离研究

研究强酸型阳离子交换纤维PVF g SO3 H对碱性氨基酸L 组氨酸和L 赖氨酸的吸附分离性能 ,并与 73 2号树脂进行比较 .结果表明PVF g SO3 H纤维不仅对单组份赖氨酸或组氨酸的吸附率比 73 2号树脂高约 1 5%～ 3 9% ,而且其洗脱率高约 1 2 5%～ 1 3 4 % ,同时对混合氨基酸的洗脱峰既强而且分辨率高 .再生后纤维和树脂的总提取率都有微小的下降 ,但纤维的再生提取率仍高于 73 2号树脂 1 0 %以上 .实验的最佳洗脱条件为 :洗脱液柠檬酸 柠檬酸钠的pH值为 4 6,填充柱长径比为 2 0 ,洗脱速率为 1mL/min .

不同浓度赖氨酸对猪肠黏膜上皮细胞碱性氨基酸转运载体mRNA表达的影响

研究通过建立猪肠黏膜上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IEC)原代培养的方法,研究了赖氨酸对体外培养的猪小肠黏膜上皮细胞碱性氨基酸转运载体mRNA表达的影响。用机械刮取初生仔猪小肠黏膜加胶原酶Ⅱ消化的方法,成功地在体外培养了新生仔猪IEC;分别用浓度为0、2、8mmol/L赖氨酸处理细胞96h,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR方法,检测了碱性氨基酸转运载体在不同处理细胞中的表达丰度。结果表明:高浓度的赖氨酸对CAT-1 mRNA的表达有上调作用,差异极显著(P<0.01),并且呈剂量依赖效应;不同浓度的赖氨酸对CAT-2 mRNA的表达影响不大,8mmol/L和2mmol/L赖氨酸组CAT-2 mRNA的表达丰度均有低于0mmol/L的趋势,但二者之间差异不显著(P>0.05);不同浓度的赖氨酸对y+LAT1 mRNA表达影响差异不显著(P>0.05);高浓度的赖氨酸可提高4F2hc mRNA的表达;0mmol/L和2mmol/L赖氨酸组4F2hc mRNA的表达丰度均低于8mmol/L,且差异显著(P<0.05);0mmol/L和2mmol/L赖氨酸组之间差异不显著(P>0.05)。

山羊y^+L碱性氨基酸转运系统转录水平表达的研究

旨在研究山羊y+L碱性氨基酸转运系统中4F2hc、y+LAT1和y+LAT2mRNA表达的组织特异性及其在不同年龄山羊小肠中的发育性表达规律。试验选取健康、体重相近的1日龄、6月龄、8月龄、10月龄、12月龄陕北白绒山羊各3只,共15只,屠宰后采集心、肝、肾、大脑、背最长肌、体侧皮肤、瘤胃、十二指肠、空肠、回肠和结肠组织,利用实时荧光定量PCR技术检测4F2hc、y+LAT1和y+LAT2mRNA在1日龄山羊上述组织和全部山羊十二指肠、空肠和回肠的表达情况。结果表明,(1)4F2hc、y+LAT1和y+LAT2mRNA在1日龄山羊多种组织中均有表达,且有一定的组织特异性。其中,4F2hc mRNA在皮肤表达量最高,y+LAT1 mRNA在回肠表达量最高,y+LAT2mRNA在大脑和回肠表达量最高。(2)4F2hc mRNA在山羊十二指肠、空肠和回肠表达量均以1日龄山羊为最高,其他月龄山羊相同肠段之间表达量无显著差异(P>0.05);y+LAT1mRNA在十二指肠、空肠和回肠表达量随山羊年龄的增加均呈现逐渐降低的趋势;y+LAT2mRNA在十二指肠、空肠和回肠表达量随山羊年龄的增加呈现先升高后降低的趋势,其在10月龄山羊表达量最高;y+LAT2mRNA在回肠表达量以1日龄山羊为最低,其他月龄山羊之间差异不显著(P>0.05)。结果说明,山羊y+L碱性氨基酸转运系统的主要转运部位为小肠;该系统中轻链y+LAT1和重链4F2hc构成的异二聚体转运蛋白可能发挥更为主要的转运作用;4F2hc和y+LAT2基因可能分别在山羊皮肤和大脑中发挥重要的生理功能;4F2hc、y+LAT1和y+LAT2基因在山羊小肠中受肠段和发育阶段的影响,具有不同的发育性表达规律。

柱前衍生反相高效液相色谱法分析碱性氨基酸

采用柱前衍生反相高效液相色谱法 (RP HPLC)测定碱性氨基酸含量 ,衍生化试剂为 2 ,4 二硝基氯苯 (CDNB) ,流动相为 0 .2mol/L的醋酸 醋酸盐缓冲液 ( pH 5 .2 0 )和甲醇的混合溶液 ,其体积配比为 75∶2 5 ,不需梯度洗脱 ;采用C18柱 ,在波长 36 0nm条件下进行紫外检测 ,碱性氨基酸质量浓度与峰面积呈良好的线性关系 ,相关系数均在 0 .98以上 ,分离效果较好 .

碱性氨基酸转运载体的研究进展

碱性氨基酸转运载体广泛分布于动物机体中,并对动物机体内氨基酸的转运和调节起着重要作用,其变异会导致胱氨酸尿症、赖氨酸尿性蛋白不耐症等疾病,引起氨基酸吸收代谢紊乱。综述了碱性氨基酸转运载体的结构、表达、功能及其调节的研究进展。

动物细胞碱性氨基酸转运载体的研究进展

氨基酸是构成生物功能大分子蛋白质的基本组成单位,是动物营养所需蛋白质的基本物质,同时参与细胞内许多重要的代谢途径。在动物机体内,氨基酸是重要的小分子极性物质,不能自由通过细胞膜,需要细胞膜上相应的转运蛋白的协助才能完成转运。

微分脉冲极谱同时测定三种碱性氨基酸的研究

应用微分脉冲极谱，在ｐＨ９．０ ＮａＢ４Ｏ７－ ＣＨ３ＣＨＯ－Ｃｏ２＋－ ＮａＯＨ组成的极谱底液，扫描电位－ ０．８０～－ １．６０ Ｖ、振幅 ２０ｍＶ、扫描速度５ｍＶ／ｓ、一滴汞周期２ｓ的条件下进行连续扫描测量三种碱性氨基酸，获得三个灵敏 度和分辨率均较高的极谱峰图。该法简便快速，稳定可靠，为测量各种蛋白质中的三种磁性氨基酸提供一种新途 径。

碱性氨基酸影响肉品品质及机理的研究进展

肉及肉制品在加工和贮藏过程中会出现食用品质下降、营养功能降低等问题,寻求能够改善肉品品质的绿色健康改良剂具有重要意义和经济价值。碱性氨基酸可以作为NaCl以及NaNO_(2)等传统食品改良剂的替代物,在工业生产与应用中受到广泛关注。作者概述了碱性氨基酸对肉品的质构、色泽、嫩度的影响,并着重从影响蛋白质的溶解度、热聚集、凝胶性、氧化稳定性、调控蛋白酶活性等方面阐述了碱性氨基酸对肉品品质的作用机理,为碱性氨基酸在肉品中的应用和推广提供参考。

鱼类碱性氨基酸需求研究进展

蛋白质是构成生命的基础物质，是由氨基酸组成的含氮高分子化合物。饲料蛋白质被鱼体摄食后，必须在鱼消化道中各种消化酶的作用下分解成氨基酸后才能被鱼体吸收利用。因此氨基酸构成决定了蛋白质的质量。已经证明，鱼类的必需氨基酸有赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、精氨酸和组氨酸10种。不同种鱼要求蛋白质中各种必需氨基酸所占的比例不同，

碱性氨基酸对大强度运动后机体的保护作用

大强度运动训练导致机体氧化应激水平的提高,机体受到氧自由基的氧化损伤的加剧,同时体液酸性增强,机体运动能力下降。探讨了氨基酸在运动后的一系列变化趋势以及其可能原因,为氨基酸作为运动营养补剂外的另外一种功能"保护作用"提供理论参考。

兔抗鸡碱性氨基酸转运载体b^(0,+)AT多克隆抗体的制备及其效价和特异性分析

为了获得兔抗鸡碱性氨基酸转运载体b0,+AT多克隆抗体,并对多克隆抗体进行特异性分析,本试验利用鸡b0,+AT cDNA全序列(GenBank登录号HQ338713)进行生物信息学分析,预测其蛋白质理化性质、跨膜区域、二级结构及抗原表位,并设计出1段抗原多肽;构建鸡pET-32a(+)-b0,+AT质粒,原核表达融合蛋白经纯化后,注射于新西兰大白兔,经3次加强免疫后,制备兔抗鸡b0,+AT多克隆抗体,并采用酶联免疫分析(ELISA)和蛋白质免疫印迹(Westernblot)技术分析其效价和特异性。结果如下:1)鸡肠道b0,+AT分子质量为53.8 ku,等电点为8.27,编码493个氨基酸,其中含33个强碱性氨基酸残基(K、R)、28个强酸性氨基酸残基(D、E)、235个疏水性氨基酸残基(A、I、L、F、W、V)、122个极性氨基酸残基(N、C、Q、S、T、Y);经推测,b0,+AT有12个跨膜螺旋结构,由32.05%α-螺旋、25.96%延伸链和41.99%无规则卷曲组成。2)成功构建了鸡pET-32a(+)-b0,+AT质粒并获得兔抗鸡b0,+AT多克隆抗体,抗体效价可达到1∶204 800,且特异性较好。3)利用制备的兔抗鸡b0,+AT多克隆抗体作为一抗,肠道组织膜蛋白为抗原,采用Western blot验证获得预期的特异性条带,一抗稀释比例为1∶4 000。结果提示,本试验成功制备了与膜蛋白b0,+AT特异性较好的多克隆抗体,同时其在鸡肠道组织中具有较好的应用效果。

鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌在低碱性氨基酸培养基中对抗菌药物的敏感性

为了探讨鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌在低碱性氨基酸培养基中对抗菌药物的敏感性,本研究利用常规培养基和低碱性氨基酸培养基,采用琼脂稀释法检测140株鲍曼不动杆菌和60株铜绿假单胞菌对亚胺培南、帕尼培南和罗美培南的最低抑菌浓度,利用K-B纸片扩散法进行药敏实验并计算敏感率。结果显示,在低碱性培养基中,铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对三种药物的最低抑菌浓度(MIC)值显著降低,铜绿假单胞菌在低碱性氨基酸培养基中对帕尼培南的敏感率显著上升,而鲍曼不动杆菌对三种药物的敏感性均显著上升。研究表明,在低碱性氨基酸培养基中,鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对帕尼培南、亚胺培南和美罗培南的敏感性有所增强,在临床检验中需考虑由培养基导致的敏感性差异。

二(2-乙基己基)磷酸铵反胶束萃取碱性氨基酸的研究

研究以二 ( 2 -乙基己基 )磷酸铵表面活性剂在磺化煤油中形成的反胶束对碱性氨基酸的萃取 .分别测定了该反胶束萃取氯化铵浓度为 1 5,2 5,3 5和 4 5mol/L的水溶液中的碱性氨基酸的分配系数 ,结果表明该反胶束具有优良的萃取性能 ,可从无机盐浓度更高的氨基酸水溶液中萃取出氨基酸 .对 pH值及氯化铵浓度对萃取的影响进行了讨论 .

壳聚糖碱性氨基酸衍生物的合成及抑菌活性研究

利用接枝反应,采用碱性氨基酸修饰壳聚糖,制备壳聚糖赖氨酸衍生物、壳聚糖精氨酸衍生物、壳聚糖组氨酸衍生物。通过红外(FT-IR)、核磁(~1H-NMR)、元素分析(EA)对其进行表征,并研究了不同壳聚糖氨基酸衍生物的抑菌活性。结果表明,壳聚糖赖氨酸衍生物、壳聚糖精氨酸衍生物、壳聚糖组氨酸衍生物、壳聚糖对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为320、160、320、640μg/mL,对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为320、320、320、640μg/mL,三种壳聚糖氨基酸衍生物的抑菌活性均明显高于未修饰壳聚糖。通过引入碱性氨基酸增加壳聚糖的正电荷有利于提高其抑菌活性。

碱性氨基酸调控肌原纤维蛋白加工性能及肉品品质研究进展

随着《“健康中国2030”规划纲要》的实施以及消费者健康饮食观念的不断增强,“低盐无磷”健康肉制品逐渐成为肉制品行业未来的发展趋势。但是单纯减少NaCl以及多聚磷酸盐的添加量会严重影响产品的得率和品质。因此,寻求NaCl以及多聚磷酸盐的绿色健康替代物具有重要意义。近年来,碱性氨基酸——精氨酸、赖氨酸及组氨酸在肉制品行业中作为NaCl以及多聚磷酸盐替代物的研究与应用受到了广泛关注。本文综述了国内外有关碱性氨基酸对肌原纤维蛋白结构、溶解度、乳化性及凝胶性的调控作用及其内在机制的最新研究成果,并概述了碱性氨基酸对肉品品质(色泽、保水性、质构特性、氧化稳定性)的作用机理,以期为碱性氨基酸在肉类工业中的后续研究和实际应用提供理论依据。