杂交玉米及亲本种子碱溶蛋白电泳鉴定

用乳酸 -聚丙烯酰胺凝胶电泳对玉米不同杂交种及其亲本种子碱溶蛋白进行分析 ,结果表明 :玉米碱溶蛋白在蛋白质组成上存在丰富的多态性 ,各杂交种和自交系的电泳谱带差异明显 ,可视为各自的“特征”指纹 ,通过指纹分析能有效地将各供试品种区分开来。因此 。

鲢鱼鱼糜采肉下脚料碱溶蛋白的制备工艺研究

以鲢鱼鱼糜采肉下脚料为原料,采用酸碱法(pH-shifting)制备碱溶蛋白,主要探讨原料的储藏、提取pH、提取时间、提取温度、提取料液比以及沉淀pH对碱溶蛋白制备工艺的影响。结果表明,最佳提取pH为12.0,提取时间为15min,提取温度为5℃,采用两段式提取、提取料液比为1∶6(3+3),最佳沉淀条件为pH5.5,在此条件下,碱溶蛋白回收率约为82%。原料的不同处理对碱溶蛋白的制备无显著影响。

甲鱼碱溶蛋白肽的分离及抗肿瘤活性研究

为了获得具有抗肿瘤活性的肽段,研究以水解度为评价指标,评价了4种蛋白酶(酸性蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶)对甲鱼碱溶蛋白酶解效果的影响,确定中性蛋白酶为最适酶。用酶解、凝胶色谱制备甲鱼碱溶蛋白肽,用MTT肿瘤抑制实验评价抗肿瘤能力,并用HPLC测定高活性肽段的分子质量分布。结果显示:甲鱼碱溶蛋白经中性蛋白酶酶解获得较高水解度的产物,水解度为14.47%。经Sephadex G-25分离获得分子质量184~4 588 u的小分子肽,其具有较高的抗肿瘤活性,IC_(50)为32.26μg/m L。

碱溶性东北山核桃蛋白的提取及SDS-PAGE分析

以经超临界CO2去除油脂后的东北山核桃仁渣为原料,利用碱提法对山核桃渣进行蛋白质提取,考察NaOH溶液浓度、料液比、提取温度、提取时间4个因素对蛋白提取率的影响,并在单因素试验的基础上设计正交试验,确定碱溶性山核桃仁蛋白最佳提取条件和其等电点。同时对碱溶性山核桃蛋白进行SDS-PAGE凝胶电泳分析。结果表明:当提取液NaOH浓度0.02mol/L、料液比1:30(g/mL)、提取温度50℃、提取时间1.5h时,碱溶性山核桃蛋白提取率最大可达88.05%,其等电点为4.5。SDS-PAGE分析结果表明,碱溶性山核桃蛋白分子质量主要分布在100、60、36kD和20kD四个区域。

亚侧耳碱溶性多糖蛋白的抗肿瘤作用

亚侧耳碱溶性多糖蛋白的抗肿瘤作用曹瑞敏赵忠伟叶菲苏士杰（白求恩医科大学基础医学院长春１３００２１）１材料药物亚侧耳子实体由东北师范大学李茹光教授鉴定为Ｈｏｈｅｎｂｕｅｈｅｌｉａｓｅｒｏｔｉｎａ（Ｓｃｈａｒｄ．Ｆｒ．）Ｓｉｎｇ。动物ＢＡＬＢ／Ｃ纯系小鼠...

僵蚕碱溶性蛋白质的提取工艺优化及指纹图谱分析

建立稀碱法提取僵蚕蛋白质的最佳工艺,并对其进行相应SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)指纹图谱分析。单因素考察缓冲液pH值、液料比、提取时间和提取温度对僵蚕碱溶性蛋白质提取率的影响,随后以Box-Behnken组合设计响应面优化,对试验结果进行回归拟合分析,获得上述因素对碱溶性蛋白质提取率的量化关系,确定最佳提取条件,并对提取的碱溶性蛋白质进行SDS-PAGE指纹图谱分析。结果表明最佳提取工艺条件为:Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷盐酸盐)缓冲液pH值8.0、液料比58mL∶1g,提取温度为40℃,提取时间为205min,此时碱溶性蛋白质提取率可达2.29%。SDS-PAGE指纹图谱结果表明僵蚕碱溶性蛋白质含有29.85、27.28ku2条迁移率相近的高丰度特征性条带,分别占总蛋白量的36.37%、32.65%,同时还有78.8、69ku较高丰度特征性条带,该指纹图谱具有种属特异性。本研究建立了僵蚕碱溶性蛋白质的最佳提取工艺条件,所得SDS-PAGE指纹图谱可为僵蚕药材的分子鉴定提供参考依据。

金钱白花蛇碱溶性蛋白质的提取工艺优化及其表征

目的:优化金钱白花蛇碱溶性蛋白质(bmASP)的提取工艺,并对其进行SDS-PAGE、HPLC、FTIR表征。方法:在单因素试验基础上,以提取pH值、料液比、提取时间和提取温度为自变量,bmASP提取率为因变量,基于Box-Behnken组合设计对提取工艺进行响应面优化,对提取产物进行HPLC、FTIR、SDS-PAGE分析。结果:最佳提取工艺条件为:提取pH值为8.0,料液比为1∶40(g/mL),提取时间为5.0 h,提取温度为45℃,bmASP提取率为5.96%。HPLC结果表明bmASP的保留时间为2.998、4.745、4.977、5.672 min;FTIR结果表明bmASP在3 551.45、3 575.95、3 413.06 cm^(-1)等处有特征吸收峰;SDS-PAGE指纹图谱结果表明bmASP分子量介于18.4~116 kDa,其中18.4~19.5 kDa、23.38~25.11 kDa、32.53~38.64 kDa、58.62~65.96 kDa的蛋白质含量丰富。结论:bmASP提取工艺的响应面模型可靠有效,结果稳定,可为金钱白花蛇药效物质基础的研究、资源开发利用及真伪鉴定提供实验依据。

金鲳鱼加工副产物中碱溶性蛋白的提取及性质测定

为了实现对金鲳鱼加工副产物的高值化利用,本研究采用碱提法,通过单因素及正交试验确定了金鲳鱼加工副产物中碱溶性蛋白提取的最佳工艺,并对碱溶性蛋白的相关性质进行了分析测定。结果表明:碱溶性蛋白的最佳提取工艺条件为:碱提浓度0.3 mol/L、料液比1∶8 g/mL、碱提温度50℃、碱提时间70 min,碱溶性蛋白提取率达到83.71%;碱溶性蛋白的等电点为4.6,pH9.0时溶解度最大,吸油性为5.5 mL/g,吸水性为1.85 mL/g,乳化性为43.44%,起泡性为75.33%,起泡稳定性为37.5%;氨基酸组成分析表明,其必需氨基酸(除色氨酸外)含量为47.84%,鲜味氨基酸含量为34.23%;SDS-PAGE显示,碱溶性蛋白分子量主要分布在90、70、65、44.3 kDa的4个条带区域。本研究可以为金鲳鱼副产物的深加工提供一定的技术基础。

蚕蛹不同溶解性蛋白的营养学评价及酶解物对血管紧张素转换酶的抑制活性

分别对缫丝蚕蛹中的水溶性和碱溶性蛋白组分进行营养学评价,为高效开发蚕蛹食品提供依据;通过蚕蛹蛋白酶解产物对血管紧张素转换酶(ACE)的体外抑制活性试验,探讨蚕蛹蛋白作为天然降压药品原料的利用潜力。营养学分析表明:蚕蛹蛋白水溶性和碱溶性组分中的氨基酸种类齐全,且必需氨基酸占总氨基酸的质量分数分别为41.2%和39.2%,明显高于WHO推荐的氨基酸组成模式(>36%);蚕蛹水溶性蛋白有第1～第4限制性氨基酸(依次为亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸和苏氨酸),而蚕蛹碱溶性蛋白仅有第1和第2限制性氨基酸(依次为蛋氨酸+胱氨酸、异亮氨酸),2种溶解性蛋白的生物效价均较低,在开发利用中,应补充限制性氨基酸或与其它蛋白搭配使用,以提高产品的营养价值。体外ACE抑制活性试验表明,蚕蛹的水溶性蛋白和碱溶性蛋白的碱性蛋白酶酶解产物均具有较强的ACE抑制活性,IC50值分别为0.121、0.113 mg/mL,2种蛋白有可能成为降血压肽生产原料。

碱与热处理对大米蛋白质结构与功能性质的影响

以大米蛋白质为原料,研究碱处理和热处理对大米蛋白质结构与功能性质的影响。研究结果发现:经不同pH处理40 min后,大米蛋白质功能性质均有一定程度改善,其中经pH 12. 0/40 min处理的大米蛋白质溶解性、乳化性与乳化稳定性、起泡性分别提高了2. 46,2. 85,1. 12,2. 51倍;同时,> 100 kDa的组分含量减少,此时蛋白质分子中的α-螺旋、β-转角含量分别减少了26. 99%,10. 54%,而β-折叠、无规卷曲含量分别增加了14. 65%,20. 23%。采用50~90℃/40 min的条件对大米蛋白质进行热处理,其结构性质和溶解性、表面疏水性皆无明显变化;但乳化性与乳化稳定性、起泡性则随着热处理温度升高而提高,90℃热处理可达到最大值,分别是原大米蛋白质的2. 41,1. 09,1. 62倍。结果表明经单独碱处理、热处理后,大米蛋白质的结构发生了改变,但溶解度改善效果不明显。

不同提取方法提取的啤酒糟蛋白质氨基酸组成比较

应用全自动氨基酸分析仪分别对啤酒糟原料、啤酒糟碱溶蛋白和啤酒糟醇溶蛋白进行氨基酸组成及含量分析。结果表明,两种提取方法对啤酒糟蛋白和氨基酸的提取具有组分选择性:碱提法主要提出啤酒糟麦谷蛋白,而醇溶法主要提出麦醇溶蛋白。相对于啤酒糟原料和啤酒糟碱溶蛋白,啤酒糟醇溶蛋白中的氨基酸组成特征更明显,具有显著的B类麦醇溶蛋白的特征氨基酸含量:Glu31.18%,Pro 18.92%,Lys1.8%。

七子花叶片蛋白组分含量动态分析

对七子花叶片中5种蛋白组分含量的动态变化进行了研究。结果表明:七子花叶片的总蛋白含量变化曲线呈"W"型,叶片生长初期含量基本保持稳定,5月中旬含量开始下降,并且下降幅度较大,6月中旬达一低值后,其含量迅速上升,到7月中旬(盛花期)达一峰值,接着其含量下降,到8月中旬达到最低,后又上升直至落叶时达到最高值。水溶蛋白含量季节性变化呈"低-高-低-高",在叶生长初期上升,峰值出现在5月中旬,以后逐渐下降,到7月中旬达最低值,之后缓慢上升,落叶前达到最高值。盐溶蛋白在叶生长初期迅速下降,到5月中旬达最低值,后一直呈上升趋势。醇溶蛋白与碱溶蛋白在叶生长初期有所下降,至6月中旬达到最小值,以后迅速上升,至7月中旬达到高峰后大幅度下降,在落叶前又有所回升。杂蛋白在叶生长初期迅速下降,至5月中旬达到最低值后,基本趋于稳定。推测水溶蛋白、盐溶蛋白和醇溶蛋白、碱溶蛋白与七子花的展叶和开花生理过程有密切关系。

瓜蒌子副产物中蛋白质的提取及其分子性质研究

采用分步提取法从瓜蒌子提油副产物中提取蛋白质,并对其分子性质进行分析。结果显示：瓜蒌子提油副产物中主要包含盐溶蛋白（提取率达55.3%）和碱溶蛋白（提取率为15.8%）,其中碱溶蛋白质分子上可能连接有色素基团,导致其溶液为深褐色;利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定两种蛋白质的亚基分子量分布,结果表明瓜蒌子中盐溶蛋白与碱溶蛋白的亚基分子量主要分布在10-32kDa;体积排阻色谱分析显示碱溶蛋白中分子质量大于106 Da的蛋白质聚集体含量较盐溶蛋白多;电子扫描显微镜观察发现盐溶蛋白微观上为直径2-5μm的规则球状,而碱溶蛋白为结构致密的聚集体。

大麦蛋白质的组成研究

利用SDS-PAGE电泳技术,对酿酒原料大麦的蛋白质组成进行了系统的分析。研究发现,不同品种大麦的水溶、盐溶及碱溶蛋白质组成基本相同,而醇溶蛋白质存在显著差异,醇溶蛋白质分子量区别主要在30000～45000Da之间,因此醇溶蛋白质可作为品种鉴定的依据。

南瓜属4个栽培种种子蛋白及电泳图谱的比较

对南瓜属4个栽培种中的11个品种进行种子蛋白质含量及碱溶蛋白SDS-PAGE分析.结果显示,蛋白质含量在4栽培种间呈现一定的差异,在种内品种间则比较接近;非还原与还原条件下,4栽培种间蛋白谱带均有差异,可将各栽培种区别开,其中以还原条件下区别更为明显.栽培品种日本南瓜同时显示出中国南瓜和印度南瓜的特征条带,推测可能是2个种的种间杂交种.

超临界CO_2杀灭大肠杆菌过程中菌体蛋白的变化

通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,结合超临界CO2对大肠杆菌的杀菌曲线,研究超临界压力、温度和处理时间对大肠杆菌菌体蛋白的影响。结果表明:超临界CO2在杀灭大肠杆菌过程中,可显著降低菌体碱溶性(pH8.0)蛋白的溶解性,但对菌体总蛋白含量和种类没有影响;37℃下超临界CO2处理大肠杆菌30min,压力为10MPa时,大肠杆菌存活率为2.8%,菌体碱溶性蛋白的溶解性显著降低,当压力增加到50MPa时,大肠杆菌存活率和碱溶性蛋白溶解性变化不明显;超临界温度和处理时间对菌体碱溶性蛋白溶解性的影响与大肠杆菌在超临界CO2中的存活趋势基本一致,随处理时间的延长和温度的增加大肠杆菌存活率逐渐降低到0,碱溶性蛋白溶解性逐渐降低,直至部分蛋白带消失,但菌体总蛋白含量和种类并没有明显变化;升高温度比增加压力更能显著地导致菌体碱溶性蛋白变性,溶解性下降。

等电点沉淀结合凯氏定氮法测定市售纯牛奶中酪蛋白的含量

在酪蛋白测定方法的前期研究基础上,对等电点沉淀法进行改进,结合凯氏定氮法对市售纯牛奶中的乳蛋白组分进行了测定。确定了制备纯品酪蛋白的最佳洗涤剂和洗涤次数,NaOH溶液碱复溶酪蛋白等电点沉淀物最佳添加范围。实验结果表明,改进后的等电点沉淀方法,测定酪蛋白质量分数都在74%~76%。pH4.6HAc-NaAc缓冲溶液作为洗涤剂,对于体系pH的维持更加稳定。仅沉淀的处理方式可以将大部分乳清蛋白和酪蛋白进行分离。NaOH溶液最佳添加范围是25mL^35mL。改进后的等电点沉淀结合凯氏定氮法高效准确,简单易行,重现性好,可以用于纯牛奶中酪蛋白的掺假鉴定。

乙醇梭菌蛋白的分级提取工艺优化

通过超声辅助Osborne分级法对新型蛋白质源乙醇梭菌蛋白进行分级提取,得到水溶性蛋白、盐溶性蛋白、醇溶性蛋白和碱溶性蛋白4种蛋白质,蛋白含量的大小顺序为碱溶性蛋白>水溶性蛋白>盐溶性蛋白>醇溶性蛋白,对其中含量最多的碱溶性蛋白的提取条件进行优化,结果表明,碱溶性蛋白的最佳提取条件为提取温度50℃、料液比1∶35(g/mL)、提取时间30 min、NaOH溶液质量分数0.3%。此条件下蛋白得率为75.75%。