富二十二碳六烯酸-磷脂酰丝氨酸缓解环磷酰胺导致的小鼠肾损伤机制

目的:研究富二十二碳六烯酸-磷脂酰丝氨酸(docosahexaenoic acid-enriched phosphatidylserine,DHAPS)对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导小鼠肾损伤的改善作用及其机制。方法:32只雄性ICR小鼠随机分为正常组(CON组)、模型组(MOD组)、50 mg/kg mb DHA-PS组(50 DHA-PS组)和100 mg/kg mb DHA-PS组(100 DHA-PS组),每组8只。腹腔注射80 mg/kg mb CTX建立小鼠肾损伤模型,5 d后,MOD组和DHA-PS组分别灌胃等量生理盐水或DHA-PS,7 d后处死小鼠。测定各组小鼠肾脏指数、血清生化指标、肾脏氧化应激和炎症因子表达水平,分析组织病理变化及肾脏组织非靶向代谢组学。结果:与MOD组相比,DHA-PS可显著降低小鼠肾脏指数以及肌酐、尿素氮、胱抑素C和肾损伤分子-1水平(P<0.05);显著提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶等抗氧化酶活性(P<0.05),并显著降低丙二醛含量(P<0.05);显著下调白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α等促炎细胞因子的表达(P<0.05),显著上调抗炎细胞因子IL-10的含量(P<0.05)。染色结果显示,DHA-PS组小鼠肾脏组织结构明显恢复。此外,肾脏组织代谢组学分析结果表明,DHA-PS主要通过影响甘油磷脂代谢、嘌呤代谢及其代谢物缓解CTX导致的小鼠肾脏代谢紊乱。结论:DHAPS可通过减轻氧化应激和炎症反应、调节甘油磷脂代谢和嘌呤代谢等途径缓解CTX导致的小鼠肾损伤。

用于炎症治疗的磷脂酰丝氨酸修饰胞外囊泡纳米递药系统的初步构建与评价

目的:初步构建与评价递送槲皮素(quercetin,Que)的磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)修饰的巨噬细胞源的胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)纳米载体(PS-EVs@Que),并研究PS-EVs@Que在炎症治疗中的作用。方法:利用超速离心法从巨噬细胞提取EVs,采用超声法将Que载入EVs中(EVs@Que),最后将PS加入EVs@Que溶液中孵育后制备得到PS-EVs@Que,并对其形貌、粒径、载药量和包封率进行制剂学评价;通过免疫荧光观察EVs及PS修饰的EVs的细胞摄取情况。分别设置LPS组、LPS+EVs@Que组、LPS+PS-EVs@Que组以及对照组作用于巨噬细胞,蛋白质印迹实验检测巨噬细胞表面标志物iNOS的表达情况;ELISA法检测炎性因子TNF-α与IL-6的表达情况。结果:制备得到的PS-EVs@Que呈类圆形囊泡结构,平均粒径为(118.45±0.97)nm,载药量为(8.59±0.16)%,包封率为(20.08±0.52)%。摄取结果表明,PS的修饰使EVs更好地被巨噬细胞吞噬,增强了巨噬细胞对EVs的摄取。与其他组相比,PS-EVs@Que组巨噬细胞iNOS蛋白表达减少(P<0.01),并且炎症因子TNF-α及IL-6的表达也受到了明显抑制(P<0.01)。结论:本研究成功构建了一种纳米药物递药系统,其能提高Que的生物利用度,抑制巨噬细胞的促炎M1表型极化,降低促炎因子的分泌,为新型纳米药物治疗炎症疾病提供了参考。

基于斑马鱼模型评价磷脂酰丝氨酸对记忆力及认知力的改善作用

利用斑马鱼模型评价磷脂酰丝氨酸(PS)对东莨菪碱所致的记忆力及认知力损伤是否有改善作用。采用成年斑马鱼做为试验模型,设置空白对照组、东莨菪碱模型组、多奈哌齐阳性药组及三个浓度(1、3、9 mg/L)的PS共处理组,药物干预培养6天,第7天时,记录斑马鱼行为学变化,检测学习记忆相关基因与抗氧化相关基因的表达变化,并做统计学分析。结果表明,与对照组相比,东莨菪碱模型组斑马鱼主要表现出记忆力下降和认知力丧失的行为现象,且各基因表达出现异常。与东莨菪碱模型组比较,阳性药组与三个浓度的PS共处理组的斑马鱼记忆力和认知力得到一定恢复,且各基因表达趋于正常。因此,浓度为1、3和9 mg/L的PS对东莨菪碱所致斑马鱼记忆力和认知力的损伤具有一定的改善作用。

高频超声评估肱动脉血流介导的血管舒张功能联合血清磷脂酰丝氨酸1磷酸盐预测脓毒症患者血管内皮功能的研究

目的:探讨高频超声评估肱动脉血流介导血管舒张功能(FMD)联合血清磷脂酰丝氨酸1磷酸盐(S1P)水平预测脓毒症患者血管内皮功能的价值。方法:选择2021年2月至2023年2月重庆市南川区人民医院收治的140例脓毒症患者纳入病例组,另选同期在医院进行健康体检的140名志愿者纳入健康对照组。采用高频超声测量两组受试者肱动脉FMD,检测两组血清S1P水平。分析FMD、S1P与脓毒症患者血管内皮功能的相关性,以及FMD、S1P评估脓毒症患者血管内皮功能的诊断效能,分析FMD和S1P水平与脓毒症患者的血管内皮功能评分(VEFS)的相关性。结果:病例组FMD(4.21±1.63)和S1P(0.82±0.24)及VEFS(0.42±0.15)水平均显著低于健康对照组(7.35±2.15,1.28±0.32,0.78±0.18),差异有统计学意义(t=-14.23、-13.56、-17.32,P<0.05),且病例组FMD和S1P水平与VEFS呈显著正相关(r=0.62、0.58,P<0.01),与血清C反应蛋白(CRP)水平呈显著负相关(r=-0.55、-0.51,P<0.01)。FMD和S1P水平作为预测脓毒症患者血管内皮功能的单因素指标,其受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.83和0.82,灵敏度分别为74.0%和77.0%,特异度分别为78.0%和75.0%。FMD和S1P联合作为预测脓毒症患者血管内皮功能的多因素指标,其AUC为0.90,灵敏度为88.0%,特异度为77.0%。结论:高频超声评估肱动脉FMD联合血清S1P水平可以有效预测脓毒症患者的血管内皮功能,对于脓毒症患者的诊断和治疗具有重要的临床意义。

磷脂酰丝氨酸研究进展

综述了磷脂酰丝氨酸的结构、合成机理及其在改善老年人阿耳茨海默(氏)病、提高认知力、抗抑郁、缓解紧张压抑、辅助激活酶等方面的保健功效,同时对磷脂酰丝氨酸在食品、药品行业的应用前景进行了展望。

磷脂酰丝氨酸制备进展

介绍了磷脂酰丝氨酸的重要作用,综述了磷脂酰丝氨酸的提取法合成、酶法合成,总结出了化学法制备工艺流程。讨论了磷脂酰丝氨酸及其中间体衍生物的化学法合成的必要性,提出了化学合成磷脂酰丝氨酸需要解决的3个问题,并对化学法合成磷脂酰丝氨酸的前景进行了展望。

质膜组分磷脂酰丝氨酸外翻的分子调控机制

磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)是细胞质膜重要的磷脂成分之一,具有重要的生物学功能。在细胞凋亡及一些特殊的病理条件下,细胞内ATP供能不足,胞浆Ca2+浓度升高,引起PS发生外翻。PS外翻在不同类型细胞中具有不同的生物学功能,且外翻的程度与疾病发展程度密切相关,可作为癌症等多种疾病治疗的靶标。文章综述了细胞质膜中磷脂酰丝氨酸的重要生物学功能和意义、磷脂酰丝氨酸外翻的分子机制及在临床医学方面的应用,以期对未来的功能和临床应用研究提供参考。

磷脂酰丝氨酸制备的研究进展

磷脂酰丝氨酸具有改善记忆和认知能力、防治老年痴呆症、抑郁症及缓解精神压力等作用,目前在国外被用作营养补充剂广泛应用于保健食品中。着重从提取法和酶转化法2个方面综述了磷脂酰丝氨酸的制备方法,同时通过对国内外磷脂酰丝氨酸消费现状的调查,对其在食品、药品、保健品方面的应用前景进行了展望。

流式细胞术联合测定保存血小板表达的磷脂酰丝氨酸和CD62p

人类血小板通过不同的技术进行离体保存后 ,其特性改变差异较大。建立适用于各种保存血小板特性分析的流式细胞术 (FCM)对保存血小板的质量监测和新保存方法研究有重要意义。本研究通过对FCM分析方法主要条件的优化评估 ,建立了联合测定血小板膜表面包括磷脂酰丝氨酸在内的多参数FCM定量分析方法。在标本制作中 ,血小板不需要洗涤即可直接进行标记 ,减少了血小板离心洗涤过程中的激活。除了FCM常用的同型对照外 ,文中还将新鲜富含血小板血浆 (FPRP)、凝血酶激活FPRP和液氮处理FPRP作为血小板标准阴性、阳性对照 ,直接应用于FCM分析 ,且效果良好。该方法中Gly Pro Arg Pro乙酸盐 (GPRP)的选择应用 ,既防止了血小板聚集和纤维蛋白的形成 ,同时可稳定血小板 ,减少制备过程中人为激活 ,克服了在血小板、Ca2 + 和血浆共存条件下FCM定量分析血小板的困难 ,尤其是为深低温处理血小板包括PS在内的多参数分析提供了良好的方法基础。研究表明该方法标本处理简单 ,结果分析简便、准确 ,重复性好。作者还通过低温、低渗或激活剂的方法制备了几种膜表面分子标记显著不同的血小板应用于FCM分析 ,不仅证实了所建立的FCM分析方法在各种不同膜表面分子标记的血小板分析中的实用性 ,又表明了文中制备的这 4种不同膜表面分?

ω-3脂肪酸及磷脂酰丝氨酸的益智作用研究进展

磷脂酰丝氨酸(PS)与ω-3脂肪酸在大脑中具有保护神经细胞及改善大脑信号传导功能的作用,但目前两者的作用机理尚不清楚。主要综述了DHA及磷脂酰丝氨酸在改善大脑功能方面的作用及相互协调作用,DHA可以促进大脑对磷脂酰丝氨酸的吸收,同时单纯服用DHA,不仅会增加胃肠的负担,而且也容易氧化,导致吸收效率下降,较有效的方法是将其与磷脂酰丝氨酸结合而相互发挥作用。

Annexin B1与磷脂酰丝氨酸的结合活性

目的 :研究 annexin B1与磷脂酰丝氨酸的结合活性。方法 :在大肠杆菌中表达 annexin B1蛋白 ,经离子交换层析得纯品 ;选用 U937细胞 ,以过氧化氢诱导凋亡 ,制备小鼠洗涤血小板 ,凝血酶激活 ;以异硫氰酸荧光黄 (FITC)标记的 annexin B1检测凋亡细胞和活化血小板。结果 :FITC标记的 annexin B1既能与凋亡细胞特异性结合 ,又能与活化血小板特异性结合 ,结合活性接近 annexin 。结论 :研究表明 annexin B1可结合于凋亡细胞和活化血小板膜上的磷脂酰丝氨酸 (PS) ,而非其他膜成分 ,也进一步阐明 annexin

生物酶法制备磷脂酰丝氨酸的研究进展

近年来的研究表明,磷脂酰丝氨酸具有预防老年痴呆症、改善记忆力等功能。但是天然存在的磷脂酰丝氨酸很少,提取工艺繁杂,并且产品安全性受到人们质疑。生物酶法制备磷脂酰丝氨酸具有反应条件温和、环境友好、产品质量好等优点,近年来受到越来越多的关注。从用于生物酶法制备磷脂酰丝氨酸的酶和反应体系等方面综述了国内外生物酶法制备磷脂酰丝氨酸的相关研究进展,并指出开发稳定高效的酶制剂和探寻绿色安全的新工艺等措施有助于促进生物酶法工业化生产磷脂酰丝氨酸。

磷脂酰丝氨酸合成酶基因的克隆及在枯草芽孢杆菌中的表达

应用PCR技术从Escherichia coli K12 Sgal-(ExPASy P23830)中扩增到大小为1350bp编码磷脂酰丝氨酸合成酶的DNA片段,将其插入枯草芽孢杆菌诱导型表达载体pBES,获得重组质粒pBES-pss后转化Bacillus subtilis DB104。经蔗糖诱导后,该磷脂酰丝氨酸合成酶在Bacillus subtilis DB104(pBES-pss)中获得胞外分泌表达,SDS-PAGE分析发现目的蛋白分子量约为52kDa,酶联比色法检测酶活力为1.50U/ml,提高了磷脂酰丝氨酸合成酶的表达产量,为工业化发酵生产磷脂酰丝氨酸合成酶奠定了良好的基础。

磷脂酶D催化大豆磷脂合成磷脂酰丝氨酸工艺

磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,简称PS)是一种具备独特生理功能的稀有磷脂,自然界中含量稀少,分离提取难度大。利用磷脂酶D(PLD)催化大豆磷脂进行磷脂酰基转移反应合成PS具有条件温和、产品收率高等显著优点,受到广泛重视。本文研究采用固定化磷脂酶D催化合成PS的工艺。磷脂酶D催化大豆磷脂合成PS是油-水两相界面反应,通过采用吸附-交联法将PLD固定化于硅藻土载体上,取得了PS收率达57%的结果。采用硅胶柱色谱对粗产品进行分离纯化,PS纯度高达85%。

磷脂酰丝氨酸的提取分离研究进展

磷脂酰丝氨酸作为人类大脑的益智物质,已经得到了广泛关注。主要对磷脂酰丝氨酸的提取和纯化方法进行介绍。提取方法包括氯仿-甲醇法、叔丁基甲醚法、乙酸乙酯-乙醇法等。纯化的方法涉及薄层色谱法、柱色谱法、高效液相色谱法等。磷脂酰丝氨酸提取工艺复杂,需使用大量有机溶剂,今后需加强提取工艺的优化。

抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原复合物抗体对血清学阴性抗磷脂综合征的诊断价值研究

目的·研究抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原复合物抗体(anti-phosphatidylserine/prothrombin antibody,aPS/PT)、IgA型抗心磷脂抗体(anti-cardiolipin antibody,aCL)及IgA型抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2-glycoproteinⅠantibody,aβ2-GPI)对血清阴性抗磷脂综合征(seronegative antiphospholipid,SNAPS)的诊断价值。方法·选取86例抗磷脂综合征(antiphospholipid,APS)患者(APS组)、48例SNAPS患者(SNAPS组)、79例系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者(SLE组)和85例健康者(健康对照组),应用ELISA法测定IgG型和IgM型aPS/PT、IgA型aCL和IgA型aβ2-GPI 4种抗磷脂抗体。计算这4种抗体用于诊断SNAPS的敏感度及特异度,并做受试者工作特征(ROC)曲线,以及分析4种抗体与SNAPS临床表现的相关性。结果·SNAPS组aPS/PT总检出率为52.1%,其中IgG型a PS/PT检出率为29.2%,IgM型aPS/PT检出率为35.4%,IgA型aβ2-GPI检出率为16.7%,IgA型aCL未检出;SNAPS组IgG型和IgM型aPS/PT,以及IgA型aβ2-GPI检出率显著高于健康对照组(均P=0.000)。IgG型aPS/PT用于诊断SNAPS的ROC曲线下面积最大,其次为IgA型aβ2-GPI,分别为0.753和0.725。IgG型aPS/PT(OR=5.54,95%CI1.67～17.33,P=0.003)和IgA型aβ2-GPI(OR=3.43,95%CI 0.86～11.53,P=0.041)与静脉血栓风险均呈正相关,IgM型aPS/PT与妊娠丢失风险正相关(OR=5.11,95%CI 1.31～21.29,P=0.004)。结论·IgG/IgM型aPS/PT和IgA型aβ2-GPI可作为SNAPS实验室诊断潜在的补充指标,IgG/IgM型aPS/PT对于临床评估SNAPS患者血栓形成和妊娠丢失的风险也有一定的应用价值。

昆明山海棠碱诱导Jurkat淋巴瘤细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻及瘤细胞超微结构改变的研究

目的 检测昆明山海棠碱 (THH碱 )诱导JurkatT淋巴瘤细胞的凋亡效应。方法 THH碱多剂量多时间点诱导JurkatT淋巴瘤细胞细胞后 ,采用Annexin V Fluorescence标记膜外翻磷脂酰丝氨酸 (Phosphatidylserine ,PS)的凋亡细胞 ,同时荧光素PI标记坏死细胞 ,流式细胞术检测分别检测其阳性细胞率。同时采用判断凋亡发生的“金标准”———形态学观察方法观察其超微结构的改变。结果 THH碱诱导后磷脂酰丝氨酸外翻的细胞显著增加 ,有明显的时间和剂量相关性 ,超微结构观察可见大量细胞明显发生细胞体积缩小、核固缩、胞浆浓缩、凋亡小体形成等凋亡典型的形态特征。

海藻糖抑制高浓度葡萄糖诱导的红细胞磷脂酰丝氨酸暴露、渗透脆性增高和膜脂质过氧化损伤的研究

尽管高浓度葡萄糖孵育有利于深低温或冰冻干燥保存人红细胞的存活,但是高浓度葡萄糖仍然对红细胞造成一定损伤。本研究探讨海藻糖对高浓度葡萄糖导致的红细胞损伤的影响。将红细胞于含有一定浓度海藻糖的葡萄糖缓冲液中孵育3小时后,用流式细胞术分析红细胞磷脂酰丝氨酸(PS)分布和细胞渗透脆性,用TBA法检测膜脂质过氧化损伤。结果表明:葡萄糖可以导致红细胞PS暴露、脂质过氧化损伤和细胞渗透脆性增高,而且其效率和葡萄糖浓度和温度密切相关。然而,海藻糖却可以很好地抑制高浓度葡萄糖诱导的红细胞PS暴露、渗透脆性增高和过氧化损伤。随着海藻糖浓度的增加,红细胞PS标记率、丙二醛(MDA)浓度和细胞碎片率呈逐步下降的趋势。结论:高浓度葡萄糖可以导致细胞PS暴露、脂质过氧化损伤和渗透脆性增高,而且这3种损伤之间存在一定关系;海藻糖可以有效地抑制高浓度葡萄糖导致的红细胞PS暴露、渗透脆性增高以及过氧化损伤,这对于应用小分子糖类保存红细胞研究具有重要意义。

强化磷脂酰丝氨酸纯牛奶改善记忆力人群试食研究

目的研究牛奶中强化磷脂酰丝氨酸(PS)对人的记忆力改善作用。方法将50%纯度的PS原料以0.08%的比例添加入纯鲜牛奶,经超高温(UHT)灭菌奶工艺制作为"PS奶",将120名17～18岁中学生随机分为干预组和对照组,采用双盲法,前者每日服用PS奶250mL,后者服用未添加PS的纯牛奶,试验期40d。试验前后对受试者进行记忆力评分,评分方式采用临床记忆量表标准方法,分量表包括指向记忆、联想学习、图像自由回忆、无意义图形再认、人像特点联系回忆。结果对照组服用前后各分量表得分和总分差异均无统计学意义,而PS干预组试验后各分量表得分和总分比试验前有显著性提高(P<0.05),同时,试验结束后PS干预组的各分量表得分及总分显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论试验证明PS奶对学生记忆力有显著的改善和提高作用。

亚临界R134a流体中酶法制备富含多不饱和脂肪酸的磷脂酰丝氨酸

以取自鱿鱼卵的富含多不饱和脂肪酸的磷脂酰胆碱为底物,在亚临界1,1,1,2-四氟乙烷(R134a)中通过磷脂酶 D 催化酰基转换反应制备了富含多不饱和脂肪酸的磷脂酰丝氨酸,并利用响应面法对影响磷脂酰丝氨酸合成的工艺条件进行了优化。结果表明,磷脂酶 D 在亚临界 R134a 中显示出高活性,可以高效地催化酰基转换反应制备富含多不饱和脂肪酸的磷脂酰丝氨酸,反应时间短,转化率高;反应时间、底物摩尔比、初始水分是影响转化率的显著因素。通过对转化率的拟合模型响应面分析,得到了优化工艺条件:在亚临界 R134a 体系中,体系压力6MPa,温度40℃,反应时间5.60h,酶量9.6U,鱿鱼卵磷脂75mg,L-丝氨酸1.02g,溶于2.30mL pH5.5磷酸盐缓冲液。在此优化工艺条件下,转化率的预测值为92.21%,实验值为89.06%,响应面模型的有效性得到了验证。