苹果砧木新品种鲁砧1号离体叶片高效不定植株再生

【目的】建立苹果半矮化砧木新品种鲁砧1号离体叶片高效不定梢再生技术体系,为该砧木快繁和遗传改良奠定技术基础。【方法】以鲁砧1号无菌苗离体叶片为外植体,研究碳源、细胞分裂素种类和质量浓度对叶片不定梢再生的影响;以不定梢为试材,研究基本培养基、蔗糖质量浓度对不定梢生根的影响。【结果】MS添加较低质量浓度(0.6 mg·L^(-1))细胞分裂素(TDZ)时,碳源物质为D-山梨醇的叶片不定梢再生率显著高于蔗糖;其他激素处理下,D-山梨醇和蔗糖之间叶片不定梢再生率无显著差异。两种碳源上的平均每叶不定芽(梢)数,都表现较高细胞分裂素质量浓度处理高于或显著高于较低细胞分裂素质量浓度处理,以TDZ质量浓度为1 mg·L^(-1)时产生的不定芽数最多,平均每叶不定芽数为3.8~4个。在不定芽诱导培养基上,6-苄基氨基嘌呤(BA)比TDZ更容易诱导产生直接伸长生长的不定梢。不定梢生根率和平均每株生根条数,两种基本培养基及两个蔗糖质量浓度之间都表现差异不显著,但以1/4MS基本培养基和20 g·L^(-1)蔗糖组合的生根培养基上获得的生根率和单株生根条数最高,分别超过93%和5.8。【结论】鲁砧1号离体叶片容易诱导再生不定芽和不定梢生根,诱导叶片不定芽再生最佳培养基为MS添加1 mg·L^(-1)TDZ、0.3 mg·L^(-1)IBA和30 g·L^(-1)蔗糖,最佳生根培养基为1/4MS添加0.3~0.5 mg·L^(-1)IBA和20 g·L^(-1)蔗糖。

甘薯离体叶片失水速率及渗透调节物质与品种抗旱性的关系

对水分胁迫下甘薯离体叶片失水速率和叶片渗透调节物质与品种抗旱性关系的研究表明 ,水分胁迫下不同甘薯品种离体叶片失水速率比对照均明显减慢 ;叶片中可溶性糖含量和游离氨基酸总量比对照均明显增加 ,K+ 含量明显下降 ,游离脯氨酸含量有不同程度的增加。叶片中可溶性糖、总游离氨基酸和K+ 的相对值 (占对照 % )与品种抗旱性均呈极显著正相关 (r分别为 0 .9374、0 .92 2 9和 0 .835 9,P <0 .0 1) ;离体叶片失水速率的相对值与品种抗旱性呈显著负相关 (r=- 0 .5 4 5 0 ,P <0 .0 5 ) ;而游离脯氨酸的相对值与品种抗旱性间的相关性不显著 (r=0 .2 5 83,P =0 .35 2 6 )。因此 ,除游离脯氨酸外 。

甜樱桃砧木离体叶片愈伤组织诱导及不定芽再生

叶片再生效率的高低直接影响目的基因转化的成功率,为建立稳定、高效的樱桃不定芽离体再生体系,以30～40d苗龄的甜樱桃砧木ZY-1的组培继代苗为试材,取上部幼嫩叶片或不含腋芽的茎段,分别从培养基生长调节剂配比、接种材料类型、叶片接种部位、接种方式以及培养条件等方面进行了不定芽再生技术研究。结果表明,培养基中添加7.0mg/L的6-BA与0.5～1.0mg/L的IBA配比时不定芽再生率和出芽数均较高,TDZ和NAA不适于诱导ZY-1叶片再生不定芽;接种继代苗茎段比叶片再生率高;接种叶片以选择嫩叶横切2刀、远轴面向下接触培养基的方式为好;叶片不同部位处理以带叶柄的基部叶块最易再生;叶片接种后在25℃室温条件下,先暗培养3周再照光,利于不定芽的再生。

不同细胞分裂素对2001富士苹果离体叶片再生的影响

以综合经济性状优良的2001富士苹果为试材,研究了不同浓度的细胞分裂素对其离体叶片再生效率的影响.结果表明:2001富士离体叶片分化不定芽适宜的BA、CPPU和TDZ的最佳再生浓度范围分别为8.0 mg/L、6.0～8.0 mg/L和1.0～2.0 mg/L,再生频率分别达到67.9%、78.6%～89.3%和100.0%,ZT和KT不适宜诱导2001富士叶片分化不定芽.

不同培养条件对‘丰香’草莓离体叶片再生的影响

以草莓品种‘丰香’离体叶片为外植体 ,探讨了基本培养基、不同细胞分裂素、暗培养、硝酸银浓度以及不同植物生长调节剂组合对不定芽再生的影响。结果表明 ,基本培养基中以MS最为适合 ,WPM、QL、AS培养基均不利于不定芽的再生 ,而TDZ的诱导效果好于BA。以MS基本培养基附加TDZ2 0mg·L-1 和IBA 0 8mg·L-1 可以使‘丰香’叶片不定芽的再生率高达 72 33%,平均每叶再生芽 5 5 9个。暗培养 1 4d可以将‘丰香’叶片的不定芽再生率提高到 90 0 9%。硝酸银对于提高‘丰香’叶片的不定芽再生没有明显效果 ,但在一定程度上改变了细胞分化的方向。

水稻离体叶片吸收亚硒酸盐的生理特性

硒在人体内具有抗氧化、提高免疫力和预防癌症等多种重要的生理功能。人体硒主要通过食物链来源于植物性食物。水稻是我国主要粮食作物之一，在稻米中，硒主要以硒代蛋氨酸和甲基硒代半胱氨酸形式存在，而这两种形式的有机硒对人体健康的有效性远大于无机硒。因此利用稻米中良好硒源为人体补硒是一条高效、低廉、简单和易行的途径。

秋水仙素对草莓离体叶片再生和多倍体诱导的影响

以草莓(Fragaria×ananassa Duch.)栽培品种‘雪蜜’(2n=8X=56)的离体叶片为外植体,研究了不同浓度秋水仙素对愈伤组织诱导率、不定芽再生率以及多倍体植株诱导的影响,并采用流式细胞仪对多倍体植株的倍性进行鉴定。结果显示,用质量体积分数0.1%、0.3%、0.5%和0.7%的秋水仙素浸泡2、4和6 d,草莓离体叶片均能诱导出愈伤组织和不定芽,但随秋水仙素浓度的提高和处理时间的延长,愈伤组织诱导率和不定芽再生率均显著下降。用不同浓度秋水仙素处理均能产生多倍体植株,倍性为9X、10X、11X、12X、14X和16X;随秋水仙素浓度的提高,多倍体诱导率呈现先上升后下降的变化趋势。用质量体积分数0.3%秋水仙素浸泡处理4 d是最佳的草莓离体叶片诱导方法,不定芽再生率达到40.5%,多倍体诱导率为100.0%,并且诱导产生出16X的植株。

不同处理对丰水梨离体叶片不定芽再生的影响

采用多因素组合试验设计,研究了噻重氮苯基腺(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)浓度组合、外植体类型、叶片放置方式、暗培养时间以及乙烯抑制剂AgNO3处理等因素对丰水梨离体叶片再生体系建立的影响。结果表明,NN69+TDZ2.0 mg.L-1+IBA0.1 mg.L-1处理的叶片再生频率和再生芽数分别达到86.7%和2.92,为丰水梨最佳培养基与植物生长物质组合。同一叶片的基部和中部比顶端更容易产生愈伤并再生形成不定芽。叶片远轴面向下接触培养基比近轴面向下利于叶片不定芽再生。AgNO3质量浓度在0.1-1.5 mg.L-1范围内对离体叶片再生有显著促进作用,NN69+TDZ 2.0mg.L-1+IBA0.2 mg.L-1+AgNO31.0 mg.L-1以及NN69+TDZ 1.5 mg.L-1+IBA0.3 mg.L-1+AgNO30.1 mg.L-1使丰水梨叶片再生频率均达到100%。

磨盘柿离体叶片愈伤组织发生及不定芽诱导

研究了培养基种类、植物生长调节剂配比、叶片不同部位及培养条件对磨盘柿离体叶片愈伤组织发生及不定芽再生的影响.适宜磨盘柿叶片再生的基本培养基为改良MS(1/2N),生长调节剂为ZT4.0～6.0mg/L或TDZ 10mg/L与IAA 0.1 mg/L组合,不宜用BA和高浓度的NAA;ZT和TDZ促进叶片再生的方式不同,前者利于直接再生,后者需降低细胞分裂素浓度,二次诱导使芽点生长成苗;叶片接种后暗培养2～3周再生效率高;叶片不同部位中以叶基部最易再生,其次为叶中部,叶尖最差.

苹果离体叶片高效再生不定芽技术研究

苹果不同品种叶片再生不定芽能力不同，嘎拉再生能力最强，其次是乔纳金，富士最难再生。用继代培养３ 年以上、当代培养３０ ～５０ ｄ 的试管苗，取顶部第２ ～４ 叶位幼嫩叶片，远轴面向下接触培养基，再生效率高。诱导叶片再生不定芽适宜培养基为ＭＳ＋ ＴＤＺ１．０ ｍｇ·ｌ－ １（ 富士、乔纳金）或ＢＡ５ ．０ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ ＮＡＡ０ ．１ ～０．２ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ 蔗糖３５ ．０ ｇ·ｌ－ １ ＋ 琼脂６ ．２ ｇ·ｌ－ １（ 嘎拉） 。

水稻离体叶片抗纹枯病接种方法的研究

水稻纹枯病是影响水稻生产的重要病害之一。水稻纹枯病抗性属于数量遗传性状,目前尚未发现高抗或免疫的水稻种质材料。为了提高水稻抗纹枯病种质的筛选和研究效率,对水稻离体叶片抗纹枯病接种的实验条件进行了更精确的控制,并采用了量化的病情调查方法。取纹枯菌接种离体水稻叶片组织进行qRT-PCR分析,水稻病程相关基因呈诱导表达,验证了纹枯病菌对水稻的侵染。采用离体叶片接种、大田成株期接种、苗期"微室"接种法,对抗纹枯病水稻品种和敏感品种进行测试。抗性品种和敏感品种纹枯病病级的统计检验呈显著差异,3种方法的结果表现一致。改进的离体叶片接种方法具有易于操作和重复性好的优点,适用于大规模筛选抗纹枯病水稻种质材料。

昌红苹果离体叶片不定芽的诱导及植株再生

以昌红苹果的组培苗为试材，研究建立叶片的离体再生体系。用30—40d继代的新梢顶部1．3节新展开的叶片作为外植体，分别接种在分化的培养基上，黑暗处理15d，昌红苹果叶片不定芽的最高再生率为100％。在6号培养基上，昌红苹果叶片的再生能力最高；诱导叶片不定芽适宜的培养基为MS＋TDZ1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂5．5g／L。

秋水仙素处理离体叶片获得皇家嘎拉苹果四倍体植株

采用皇家嘎拉苹果（Malus domestica Borkh．）离体新梢叶片作为外植体，研究了不同浓度的秋水仙素长时间处理（5 d）诱导四倍体的效率。结果表明，以不定芽再生培养基附加25 mg／L秋水仙素效果最好，最高在36．7％的叶片外植体上获得了四倍体植株。高浓度（75～200 mg／L）秋水仙素处理严重抑制组织的再生。采用流式细胞技术测定出诱变植株的细胞核DNA含量比对照高出一倍，确定了植株为四倍体。四倍体植株不仅在遗传上而且在外观形态上也明显区别于二倍体。四倍体植株已移栽于大田，并进行了嫁接育苗和大树高接。

欧洲甜樱桃砧木‘SL64’离体叶片再生体系研究

【目的】探明欧洲甜樱桃砧木‘SL64’离体叶片再生技术体系。【方法】以‘SL64’的组培苗叶片为试材,从基本培养基、激素配比、暗培养和叶片生理状态等方面对影响离体叶片再生的关键因素进行了研究,建立了SL64砧木离体叶片的高效再生体系。【结果】‘SL64’采用改良DKW培养基为基本培养基再生效果最好,显著优于MS、WPM和QL培养基;最佳激素组合为6-BA 2.5 mg·L-1+IBA 0.05 mg·L-1;接种后5℃下暗培养5 d、然后23℃下暗培养10 d可明显提高愈伤组织发生率和不定芽再生率。【结论】通过以上条件的优化,建立了‘SL64’的高效离体再生技术体系,离体叶片不定芽再生率为90%左右,平均每叶再生不定芽数达5~6芽。

拟南芥连体和离体叶片光合作用的光响应

测定出 2 5 0 μmol·m-2 ·s-1光强下培养的整株拟南芥连体叶片的光合作用在光强为 80 0 μmol·m-2 ·s-1左右达到光饱和 ,其离体叶片光合作用对光强响应的结果与此类似。自然条件下生长的珊瑚树连体与离体叶片光合作用均在光强约为 10 0 0 μmol·m-2 ·s-1下达到饱和 。

外源抗坏血酸和过氧化氢对小麦离体叶片衰老的调节(简报)

以1、5mmol·L(-1)抗坏血酸及0．1、0．5mmol·L(-1)过氧化氢于暗中处理小麦离体叶片的结果表明：前者明显提高抗坏血酸过氧化物酶、过氧化氢酶活性，减少脂质过氧化产物丙二醛的产生，使小麦叶片衰老延缓；后者对抗坏血酸过氧化物酶活性影响不大，略微降低过氧化氢酶活性，也明显促进蛋白水解酶活性的上升，导致可溶性蛋白质含量下降加速，从而促进小麦叶片衰老。

不同激素和黑暗处理对泰山红石榴离体叶片再生的影响

以泰山红石榴为试材,研究了不同激素配比、黑暗处理时间等关键因素对泰山红石榴离体叶片愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明,细胞分裂素是离体叶片再生不定芽所必需的。生长素2,4-D与IBA组合诱导出的愈伤组织生长量大,但不定芽再生率低。黑暗处理时间以2周为宜。适宜的再生培养基为MS+KT1.0mg·L-1+BA2.0mg·L-1+GA30.5mg·L-1,不定芽再生率达57.0%,每片叶再生芽数为3.0个。

苹果离体叶片培养直接体细胞胚胎发生研究

在ＭＳ＋ＢＡ１０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ５０ｍｇ／Ｌ＋２，４＿Ｄ０＼＾５ｍｇ／Ｌ＋蔗糖２０ｇ／Ｌ的固体培养基上，苹果品种嗄拉试管苗叶片经７天暗培养产生胚性细胞。将具有胚性细胞的叶片转入ＭＳ＋ＢＡ１０ｍｇ／Ｌ＋蔗糖２０ｇ／Ｌ的培养基上暗培养４０天，６５％的叶片直接发生体细胞胚，体细胞胚在同种培养基上萌发，长成小植株。

黑莓品种‘Arapaho’离体叶片不定芽诱导影响因素分析及再生体系建立

以黑莓(Rubus spp.)品种‘Arapaho’无菌苗叶片为外植体,通过正交和单因素实验分别研究了基本培养基类型、6-BA和IBA质量浓度以及暗培养时间、外植体的叶位和接种方式对不定芽诱导的影响,并研究了IBA质量浓度对不定芽生根的影响;在此基础上,初步建立了黑莓品种‘Arapaho’离体叶片的再生体系。正交实验结果表明:基本培养基类型对叶片不定芽诱导率及平均不定芽数的影响最大,而IBA质量浓度对叶片不定芽诱导率及6-BA质量浓度对平均不定芽数的影响较小;适宜‘Arapaho’叶片不定芽诱导的最佳培养基为含有2.0 mg.L-1 6-BA和1.0 mg.L-1 IBA的MS培养基。单因素实验结果表明:暗培养时间、外植体的叶位及接种方式对不定芽诱导率有显著影响;最适宜的暗培养时间为21 d;植株中、上部叶片的再生能力较强,其中第3和第4位叶的不定芽诱导效果最佳;叶面朝上接种更有利于不定芽的诱导。在含0.2 mg.L-1IBA的MS培养基中,不定芽生根率达100.0%,且根数多、长势良好。黑莓品种‘Arapaho’离体叶片的再生体系为:以无菌苗的第3和第4位叶为外植体,经过适当修剪后叶面朝上接种于含有2.0 mg.L-16-BA和1.0 mg.L-1 IBA的MS培养基上,暗培养21 d后置于光照条件下培养30 d;将不定芽转接到含有0.5 mg.L-16-BA和0.3 mg.L-1 NAA的MS培养基上进行继代培养;当不定芽高约2 cm时转接到含有0.2 mg.L-1IBA的MS培养基上进行生根培养,最终获得完整植株。

苹果矮化砧木P_(59)离体叶片高效再生体系的建立

对苹果矮化砧木P59离体叶片再生条件进行研究,结果表明：当选用苗龄20～30 d的试管苗,取顶部第2～4叶位幼嫩叶片,横切2刀,远轴面向下接触培养基,再生培养基为MS＋TDZ 2.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋白砂糖35 g/L＋琼脂6.2 g/L,暗培养20 d时,再生效率可达到85%,出芽数平均8个以上,建立了良好的再生体系.