秦皮甲素和秦皮乙素的药理研究进展

秦皮为一种传统中药,其毒性低、临床应用范围广,常被运用于治疗目赤肿痛、湿热泻痢、赤白带下、血崩不止等病症。药理研究发现香豆素类化合物是秦皮的主要活性成分,其中秦皮甲素和秦皮乙素最具代表性。众多的研究显示,秦皮甲素和秦皮乙素在抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等方面展现出丰富的药理学活性,其潜在的开发利用价值日益受到关注。该文通过查阅国内外相关文献,对秦皮甲素和秦皮乙素的主要药理作用研究进行归纳,以期为秦皮的研发及临床运用提供参考依据。

秦皮甲素的提取工艺及活性进展研究

秦皮(Cortex fraxini)是常见的药食同源的天然植物产物,在预防及治疗疾病等方面有着重要的影响,其活性成分秦皮甲素(Esculin)具有抗炎,抗氧化,抗肿瘤,降高尿酸及利尿等多方面明显的药理活性作用。秦皮甲素的提取方法包括回流法、液固萃取法、超声提取法和微波提取法等。分离纯化方法有大孔树脂吸附法等。本文对秦皮甲素的提取分离、纯化以及其多种药理活性的国内外研究进展展开论述,旨在为秦皮甲素的深入研究及充分开发利用等方面提供理论基础。

三种微波萃取秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的方法

以秦皮甲素和秦皮乙素的含量为指标,研究了3种微波萃取秦皮的方法.3种方法分别为家用微波炉连续引入溶剂萃取法、微波谐振腔连续引入溶剂萃取法和实验室专用微波炉萃取法.结果表明,溶剂浓度、辐射时间、微波功率、样品粒度等均对萃取有影响.3种微波萃取法与索氏萃取法相比,提取效率高且可省时节能.

秦皮甲素、秦皮乙素与血清白蛋白的相互作用

用荧光光谱法研究了中药有效成分秦皮甲素、秦皮乙素与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)的相互作用。结果表明:秦皮甲素、秦皮乙素对血清白蛋白的荧光有较强的猝灭作用,其荧光猝灭为单一的静态猝灭过程,其作用机制属能量转移机制。求得不同温度下反应的结合常数K。由反应焓变、熵变确定它们间的结合主要是静电引力。依据非辐射能量转移机理,求出了其结合位置和能量转移效率。

藏药八味秦皮丸中秦皮甲素、秦皮乙素和麝香酮的定量测定

目的建立八味秦皮丸(秦皮、针铁矿、草莓、多刺绿绒蒿、寒水石、美丽风毛菊、朱砂、麝香)质量标准中的定量测定项。方法采用高效液相色谱法测定秦皮甲素和秦皮乙素,色谱柱为依利特C18柱(4.6mm×250mm);流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(27∶73);体积流量为1.0 mL/min;柱温为室温;检测波长为344.4 nm。采用气象色谱法测定麝香酮,色谱柱为HP-5毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm);载气为氮气(99.99%);检测器温度为250℃;分流比为40∶1;程序升温150℃开始以10℃/min速度升温至170℃保持4 min,然后以15℃/min速度升温至230℃保持5 min。结果秦皮甲素、秦皮乙素进样量分别在0.200～2.502μg、0.120～1.503μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率分别为100.71%、100.38%,RSD分别为0.65%、0.87%(n=6);麝香酮进样量在15.20～152.0μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.27%,RSD为0.74%(n=6)。结论该方法灵敏、准确、专属性强,可用于八味秦皮丸中秦皮甲素、秦皮乙素、麝香酮的定量测定。

秦皮甲素对实验性溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜细胞因子的影响

【目的】研究秦皮甲素对实验性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠肠黏膜的保护作用及其机制。【方法】选用40只SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(SASP组)和秦皮甲素组(EH组),每组10只。模型组、SASP组和EH组均采用三硝基苯磺酸(TNBS,剂量为100 mg/kg)灌肠法复制大鼠UC模型,SASP组和EH组分别灌胃给予SASP(剂量为600 mg/kg)和秦皮甲素(剂量为100 mg/kg)进行治疗。治疗结束后,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)的水平。比较各组大鼠一般状态、肠黏膜损伤情况和血清TNF-α、IL-10水平。【结果】秦皮甲素能显著改善UC大鼠的一般状态,显著缓解其结肠组织炎症。模型组大鼠结肠黏膜疾病活动指数(DAI)评分和组织学损伤指数(TDI)评分较正常组显著增高(P<0.01),各给药组DAI评分和TDI评分较模型组显著降低(P<0.01)。模型组大鼠血清中TNF-α水平显著升高,IL-10水平显著降低(均P<0.01)。与模型组比较,SASP组和EH组TNF-α水平显著降低,IL-10水平显著增高(均P<0.01)。【结论】秦皮甲素对TNBS诱导的大鼠UC有良好的治疗作用,其作用可能是通过抑制TNF-α分泌,上调IL-10表达,改善肠道免疫平衡紊乱而实现的。

不同地理种源秦皮的树皮及叶中秦皮甲素、秦皮乙素的含量测定

目的 :测定不同地理种源秦皮的树皮及叶中秦皮甲素和秦皮乙素的含量。方法 :采用HPLC法 ,以乙腈 水 (15∶85 )为流动相 ,使用NovapakC18柱 ,检测波长 348nm ,外标法。结果 :进样量与峰面积线性关系良好 ,秦皮甲素与秦皮乙素的r值分别为 0 .9992 ,0 .9994 ,平均回收率分别为 98.2 % ,99.2 % ,RSD分别为 2 .2 4 % ,2 .15 %。因地理种源不同而造成的秦皮质量差异明显存在 ,陕西产秦皮质量上乘。结论 :本法操作快速、简便、易行 ,精密度、重复性、稳定性好 ,适用于秦皮含量的分析测定。

高效液相色谱法测定秦皮浓缩颗粒中秦皮甲素的含量

采用高效液相色谱法测定秦皮浓缩颗粒中秦皮甲素的含量。色谱柱：Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋ ＣＬＣ－ＯＤＳ－Ｃ１８柱）；检测波长：２５４ｎｍ；流动相：甲醇－水－冰醋酸（３１：６９：０．５）；流速：１．８ｍＬ／ｍｉｎ；柱温：４０℃；线性关系在０．９２～４．６０μｇ范围内，ｒ＝０．９９９６，平均加样回收率为９８．４２％，ＲＳＤ为１．７０％。

秦皮甲素在Caco-2细胞模型中吸收机制的研究

目的:研究秦皮甲素在Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法:用Caco-2细胞单层模型研究秦皮甲素的双向转运,考察时间、药物浓度对秦皮甲素吸收的影响。采用高效液相色谱法检测秦皮甲素浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果:秦皮甲素在Caco-2细胞模型中,从单层细胞层顶端到基底端的转运与基底端到顶端的转运大致相同;随着秦皮甲素质量浓度的增加,顶端到基底端方向的吸收量近似线性增加,基底端到顶端方向的分泌量近似线性增加。结论:秦皮甲素在Caco-2细胞模型中吸收主要是被动转运。

三维荧光光谱法结合交替三线性分解算法同时分辨及定量测定秦皮中的秦皮甲素和秦皮乙素成分

用三维荧光分析结合交替三线性分解算法对秦皮中药成分进行定性定量分析,为直接测定秦皮甲素和秦皮乙素提供了一种快速简洁的方法。相关系数r分别为1.000和0.998。多次测定结果的相对误差分别为2.01%和2.21%。

秦皮甲素大鼠体内药代动力学研究

目的:建立并确证LC/MS/MS法测定人血浆中秦皮的方法,并用以研究大鼠口服痛风利灵胶囊后秦皮甲素的药代动力学过程。方法:采用HPLC/MS/MS的方法进行血浆样品的测定,色谱柱为Aglient Zobax C18(2.1mm×150mm),流动相为甲醇-0.1%甲酸(含5mmol/L甲酸铵)=30∶70,流量为0.25mL/min;柱温为30℃。电喷雾ESI源,多反应监测(MRM):秦皮甲素,[M+H]+,m/z 341.27→179.1;替硝唑,[M+H]+,m/z 248.3→120.9。8只大鼠,雌雄各半,分别灌胃给予50mg/kg痛风利灵胶囊内容物(含秦皮甲素43mg/kg),于给药前及给药后多点抽取静脉血进行检测。结果:秦皮甲素的线性范围为12.5～1800ng/mL,日内、日间变异系数均小于10%。大鼠口服痛风利灵胶囊后,秦皮甲素药时曲线均分别符合一房室开放模型,T1/2为1.21h。结论:本实验建立的血药浓度测定方法简便、灵敏、特异,适用于大鼠血浆中秦皮甲素浓度的测定及药动学研究。

HPLC法测定秦皮中秦皮甲素、秦皮乙素的含量

采用高效液相色谱法测定中药秦皮中泰皮甲素、秦皮乙素的含量．固定相为十八烷基硅烷健合硅胶柱，流动相为甲醇—水（24：76），检测波长348nm．浓度在16μg／ml～176μg／ml范围内线性关系良好，相关系数分别为0．9995，0．9994，加样回收率秦皮甲素99．1±1．5％（n=5），秦皮乙素99．8±2．5％（n=5）。本方法日内精密度和日间精密度分别为0．8％和6．2％．该方法简便、快速、准确。

秦皮甲素两种给药途径在大鼠体内药代动力学研究

目的研究秦皮甲素两种给药途径在大鼠体内的药代动力学。方法秦皮甲素经大鼠灌胃(ig)和腹腔注射(ip)给药(100 mg/kg)后,采集不同时间点的大鼠血样,采用HPLC测定秦皮甲素在大鼠血浆中的浓度并计算其药代动力学参数。结果秦皮甲素灌胃给药和腹腔注射给药两种途径的药动学均符合一级吸收一室开放模型,其关键药物动力学参数分别为AUC_(0→∞)=(3.76±0.44)mg·h/L,(149.64±20.71)mg·h/L;Ke=(0.83±0.22)/h,(1.38±0.13)/h;C_(max)=(2.63±0.60)mg/L,(164.37±16.94)mg/L;T_(max)=(0.17±0.00)h,(0.17±0.00)h;T_(1/2(ke))=(0.88±0.21)h,(0.51±0.05)h;MRT=(1.69±0.31)h,(0.99±0.06)h。结论秦皮甲素两种给药途径的主要药动学参数有显著性差异,腹腔注射给药代谢速度较高,可以更加有效地降低血尿酸。

秦皮提取物及秦皮甲素对大鼠类风湿关节炎的保护作用

目的探讨秦皮提取物及秦皮甲素对大鼠类风湿关节炎的保护作用,比较秦皮提取物与秦皮甲素的抗炎效果。方法分别采用角叉菜胶和弗氏完全佐剂制备大鼠急性关节炎和类风湿关节炎模型,并给予秦皮提取物和秦皮甲素干预后,测量大鼠足厚度、体重变化,并记录关节评分,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定大鼠血浆白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性变化。结果与空白组比较,2种炎症模型大鼠模型组的IL-1β,TNF-α,MDA水平显著上升,SOD活性显著下降(P<0.05);与模型组比较,在2种炎症模型中,秦皮提取物组和秦皮甲素组IL-1β,TNF-α含量均显著降低(P<0.05);在角叉菜胶模型中,秦皮甲素在致炎1,2 h表现出抑制作用(P<0.05),秦皮提取物对SOD活力有显著影响(P<0.05),秦皮甲素组在降低大鼠TNF-α水平上较秦皮提取物组显著(P<0.05);在佐剂模型中,秦皮提取物组和秦皮甲素组MDA含量显著降低(P<0.05),秦皮提取物组关节评分较低(P<0.05),秦皮甲素组在降低IL-1β水平上较秦皮提取物组更显著(P<0.05)。结论秦皮提取物及秦皮甲素对类风湿关节炎有一定的保护作用,秦皮甲素可能为秦皮的主要抗炎物质,其作用机制可能与调节IL-1β和TNF-α水平有关。

白头翁汤中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素和秦皮苷同时检测高效液相色谱法的建立及各药味对其溶出的影响

为了考察白头翁汤中其他药味对秦皮主要有效成分溶出的影响,试验采用高效液相色谱法（HPLC）[Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱,以乙腈（A溶液）-0.1%磷酸（含0.2%三乙胺,B溶液）为流动相进行梯度洗脱,0-23 min,流动相中A溶液含量由10%逐渐升为20%,流速0.8 mL/min,检测波长345 nm,柱温30℃,进样量10μL]检测白头翁汤及相关组方中的秦皮素、秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素。结果表明：秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素浓度分别在0.090-22.500,0.120-29.800,0.110-27.100,0.076-19.000μg/mL内,线性关系良好;仪器精密度、方法的重复性、稳定性、加样回收试验的相对标准偏差（RSD）均在2.0%以内;秦皮素溶出率受其他物质影响不大;黄柏和白头翁汤醇提液能明显增大秦皮乙素的溶出;白头翁汤中秦皮苷溶出率都低于秦皮药材;秦皮甲素的溶出规律与秦皮苷非常相似。说明该方法准确灵敏,可用于白头翁汤等相关中药组方中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素和秦皮素的含量测定;白头翁汤中的黄连、黄柏、白头翁对秦皮中秦皮素、秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素的溶出都有影响。

多基原秦皮药材中秦皮甲素和秦皮苷的纯化工艺研究

目的建立一种适合纯化不同基原的秦皮药材中秦皮甲素和秦皮苷的工艺。方法以D101C大孔树脂为分离和纯化载体,以秦皮甲素和秦皮苷的含量为指标,建立并评价相关工艺参数。结果按照建立的工艺,分别以3种基原的秦皮药材为材料,采用确定的工艺处理,提取物中秦皮甲素和秦皮苷的转移率达到了80%以上,其质量分数可以提高5倍。结论该工艺适合多种基原的秦皮中秦皮甲素和秦皮苷的纯化。

树龄对秦岭白蜡树树皮中秦皮甲素、秦皮乙素与秦皮素含量的影响

目的考察树龄对秦岭白蜡树树皮中秦皮甲素、秦皮乙素与秦皮素含量的影响。方法采用HPLC法,以Hypersil GOLD C_(18)柱为固定相,甲醇-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长340 nm,流速1 m L·min^(-1)。结果 6年生的秦岭白蜡树树皮中秦皮甲素、秦皮乙素的含量最高,其次是5年和4年生的秦岭白蜡树树皮,3年生秦岭白蜡树树皮中上述2种成分的含量最低;而秦皮素含量则相反,最高的是3年生秦岭白蜡树,5年生和6年生的秦岭白蜡树树皮中的含量则较低。结论秦岭白蜡树树皮中秦皮甲素、秦皮乙素含量随着树龄增加呈升高趋势,而秦皮素含量则相反,随着树龄增加呈降低趋势。

高效液相色谱法测定对节白蜡中秦皮甲素的含量

目的研究高效液相色谱(HPLC)法测定对节白蜡中秦皮甲素的含量。方法采用甲醇提取样品。固定相为HypersilC18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相乙腈-水(25:75),流速1mL·min-1,紫外检测波长:336nm,柱温35℃。结果秦皮甲素在线性范围为2～10μg.mL-1,具有良好的线性关系,r=0.9997。平均回收率为100.19%,RSD=2.11%。结论该方法测定对节白蜡中秦皮甲素的含量,方法简便、快速、结果准确。

秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的荧光测定

本文根据胶束的增溶增敏作用，用β-环糊精（β-cyclodextrin）为胶束试剂，对秦皮中秦皮甲素、秦皮乙素的含量进行了测定，用国产930型荧光光度计实现了高灵敏的检测。秦皮甲素和秦皮乙素线性范围分别为2×10－8～8×10－6g／mL和2×10－9～8×10-6m／mL；检出限分别为3．78×10-10g／mL和5．54×10-11g／mL；秦皮甲素的平均回收率为96．6％，秦皮乙素的平均回收率为96．8％。测定效果良好。