秦皮素对动脉粥样硬化小鼠炎症的调节作用研究

目的 探讨秦皮素对动脉粥样硬化小鼠炎症的调节作用。方法 将ApoE-/-小鼠随机分为四组,每组15只。对照组,正常饲养小鼠;模型组,通过高脂喂养建立动脉粥样硬化模型;秦皮素低剂量组和秦皮素高剂量组,在动脉粥样硬化模型基础上灌胃给予20 mg/kg或50 mg/kg秦皮素,1次/d,连续12周。分别分析各组小鼠体质量,血脂和肝功改变,ELISA法检测脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2)、IL-8和IL-10的分泌,检测超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)以及丙二醛(MDA)的改变。结果 与模型组相比,秦皮素可降低动脉粥样硬化小鼠体质量,TC、TG、LDL-C、ALT和AST以及Lp-PLA2,抑制IL-8分泌,促进IL-10分泌,降低ROS、MDA水平,升高SOD活性(P<0.05)。结论 秦皮素通过调控氧化应激,抑制炎症因子,促进抗炎因子,调节促炎和抗炎,改善动脉粥样硬化。

基于铁死亡调节探讨秦皮素对动脉粥样硬化的作用及机制研究

目的:基于秦皮素对铁死亡的调节作用,进一步探讨秦皮素对动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:通过高脂饮食构建Apo E敲除(Apo E^(-/-))小鼠动脉粥样硬化模型,随机分为正常饮食组(NC组)、高脂饮食组(HFD组)、铁死亡抑制剂组(Fer-1组)、秦皮素组(Fra组)和萝卜硫素组(Sul组);用过氧化氢(H_(2)O_(2))干预人原代脐静脉内皮细胞(HUVECs)构建体外AS模型,随机分为NC组、H_(2)O_(2)组、Fer-1组、Fra组和Sul组。油红O染色用于评估AS病变大小,血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和总胆固醇(TC)测定试剂盒用于评估脂质代谢。细胞计数实验(CCK-8)用于检测秦皮素毒性作用和细胞增殖能力,铁、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)试剂盒用于测定小鼠主动脉组织和HUVECs中铁死亡水平。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)和蛋白免疫印迹(western blotting)实验主要通过检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和血红素加氧酶1(HMOX1)表达水平以评估秦皮素的抗铁死亡作用。结果:秦皮素能够减轻AS小鼠血清脂质沉积和主动脉粥样硬化,并且保护HUVECs免受H_(2)O_(2)诱导的细胞死亡。与Fer-1组结果一致,秦皮素在体内和体外均能抑制促铁死亡生物标志物铁和MDA表达水平,上调抗铁死亡生物标志物GSH和GPX4表达水平。此外,秦皮素减轻了H_(2)O_(2)诱导的HUVECs发生铁死亡,而这种保护作用能被HMOX1特异性激活剂萝卜硫素所逆转。结论:秦皮素可能通过下调HMOX1抑制铁死亡,从而减轻AS。

转录组测序筛选大鼠滑膜炎差异表达基因及秦皮素治疗靶点的体外验证

目的基于转录组测序分析碘乙酸钠(monosodium iodoacetate,MIA)诱导的膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠相比于正常组大鼠滑膜组织中的表达差异基因,并初步筛选出秦皮素(fraxetin)治疗滑膜炎的靶点。方法将SD大鼠分为KOA模型组和对照组,采用MIA膝关节注射法制备大鼠右膝KOA模型。造模4周后,取各组大鼠右膝滑膜组织进行转录组测序,获得了KOA模型组与对照组大鼠滑膜组织中mRNA差异表达情况,然后进行差异基因表达分析、GO富集分析、KEGG功能富集分析和PPI蛋白网络互作分析。同时将巨噬细胞Raw264.7分为对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)干预组和LPS+60μmol/L秦皮素联合干预组,并采用实时荧光定量PCR法对转录组测序后的差异基因分析结果进行验证。结果转录组测序后的差异基因表达分析显示,KOA模型组与对照组相比,共有1730个上调基因和1546个下调基因,其中显著上调的基因有mmp12、Acod1、Acan、Col2a1和Atp6v0d2等[|log2(FoldChange)|≥1,校正后P<0.01]。KEGG聚类分析和GO聚类分析显示,差异基因主要参与调节炎症及免疫代谢过程,例如三羧酸循环、线粒体功能。LPS干预后的Raw264.7细胞中Acod1与Atp6v0d2显著高表达(P<0.0001),而且相较于LPS干预组,LPS+秦皮素联合干预后的Raw264.7细胞中Atp6v0d2表达水平显著降低(P<0.001)。结论MIA诱导KOA建模后,大鼠膝关节滑膜组织中介导炎症及免疫代谢的巨噬细胞相关基因mmp12、Acod1和Atp6v0D2等高表达,提示KOA的发生、发展过程中可能存在着由滑膜巨噬细胞介导的免疫代谢改变。LPS干预后巨噬细胞Raw264.7中Acod1和Atp6v0d2表达增高可初步证实这一结果。其中Atp6v0D2可能是秦皮素治疗滑膜炎的一个潜在靶点,这为KOA治疗提供了新的思路。

秦皮素与人血清白蛋白相互作用研究

目的:采用荧光光谱法分析秦皮素与人血清白蛋白(HSA)的相互作用及分子结构特征。方法:应用荧光分光光度计,通过荧光淬灭分析、同步荧光分析、三维荧光分析、疏水探针分析,获得秦皮素与HSA相互作用的光谱学信息。结果:荧光淬灭分析结果显示,秦皮素通过结合HSA引起HSA荧光淬灭,荧光猝灭机制属于单一静态猝灭;计算得出的热力学参数熵变和焓变均为正值,表明疏水力是驱动秦皮素结合HSA的主要作用力。同步荧光分析表明,秦皮素对HSA分子中Trp残基微环境影响明显,可使其特征光谱峰发生蓝移,再次表明疏水力在秦皮素结合HSA中起到重要作用。三维荧光分析结果表明,秦皮素与HSA相互作用改变了HSA的空间结构、氨基酸残基的微环境以及荧光发射峰强度;疏水探针分析结果显示,疏水探针能够显著影响秦皮素与HSA的结合,进一步验证了疏水力是秦皮素结合HSA的主要作用力。结论:秦皮素能够与HSA相互作用结合,导致HSA分子结构及光谱特性发生改变。

秦皮素抑菌活性及其机制研究

目的以金黄色葡萄球菌为供试菌株来研究秦皮素对其的抑制活性及其机制。方法利用牛津杯法、2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、生长曲线的测定、细胞膜渗透性测定、SDS-PAGE蛋白谱变化方法等对秦皮素的抑菌活性及其机制进行研究。结果秦皮素能够影响金黄色葡萄球菌细胞膜的通透性,秦皮素作用20 h,菌体可溶性蛋白总量减少55.74%。结论秦皮素对金黄色葡萄球菌具有明显的抑制作用,其抑菌机制可能是通过抑制蛋白质的合成来实现的。

秦皮素抑制NF-κB/COX-2信号通路改善PC12细胞损伤

目的研究秦皮素(fraxetin)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致大鼠嗜铬细胞瘤细胞株(PC12细胞)损伤的作用并考察炎症反应中相关蛋白的变化。方法采用MTT法研究秦皮素对PC12细胞活力的作用,筛选合适给药浓度。试验共分为3组即对照组(Control组)、LPS模型组和秦皮素保护组(fraxetin+LPS组)。采用四甲基偶氮唑盐比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞活性变化;采用倒置显微镜和4′,6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride(DAPI)荧光核染色法观察细胞形态学变化;采用real-time PCR法检测细胞因子IL-1、IL-6、TNF-α及环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)mRNA水平;采用western blot法检测COX-2和NF-κB-p65蛋白表达水平。结果与模型组比较秦皮素保护组细胞存活率显著升高(P<0.01)。LPS模型组炎症因子IL-1、IL-6和TNF-αmRNA水平,NF-κB-p65和COX-2蛋白表达水平相对于对照组均明显升高(P<0.01)。与此同时秦皮素治疗组其炎症细胞因子mRNA水平,NF-κB和COX-2蛋白的表达水平均显著下调。结论秦皮素对LPS所致PC12细胞损伤有保护作用,其效应可能与抑制NF-κB/COX-2信号通路,降低炎症反应有关。

秦皮素对脑缺血再灌注损伤小鼠的保护作用

目的观察秦皮素对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法采用反复夹闭双侧颈总动脉制备小鼠脑缺血再灌注损伤模型,秦皮素高、中、低3个剂量于造模前分别腹腔注射给药,术后24 h及48 h,用跳台法分别测定小鼠的学习记忆能力,测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量及髓过氧化物酶(MPO)活性,并测定Na^+-K^+-ATPase,Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATPase活性,HE染色观察脑组织的病理形态学变化。结果模型组小鼠的学习记忆能力降低,秦皮素各剂量组小鼠的学习记忆能力明显提高(P<0.05)。秦皮素高、中、低剂量组可提高脑缺血再灌注小鼠脑组织SOD活性,降低MDA含量和MPO活性,与模型组差异显著(P<0.05)。秦皮素各剂量组可明显提高脑组织Na+-K+-ATPase,Ca2+-Mg2+-ATPase活性(P<0.05)。结论秦皮素对脑缺血再灌注损伤小鼠有保护作用,其机制与抗氧化、抑制炎症反应及改善细胞能量代谢有关。

树龄对秦岭白蜡树树皮中秦皮甲素、秦皮乙素与秦皮素含量的影响

目的考察树龄对秦岭白蜡树树皮中秦皮甲素、秦皮乙素与秦皮素含量的影响。方法采用HPLC法,以Hypersil GOLD C_(18)柱为固定相,甲醇-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长340 nm,流速1 m L·min^(-1)。结果 6年生的秦岭白蜡树树皮中秦皮甲素、秦皮乙素的含量最高,其次是5年和4年生的秦岭白蜡树树皮,3年生秦岭白蜡树树皮中上述2种成分的含量最低;而秦皮素含量则相反,最高的是3年生秦岭白蜡树,5年生和6年生的秦岭白蜡树树皮中的含量则较低。结论秦岭白蜡树树皮中秦皮甲素、秦皮乙素含量随着树龄增加呈升高趋势,而秦皮素含量则相反,随着树龄增加呈降低趋势。

白头翁汤中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素和秦皮苷同时检测高效液相色谱法的建立及各药味对其溶出的影响

为了考察白头翁汤中其他药味对秦皮主要有效成分溶出的影响,试验采用高效液相色谱法（HPLC）[Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱,以乙腈（A溶液）-0.1%磷酸（含0.2%三乙胺,B溶液）为流动相进行梯度洗脱,0-23 min,流动相中A溶液含量由10%逐渐升为20%,流速0.8 mL/min,检测波长345 nm,柱温30℃,进样量10μL]检测白头翁汤及相关组方中的秦皮素、秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素。结果表明：秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素浓度分别在0.090-22.500,0.120-29.800,0.110-27.100,0.076-19.000μg/mL内,线性关系良好;仪器精密度、方法的重复性、稳定性、加样回收试验的相对标准偏差（RSD）均在2.0%以内;秦皮素溶出率受其他物质影响不大;黄柏和白头翁汤醇提液能明显增大秦皮乙素的溶出;白头翁汤中秦皮苷溶出率都低于秦皮药材;秦皮甲素的溶出规律与秦皮苷非常相似。说明该方法准确灵敏,可用于白头翁汤等相关中药组方中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素和秦皮素的含量测定;白头翁汤中的黄连、黄柏、白头翁对秦皮中秦皮素、秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素的溶出都有影响。

秦皮素对苯肾上腺素诱导的大鼠心肌细胞肥大的影响

目的观察秦皮素对苯肾上腺素诱导的原代SD乳鼠心肌细胞肥大的影响。方法建立苯肾上腺素诱导的SD乳鼠原代心肌细胞肥大模型,观察秦皮素对心肌细胞肥大的影响;图像分析法计算心肌细胞面积;[3 H]-亮氨酸掺入法测试心肌细胞蛋白质合成速率;实时定量荧光PCR法检测心肌细胞Nrf2和肥大分子标志物心房钠尿肽、心房利尿肽的mRNA表达水平。结果(1)80μmol/L苯肾上腺素刺激心肌细胞48h能成功复制SD乳鼠心肌细胞肥大模型并伴随Nrf2表达量的增加;(2)秦皮素呈剂量依赖性地抑制苯肾上腺素刺激的SD乳鼠心肌细胞面积的增大、蛋白质合成速率的增加和肥大分子标志物的上调。结论秦皮素能显著抑制PE诱导的原代大鼠心肌细胞肥大。

异秦皮素治疗脑梗死大鼠的疗效观察及机制研究

目的:探究异秦皮素(ISO)治疗脑梗死大鼠的疗效及机制。方法:Longa法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。32只雄性SD大鼠分为假手术组(sham组)、MCAO组、ISO 10组(10 mg/kg)和ISO 20组(20 mg/kg),每组各8只。药物组大鼠每天给予腹腔注射相应剂量的ISO;sham组、MCAO组腹腔注射相同体积的生理盐水,持续8周。评估各组神经功能后,取相应标本行TUNEL、HE和Nissl染色,测量脑组织含水量后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测活性氧自由基(ROS)、血清丙二醛(MDA)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-18、IL-10、超氧化物歧化酶(SOD)的含量。采用Western blotting法检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)和CARD结构域凋亡相关颗粒样蛋白(ASC)的表达水平。结果:两组ISO处理后均可降低脑梗死引起的神经功能评分(P<0.01)。TUNEL染色表明,两组ISO处理后均可减少脑梗死后TUNEL阳性细胞数量(P<0.01);HE和Nissl染色结果表明,两组ISO处理后均能有效减轻脑梗死后神经元损伤;ISO 20组脑梗死后脑组织水含量降低(P<0.05)。ISO 20组ROS和MDA含量均低于MCAO组(P<0.01),SOD含量高于MCAO组(P<0.01);与MCAO组比较,两组ISO处理后均可降低TNF-α、IL-6水平(P<0.01),同时IL-10水平上调(P<0.01)。两组ISO处理后均能降低NLRP3和ASC含量(P<0.01);两组ISO处理后均能降低IL-1β和IL-18水平(P<0.01)。结论:ISO可能通过调节NLRP3炎症小体来改善脑梗死后的神经炎症和氧化应激,可能是临床治疗脑梗死的潜在有效药物。

秦皮素的抑菌作用及其对嗜水气单胞菌毒力的影响

为探讨中草药单体秦皮素对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)生长和毒力的影响,实验测定了秦皮素对嗜水气单胞菌最低抑菌浓度(MIC)、生长曲线、生物膜以及脂肪酶活性、运动性、蛋白酶活性和溶血性等毒力相关因子的影响。结果表明,秦皮素对嗜水气单胞菌具有明显的抑制效果,MIC为128μg/mL;秦皮素浓度大于16μg/mL时,对嗜水气单胞菌的生物膜形成有显著促进作用(P<0.05);秦皮素浓度大于8μg/mL时,对嗜水气单胞菌的脂肪酶活性有显著降低作用(P<0.05);秦皮素浓度为2~8μg/mL时,对嗜水气单胞菌的运动性和溶血性无显著影响(P>0.05),但能降低嗜水气单胞菌蛋白酶活性(P<0.05)。秦皮素对嗜水气单胞菌有一定的抑菌作用,但期望通过低浓度秦皮素实现对嗜水气单胞菌的防治仍有待进一步研究。

秦皮素通过调节JAK1/STAT3信号通路抑制肝纤维化

目的探讨秦皮素对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的防治作用及其机制。方法将48只成年雄性SD大鼠随机均分为4组,即正常对照组、模型组、秦皮素低剂量组和秦皮素高剂量组。除正常对照组外,其余3组大鼠给予50%CCl4花生油混合液(2 mL·kg-1)灌胃,每周2次,建立肝纤维化模型,持续8周。给药组造模的同时每日给予秦皮素干预,剂量分别为25 mg·kg-1和50 mg·kg-1。正常对照组给予等量的生理盐水。8周后处死各组大鼠,称量体重和肝重;全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和总胆红素(TBIL);放射性免疫法测定血清透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)和Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)。HE和Masson染色考察肝组织病理学改变,免疫组织化学染色检测肝组织α-SMA的表达;Western blot检测肝脏组织中α-SMA和JAK1/STAT3信号通路关键蛋白的表达水平;Q-PCR检测肝窦毛细血管化调控因子(VEGF、β-FGF和PD-ECGF)基因的表达水平。结果与模型组相比,秦皮素给药组中肝纤维化大鼠肝功能指标(ALT、AST、TBIL)和纤维化指标(HA、LN、CⅣ、PⅢNP)血清水平明显减低。HE和Masson染色结果显示秦皮素能显著改善肝纤维化大鼠肝脏组织病理学结构和胶原沉积程度。与此同时,秦皮素能够抑制肝星状细胞激活标志物(α-SMA)以及肝窦毛细血管化调控因子(VEGF、β-FGF、PD-ECGF)的表达。与模型组相比,秦皮素给药组大鼠肝脏中p-JAk1和p-STAT3蛋白的表达水平显著降低。结论秦皮素可改善大鼠肝纤维化,其机制可能与抑制JAK1/STAT3信号通路有关。

秦皮素通过抑制EGFR及其下游AKT信号通路抑制MCF-7细胞增殖及迁移

表皮生长因子受体(EGFR)是细胞内多种信号调节通路的交汇点,其介导的信号通路与乳腺癌的发生、发展、转移和侵袭等密切相关,已成为乳腺癌治疗的新靶点之一。但目前关于秦皮素的抗乳腺癌作用与EGFR通路的关系,国内外尚未见相关报道。本研究结果表明,秦皮素能够通过抑制EGFR及其下游的AKT信号通路来发挥其抗乳腺癌作用。秦皮素在体外可促进T、B淋巴细胞增殖及巨噬细胞吞噬能力,提示秦皮素可能促进小鼠免疫功能。Western印迹结果表明,秦皮素能显著抑制EGFR蛋白及其下游的AKT蛋白磷酸化水平。划痕实验结果表明,秦皮素能抑制MCF-7细胞的迁移。此外,秦皮素还能促进小鼠巨噬细胞的吞噬能力和代谢活力,促进T、B淋巴细胞的增殖,提高NK细胞的杀伤活力。本研究结果提示,秦皮素的抗乳腺癌作用是通过抑制EGFR信号通路,抑制MCF-7细胞迁移和促进小鼠的免疫功能等多种途径来实现的。

水马桑4种不同部位中秦皮素、东莨菪内酯的测定

目的测定水马桑根、茎、叶、花中秦皮素、东莨菪内酯的含有量。方法水马桑提取液的HPLC分析采用Cosmosil 5C18-MS-Ⅱ色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-0. 25%冰醋酸(30∶70);体积流量1. 0 m L/min;柱温30℃;检测波长339 nm。结果秦皮素、东莨菪内酯均在40~640μg/m L范围内线性关系良好(r=0. 999 8、1. 000 0),平均加样回收率分别为96. 27%、97. 14%,RSD分别为0. 98%、1. 51%。在4种部位中,秦皮素含有量依次为茎>叶>根>花,东莨菪内酯含有量依次为叶>根>茎>花。结论从化学成分、资源可持续利用角度出发,水马桑可考虑以茎叶入药(与根同等)。

基于炎症免疫调节探讨秦皮素抗动脉粥样硬化的作用及机制研究

目的:探讨基于炎症免疫调节对秦皮素(FRA)抗动脉粥样硬化(AS)的作用及机制研究。方法:以ApoE-/-小鼠为研究对象,通过喂养高脂饲料建立AS模型,实验分为对照组(control组)、模型组(AS组)、秦皮素低剂量组(AS+FRA-L组)、秦皮素高剂量组(AS+FRA-H组);全自动生化分析仪测定小鼠血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量变化;ELISA检测各组小鼠血清中氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)、TNF-α、IL-1β及IL-6的含量变化;HE染色检测各组小鼠主动脉中斑块的形成情况;油红O染色检测小鼠AS斑块中脂质的沉积情况;Masson染色检测主动脉中胶原蛋白的含量变化;免疫荧光检测各组小鼠AS斑块中巨噬细胞MOMA-2的表达;免疫组织化学法检测小鼠主动脉中白细胞分化抗原40(CD40)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)蛋白的表达变化;qRT-PCR检测小鼠主动脉中CD40、MMP-9、VCAM-1 mRNA的表达变化。结果:与AS组相比,秦皮素可使血清中TC、TG、LDL-C含量降低(均P<0.05),HDL-C含量升高(P<0.05),也可降低血清中oxLDL、TNF-α、IL-1β和IL-6的含量(均P<0.05)。HE和油红O结果表明秦皮素可改善AS小鼠的斑块形成和脂质沉积。Masson结果表明秦皮素可改善胶原蛋白沉积程度。免疫荧光结果显示,秦皮素可减少巨噬细胞MOMA-2的表达。免疫组化和qRT-PCR结果表明,秦皮素可下调小鼠主动脉中CD40、MMP-9、VCAM-1蛋白和mRNA的表达。结论:秦皮素可改善AS,其机制可能与炎症免疫调节有关。

秦皮素的生物活性及药物作用机制研究进展

秦皮素是一种天然的简单香豆素类化合物,是传统中药秦皮的主要成分之一,近年来大量研究证实其具有多种生物活性及药理作用,如抗癌、抗炎、抗菌、防治骨质疏松及神经保护等。本文对秦皮素的生物活性及药物作用机制的国内外研究进展进行归纳总结,以期为秦皮素的进一步研究和开发利用提供依据。

异秦皮素腹腔注射对脑梗死大鼠的治疗作用及其作用机制

目的观察异秦皮素(ISO)腹腔注射对脑梗死大鼠的治疗作用,并探讨其作用机制。方法将SD大鼠随机分为四组各8只,药物1、2组及模型组均采用线栓法建立大鼠右侧大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。药物1、2组分别腹腔注射10、20 mg/kg的ISO,假手术组、模型组腹腔注射相同体积生理盐水,1次/d,持续8周。评估神经行为后,测定脑组织含水量,HE、TUNEL、Nissl染色观察神经元损伤情况,检测脑组织中氧化应激指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),检测血清及脑组织中炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10,检测脑组织中炎症小体关键蛋白NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)及其活化标志IL-18、IL-1β。将神经细胞株PC12分为四组,模型组及干预组制作氧葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R)细胞模型,干预组同时给予ISO处理,干预+激动剂组在加入ISO的同时加NLRP3激动剂Nigericin,对照组不处理;收集模型组、干预组和对照组细胞,采用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪测算细胞凋亡率,检测细胞中氧化应激标志物ROS、MDA、乳酸脱氢酶(LDH);收集四组细胞,检测细胞中的NLRP3、ASC、IL-18、IL-1β。结果在实验动物中,与假手术组比较,模型组及药物1、2组神经功能评分、脑组织含水量升高(P均<0.01),HE、Nissl染色示神经元损伤明显,TUNEL阳性细胞率增高,脑组织中ROS、MDA升高而SOD降低,血清、脑组织促炎因子TNF-α、IL-6及脑组织NLRP3、ASC、IL-18、IL-1β表达升高(P均<0.01);与模型组比较,药物1、2组神经功能评分、脑组织含水量降低(P均<0.01),HE、Nissl染色示神经元损伤减轻,TUNEL阳性细胞率降低,脑组织中ROS、MDA降低而SOD升高,血清、脑组织TNF-α、IL-6及脑组织NLRP3、ASC、IL-18、IL-1β降低,而抗炎因子IL-10升高(P均<0.01)。在细胞水平上,与对照组比较,模型组细胞活力降低,细胞凋亡率升高,细胞LDH、ROS、MDA均升高(P均<0.01);与模型组比较,干预组细胞活力升高,细胞凋亡率升降低,细胞LDH、ROS、MDA均降低(P均<0.01);细胞中NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18模型组、干预+模型组>干预组>对照组(P均<0.01)。结论ISO可能通过调节NLRP3炎症小体来抑制脑梗死后的神经炎症和氧化应激,其可能成为临床治疗脑梗死的潜在有效药物。

秦皮素对大鼠动脉粥样硬化修复及对炎症免疫因子的调节作用

目的探讨秦皮素对大鼠动脉粥样硬化修复作用及对炎症免疫因子的调节作用。方法大鼠随机分为对照组及造模组,造模组采用腹腔注射维生素D3联合高糖高脂饲料喂养建立动脉粥样硬化大鼠模型。造模完成后,随机分为动脉粥样硬化模型组、秦皮素低、中、高剂量组及辛伐他汀组各12只。秦皮素各剂量组分别腹腔注射给予25、50、100 mg/kg秦皮素,辛伐他汀组灌胃给予5 mg/kg辛伐他汀,1次/d,连续给药8 w,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)及三酰甘油(TG)水平,同时测定冠状动脉肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-8、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、还原型谷胱甘肽(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及活性氧(ROS)水平,苏木素-伊红(HE)染色测定冠状动脉组织病理学检查,实时定量-聚合酶链式反应(PCR)测定冠状动脉MCP-1、趋化因子受体(CCR)2、MCP诱导蛋白(MCPIP)、C-反应蛋白(CRP)及基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA水平,Western印迹测定冠状动脉MCP1、CCR2、MCPIP、CRP及MMP-9蛋白表达。结果与对照组比较,动脉粥样硬化模型组血清LDL-C、TC及TG水平,冠状动脉MDA、ROS、TNF-α、IL-6、IL-8及MCP-1水平,冠状动脉MCP1、CCR2、MCPIP、CRP及MMP-9 mRNA及蛋白水平均显著升高,冠状动脉GSH-Px及SOD水平显著降低(均P<0.05);与动脉粥样硬化模型组比较,秦皮素低、中、高剂量组及辛伐他汀组LDL-C、TC及TG水平,冠状动脉MDA、ROS、TNF-α、IL-6、IL-8及MCP-1水平,冠状动脉MCP1、CCR2、MCPIP、CRP及MMP-9 mRNA及蛋白水平均显著降低,冠状动脉GSH-Px及SOD水平显著升高(均P<0.05)。且随着秦皮素剂量增加,各指标变化更显著(P<0.05)。结论秦皮素能够显著改善大鼠动脉粥样硬化状态,调节血脂水平,抑制冠状动脉炎症及氧化应激损伤,其机制可能与调节炎症免疫通路有关。

秦皮中所含的秦皮素和秦皮素甙的主要药理作用

据《本草纲目》载,秦皮“主治风寒湿痹,……除热,……小儿风癎……身执”,“主热痢下重”等功用,为我国常用治痢复方白头翁汤组成之一。近年来,秦皮的生药学及其有效成分的研究均有报道。据梅氏等从辽宁产秦皮即大叶梣(Fraxinus rhynchophylla Hance)中分离出两种有效成分。