非小细胞肺癌患者外周血中可溶性程序性死亡配体-1、趋化因子配体9、基质金属蛋白酶9水平与预后生存的关系

目的 观察非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血可溶性程序性死亡配体-1(sPD-L1)、趋化因子配体9(CXCL9)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平与临床特征及预后生存的相关性。方法 我院收治的98例NSCLC患者(研究组),选取同期肺部良性病变患者50例(对照1组)、健康志愿者50例(对照2组),比较三组外周血sPD-L1、CXCL9、MMP-9表达水平。随访研究组治疗后1年的预后生存情况,分为生存组与病死组,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析sPD-L1、CXCL9及MMP-9对预后生存的预测价值。结果 研究组外周血sPD-L1、CXCL9、MMP-9水平较对照1组、对照2组高,对照1组较对照2组高(P<0.05);TNM分期为Ⅱ期患者CXCL9、MMP-9表达水平较Ⅰ期高,发生淋巴结转移患者sPD-L1、MMP-9表达水平较未发生淋巴结转移高(P<0.05);NSCLC患者TNM分期与CXCL9、MMP-9水平成正相关,淋巴结转移与sPD-L1、MMP-9水平成正相关(P<0.05);sPD-L1、CXCL9、MMP-9预测NSCLC患者预后的最佳截断值分别为1.915 ng/ml、1.980 ng/ml、179.030μg/L,且三项指标联合预测NSCLC患者预后生存情况的AUC及特异性均高于单一指标预测(P<0.05)。结论 NSCLC患者外周血sPD-L1、CXCL9、MMP-9表达水平上调,且与临床分期、淋巴结转移相关,三者联合对NSCLC患者预后有较高预测价值。

阻断程序性死亡配体-1改善糖尿病脓毒症小鼠免疫状态并对肾脏起保护作用

目的探讨阻断程序性死亡配体-1(PD-L1)对糖尿病脓毒症小鼠免疫状态的改变及肾功能保护的可能机制。方法C57BL/6J雄性小鼠随机分为四组:非糖尿病鼠假手术组(Sham组)、糖尿病鼠假手术组(DMS组)、糖尿病鼠脓毒症模型组(DMCLP组)和PD-L1抗体治疗组(anti-PD-L1组),每组6只。采用高糖高脂饮食喂养联合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)注射构建糖尿病小鼠模型,模型建立后继续饲养28 d,盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)构建脓毒症小鼠模型,PD-L1抗体治疗组于小鼠CLP后1 h腹腔注射抗PD-L1抗体50μg/只。24 h后采用流式细胞术观察各组小鼠经典单核细胞亚型及其表面组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清炎症因子IL-6、TNF-α、IL-10表达,全自动生化检测仪检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(SCr)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肾组织损伤情况。结果与Sham组和DMS组比较,DMCLP组小鼠经典单核细胞(Ly6C hi单核细胞)百分比明显增加,其表面MHCⅡ表达明显减少,外周血炎症因子IL-6、TNF-α、IL-10水平升高,BUN和SCr水平明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05);肾脏病理损害加重。与DMCLP组比较,anti-PD-L1治疗组小鼠Ly6C hi单核细胞百分比减少,其表面MHCⅡ表达明显增加,外周血炎症因子IL-6、TNF-α、IL-10水平下降,BUN和SCr水平降低,差异有统计学意义(均P<0.05);肾脏病理损害减轻。结论PD-L1抗体通过改善经典单核细胞功能而改变糖尿病脓毒症小鼠免疫状态,进而对肾脏起保护作用。

程序性死亡配体-1和缺氧诱导因子-1α表达与胃癌病人临床病理特征及预后的关系

目的探讨程序性死亡配体-1(PD-L1)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达与胃癌病人临床病理特征及预后的关系。方法2019年7月~2020年7月行胃癌根治术治疗的胃癌病人100例,取病人癌组织标本并选取其癌旁组织(距离癌组织≥5 cm处的正常组织)作为对照组。采用免疫组化SP法检测PD-L1、HIF-1α的表达。采用Spearman相关性分析分析胃癌组织中PD-L1和HIF-1α的相关性;采用Kaplan-Meier法进行胃癌病人3年生存关系分析;采用单因素、多因素Cox回归分析胃癌病人预后死亡的影响因素。结果100例胃癌病人中,PD-L1阳性表达52例,阴性表达48例;HIF-1α阳性表达67例,阴性表达33例,PD-L1和HIF-1α在胃癌组织中的阳性表达率分别为52.00%、67.00%,高于癌旁组织(11.00%、18.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,胃癌组织中的PD-L1和HIF-1α表达呈正相关(r=0.730,P<0.001)。胃癌病人PD-L1和HIF-1α的表达与TNM分期、淋巴结有无转移、局部有无浸润有关(P<0.05)。胃癌病人术后3年总生存率为48.00%,PD-L1、HIF-1α阳性表达病人3年生存率为28.85%、31.34%,均低于PD-L1、HIF-1α阴性表达病人(68.75%、81.82%)(Log rankχ2=25.155,P<0.001,Log rankχ2=24.552,P<0.001);且PD-L1、HIF-1α阳性表达、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移和局部浸润均为胃癌病人不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论胃癌病人癌组织中PD-L1和HIF-1α均高表达,二者呈正相关,并与病人TNM分期、淋巴结转移等临床病理特征及不良预后有关。

基于深度学习的程序性死亡配体-1病理切片辅助诊断系统研究

目的:利用深度学习技术实现对程序性死亡配体-1(PD-L1)病理切片的辅助诊断。方法:通过开发细胞级深度学习定位、分类、识别算法,实现PD-L1病理切片中恶性肿瘤区域的定位与肿瘤细胞的精确检测,开发PD-L1病理切片辅助诊断阅片平台,为病理医生提供快速、准确的PD-L1辅助诊断信息。结果:基于该辅助诊断系统对200例PD-L1病理切片进行测试,系统与病理医师人工判读结果具有较高的一致性(ICC相关系数值为0.927),同时解决了现有PD-L1染色结果辅助判读方法准确性、稳定性与鲁棒性较差的问题。结论:基于深度学习的PD-L1病理切片辅助诊断系统性能整体表现良好,具有较强的客观性,是人工智能辅助诊断的有益探索。

不同阈值程序性死亡配体-1的表达在非表皮生长因子受体突变的肺腺癌患者中的临床意义

目的 评估不同阈值程序性死亡配体-1(PD-L1)的表达对非表皮生长因子受体(EGFR)突变的肺腺癌患者的治疗效果及其预后的影响。方法 回顾性分析75例接受PD-L1免疫治疗的非EGFR突变的肺腺癌患者的临床资料,应用免疫组化检测患者中不同阈值下PD-L1的表达水平。分析比较不同阈值PD-L1表达水平与患者临床资料的相关性以及对患者预后的影响。结果 75例患者中,PD-L1<1%和PD-L1≥1%组中,PD-L1的表达水平与患者性别、年龄、ECOG评分、TNM分期、Ki-67和淋巴结转移等因素无关(P>0.05);PD-L1<5%和PD-L1≥5%组中,PD-L1的表达与Ki-67及淋巴结转移有关(P<0.05)。PD-L1<1%和PD-L1≥1%组中,PD-L1的表达与化疗客观有效率、PFS及OS均无统计学差异(ORR 58.5%vs 38.2%,P=0.106;mPFS 18.4个月vs 21.2个月,P=0.158;mOS 28.1个月vs 32.7个月,P=0.156)。PD-L1<5%和PD-L1≥5%组中,PD-L1的表达与化疗客观有效率、PFS有统计学差异(ORR 36.8%vs 61.1%,P=0.013;mPFS 17.1个月vs 23.2个月,P=0.020)。以TPS 5%为界,单因素分析Ki-67≥15%、淋巴结转移及PD-L1表达阳性是影响非EGFR突变肺腺癌患者PFS的危险因素(P=0.031,P=0.003,P=0.004);多因素分析中PD-L1表达阳性是影响无病生存期的独立危险因素(P=0.001)。结论 不同阈值PD-L1的表达在非EGFR突变的肺腺癌患者中存在较大差异,提示不同阈值界定的PD-L1的表达可作为该类患者个体化治疗的预测指标。

人子宫颈癌异常表达程序性死亡配体-1并促CD4＋T和CD8＋T细胞凋亡

目的:探讨程序性死亡配体-1(Programmed death ligand-1,PD-L1)在人子宫颈癌的表达及其与肿瘤内CD4+T和CD8+T细胞浸润的相关性,体外实验观察重组人PD-L1蛋白对宫颈癌患者外周血T细胞凋亡的影响。方法:采用免疫组化SP法检测PD-L1在10例正常人宫颈组织和67例宫颈癌组织中的表达以及死亡受体-1(Programmed death receptor-1,PD-1)在宫颈癌内浸润淋巴细胞的表达;TUNEL法检测肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡;免疫荧光分析宫颈癌内浸润的CD4+T和CD8+T淋巴细胞数量;流式细胞术分析PD-L1促进宫颈癌患者外周血活化CD4+T和CD8+T细胞凋亡情况。结果:正常子宫颈上皮不表达PD-L1;宫颈癌PD-L1的表达率为70%(47/67)。部分宫颈癌内浸润的淋巴细胞表达PD-1,且淋巴细胞存在凋亡现象。PD-L1阳性宫颈癌肿瘤内浸润的CD8+T细胞数量明显减少(P<0.05)。体外实验发现PD-L1与健康人或宫颈癌患者外周血活化T细胞混合培养48 h后,T细胞凋亡率明显高于空白组,2组平均凋亡率分别为(32.8±1.4)%、(38.3±1.5)%(P<0.05)和(27.7±1.3)%、(30.9±1.9)%(P<0.05);抗PD-1抗体使PD-L1诱导的T细胞凋亡率下降,分别为(29.8±1.6)%和(31.6±1.4)%(P>0.05)。PD-L1对人外周血活化CD4+T和CD8+T细胞均有促凋亡作用。结论:人子宫颈癌异常表达PD-L1与肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡及CD8+T细胞数量减少有关。PD-L1经PD-1促进活化的CD4+T和CD8+T细胞凋亡。

程序性死亡配体-1表达对I期肺腺癌术后患者预后的价值

目的探究程序性死亡配体-1(PD-L1)表达对Ⅰ期肺腺癌肺叶切除联合系统性淋巴结清扫术后患者预后的价值。方法收集86例经电视胸腔镜下肺叶切除联合系统性淋巴结清扫术的I期浸润性肺腺癌的患者,检测其血清中可溶性程序性死亡配体-1(s PD-L1),分析s PD-L1对术后复发及生存的预测价值。结果 sPD-L1高表达胸膜受累、术后ECOG评分、分化程度、临床分期、病理类型及GGO状态具有相关性(P <0.05)。s PD-L1对术后复发诊断的曲线下面积AUC为0.730(95%CI:0.671,0.876),对术后生存诊断的AUC为0.771(95%CI:0.685,0.907)。Cox风险比例模型分析显示,ECOG评分、PD-L1、分化程度、临床分期、GGO状态及胸膜受累为术后预后的影响因素。结论 sPD-L1高表达为I期肺腺癌患者经电视胸腔镜肺叶切除联合系统淋巴结清扫术后复发、预后生存的危险因素。

可溶性程序性死亡受体-1、可溶性程序性死亡配体-1和γ-干扰素在晚期肿瘤患者血清中的表达特征和临床意义

目的探讨可溶性程序性死亡受体-1(sPD-1)、可溶性程序性死亡配体-1(sPD-L1)和γ-干扰素(IFN-γ)在晚期肿瘤患者血清中的表达特征及其临床意义。方法检测晚期肺癌患者(肺癌组)和消化道肿瘤患者(消化道肿瘤组)血清免疫标志物sPD-1、sPD-L1、IFN-γ和肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原153(CA153)、糖类抗原199(CA199)、糖类抗原724(CA724)、细胞角蛋白19片段(Cyfra211)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的水平,分析其与健康人(体检组)和肺炎患者(肺炎组)间的差异;分析肿瘤患者IFN-γ及上述肿瘤标志物对sPD-1、sPD-L1的影响;分析sPD-1与sPD-L1,sPD-L1与IFN-γ的相关性。结果消化道肿瘤组和肺癌组CEA水平高于肺炎组和体检组(P<0.01);消化道肿瘤组CA125水平高于肺炎组(P<0.05);肺癌组CA153水平高于肺炎组(P<0.05);消化道肿瘤组CA199水平高于体检组(P<0.01);消化道肿瘤组CA724水平高于肺炎组(P<0.05);肺癌组、消化道肿瘤组Cyfra211水平高于体检组和肺炎组(P<0.01);肺癌组NSE水平高于体检组(P<0.05);肿瘤患者sPD-1和sPD-L1水平相对肺炎患者和体检者有升高趋势,其中消化道肿瘤组sPD-1水平高于体检组(P<0.05);消化道肿瘤组sPD-L1/IFN-γ高于肺炎组(P<0.01)。不同水平IFN-γ的患者其sPD-1和sPD-L1分布差异有统计学意义(P<0.01);sPD-1与sPD-L1在肺癌患者、消化道肿瘤患者和全部肿瘤患者中均呈正相关(r=0.688、0.594、0.550,P<0.05);在肺炎患者中IFN-γ与sPD-L1呈正相关(r=0.547,P<0.05)。结论sPD-1与sPD-L1在晚期肿瘤患者外周循环中整体呈高表达并且具有同步变化趋势;IFN-γ水平会影响sPD-1和sPD-L1的分布,sPD-1、sPD-L1和IFN-γ的表达特征对反映晚期肿瘤的免疫状态具有重要参考价值,在肿瘤的临床诊疗中具有潜在的生物标志物价值。

系统性红斑狼疮患者程序性死亡配体-1表达的初步研究

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)程序性死亡配体-1(PD-L1)的表达水平,探讨其在系统性红斑狼疮发病过程中的作用。方法密度梯度离心法分离系统性红斑狼疮患者和正常人PBMC,采用半定量RT-PCR检测PBMC的PD-L1mRNA表达。结果系统性红斑狼疮患者活动期组和稳定期组的PD-L1mRNA表达与对照组比较明显增高,差异有显著性(P均<0.05);但PD-L1mRNA表达在系统性红斑狼疮活动期组与稳定期组之间比较无显著性差异(P>0.05)。结论系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞PD-L1mRNA表达水平增加,程序性死亡配体-1可能在系统性红斑狼疮的发病机制中有一定的作用。

程序性死亡配体-1与白细胞介素-10在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的通过检测程序性死亡配体-1(PD-L1)和白细胞介素-10(IL-10)在喉鳞状细胞癌中的表达情况,分析与喉鳞癌的肿瘤部位、病理分级、TNM分期、淋巴结转移等之间的关系。方法应用免疫组化二步法检测30例喉鳞状细胞癌组织(观察组)和15例癌旁正常组织(对照组)中PD-L1及IL-10的表达情况,分析二者与喉鳞状细胞癌临床病理参数的关系及二者表达的相关性。结果 (1)PD-L1在喉鳞状细胞癌组织(56.67%)中的表达明显高于癌旁正常组织(13.33%);喉鳞状细胞癌组织中PD-L1的阳性表达与病理分级、临床分期(TNM分期)、T分期、肿瘤局部淋巴结转移有关(P<0.05),与肿瘤分区、患者年龄无明显相关性。(2)IL-10在喉鳞状细胞癌组织(63.33%)中的表达明显高于癌旁正常组织(20.00%);喉鳞状细胞癌组织中IL-10的阳性表达与TNM分期、T分期、肿瘤局部淋巴结转移有关(P<0.05),与病理分级、肿瘤分区、患者年龄无明显相关性。(3)喉鳞状细胞癌组织中PD-L1、IL-10的表达呈正相关(r=0.522,P<0.05)。结论 (1)PD-L1与IL-10的高表达可能与喉鳞状细胞癌的发病相关,两者参与了肿瘤的发展及转移;(2)免疫卡控点的调控和抑制性细胞因子与肿瘤的免疫逃逸密切相关,PD-L1与IL-10在喉鳞状细胞癌中的表达呈正相关,两者可能协同参与喉鳞状细胞癌的免疫逃逸;(3)联合检测PD-L1与IL-10在喉鳞状细胞癌组织中的表达对喉鳞癌的临床评估有一定价值;为喉鳞癌的免疫治疗提供理论支持。

金属蛋白酶组织抑制因子-1和程序性死亡配体-1在老年慢性阻塞性肺疾病患者血清中的表达

目的探讨血清金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、程序性死亡配体-1(PD-LI)在老年慢性阻塞性肺疾病中的表达。方法收集2017年11月-2018年11月共计36名健康对照者、37例慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者、12例慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者入院时的血清,分别行酶联免疫吸附测定,比较3组血清TIMP-1、PD-L1水平。结果老年慢性阻塞性肺疾病患者血清TIMP-1、PD-L1水平显著高于健康对照组(P<0.05);慢阻肺患者血清TIMP-1与PD-L1二者表达相关(r=0.604,P<0.001)。结论血清TIMP-1与PD-L1水平在老年慢性阻塞性肺疾病患者表达水平明显升高,二者存在相关性。

程序性死亡因子-1、程序性死亡配体-1、TNF家族B细胞活化因子-R在弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中的表达

目的 分析程序性死亡因子-1(programmed death factor-1,PD-1)、程序性死亡配体-1(programmed death-ligand-1,PDL1)、TNF家族B细胞活化因子-R(B cell-activating factor-R belonging to the TNF family,BAFF-R)在弥漫大B细胞淋巴瘤组织中的差异性表达及临床意义。方法 以延安大学附属医院血液科2019年1月至2020年4月初诊的28例弥漫性大B细胞淋巴瘤组织及瘤旁组织样本作为研究对象,采用免疫组化法检测其PD-1、PD-L1及BAFF-R表达,然后统计分析PD-1、PD-L1及BAFF-R表达与病人临床病理特征的关系。结果 弥漫性大B细胞淋巴瘤组织PD-1、PD-L1及BAFF-R阳性表达积分分别为(5.44±0.79)、(5.58±0.86)及(4.49±0.65)分,瘤旁组织PD-1、PD-L1及BAFF-R阳性表达积分分别为(3.31±0.35)、(3.25±0.34)及(2.77±0.27)分,差异有统计意义(P<0.05);淋巴瘤组织PD-1表达差异与临床病理特征差异无统计学意义(P>0.05);淋巴瘤组织PD-L1表达与Ann Arbor/Costwards分期、病理分型及EBV是否阳性差异有统计意义(P<0.05);淋巴瘤组织BAFF-R表达与Ann Arbor/Costwards分期、病理分型、IPI评分及EBV是否阳性差异有统计意义(P<0.05)。结论 PD-L1及BAFF-R在弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中呈高表达,且与弥漫性大B细胞淋巴瘤分期、病理分型及EBV感染密切相关,二者联合检测对病人预后评估可能具有较高价值;对难治性弥漫大B细胞淋巴瘤而言,以PD-L1及BAFF-R的信号通路为靶点,是潜在的免疫治疗方案。

头颈部鳞癌程序性死亡配体-1的共表达基因及调控网络的生物信息学分析

目的运用生物信息学的方法绘制头颈部鳞癌(HNSCC)中程序性死亡配体-1(PD-L1)共表达基因关系网络,筛选潜在的PD-L1的协同标志物,寻找可能的PD-L1基因调控肿瘤免疫状态的基因和通路。方法利用癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)中的大样本HNSCC的转录组学数据,在cBioPortal数据平台进行基因集的检索,筛选PD-L1共表达基因,在R语言的clusterProfiler中进行GO-BP和KEGG富集分析,再进行分子关系网络分析,提取重要节点基因(hub基因),再进行生存分析。结果筛选出共表达基因117个,共表达基因主要富集在免疫调节和病毒反应过程。网络节度分析得到了10个hub基因,依次为STAT1、IFNG、CXCL10、CCR5、FCGR3A、CXCL9、GBP5、CD86、GZMB、IRF1。生存分析显示:CCR5、CXCL9、GZMB是HNSCC预后相关的重要基因。这些基因均参与了免疫过程,其表达与PD-L1相关(Pearson相关系数为0.30、0.35、0.39,P值均小于0.01)。这些基因高表达在HNSCC中均为保护因素。结论 HNSCC中的PD-L1共表达的主要基因均为免疫相关基因,其中CCR5、CXCL9、GZMB与PD-L1存在共表达关系,与预后相关,其可能与程序性死亡受体-1(PD-1)/PD-L1介导的肿瘤免疫逃避相关,为进一步研究PD-1/PD-L1的作用机制和精准靶向治疗提供了新的参考。

宫颈癌组织程序性死亡配体-1的表达及其与患者临床病理特征、预后的关系研究

目的探讨宫颈癌组织程序性死亡配体-1(PD-L1)的表达,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法选取2019年8月至2020年3月浙江省肿瘤医院收治的病理学诊断明确为宫颈癌的患者172例,采用免疫组织化学法检测宫颈癌术后留存的石蜡包埋组织切片PD-L1的表达情况,并分析PD-L1表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果172例宫颈癌患者中PD-L1表达阳性166例,阳性表达率为96.51%。宫颈癌组织PD-L1表达阳性与高危型HPV感染、CA19-9水平、病理类型、分化程度均有关(均P<0.05),与患者年龄、怀孕次数、分娩次数、BMI、家族史、Hb水平、血清鳞状细胞癌抗原、癌胚抗原、CA125、初始治疗方式、肿瘤生长类型、肿瘤大小、淋巴结转移、脉管瘤栓、器官转移、肿瘤分期、合并其他癌症等均无关(均P>0.05)。多因素logistic回归分析显示,病理类型是患者宫颈癌组织PD-L1表达阳性的独立影响因素(OR=0.006,95%CI:0.009~0.387,P<0.05),PD-L1表达阳性患者中鳞癌比例高。宫颈癌组织PD-L1表达阳性患者2年无进展生存率(88.6%比50.0%)和2年总生存率(96.4%比66.7%)均高于PD-L1表达阴性患者(均P<0.05)。结论不同临床病理特征的宫颈癌患者PD-L1的表达各有差异,宫颈鳞癌表达阳性率最高,鳞癌患者从程序性死亡受体-1/PD-L1免疫抑制剂治疗中获益的可能性较大。

细胞程序性死亡受体-1/细胞程序性死亡配体-1抑制剂相关内分泌不良反应及处理现状

近年来,免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)开始用于治疗多种癌症,疗效显著。细胞程序性死亡受体-1(programmed death 1,PD-1)抑制剂和细胞程序性死亡配体-1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)抑制剂都是临床中常用的ICIs。PD-1与配体结合导致了T细胞凋亡阈值降低,使T细胞更容易发生凋亡,削弱了细胞免疫功能^([1-2])。在一些肿瘤细胞中.

秦皮甲素通过调控程序性死亡配体-1逆转人肺癌细胞顺铂耐药性

目的探讨秦皮甲素对肺癌顺铂耐药细胞A549/DDP耐药的逆转作用及相关机制。方法利用MTT法检测顺铂对A549和A549/DDP细胞的半数抑制浓度(IC50)及秦皮甲素对A549/DDP细胞的增殖抑制作用,筛选出非细胞毒性的秦皮甲素浓度。将A549/DDP细胞分为空白对照组、秦皮甲素组、顺铂组和秦皮甲素+顺铂组,分别采用流式细胞术和Western blot检测细胞凋亡率和程序性死亡配体-1(PD-L1)表达。利用小干扰RNA(siRNA)技术干扰A549/DDP细胞PD-L1表达,按照处理方式再将A549/DDP细胞分为空白对照组、秦皮甲素组、siRNA-NC组、siRNA-PD-L1组、秦皮甲素+siRNA-NC组和秦皮甲素+siRNA-PD-L1组,分别用流式细胞术和MTT法检测细胞凋亡率、增殖抑制率。结果 2~32μg/mL顺铂处理A549和A549/DDP细胞48h后,顺铂对A549细胞的IC50为14.3μg/mL,对A549/DDP细胞的IC50为29.1μg/mL,耐药指数(RI)为2.03。秦皮甲素以浓度和时间依赖性地抑制A549/DDP细胞增殖,0.4mmol/L秦皮甲素联合顺铂处理48h后,顺铂对A549/DDP细胞的IC50为19.5μg/mL,RI为1.36,逆转倍数为1.49。与空白对照组比较,秦皮甲素组、秦皮甲素+顺铂组细胞PD-L1蛋白表达明显降低,其中秦皮甲素+顺铂组降低得更明显,差异具有统计学意义(P<0.01);秦皮甲素组、秦皮甲素+顺铂组细胞凋亡率明显高于空白对照组,且秦皮甲素+顺铂组凋亡率的增加更明显(P<0.01)。秦皮甲素组、siRNA-PD-L1组、秦皮甲素+siRNA-NC组和秦皮甲素+siRNA-PD-L1组对A549/DDP细胞增殖抑制率明显增加,秦皮甲素+siRNA-PD-L1组增加得更明显(均P<0.01),秦皮甲素、siRNA-PD-L1联合顺铂作用48h,顺铂对A549/DDP细胞的IC50为7.89μg/mL,RI为0.55,逆转倍数为3.69。结论秦皮甲素可以抑制肺癌耐药细胞A549/DDP的体外增殖,逆转其对顺铂的耐药性,其逆转机制可能与下调PD-L1的表达有关。

程序性死亡配体-1在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的分析程序性死亡配体-1(PD-L1)在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色、Western blot检测PD-L1在50例食管鳞癌患者的癌组织及其相应癌旁组织中的表达,并分析PD-L1表达与食管鳞癌临床病理学特征及预后的相关性。结果 PD-L1在食管鳞癌组织中阳性表达率为42.0%(21/50)高于癌旁组织22.0%(11/50),差异有统计学意义(P <0.05)。PD-L1蛋白的表达水平与患者肿瘤浸润深度及临床分期相关(P <0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明PD-L1的阳性组较阴性组预后较差,PD-L1阳性组和阴性组患者30个月生存率分别为38.1%和86.2%,差异有统计学意义(P <0.05)。多变量COX回归分析结果显示PD-L1是食管癌患者的预后因素。结论 PD-L1蛋白高表达在食管鳞癌的发生发展过程中具有重要作用,可能成为食管鳞癌预后的评价指标,并为食管鳞癌的治疗提供新的靶点。

miR-138-5p靶向调控程序性死亡配体-1对肺腺癌细胞的增殖、迁移和上皮间质转化的影响

目的:探讨微小RNA-138-5p(miR-138-5p)靶向调控程序性死亡配体-1(PD-L1)对肺腺癌细胞(H1299)增殖、迁移及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:选择2019年3月至2021年5月在本院手术治疗的肺腺癌患者42例,术中取肺腺癌组织与癌旁组织,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测肺腺癌组织、癌旁组织与肺腺癌细胞H1299、HCC827、A549、H1975及支气管上皮细胞BEAS-2B中miR-138-5p表达水平;将H1299细胞分为Control组、miR-138-5p过表达(miR-138-5p mimics)组及阴性对照(miR-NC)组、抑制PD-L1表达(si-PD-L1)组及阴性对照(si-NC)组、miR-138-5p mimics+空载质粒(pcDNA)组和miR-138-5p mimics+PD-L1过表达(PD-L1)组。双荧光素酶报告基因检测miR-138-5p与PD-L1的靶向关系,CCK-8法与细胞划痕实验检测H1299细胞增殖与迁移,Western blotting法检测H1299细胞PD-L1、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)蛋白表达。结果:miR-138-5p在肺腺癌组织中表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05),肺腺癌H1299、HCC827、A549、H1975细胞中miR-138-5p表达水平显著低于BEAS-2B细胞(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-138-5p与PD-L1存在靶向关系;过表达miR-138-5p或抑制PD-L1表达后H1299细胞增殖、细胞划痕愈合率与PD-L1、PCNA、MMP-9、N-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05);过表达PDL1可部分逆转过表达miR-138-5p对H1299细胞增殖、迁移与EMT的抑制作用。结论:miR-138-5p在肺腺癌患者组织和肺腺癌细胞中的表达下调,过表达miR-138-5p可通过靶向抑制PD-L1表达而抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和EMT。

胃癌组织中程序性死亡配体-1和粘蛋白1的表达及相关性

目的探讨程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1, PD-L1)和粘蛋白1(mucin 1, MUC1)在胃癌组织中的表达与临床病理因素间的关系以及两者间的相互关系。方法应用免疫组织化学S-P方法检测PD-L1和MUC1在120例胃癌组织和40例距癌灶边缘5cm以上的正常胃粘膜组织中的表达。结果在正常胃粘膜组织中未见PD-L1阳性免疫反应,在胃癌组织中PD-L1阳性表达率为32.5%(39/120);MUC1在正常胃粘膜组织中的阳性表达率为100%,在胃癌组织中的阳性表达率是65%(78/120)。在胃癌组织中,PD-L1和MUC1表达与肿瘤大小、肿瘤浸润深度及淋巴结转移有关,与患者年龄、性别、肿瘤分化程度及TNM分期无关;PD-L1和MUC1在胃癌组织中的表达呈正相关。结论 PD-L1和MUC1在胃癌组织中的生物学行为以及两者的相关性提示联合检测更有意义。

非小细胞肺癌程序性死亡配体-1表达与临床病理特征和常见驱动基因变异的相关性研究

目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者程序性死亡配体-1(PD-L1)表达与临床病理特征和常见驱动基因变异的相关性,为NSCLC患者免疫治疗提供理论依据。方法回顾性纳入首都医科大学附属北京胸科医院病理科2018年1月—2021年12月进行PD-L1免疫组织化学染色及EGFR、KRAS、ALK、ROS1、BRAF、RET、MET和HER2基因检测的NSCLC患者,分析不同病理特征与不同驱动基因变异对NSCLC患者PD-L1蛋白表达的影响。结果PD-L1蛋白表达检测2386例,阳性率为45.8%(1093/2386),其中低表达组(1%≤TPS≤49%)为62.0%(678/1093),高表达组(TPS≥50%)为38.0%(415/1093),不同临床病理特征PD-L1表达存在差异。多因素logistic回归分析显示吸烟史、淋巴结转移、病理亚型、EGFR突变、KRAS突变、ALK和MET突变是NSCLC患者PD-L1是否表达的独立危险因素(P<0.05),淋巴结转移和EGFR突变是NSCLC患者PD-L1表达水平的独立危险因素(P<0.05)。结论PD-L1蛋白在吸烟、鳞癌、KRAS突变型、ALK阳性和MET突变型患者中阳性率高,在淋巴结转移和EGFR野生型患者中高表达。区别于EGFR阳性的NSCLC患者,KRAS、MET阳性的NSCLC患者有望从免疫检查点抑制剂治疗中获益。