石莼类菌孢素氨基酸的提取工艺及对副溶血弧菌的抑菌机理

为探明石莼类菌孢素氨基酸(MAAs)的提取工艺及对副溶血弧菌的抑菌机理,本研究采用单因素实验和响应面优化试验,分析了液固比、提取温度和提取时间对石莼MAAs得率的影响,并对MAAs进行了硅胶柱层析分离以及HPLC和ESI-MS鉴定。通过扫描、荧光显微镜观察胞内核酸、蛋白质的泄露及DNA分解等分析MAAs对副溶血弧菌的抑菌机理。结果表明,石莼MAAs的最佳提取参数为液固比25:1 mL/g、提取温度40℃和提取时间118 min,制备到的MAAs得率为179.34±3.91 mg/g。石莼MAAs明显破坏了副溶血弧菌的细胞膜,导致了胞内核酸和蛋白质泄露,并促使菌体内DNA发生分解。MAAs经硅胶柱层析分离获得2个组分,经鉴定组分H2为shinorine,其在石莼干粉末中含量可达10.32 mg/g。本研究为石莼MAAs的制备和副溶血弧菌的生物防治提供了技术参考。

铜绿微囊藻中的紫外保护物质类菌孢素氨基酸(MAAs)与水华形成机制探讨

类菌孢素氨基酸(mycosporine-like amino acids, 间称MAAs)存在于许多生物体内,对紫外辐射(UVR)有较高的吸收能力,被认为有保护细胞、减少UVR损伤的功能. 通过对从太湖分离、室内培养的铜绿微囊藻和以微囊藻为优势种类的太湖浮游植物样品的吸收光谱和反相高效液相色谱分析,发现铜绿微囊藻和太湖浮游植物都含有shinorine和porphyra-334两种MAAs,但以shinorine为主. 本文还讨论了MAAs与铜绿微囊藻水华形成的关系.

江蓠中类菌孢素氨基酸(MAAs)分离纯化及其成分分析

存在于海洋生物中,尤其是藻类中的类菌孢素氨基酸(mycosporine-like amino acids,MAAs),是一种吸收紫外线的物质,可用于紫外线防护品的原料,具有商业开发的前景。对湛江沿海产江蓠中MAAs进行了分离和结构鉴定,确定江蓠MAAs的主要组成及比例。利用C-18 Sep-Pak固相萃取柱和半制备型HPLC对湛江产江蓠中MAAs成分进行分离纯化。根据化合物的特征、紫外吸收波长和波谱数据鉴定其主要成分的结构,并结合参考文献确定湛江产江蓠MAAs的4种主要成分是palythine、shinorine、palythinol和porphyra-334,其比例约为4.9∶1∶1.2∶9.9。同时,比较了UV法和HPLC法对湛江产江蓠MAAs主要成分porphyra-334含量检测的准确度,建立了两种检测方法的拟合曲线,并通过试验验证,最终确立了HPLC对MAAs主要组成成分的检测方法。

紫菜类菌孢素氨基酸抗皮肤光老化的研究

为探究从坛紫菜中提取的类菌孢素氨基酸(MAAs)化合物对紫外线诱导产生的小鼠皮肤光老化作用的保护机制,实验采用乙醇热水提取法,提取坛紫菜中的MAAs,对其化合物的基本成分组成进行鉴定;通过观测小鼠造模部位皮肤的损伤情况,结合皮肤病理切片来评价坛紫菜MAAs对光老化小鼠的保护作用,并通过测定小鼠组织中超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)的含量和皮肤组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量,分析MAAs化合物对光老化皮肤的保护机制。结果显示,从坛紫菜中提取的类菌孢素氨基酸类化合物主要组分为Porphyra-334和Shinorine;紫菜MAAs可有效改善因紫外线诱导而产生的皮肤光老化的发生;与模型组小鼠相比,外涂给药组小鼠皮肤组织中SOD、GSH-Px的活性及Hyp的含量显著性提高,MDA的含量显著降低;而灌胃给药组与空白对照组小鼠相比体内抗氧化酶活性作用水平变化不明显。研究表明,紫菜MAAs对紫外线诱导的皮肤光老化具有保护作用。

紫菜中类菌孢素氨基酸纯化工艺的优化及其抗紫外辐射作用研究

为了筛选纯化紫菜类菌孢素氨基酸(mycosporine-like amino acid,MAAs)的离子交换树脂,优化纯化工艺,并研究纯化后MAAs体外抗紫外辐射活性,本研究通过静态动力学吸附及解析实验,筛选纯化树脂;结合动态动力学吸附及解析单因素实验建立响应面法对SA-2型阳离子树脂纯化MAAs的二次多项式模型,对MAAs的纯化工艺进行优化;通过建立大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的复合紫外线(UVA+UVB)损伤模型,分析纯化后MAAs样品的体外抗辐射活性。结果表明:静态动力学吸附及解析实验筛选出SA-2型阳离子树脂为纯化MAAs的最佳树脂,吸附率和解析率分别为86.01%和56.63%;吸附的最佳工艺条件为:上样液质量浓度3 g/L、上样流速1 m L/min、上样液pH为6、洗脱液体积分数为3%、洗脱流速为1.5 m L/min、洗脱液pH为6;在此条件下吸附率为79.21%,洗脱率为64.02%;纯化后的MAAs样品能有效抑制紫外辐射而造成的损伤,将菌种失活速度分别降低了39.10%和40.58%,表现出显著的抗紫外辐射活性。

江蓠中类菌孢素氨基酸(MAAs)成分分析及提取研究

利用高效液相色谱技术对江蓠(Gracilariaceae)中类菌孢素氨基酸(MAAs)进行了分析,并采用响应面分析法对MAAs物质的提取工艺进行优化研究。根据正交旋转组合试验设计原理,采用四因素五水平的响应面分析法,依据回归分析确定各因素的显著程度及最优工艺条件。结果表明,江蓠中MAAs的主要成分为porphyra-334;提取温度、浸提时间、甲醇浓度及液固比为影响MAAs物质提取的显著因素。通过多元二次回归拟合模型响应面分析,得到最优工艺条件:提取温度48.12℃,液固比34∶1,甲醇浓度25%,浸提时间1.85 h,优化条件下预测提取率为4.943 mg/g;试验值为4.893 mg/g,试验值与预测值吻合较好,响应面回归模型的准确性得到验证。

紫外辐射对铜绿微囊藻中类菌孢素氨基酸(MAAs)的诱导效应

用8w紫外灯，距离藻10cm，以5min／d、10min／d、20min／d连续照射6d的间断处理和连续照射1h、1．5h,2h、3h、6h、12h的连续处理两种方式处理铜绿微囊藻，测得水溶性色素提取液在200～400nm间的吸收光谱与对照组相比较，没有产生新的吸收峰，说明MAAs的产生不需要紫外线的诱导。同时随着紫外辐射剂量的增加，MAAs的含量先增加，当达到一定的辐射剂量之后，MAAs的含量随着紫外辐射剂量的增加而减小。

2种大型海藻类菌孢素氨基酸提取物对纳他霉素光降解的抑制作用

纳他霉素是一种天然的食品添加剂,光照会明显影响纳他霉素活性、加速其降解。类菌孢素氨基酸(MAAs)是大型海藻中广泛存在的一类水溶性化合物,具有抗紫外辐射等多种生物活性。将红毛苔和石花菜MAAs提取物,分别加入纳他霉素溶液中,分析MAAs提取物对纳他霉素光降解的影响。在光照试验第10d,对照组纳他霉素含量为原含量的10.20%,添加红毛苔和石花菜MAAs提取物光照组中纳他霉素含量分别为原含量的85.10%和82.81%。MAAs对纳他霉素的光降解表现出明显的抑制作用。进一步,分析了MAAs提取物浓度与其对纳他霉素光降解抑制作用间的关系。结果表明,随MAAs提取物浓度的增大,它们对纳他霉素光降解的抑制作用增强。这是第一次报道红毛苔和石花菜MAAs提取物对纳他霉素光降解的抑制作用。

类菌孢素氨基酸生物合成研究进展

现有的人工合成的防晒剂可能危害环境,而天然的水溶性小分子抗辐射化合物——类菌孢素氨基酸(mycosporine-like amino acids,MAAs)有望成为环境友好型防晒剂,具有广阔的应用前景。从生物体内提取的MAAs产量不足,无法满足商用需求。以合成生物学方法在宿主细胞中表达MAAs合成基因簇是解决MAAs供应不足的有效策略。本文简介MAAs的生物合成途径,总结现有MAAs生物合成研究的成果,分析探讨MAAs生物合成发展方向。

紫菜中类菌孢素氨基酸抗氧化活性研究

目的提取紫菜中类菌孢素氨基酸(Mycosporine-like amino acids,MAAs),探究MAAs对外源性自由基的清除及对内源性抗氧化酶的活力影响。方法采用乙醇提取、层析纯化的方法对紫菜MAAs进行提取纯化;利用液质联用法鉴定紫菜MAAs的种类及结构;采用邻苯三酚-鲁米诺、Fenton反应法和DPPH法研究紫菜MAAs对自由基的清除作用,并测定总抗氧化能力;选取正常ICR小鼠,随机分为空白对照组(NC)、阳性对照组(MP)以及MAAs给药组(MAAs),通过对比各组小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力及丙二醛(MDA)的含量,对MAAs化合物体内抗氧化活性进行研究。结果紫菜中2种主要的MAAs成分为:Porphyra-334和shinorine;MAAs化合物及Porphyra-334组分具有显著的自由基清除作用,其中功能性成分为Porphyra-334。MAAs的总抗氧化能力随浓度的增大呈现增强趋势;与对照组相比,给药组小鼠血清中SOD、GSH-Px的活力显著提升(P<0.05)。结论紫菜MAAs具有显著的抗氧化活性。

大型海藻类菌孢素氨基酸提取工艺及定性检测研究

类菌孢素氨基酸(Mycosporine-like amino acids,MAAs)是一类多功能活性化合物,在大型海藻中广泛存在。以海带、裙带菜、羊栖菜、江蓠、石花菜和海萝为原料,通过一系列单因素和正交实验,建立了此6种大型海藻MAAs的适宜提取工艺,并建立了定性检测方法。结果表明,海带、裙带菜、羊栖菜、江蓠、石花菜和海萝MAAs的适宜提取温度、固液比和甲醇体积分数依次为35、30、30、30、30、25 ℃,1:60、1:60、1:60、1:60、1:60、1:50 g/mL,30%、10%、30%、10%、30%、10%。利用上述工艺条件,制备得到6种大型海藻MAAs提取物,得率分别为(39.0±3.80)%、(20.6±2.20)%、(32.8±2.60)%、(5.41±1.20)%、(9.87±0.80)%、(16.2±1.40)%。在此基础上,250~390 nm波长扫描显示6种大型海藻MAAs提取物均在330 nm附近有吸收,表明它们中存在Porphyra-334。进一步,初次确定了海带、裙带菜、羊栖菜、江蓠、石花菜和海萝中Porphyra-334含量,依次为(1.60±0.69)μg/g、(1.96±0.89)μg/g、(3.97±0.82)μg/g、(41.9±3.41)μg/g、(13.2±2.25)μg/g、(8.89±1.29)μg/g。随后,应用硅胶薄层层析,对上述6种大型海藻MAAs提取物进行检测,建立了大型海藻MAAs检测的一种简便方法,可用于大型海藻MAAs的筛选。

海洋生物提取物中抗皮肤光老化活性成分的研究进展

海洋生物是海洋资源的重要组成部分,具有抗菌、抗氧化、抗炎及光保护等生物活性,在医用护肤品和药物的生产中有重要的贡献。长期紫外线照射是皮肤外源性老化的主要原因。紫外线照射可损伤表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞,引起皮肤萎缩、皱纹及皮肤肿瘤等。海洋生物中有众多光保护物质,包括类菌孢素氨基酸、硫酸多糖、类胡萝卜素和多酚类物质等,这些物质在皮肤护理、化妆品和医药产品中有很大的开发潜力。本文综述了近年来海洋生物中的光保护物质及其在皮肤光老化中的应用进展。