粘附分子ICAM-1、E-Cadherin、CD44v6与肿瘤侵袭和转移

肿瘤的侵袭和转移是患者死亡的最主要原因。它是一个复杂的多因素、多步骤的病理生理过程。近年来粘附分子 ICAM- 1、E- Cadhcrin、CD44v6与肿瘤的侵袭转移的关系正成为研究的重点。笔者对该 3种粘附分子与肿瘤、特别是膀胱癌的侵袭转移的关系作一综述 ,展望它们作为临床指标为 TCC的早期预防。

血管内皮生长因子和黏附分子蛋白CD44变异体6与非小细胞肺癌同步放化疗近期疗效的相关性

目的分析血管内皮生长因子（VEGF）和黏附分子蛋白CD44变异体6（CD44v6）与非小细胞肺癌（NSCLC）同步放化疗近期疗效的相关性。方法回顾性分析2013年1月至2015年1月经解放军第一○五医院肿瘤三科病理确诊的72例NSCLC初诊患者的临床资料。所有患者行同步放化疗，治疗1个月。采用酶联免疫吸附试验法检测同步放化疗前1周内和同步放化疗1个月后患者血清VEGF和CD44v6水平。分析血清VEGF和CD44v6水平变化与NSCLC同步放化疗近期疗效的相关性。结果同步放化疗前后，有吸烟史患者血清VEGF和CD44v6水平高于无吸烟史患者；鳞癌患者血清VEGF和CD44v6水平高于腺癌患者；临床分期Ⅲa＋Ⅲb期患者血清VEGF和CD44v6水平明显高于Ⅱ期患者（P＜0.05或P＜0.01）。在所有患者中，完全缓解12例，部分缓解42例，稳定14例，进展4例，客观有效率为75.0%（54/72），疾病控制率为94.4%（68/72）。血清VEGF和CD44v6水平同步放化疗前分别为（595±102） ng/L和（461±21） μg/L，同步放化疗后分别为（565±84） ng/L和（431±16） μg/L；上述二者同步放化疗后均低于同步放化疗前（均P＜0.05）。在完全缓解、部分缓解、客观有效和疾病控制患者中，血清VEGF和CD44v6水平同步放化疗后低于同步放化疗前（P＜0.05或P＜0.01）；在稳定患者中，血清VEGF水平同步放化疗后低于同步放化疗前（P＜0.05）。结论血清VEGF和CD44v6水平与NSCLC多种临床病理特征相关，可作为NSCLC同步放化疗近期疗效判断及预后的可靠指标。

细胞粘附分子变异体在结直肠癌中的表达及预后

目的探讨细胞粘附分子变异体(CD44v6)在结直肠癌中的表达及与患者预后的关系。方法应用SP免疫组织化学法检测CD44v6蛋白在120例结直肠癌中的表达。结果CD44v6在结直肠癌中的阳性表达率为31.7%(38/120);CD44v6的阳性表达与淋巴结转移和Dukes’分期有关(P<0.05);有淋巴结转移组CD44v6的阳性表达率比无淋巴结转移组高;且随着Dukes’分期的加深,CD44v6的阳性表达率逐渐增高;CD44v6的表达与结直肠癌患者的生存时间有关(P<0.01),CD44v6阳性表达的患者预后较差。结论CD44v6的表达与结直肠癌淋巴结转移、Dukes’分期和患者生存时间有关。CD44v6可能为影响结直肠癌患者预后的一个重要因素。

非小细胞肺癌患者CD44及其变异体V_6的测定

目的 :探讨测定粘附分子CD44及其变异体V6在非小细胞肺癌 (non -smallcelllungcarcinoma ,NSCLC)中的意义。方法 :采用酶联免疫吸附试验检测血清中可溶性CD44S(sCD44S)和可溶性CD44V6(sCD44V6)含量 ;流式细胞术测定细胞表面CD44S、CD44V6的表达。结果 :NSCLC患者血清CD44S、CD44V6水平明显高于肺良性疾病 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。原发肺鳞癌 (SCC)和腺癌 (ADC)细胞的CD44S表达率明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;3组的CD44V6表达率均低 ,差异无显著。NSCLC原发癌细胞表面CD44S、CD44V6表达与其血清的可溶性含量之间均无相关性。结论 :提示血清CD44S、CD44V6水平可作为鉴别NSCLC和肺良性疾病的辅助指标。

胰腺癌患者血清可溶性CD44及CD44变异体6临床研究

目的 :观察胰腺癌患者的血清可溶性 CD44标准体 ( s CD44 s)及可溶性 CD44变异体断片 6( s CD44 v6)水平及其临床意义。方法 :采用酶联免疫吸附法检测 93例胰腺癌 ,3 0例正常人血清 s CD44 s和 s CD44 v6含量 ,并分析其与临床病理之间的关系。结果 :胰腺癌患者中血清 s CD44 s和 s CD44 v6明显减少 ( n=93 ,P<0 .0 0 1和 P<0 .0 0 0 5 ,s CD44 v6与临床病理之间有相关性。结论 :s CD44 v6与胰腺癌临床病理分期有关 ,检测血清 s CD44

逆转录—巢式PCR法分析胃癌活检组织CD44拼接变异体

目的 改进CD44基因异常表达检测方法，探讨该方法对胃癌早期诊断、转移监测的意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)结合巢式PCR(Nested PCR)技术，检测了89例胃镜活检标本，其中70例胃癌、19例癌前病变(11例非典型性增生、8例肠上皮化生)及其相应的病变旁正常组织活检标本CD44v(CD44拼接变异体)以及CD44v8—10(CD44外显子8—10拼接变异体)的表达。并对巢式PCR产物测序验证其可靠性。结果 建立了逆转录巢式PCR检测胃镜活检标本CD44异常拼接变异体方法。对巢式PCR产物测序证实符合相应的CD44核苷酸序列，结果可靠且更为简便。全部标本均有CD44s(CD44标准型)的表达。胃癌组织CD44v表达阳性率88．6％(62／70)，其中CD44v8—10阳性率72．9％(51／70)。癌前病变组织CD44v表达阳性率为81．8％(非典型性增生9／11)和37．5％(肠上皮化生3／8)，CD44v8—10阳性率在非典型性增生为72．7％(8／11)。病变旁正常组织CD44v阳性率16．9％(15／89)，其中CD44v8-10阳性率13．5％(12／89)。胃癌和非典型性增生组显著高于正常组。本研究对35例在我院行手术治疗的CD44v阳性患者进行了追踪，有2例胃癌患者第1次胃镜检查为非典型性增生，CD44v强阳性表达。分别在第二、三个月后再次行胃镜检查确诊为胃癌。结论 RT—巢式PCR方法灵敏度高、特异性好，应用此法检测CD44v及CD44v8—10在胃癌及非典型性增生活检组织中呈现高表达，可作为胃癌诊断和判断预后的标志之一。

CD_(44)v6基因变异体在胃癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

探讨胃癌中ＣＤ_（４４）ｖ６基因变异体的表达及其与淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组织化学技术，对７５例手术切除胃癌标本中的ＣＤ_（４４）ｖ６基因变异表达产物进行检测。结果： ７５例胃癌标本中，５６例ＣＤ_（４４）ｖ６基因变异体呈阳性表达，占７４．７％；而５５例有淋巴结转移的标本中４６例呈阳性表达（８３．６％），２０例无淋巴结转移的标本中１０例呈阳性表达（５０％），差异有显著性（Ｐ＜０．００１）；正常胃粘膜不表达ＣＤ_（４４）ｖ６基因变异体。这一结果提示，ＣＤ_（４４）ｖ６基因变异体的表达与胃癌的淋巴结转移关系密切。结论：含ｖ６外显子的ＣＤ_（４４）变异表达产物可作为预测胃癌淋巴结转移潜能较可靠的分子标记物。

胃癌组织中MMP-9、CD44v6和VEGF的表达变化及意义

目的观察胃癌组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、黏附分子CD44拼接变异体v6(CD44v6)和血管内皮生长因子(VEGF)表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测80例胃癌组织及癌旁组织中MMP-9、CD44v6和VEGF。结果胃癌组织中MMP-9、CD44v6和VEGF表达显著高于癌旁组织,且有淋巴结转移者均高于无淋巴结转移者,Ⅲ～Ⅳ期者高于Ⅰ～Ⅱ期(P均<0.05);胃癌组织中MMP-9、CD44v6与VEGF的表达呈正相关(r=0.331、0.421,P均<0.05)。结论胃癌组织中MMP-9、CD44v6、VEGF表达水平明显上调,其表达与胃癌淋巴结转移和临床分期有关;三者在胃癌的发生发展过程中可能起协同作用。

膀胱尿路上皮癌组织CD44V6、GATA-3的表达变化及与肿瘤病理分级的关系

目的观察膀胱尿路上皮癌组织CD44变异体6(CD44V6)、鸟嘌呤腺嘌呤胸腺嘧啶腺嘌呤序列结合蛋白3(GATA-3)的表达变化,探讨其与膀胱尿路上皮癌病理分级的关系。方法采用免疫组化Envision法检测120例膀胱尿路上皮癌组织、60例尿路上皮增生组织CD44V6、GATA-3蛋白的表达,分析不同病理分级膀胱尿路上皮癌组织中二者阳性表达的差异。结果膀胱尿路上皮癌组织、尿路上皮增生组织中CD44V6蛋白阳性表达率分别为49%(59/120)、13%(8/60),GATA-3蛋白阳性表达率分别为95%(114/120)、62%(37/60),二者CD44V6、GATA-3蛋白阳性表达率比较差异有统计学意义(P均<0.05)。不同病理分级膀胱尿路上皮癌组织中CD44V6、GATA-3蛋白阳性表达率比较差异有统计学意义(P均<0.05)。结论膀胱尿路上皮癌组织CD44V6、GATA-3蛋白阳性表达率升高,且肿瘤病理分级越高二者阳性表达率越高。

真核表达质粒pcDNA3.1(＋)-h/mCD44v6的构建和鉴定

目的构建含人/鼠嵌合粘附分子CD44拼接变异体6(chimeric human and mouse CD44 splice variant 6,h/mCD44v6)基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)-h/mCD44v6,并进行表达。方法通过PCR扩增h/mCD44v6的全基因cDNA,将扩增的cDNA克隆至PGM-Teasy,测序后插入pcD-NA3.1(+)真核表达质粒,构建重组真核表达质粒pcD-NA3.1(+)-h/mCD44v6,经限制内切酶酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染B16细胞,通过RT-PCR扩增出B16/pcDNA3.1(+)-h/mCD44v6细胞株中h/mCD44v6全段基因cDNA。结果经4轮PCR,成功扩增出h/mCD44v6的cD-NA全长基因,成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-h/mCD44v6,通过RT-PCR方法证实该质粒能在B16真核细胞中正确表达;建立了稳定的细胞株B16/pcDNA3.1(+)-h/mCD44v6。结论成功克隆和构建了h/mCD44v6的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-h/mCD44v6,为进一步研究h/mCD44v6的新功能和免疫治疗奠定了基础。

胃癌组织中COX-2、CD_(44)v6和MMP-9蛋白表达及意义

目的探讨胃癌组织中环氧化酶-2(COX-2)、CD44v6和MMP-9蛋白表达在胃癌发生、发展过程中的作用。方法采用免疫组化Envision法检测104例胃癌患者癌组织中COX-2、CD44v6和MMP-9蛋白表达,并与28份健康胃黏膜组织比较。结果胃癌组织中COX-2、CD44v6、MMP-9蛋白阳性表达率分别为57.7%(60/104)、59.6%(62/104)和63.5%(66/104),正常胃组织中均呈低表达或不表达,两者有显著性差异(P<0.001);三者表达均与肿瘤浸润深度、临床分期及淋巴结转移呈明显正相关(P<0.05),而与患者性别、年龄及肿瘤分化程度无明显相关性;COX-2表达与CD44v6和MMP-9表达呈明显正相关。结论COX-2、CD44v6和MMP-9的过表达可促进胃癌的浸润、转移,三者具有正协同作用;COX-2、CD44v6和MMP-9联合检测可用于判断胃癌生物学行为。

CD44V6、ER、PR表达与乳腺癌生物学行为的相关性

目的 探讨CD44V 6、ER、PR表达与乳腺癌临床病理生物学行为的关系及其临床意义 ,评价其可否作为判断乳腺癌预后的指标。方法 采用CD44V 6、ER、PR单克隆抗体对 6 3例原发性乳腺癌组织进行S P免疫组化检测 ,采用 χ2 检验方法对结果做统计学分析。结果 CD44V 6阳性表达率及强阳性表达率与患者年龄、肿瘤大小、腋淋巴结状况、TNM分期及组织学分级无显著相关性 ,而与组织学类型相关 ,单纯癌、硬癌和髓样癌阳性表达率明显高于粘液腺癌和浸润性小叶癌 ;硬癌和单纯癌强阳性表达率明显高于浸润性小叶癌。ER和PR阳性表达率与患者年龄、肿瘤大小、腋淋巴结状况、TNM分期、组织学分级及组织学类型无相关性。结论 CD44V 6作为判断乳腺癌预后的指标不够理想。

胃癌组织中MMP-9和CD44V6表达的相互关系及其临床意义

目的 研究胃癌组织中MMP -9和CD 44V 6表达的相互关系及其临床意义。方法 采用免疫组化S -P方法 ,检测85例胃癌组织中CD44V 6和MMP -9的表达情况。结果 胃癌组织中CD44V 6阳性表达率为 47.0 6% (4 0 /85 ) ;MMP -9阳性表达率为 43 .5 3 % (3 7/85 )。胃癌组织中CD44V 6表达与MMP -9表达显著相关 (P <0 .0 5 ) ;CD44V 6和MMP -9均阳性表达与胃癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期及脉管浸润均呈显著正相关 (P <0 .0 5 ) ;CD 44V 6和MMP -9均阳性表达的胃癌患者术后 1、3、5年生存率分别为 5 6.2 5 %、2 8.13 %和 2 8.13 % ,其他患者术后 1、3、5年生存率分别为 89.2 5 %、71.19%和 5 9.3 3 % ,前者显著低于后者 (P均 <0 .0 5 )。结论 CD44V 6和MMP

存活素和CD44 V6在甲状腺癌组织中的表达及意义

目的探讨细胞凋亡抑制因子存活素(survivin)和黏附分子CD44V6在甲状腺癌中的表达及其与甲状腺癌侵袭转移的关系。方法采用S-P免疫组织化学染色法,检测100例甲状腺癌和10例正常甲状腺组织中Survivin、CD44V6表达情况。结果Survivin在正常甲状腺组织中无表达,在70例甲状腺乳头状癌(PTC)及30例甲状腺滤泡癌(FTC)中阳性表达率分别为45.7%(32/70)、53.3%(16/30);CD44V6在70例甲状腺乳头状癌及30例甲状腺滤泡癌中阳性表达率分别为50.0%(35/70)、66.7%(20/30),显著高于正常甲状腺组织;在甲状腺癌组织中Survivin表达与CD44V6表达具有显著相关性(γ=0.386,P<0.05),且两者表达与甲状腺癌的临床分期及有、无淋巴结转移显著相关。结论Survivin和CD44V6表达与甲状腺癌侵袭转移密切相关,且呈协同效应。

二甲双胍联合奥沙利铂对肺癌裸鼠移植瘤VEGF-C、VEGFR-3、CD44v6和β-catenin表达的影响

目的探讨二甲双胍联合奥沙利铂对肺癌裸鼠移植瘤血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)、CD44变异体蛋白6(CD44v6)和β-链蛋白(β-catenin)分子表达水平的影响。方法建立肺癌裸鼠移植瘤模型,将裸鼠随机分为二甲双胍组、奥沙利铂组、联合用药组及对照组,每组分别给予二甲双胍、奥沙利铂、二甲双胍+奥沙利铂及灭菌蒸馏水等干预,42 d后处死动物,留取肿瘤组织,分别采用免疫组织化学法及实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中VEGF-C、VEGFR-3、CD44v6和β-catenin蛋白及mRNA的表达。结果二甲双胍组、奥沙利铂组和联合用药组的抑瘤率分别为28.97%、34.37%和50.27%。与对照组相比,奥沙利铂组、联合用药组VEGF-C、VEGFR-3、CD44v6和β-catenin蛋白及mRNA表达水平均降低(P均<0.05);与二甲双胍组、奥沙利铂组比较,联合用药组VEGF-C、VEGFR-3、CD44v6和β-catenin蛋白及mRNA表达水平均降低(P均<0.05),VEGF-C、VEGFR-3、CD44v6和β-catenin蛋白组间比较有统计学差异(F值分别为79.281、151.275、171.294、164.149,P均<0.01);VEGF-C、VEGFR-3、CD44v6和β-catenin mRNA组间比较差异均有统计学意义(F值分别为78.897、81.029、64.100、83.892,P均<0.01)。结论奥沙利铂及二甲双胍均可抑制VEGF-C、VEGFR-3、CD44v6和β-catenin的表达,联合应用抑制效果更强。

粘附分子CD44V6及抑癌基因PTEN的表达与葡萄胎恶变关系的探讨

目的 探讨粘附分子CD4 4V6及抑癌基因PTEN表达量与葡萄胎恶变的相关性。方法 1994～ 2 0 0 0年 ,采用免疫组织化学染色技术检测 15例正常绒毛及 5 5例葡萄胎组织中CD4 4V6及PTEN表达 ,应用图像分析系统定量分析其表达水平。结果 CD4 4V6在正常绒毛组织中无表达 ,在葡萄胎非恶变组及恶变组中表达水平均明显高于正常绒毛组织 (P <0 0 1)。在恶变的葡萄胎CD4 4V6表达明显高于未恶变的葡萄胎组织 (P <0 0 1) ;PTEN在葡萄胎非恶变组及恶变组中水平明显低于正常绒毛组织 (P <0 0 1)。PTEN表达量在恶变的葡萄胎组织明显低于未恶变的葡萄胎组织 (P <0 0 1)。结论 CD4

MMP-2和CD44v6蛋白表达与胃癌生物学行为相关性的实验研究

目的探讨胃组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和黏附分子CD44拼接变异体V6(CD44v6)基因的表达与胃癌生物学行为的相关性。方法应用免疫组化S-P法,对40例胃癌手术切除标本进行抗人MMP-2和CD44v6单克隆抗体免疫组化染色,检测癌组织、癌旁组织、手术切缘区正常组织各区域MMP-2和CD44v6蛋白表达,并分析二者之间及二者的表达与胃癌临床病理特征之间的关系。结果MMP-2蛋白表达在癌组织与手术切缘区正常组织、癌组织与癌旁组织之间差异有显著性,癌旁组织与手术切缘区正常组织之间其表达差异无显著性;CD44v6蛋白表达在癌组织与手术切缘区正常组织、癌组织与癌旁组织、癌旁组织与手术切缘区正常组织之间差异均具有显著性。癌组织中MMP-2和CD44v6蛋白表达与患者性别和年龄无相关性;而与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床TNM分期呈正相关;CD44v6蛋白表达还与肿瘤有无远处转移有关。此两种蛋白表达彼此具有相关性,即同时表达阳性的胃癌病例具有更为恶性的生物学特征。结论MMP-2和CD44v6在胃癌的发生和侵袭转移中可能起着重要作用,检测MMP-2和CD44v6的表达有望成为判断胃癌病变发展、预测肿瘤转移潜能的客观指标。

OSCC组织中的Pinx1、CD44v6蛋白的表达及其意义

目的口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的Pinx1(PIN2码/TRF1相互作用蛋白X1)、CD44拼接变异体6(CD44v6)蛋白的表达及其临床意义。方法选取我院2014年6月-2016年12月收集的68例OSSC组织(OSCC组)、正常口腔黏膜组织34例(对照组),采用免疫组化染色检测两组标本中的Pinx1蛋白、CD44v6蛋白表达水平,并分析在不同分化程度、临床分期、淋巴结转移的OSCC组织中的表达差异。结果OSCC组标本中的CD44v6蛋白、Pinx1蛋白阳性表达率分别为66.18%、61.76与对照组的8.82%、94.12%比较差异具有统计学意义(P<0.05);Pinx1蛋白阳性表达的低分化患者占比、Ⅲ期+Ⅳ期患者占比、发生淋巴结转移患者占比均低于Pinx1蛋白阴性表达的OSCC患者(P<0.05);CD44v6蛋白阳性表达中低分化患者占比、发生淋巴结转移患者占比均高于CD44v6蛋白阴性表达的OSCC患者(P<0.05)。结论Pinx1蛋白、CD44v6蛋白在OSCC组织中表达变化显著,并且与肿瘤病理学特征具有一定的相关性。

上皮钙黏蛋白和CD44v6蛋白在青年胃腺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨上皮钙黏蛋白（E-cad）与CD44v6蛋白在青年（≤35岁）胃癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法：收集68例青年（≤35岁）和68例老年（≥60岁）胃腺癌组织，用免疫组织化学EnVision法检测E-cad和CD44v6的表达。结果：远离癌组织的正常胃黏膜上皮几乎全部上皮细胞膜着色，即正常表达；而胃癌组织中E-cad呈异常表达，即细胞质着色或异质性着色。青年胃癌组织E-cad异常表达率和CD44v6阳性表达率分别为70．6％和76．5％，而老年胃癌组织E-cad异常表达率和CD44v6阳性表达率分别为42．6％和51．5％，两者比较差异有统计学意义。青年胃癌淋巴结癌转移组和无淋巴转移组E-cad异常表达率分别为63．6％和32．6％，差异有统计学意义；CD44v6淋巴结癌转移组阳性表达率为80．4％；无淋巴转移组阳性表达率63．6％，差异有统计学意义。青年胃癌组织中E-cad异常表达和CD44v6蛋白表达呈正相关。结论：E-cad蛋白异常表达及CD44v6蛋白高表达预示青年胃癌具有较强的侵袭转移能力，可作为预测青年胃癌转移潜能的生物学指标。

结直肠癌外周血淋巴细胞CD44v6表达的初探

目的 检测结直肠癌患者外周血淋巴细胞 (PBL)CD4 4变异体 6 (CD4 4v6 )表达情况 ,并探讨其临床意义。方法 应用流式细胞术 (FCM)检测 31例结直肠癌患者术前PBLCD4 4v6含量并与健康组相对照。结果 结直肠癌患者术前PBLCD4 4v6含量较正常对照组明显增高 (P <0 0 5 )。伴有转移的结直肠癌患者PBLCD4 4v6含量明显高于无转移者 (P <0 0 5 )。结论 应用FCM检测结直肠癌患者外周血PBLCD4 4v6含量对结直肠癌转移的诊断可能具有一定的临床价值 ,可作为结直肠癌患者转移的潜在参考指标之一。