泛素-蛋白水解酶复合体通路在小鼠精子变态中的作用

应用重力沉降法分离睾丸各层细胞 ,通过蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白免疫印迹观察各种生精细胞中泛素结合蛋白的表达规律 ,并通过免疫组织化学方法对其进行组织和细胞水平的定位 .结果表明 ,在圆形精子和长形精子细胞中泛素结合蛋白增加 ,在成熟精子中量较低 ,在精原和精母细胞中量微弱 .总蛋白电泳的结果表明 ,在精子变态过程中蛋白的变化以长形精子细胞转变为成熟精子阶段最为剧烈 ,其间许多蛋白消失同时伴随一些新蛋白的出现 .蛋白免疫印迹显示泛素结合蛋白在精子变态过程中大量出现 ;结合总蛋白电泳的结果发现 ,此阶段消失的蛋白多为泛素结合蛋白 .由此可见 ,泛素对一些蛋白的修饰及其降解与精子变态密切相关 .

精子细胞变态相关基因的筛选

目的:筛选大鼠精子细胞变态相关的cDNA片段。方法:提取两个不同发育阶段的大鼠睾丸总RNA,用mRNA差异显示(mRNA Differential Display)的方法寻找精子细胞变态期特异表达的cDNA片段,并以Northern杂交法进行鉴定。结果:初步找出性成熟大鼠特异表达的cDNA片段。经过测序分析后得到3个同源性低的新cDNA片段,分别命名为DD1-35,DD2-81,DD5-40。以DD5-40为探针,进行Northern杂交,发现此片段只与性成熟大鼠睾丸RNA有杂交信号。结论:表明此片段在精子细胞变态过程中表达,判断其与精子细胞变态相关。

微波照射对兔精子形成影响的电子显微镜观察

本研究用微波(2450 MHz)照射兔阴囊及睾丸,使阴囊皮肤温度升至41~42℃,维持20分钟。用电镜观察照射后30分钟至4个月之间不同时间阶段对精子形成的影响。30~60分钟,高尔基期、头帽期、顶体期及成熟期的精子细胞已出现形态学的改变。30~60天后退变的成熟期精子细胞增多。3~4个月后精子细胞一般恢复正常。各期精子细胞对微波都很敏感。损伤改变主要见于顶体、顶体下间隙、核、尾部线粒体鞘、纤维鞘、外致密纤维及顶体后致密膜。早期精子细胞的平滑型内质网和核膜间隙扩大及空泡化也经常见到。本文所见微波致精子细胞的超微结构改变,在许多方面与超声及实验性隐睾所致的改变相似。

环磷酸腺苷应答元件调节器与精子发生

环磷酸腺苷应答元件调节器(CREM)是cAMP信号途径中的一个主要成分,CREM基因敲除导致小鼠不育,精子发生停止在减数分裂后的精子变态(spermiogenesis)的第一步,减数分裂后的生殖细胞特异的基因表达显著减少,凋亡细胞增多。而CREM突变雌鼠能育,说明CREM对于小鼠精子发生是必须的;同样在精子发生停止在圆形精子阶段的患者中发现CREM基因表达减少或不表达或剪接错误导致产生不正确的产物。本综述主要讨论CREM在精子发生中的作用。

人类精子核内胞质残留对受精后生殖活动的可能负效应

人类精子核内含有残留胞质(INCR)。INCR起源于精子细胞变态过程的早期,是核内含有细胞质的一种隐匿性核异常类型。INCR是人类精子核内多见的超微现象,存在于精子核空泡内,具有大小、形状、数量、成分、位置和分布的多性样。畸形精子症的精子标本中,INCR发生率与精子头畸形率呈正相关。INCR可能通过多重机制对受精后的父本基因组活动和合子、早期胚胎发育产生负效应。应重视INCR可能对受精后生殖活动的影响,围绕INCR开展相关的实验与临床研究。

Cfap65基因敲除对小鼠精子发生的影响

目的探讨Cfap65基因敲除对小鼠精子发生的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Cfap65基因敲除小鼠;使用PCR和Sanger测序方法进行小鼠基因型鉴定;依据小鼠基因型将小鼠分为Cfap65-/-组(n=3)与野生型组(n=3);生育力试验评估小鼠生育力;使用HE染色、免疫荧光、透射电子显微镜观察小鼠附睾精子与睾丸精子形态;使用定量实时聚合酶链锁反应检测Cfap65 mRNA在小鼠心、肝、脾、肺、肾和睾丸组织中的表达。结果Cfap65-/-组小鼠表现为完全不育,附睾精子数量减少和活动率低下,形态观察可见精子出现短尾、卷尾和尾部缺失,头部畸形率也显著高于野生型小鼠(1.67%±0.44%比33.00%±1.53%),差异有统计学意义(P<0.001)。Cfap65基因敲除导致小鼠精子领结构异常。Cfap65高表达于成年小鼠的睾丸、肺中;Cfap65在小鼠睾丸中的表达从4周龄到6周龄有一个急剧的增加(901.90±33.19比2144.00±22.92),差异有统计学意义(P<0.001)。结论Cfap65表达具有组织特异性,缺失后导致雄性小鼠精子发生障碍,这可能与精子领运输障碍有关。

慢性照射与人的精子形成的改变

绪言在二十世纪初期,医学放射学的先驱者已注意到,职业性照射所引起的不孕是电离辐射生物效应之一。Faber在1923年首先描述了在长时间无任何防护措施情况下,一个从事放射线医生的睾丸生殖上皮的萎缩和硬化。在受急性照射人员中。