绵羊精子提取物对卵母细胞的孤雌激活作用

研究了绵羊精子提取物对绵羊卵母细胞的孤雌激活作用，确定了绵羊精子提取物的最佳注射剂量，并将其孤雌激活效果与离子霉素联合6-DMAP法的激活效果进行了比较。结果表明，绵羊精子提取物对绵羊卵母细胞有孤雌激活作用，最佳注射剂量为每个绵羊卵母细胞注入2～4pL浓度5～6mg／mL的绵羊精子提取物；绵羊精子提取物的孤雌激活效果与离子霉素联合6-DMAP法的激活效果差异不显著。

精子提取物对绵羊显微授精受精率及胚胎发育影响的研究

将绵羊精子可溶性提取物与单个不运动绵羊精子共同注射于体外成熟的绵羊卵母细胞（显微授精）并在体外培养。结果发现，共同注射的卵母细胞卵裂率、２～１６细胞发育率、桑椹胚发育率、囊胚发育率均显著高于对照组，其中卵母细胞卵裂率和２～１６细胞发育率还显著高于精子单独注射组；桑椹胚、囊胚发育率明显高于精子单独注射组。对该组囊胚的免疫荧光染色分析表明，内细胞团数量与体外受精组相似，说明提取物对精子注射的受精卵或胚胎具有明显的促进发育作用。

猪精子提取物对猪卵母细胞的孤雌激活效果

3个试验分别就猪精子提取物提取方法、精子蛋白质量浓度以及显微注射剂量对猪卵母细胞的孤雌激活效果进行了研究.结果表明,采用液氮反复冻融法和超声波破碎法提取的猪精子提取物对猪卵母细胞都有显著的孤雌激活效果;采用猪精子提取物显微注射孤雌激活猪卵母细胞的适宜注射剂量为2-4 pL;猪精子蛋白质量浓度在1.35 mg/mL以上,注射剂量为2-4 pL时均可有效激活猪卵母细胞.

水牛精子提取物对猪卵母细胞的孤雌激活效果

为验证精子蛋白对卵母细胞的激活效果,为提高核移植胚胎的质量提供可行方法,通过比较不同裂解方法提取的水牛精子蛋白,不同浓度提取液显微注入猪卵母细胞,对水牛精子提取物的孤雌激活效果进行研究。结果表明:采用液氮反复冻融法和超声波破碎法预处理后提取的水牛精子提取物对猪体外成熟卵母细胞都有显著的孤雌激活效果。水牛精子蛋白浓度在0.53～5.52 mg/mL,注射剂量为2～4 pL时均可有效激活猪卵母细胞,综合效果以1.77 mg/mL较佳。

精子提取液对绵羊同异种核移植重构胚的激活效果

应用绵羊精子提取物体外激活绵羊体细胞核移植胚和山羊-绵羊异种核移植胚,比较了不同浓度的绵羊精子提取物对绵羊同种和异种重构胚的激活作用,并与传统的化学激活方法对重构胚的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数做了比较。结果表明,绵羊精子提取物可以有效地激活绵羊体细胞核移植胚和山羊-绵羊异种核移植胚,每一重构胚注射3 pL浓度为5 mg/mL的绵羊精子提取物,对同种和异种胚的发育效果均为最好,并显著高于其他试验组(P<0.05)。注射绵羊精子提取物对绵羊-山羊异种核移植胚的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数的影响,与离子霉素联合6-DAMP激活法差异不显著(P>0.05)。注射绵羊精子提取物对绵羊同种核移植胚的卵裂率和囊胚率的影响,与离子霉素联合6-DAMP激活法差异也不显著(P>0.05),但精子提取物注射法的绵羊核移植胚的囊胚细胞数显著(P<0.05)高于化学激活法的细胞数(72.4 vs 65.2)。