丙二酸二钠通过抑制琥珀酸脱氢酶活性损伤人精子运动功能

目的 揭示琥珀酸脱氢酶(SDH)在人精子功能调控中的作用。方法 将分离纯化后的人精子样本与不同浓度(10、20、40 mmol/L)SDH抑制剂丙二酸二钠共孵育不同时间(1、2 h)后,试剂盒检测对照组及丙二酸二钠处理组SDH酶活性,Western blot检测SDH催化亚基(SDHA)蛋白水平。精子功能研究实验:1)通过计算机辅助精液分析系统检测丙二酸二钠对未获能精子重要运动参数[前向运动率(PR)、总活力(TM)、平均路径速度(VAP)]以及获能精子穿透粘性介质能力的影响;2)伊红-苯胺黑法评估丙二酸二钠对精子存活率的作用;3)PSA-FITC染色法检测丙二酸二钠处理对获能精子顶体反应发生率的影响。结果 丙二酸二钠不改变人精子中琥珀酸脱氢酶A(SDHA)蛋白表达水平,但其能够抑制SDH酶催化活性、精子前向运动率、总活力以及获能精子穿透粘性介质的能力,且上述抑制效应同丙二酸二钠浓度正相关。此外,丙二酸二钠不影响获能精子自发顶体反应发生率。结论 丙二酸二钠通过抑制SDH活性损伤人精子运动功能。

年龄对不明原因不育男性精子运动参数及DNA损伤的影响

目的探讨不明原因不育男性的年龄对其精子运动力及DNA损伤的影响。方法回顾性分析2013年1月至2018年12月在本院不孕不育专科门诊就诊的400例不明原因不育患者,按年龄分为二组:<35岁组和≥35岁组,通过计算机辅助精液分析系统(CASA)检测获得前向运动精子百分率(PR%)、总活力和精子运动参数(VAP、VSL、VCL、ALH、STR、LIN、BCF);采用精子染色质扩散法(SCD)评估精子DNA损伤程度,结果以DNA碎片指数(DFI)报告。结果不明原因不育患者年龄与PR%、总活力、VAP、VSL和VCL呈负相关(r分别为-0.142、-0.125、-0.142、-0.114和-0.161,P均<0.05),而与精子DFI呈正相关(r=0.161,P<0.05);≥35岁组的PR%、VAP和VCL均明显低于<35岁组(P均<0.05),而≥35岁组的DFI水平及DFI异常率均高于<35岁组且差异具有统计学意义;同时,≥35岁组的精子DNA损伤率风险是<35岁组的两倍多。结论在不明原因不育男性中,年龄越大的患者其精子运动参数可能越低,DNA损伤率及风险则增高。

参与调节哺乳动物精子运动的离子通道研究进展

精子运动能力是精子完成自然受精、实现自然条件下精子-卵母细胞融合的必要条件。精子从雄性附睾经生殖道进入雌性生殖道的过程中,其运动形式可以在很短的时间内根据环境的变化而做出改变,表明精子膜蛋白(离子通道)参与精子运动的调节,离子通道的正常表达和受精过程密切相关。目前研究发现Ca^(2+)、K^(+)、Na^(+)等离子通道均参与精子膜极化、运动、获能和顶体反应等生理过程,且通过膜片钳和电生理学等技术初步了解精子离子通道的作用分子机制和拓扑结构。本文就参与调节精子运动的Ca^(2+)、pH、电压门控Na^(+)、K^(+)、Cl^(-)通道的生理功能和拓扑结构进行了总结,期望能为精子离子通道的调节机制和功能研究提供全面的信息,促进动物生殖生物学的发展。

鹅精子迁移率与精子运动参数关系及其对自然交配鹅群繁殖效率的影响

实验旨在研究不同精子迁移率对鹅群繁殖效率的影响,选择体况健康、发育良好同批次的24月龄种公鹅、体重变异范围为3.70~4.60 kg的30只公鹅单笼饲养,连续5次采精,测定鹅的精子迁移率,同时测定精液质量性状和精子运动参数。将30只公鹅精子迁移率按照由高到低排序,并依据高与低迁移率组之间至少相差一个标准差原则分出高、低2组,每组6只,与母鹅按(1:5)的比例混群。收集种蛋(高精子迁移率组206枚,低精子迁移率组167枚)并孵化。采用分子遗传标记进行亲子鉴定,计算每只公鹅的后代数,比较高、低迁移率组公鹅的遗传贡献率(GCR)差异。结果表明:精子迁移率与精子活力、活率、密度呈正相关(P<0.01),与畸形率呈负相关(P<0.01);精子迁移率与运动参数中平均路径速度、直线运动速度、曲线运动速度、前向性呈正相关(P<0.01),与直线性、鞭打频率呈正相关(P<0.05),与侧摆幅度、平均移动角度呈负相关(P>0.05)。高、低精子迁移率组精子迁移率分别为0.37和0.12 absorbance(P<0.01),受精率分别为93.69%和84.46%(P<0.05),孵化率分别为88.06%和78.01%(P<0.05)。在自然交配情况下,鹅群的高精子迁移率个体具有更高的繁殖效率。

精子DNA碎片指数与精液常规参数和精子运动参数的相关性分析

目的探讨精子DNA碎片指数(DFI)与精液常规参数以及精子运动参数之间的相关性。方法回顾性分析2021年3月至2022年2月在福建省人类精子库男科实验室进行精液检查的288例男性患者资料,根据DFI值分为DFI≤15%(46.53%)、15%<DFI<30%(36.46%)、DFI≥30%(17.01%)3组,分别比较3组的年龄、精液常规参数和精子运动学参数之间是否存在差异,并分析精子DFI与各精液参数的相关性。结果3组组间比较结果显示,年龄、禁欲时间、精液量、精子水平、PR级精子百分比、精子总活力、精子运动参数、形态正常精子百分比之间的差异均有统计学意义(P<0.01),相关性分析表明,精子DFI与年龄、禁欲时间、精液量之间存在显著正相关(r=0.269、0.157、0.163,P<0.01),精子DFI与PR级精子百分比、精子总活力、精子运动参数(VCL、VSL、VAP、ALH、BCF、MAD、LIN、WOB、STR)、形态正常精子百分比之间存在显著负相关(r=-0.438、-0.443、-0.427、-0.416、-0.428、-0.306、-0.428、-0.442、-0.307、-0.307、-0.318、-0.255,P<0.01)。多元线性回归分析结果表明精子总活力、年龄、精液量、形态正常精子百分比和禁欲时间是精子DFI相关的5个变量,标准化回归系数分别为-0.370、0.195、0.151、-0.116、0.111。结论精子DFI与患者年龄、精液常规参数包括精子运动参数之间存在相关性,可综合多参数进行男性精子质量评估。

前列腺炎患者精液质量、精子运动与前列腺液M-CSF、NF-kB水平的相关性

目的:探讨前列腺炎患者精液质量、精子运动与前列腺液巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、核转录因子-kB(NF-kB)水平的相关性。方法:选择本院2019年5月-2022年12月诊治的前列腺炎患者300例为病例组,根据疾病严重程度分为轻度组、中度组和重度组,同期体检健康男性95例为对照组,检测两组精液质量、精子运动参数和前列腺液M-CSF、NF-kB水平并分析各指标间相关性。结果:病例组精液量、pH值、精子浓度、精子总活力、存活率、前向运动精子百分率均低于对照组,液化时间、M-CSF、NF-kB水平均高于对照组,且轻度组、中度组、重度组精液量、液化时间、M-CSF、NF-kB水平依次升高,pH值、精子浓度、精子总活力、存活率、前向运动精子百分率依次降低;精液量、液化时间分别与M-CSF、NF-kB水平呈正相关,pH值、精子浓度、存活率、精子总活力、前向运动精子百分率分别与M-CSF、NF-kB水平呈负相关(均P<0.05)。结论:前列腺炎患者精液质量参数、精子运动参数、NF-kB和MSCF水平存在异常表达,且精液质量、精子运动与NF-kB和MSCF均具有相关性。

大鼠慢性镉染毒后精子生成量和精子运动能力研究

目的:了解慢性镉中毒对精子生成量和精子运动能力的影响。方法:SD雄性大鼠60只,分成对照组、镉中剂量组、镉高剂量组,每组20只。采用精子头计数法研究镉染毒对精子生成量的影响;计算机辅助精子分析系统（CASA）观察附睾精子运动速度参数（VCL、VSL和VAP）和运动方式参数（BCF、ALH、LIN和STR）的变化。结果:染毒第3周时,高剂量组精子头计数和每日精子生成量均显著低于对照组（P<0.01）;中剂量组大鼠VCL显著降低,高剂量组BCF和STR也显著下降。染毒第6周时,两个染毒组精子头计数和每日精子生成量均明显低于对照组（P<0.01）;而高剂量组大鼠VSL和LIN显著降低（P<0.05）。第3、第6周其它运动指标变化均不明显。结论:慢性镉染毒对大鼠睾丸精子生产量和附睾尾精子运动能力直接造成毒性作用。

添加不同浓度黄芪注射液对人精子运动参数的作用

目的 观察体外添加不同浓度黄芪注射液对弱精子症精子运动参数的影响 ,探讨黄芪注射液中微量元素在精子运动的作用机制。方法 将优选后的弱精子症精子与不同浓度黄芪注射液共同培养 ,采用计算机辅助的精子分析系统 (CASA)观察不同浓度黄芪注射液对人精子各运动参数的作用。同时采用原子吸收光谱分析法测定黄芪注射液的微量元素。结果 黄芪注射液在 10mg/ml和 2 0mg/ml能显著提高弱精子症患者精子的运动 ,黄芪对精子活率 (Mot)、前向运动精子百分率 ,曲线速度 (VCL) ,直线运动速度 (VSL) ,平均路径速度 (VAP)和精子头摆幅度 (ALH)与对照组相比 ,差异有显著性或非常显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,两组间比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。原子吸收光谱分析法测定黄芪注射液中K+ 为 7.0 3μm/ml、Ca2 + 为 2 .91μm/ml、Fe2 + 为 0 .0 2 2 μm/ml、Zn2 + 为 0 .0 82 μm/ml、Mg2 + 为 6 1.2 0 μm/ml、Se2 + 为 0 .0 2 μm/ml。 结论 黄芪注射液能明显改善弱精子症患者精子运动参数的最佳浓度是 10mg/ml和 2 0mg/ml,最佳体外优选时间为 6 0min。

精子形态与精子运动参数关系研究

目的:探讨精子形态与精子运动参数关系。方法:783例不育患者,采用精子自动分析系统分析精子运动参数,采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析。精子形态正常组241例,异常组542例。结果:精子形态异常组精子曲线速度(VCL)、摆动性(WOB)、平均路径速度(VAP)均显著高于精子形态正常组(P<0.05,P<0.001),而精子形态异常组精子平均移动角度(MAD)、直线性(LIN)、前向性(STR)均显著低于精子形态正常组(P<0.05,P<0.001);形态正常精子百分率与MAD、LIN、WOB、STR有显著正相关性,而与侧摆幅度(ALH)有显著负相关。结论:精子形态异常和运动能力弱相伴产生,形态异常对精子运动的影响可能只是这一现象产生的次要原因,而一些共同作用于精子形态和运动能力的因素也许是导致这一现象产生的主要原因。

镉对大鼠精子运动能力影响的体外实验研究

[目的 ]研究镉对精子运动能力的直接作用。 [方法 ]应用计算机辅助精子分析 (CASA)系统研究了氯化镉对离体大鼠精子运动能力的影响。利用扩散法收集健康成年雄性 SD大鼠附睾尾精子 ,用氯化镉进行体外染毒 ,染毒浓度分别为 0 .5、 2 .0、 8.0 mg/ L (以镉计 )。分别在染毒 1 h和 2 h后应用 CASA系统对精子运动速度 (曲线运动速度、直线运动速度、平均路径速度、鞭打频率 )和运动方式 (前向性、直线性等 )进行检测。 [结果 ]在染毒 1 h后精子各项运动参数无明显改变。染毒 2 h后 ,镉的染毒浓度为 0 .5mg/ L时各项指标与对照组相比没有显著性差异 ;而染毒浓度为 2 .0和 8.0 mg/ L时 ,多项运动指标出现明显降低。 [结论 ]本次研究提示镉可作用于大鼠附睾尾精子 。

辛硫磷对大鼠精子生成量和精子运动能力的影响

为探讨有机磷杀虫剂辛硫磷的雄性生殖毒性,运用动物实验研究了不同剂量辛硫磷经口染毒大鼠60天对精子生成量和精子运动能力的影响。采用计算机辅助精子分析仪(CASA)分析精子运动轨迹。结果显示:辛硫磷24.5和73.5m g/kgBW 染毒组,大鼠睾丸精子生成量低于对照组(P< 0.05和P< 0.01)。与对照组相比,精子的运动活力参数(曲线运动速度、直线运动速度、鞭打频率)和运动方式参数(直线性和前向性)均降低(P< 0.05和P< 0.01),且具有剂量依赖关系。提示辛硫磷大剂量(24.5和73.5m g/kgBW)对雄性大鼠有生殖毒性。

刺五加水提物体外对弱精子症患者精子运动参数的影响

目的:研究不同浓度的刺五加水提物体外对弱精子症患者精子运动的影响,探讨其可能的作用机制。方法:将35例弱精子症患者经手淫法获得并通过上游优化处理的精子,与不同浓度刺五加水提物共同孵育30、60、120、180 m in后,应用计算机辅助精子分析系统(CASA)观察不同浓度(2.5、5、10、20 g/L)刺五加水提物对人精子各运动参数的作用。结果:不同浓度刺五加水提物能明显提高弱精子症患者精子的运动能力,在浓度为5 g/L和10 g/L时,精子活率(MOT)、前向运动精子百分率、曲线运动速度(VCL)、直线运动速度(VSL)和平均路径速度(VAP)与空白对照组相比,差异均有显著性(P<0.05)。结论:刺五加水提物在体外能明显改善弱精子症患者精子运动能力,其最佳浓度为10 g/L。

氰戊菊酯体外对大鼠精子运动能力的影响

目的:观察氰戊菊酯(Fen)对大鼠精子运动能力的直接作用。方法:收集7只健康成年雄性SD大鼠附睾尾精子,用Fen进行体外染毒,剂量分别为1、4、16、64μmol/L,以Fen溶剂(二甲亚砜)作为对照组。在染毒1、2、4 h后用计算机辅助精子分析(CASA)系统对精子运动速度[曲线运动速度(VCL)、直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、鞭打频率(BCF)]和运动方式[前向性(STR)、直线性(LIN)]进行检测,观察Fen对离体大鼠精子运动能力的影响。结果:Fen染毒1、2 h后,可见64μmol/L组的VSL、BCF、LIN和STR与对照组相比差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。染毒4 h后,除上述指标外,VCL在16、64μmol/L组与对照组相比也呈现出明显的下降(P<0.01)。时间-效应关系分析显示,Fen(16、64μmol/L)染毒4 h组与染毒1 h组相比,VCL和STR显著下降(P<0.01或P<0.05)。结论:Fen可作用于大鼠附睾尾精子,并对大鼠精子运动有直接毒性效应。

生精散对人精子运动能力和受精能力的影响

目的:研究含生精散血清对人精子运动能力和受精能力的影响。方法:通过人精子与生精散血清共培养,观察生精散对人精子运动能力(精子运动CASA分析)、精子与卵透明带结合能力的影响。结果:含药血清加入共培养可明显提高人精子运动速度[精子运动平均路径速度(VAP)、精子曲线速度(VCL)、精子直线运动速度(VSL)](P<0.05)精子头部侧摆幅度(ALH)和鞭毛摆动频率(BCF)(P<0.05),可增强精子与卵透明带结合能力(P<0.05)。结论:生精散与精子共培养具有提高人精子运动能力和精卵结合能力的作用。

人精子抗原基因－2表达产物相关抗体对精子运动的影响

在构建成人睾丸ｃＤＮＡ文库的基础上，用兔抗人精子抗体自文库中筛选出了８株阳性克隆，并对其中的ＨＳＧ２表达产物进行理化特性测定和抗ＨＳＧ２表达产物抗体的生物学活性测定。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳显示溶原蛋白的分子量约为１５５ＫＤａ。抗ＨＳＧ２表达产物抗体能明显的抑制精子的运动能力，对精子凝聚、顶体蛋白酶和精子表面的ＣｏｎＡ受体无影响。提示ＨＳＧ２表达产物可能成为精子疫苗的候选成份。

附睾及附属性腺对精子运动能力的影响

目的研究睾丸后附睾及附属性腺对精子运动能力的影响。方法630例精液样本采用计算机辅助精子分析(CASA)精子运动参数,把这些数值与精浆果糖、中性a-糖苷酶、前列腺特异性抗原及锌联系起来,并进行相关性分析。精浆果糖含量、中性a-糖苷酶、精浆锌采用分光光度比色法测定。PSA采用试剂盒进行检测。结果精液果糖含量异常组精子活力显著高于正常组(P<0.001),中性a-糖苷酶活性、精浆锌含量异常组精子活力均显著低于正常组(P<0.01,P<0.05)。精浆果糖含量与精子活力有明显的负相关性(r=-0.185,P<0.05),而精浆中性a-糖苷酶活性与精子活力有明显的正相关性(r=0.220,P<0.01)。结论附睾与附属性腺对精子运动能力有影响,其产生的生化标志物可能调节精子运动。

精液白细胞与精子运动参数关系的研究

目的:探讨精液白细胞与精子运动参数关系。方法:234例不育患者,采用精子自动分析系统分析精子运动参数,采用联苯胺法分析精液白细胞。结果:白细胞精子症组精子运动参数VCL、VSL、VAP均显著低于非白细胞精子症组,两组比较差异有显著性(P<0.001,P<0.001,P<0.001);白细胞精子症组MAD、BCF显著高于非细胞精子症,两组比较差异亦有显著性(P<0.001,P<0.001)。精液白细胞与VCL、VSL、VAP均呈显著负相关(r=-0.368,P<0.001;r=-0.362,P<0.001;r=-0.359,P<0.001),与MAD、BCF均呈显著正相关(r=0.134;P<0.05,r=0.210,P<0.001)。结论:精液白细胞可影响精子运动参数。

计算机辅助精子运动分析系统的研究

综合运用光电检测、计算机视觉、图像处理和图像识别等技术 ,设计研制了计算机辅助精子运动分析系统 ,在常规医学显微镜基础上实现精子运动参数的定量检测 .临床应用表明 ,本系统具有良好的可靠性、重复性和灵敏度 .本系统学术起点较高、符合我国国情 ,具有良好的社会效益和经济效益 。

弱精子症患者精子运动参数及DNA碎片化指数的检测与分析

目的了解弱精子症患者精子运动参数和DNA碎片化指数(DFI)的变化情况。方法通过对41例弱精子症患者(弱精子症组)和48例活力正常不育患者(活力正常组)精液的常规检测、精液分析仪检测和荧光显微镜检查,比较弱精子症组和活力正常组精液常规参数(包括精子浓度、精子总数、活动率)、精子运动参数[包括前向运动率(PR)、平均路径速率(VAP)、曲线速度(VCL)、直线速度(VSL)、直线性(LIN)、摆动性(WOB)、前向性(STR)、头侧摆幅度(ALH)、鞭打频率(BCF)和平均角位移(MAD)]及DFI。结果弱精子症组精子浓度、精子总数、活动率、PR、VAP、VCL、VSL、LIN、WOB、STR、ALH、BCF及MAD分别为(69.0±49.1)×106/m L、(203±159)×106、60.8%±15.7%、21.1%±8.0%、(10.7±2.8)μm/s、(20.6±4.9)μm/s、(6.3±2.2)μm/s、29.9%±8.1%、51.4%±5.8%、57.2%±10.4%、(0.53±0.12)μm、(3.20±0.85)Hz和(14.2±3.2)°,均明显低于活力正常组[(98.8±38.2)×106/m L(P<0.05)、(281±171)×106(P<0.05)、82.0%±7.9%(P<0.01)、45.1%±8.5%(P<0.01)、(18.5±3.0)μm/s(P<0.01)、(30.7±5.3)μm/s(P<0.01)、(12.0±2.3)μm/s(P<0.01)、39.6%±7.0%(P<0.01)、60.5%±5.0%(P<0.01)、65.1%±7.2%(P<0.01)、(0.72±0.13)μm(P<0.01)、(5.07±0.81)Hz(P<0.01)和(17.8±2.5)°(P<0.01)];而DFI(17.9%±12.5%)明显高于活力正常组(8.5%±6.4%,P<0.01)。结论弱精子症患者除了表现为常规检查中的精子活力低下外,还伴有精子浓度和总数下降、精子运动参数下降以及精子DFI的增高,这些参数的改变可能是弱精子症引起男性不育的机制之一。

白念珠菌体外感染对人精子运动和超微结构的影响

目的: 体外研究白念珠菌(Ca)对人精子的运动功能有无直接影响并观察精子超微结构变化,对其影响机制作初步探讨。 方法: 将从念珠菌性阴道炎患者的分泌物中分离纯化的Ca制成活菌悬液,对 10例健康青年男性手淫获得并经上游优化处理的精子进行体外感染。按细菌与精子比例不同分成A组 ( 1∶1 )、B组 ( 1∶10 )、C组(1∶100)、D组(1∶1 000)、E组(1∶10 000)、F组(空白对照)分别孵育,于 0、1、2、4h取样,计算机辅助精子分析系统(CASA)检测人精子运动参数(前向性运动百分率、直线速度、曲线速度、平均路径速度、头部侧摆幅度 )、精子存活率、精子形态及凝集情况。透射电镜观察孵育 4h后的各组精子的超微结构变化。 结果: Ca与精子体外孵育后,前向运动百分率所受影响最大,且与菌体密度及时间密切相关;其他参数与对照组相比也相继出现显著性差异。观察到精子黏附于菌体和凝集现象。精子超微结构产生变化:精子核空泡增多,顶体破裂,质膜破损,线粒体排列紊乱。 结论: Ca体外可显著降低精子存活率和抑制精子运动功能,其机制可能与Ca对人精子的黏附作用和超微结构的损伤有关。