精液分析质量控制方法专家共识

精液分析是评估男性生育力的重要方法,也是辅助生殖治疗策略制定、避孕节育效果评估、男科疾病诊断、疗效观察的依据。由于精液分析高度复杂,操作难以标准化,因此每个从事精液分析的实验室,均应该在标准化方法和操作的基础上执行质量保证项目,以保证结果的准确性和精确性。为此,中华医学会生殖医学分会制定“精液分析质量控制方法专家共识”,为我国各地从事精液分析的实验室提供参考。

精子DNA碎片率与男性不育症患者的年龄、精液分析参数相关性研究

目的分析男性不育症患者精子DNA碎片率(DFI)与年龄、精液分析相关参数的相关性。方法回顾性分析2021年11月至2022年6月至河南中医药大学第一附属医院男科门诊就诊的153例男性不育症患者的临床资料,根据患者精液常规检测结果分为两组:前向运动(PR)精子率为0.98%~32.00%或精子浓度<40×106/ml,其余精液参数指标正常者为少弱精子症组(n=74),精液各项参数指标均正常的为精液参数正常组(n=79);同时,根据不同的DFI值分成3个亚组:DFI≥30%组、15%<DFI<30%组、DFI≤15%组,比较各组间精液检测指标;采用Spearman相关性分析,分析精子DFI与年龄、精子浓度、总精子数、PR精子率和精子总活力等各项指标的相关性。结果少弱精子症组精子浓度、精子总数、精子总活力、PR精子率均显著低于精液参数正常组(P<0.05),而DFI值显著高于精液参数正常组(P<0.05),且精子DFI≤15%的比例显著低于精液参数正常组(32.43%vs.65.82%,P<0.05)。与DFI≥30%组比较,DFI≤15%组精子浓度显著升高(P<0.01)。Spearman相关性分析结果显示,纳入不育症患者的精子DFI与年龄(r=0.244,P=0.002)、精液量(r=0.164,P=0.042)呈正相关;精子DFI与精子浓度(r=-0.254,P=0.002)、精子总数(r=-0.169,P=0.037)、PR精子率(r=-0.564,P<0.001)、精子总活力(r=-0.585,P<0.001)均呈成负相关。结论精子DFI能通过揭示DNA结构的完整性进一步研究精液参数正常时不育症患者的微观因素,精子DFI联合精液常规检测能更全面地反映出男性的生殖能力。

2018—2022年西北地区精液分析外部质控结果评估

目的分析和评估2018—2022年西北地区精液分析的外部质控,为国内推广精液分析的外部质控积累经验。方法每年分别制作2个水平的精子浓度、精子活力和精子形态学分析的质控品,发放给各参评实验室进行外部质控。各参评实验室收到质控品后在规定时间内进行检测并及时反馈结果。结果参评实验室数量由2018年的12家增加至2022年的30家,使用计算机辅助精液分析系统(CASA)进行精液分析及质控的单位从5家增至21家。精子活力分析的平均变异系数(CV)在20%左右;浓度分析的CV从2018年的49.87%降至2022年的23.93%,降幅超过50%;精子形态学分析的CV是3个质控项目中最高的,但整体也呈下降趋势。Youden图显示,超过80%的参评实验室的检测结果都在95%可信区间内,失控原因中83.33%为随机误差,16.67%为系统误差,说明随机误差仍是参评单位失控的主要原因。结论通过操作培训和外部质评,各实验室间的CV逐渐缩小,但各参评实验室之间的结果差异较大,尤其是精子形态学分析。后续还需要进一步加强技术人员的标准化操作与质控培训,提高区域内精液分析的准确性和一致性。

计算机辅助精液分析在不孕症诊疗中的应用价值探讨

目的探讨计算机辅助精液分析(CASA)在不孕症诊疗中的应用价值。方法对600份不育男性患者精液标本采用计算机辅助精液分析仪进行精液分析,并对其中的100份精液同时行人工常规精液分析(RSA)。对两种方法的精液密度、活力、活率、形态异常率进行对比分析。结果600份精液标本中,精液指标全部正常者274例(45.67%),精液指标中有一项或几项异常者326例(54.33%)。CASA与RSA两种方法比较,精液密度、活力、活率、形态异常率差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论计算机辅助精液分析准确、直观、快捷、经济,能为不孕症的诊断和治疗提供依据。

精子DNA荧光分析与两种常规精液分析方法的比较

目的 :比较计算机辅助的DNA荧光染色精子分析系统 (简称荧光CASA)与两种常规精液分析方法。 方法 :随机选择 2 2例男性不育患者 ,采用荧光CASA、灰度CASA和人工技术分析精液 ,以荧光CASA检测的精子密度为基础 ,分别与常规精液分析及灰度CASA的结果进行比较。 结果 :荧光CASA检测可以区别非精子颗粒及死活精子。与荧光CASA分析方法获得的精子密度相比 ,常规精液分析和灰度CASA法获得的精子密度差值绝对值的平均值分别为 (9.2 3± 8.0 1)× 10 6/ml和 (10 .2 7± 6 .2 2 )× 10 6/ml,检测精子密度误差的百分率分别为 (4 9.0 6±4 9.87) %和 (4 3.39± 2 5 .5 6 ) %。 结论 :荧光CASA更符合最新WHO男性不育实验室诊断标准的要求 ,推荐在临床工作中使用DNA荧光染色精子分析系统来分析精子特性 ,尤其是精子密度分析。

计算机辅助精液分析中精子密度的质量控制

目的在计算机辅助精液分析中,建立一种可行的精液密度测定的质量控制方法。方法采用计算机辅助精液分析(CASA)方法,对所选取的已知浓度的与精子头部直径相近的质控珠进行高、低两种密度测定,分别于日内及日间测试20次。结果高、低两种密度结果的日内变异系数分别为:1.86%、2.46%,日间变异系数分别为:1.45%、2.25%。结论质控珠可用于计算机辅助精液分析中精子密度测定的室内质量控制,从而达到保证实验室测试精子密度质量的目的。

ZKPACS多功能显微图像分析系统在精液分析中应用与评价

目的比较ZKPACS多功能显微图像分析仪精子质量自动分析系统计算机辅助精液分析(CASA)与常规精液分析的各项参数结果,并对其应用进行评价。方法对27例生育男性和38例不育男性患者的精液采用计算机辅助分析方法和常规分析方法同时进行检测。结果与常规精液分析比较,计算机辅助精液分析存在精子畸形率降低;活率有差异时,活力a、b级精子降低,活力c、d级精子上升,两者比较差异有统计学意义(P<0.01);非前向运动组有b级精子。结论计算机辅助精液分析对精子形态、活力辨别能力较常规精液分析低,但增设的直线速度(VSL)、曲线速度(VCL)、路径速度(VAP)、侧摆幅值(ALH)、鞭打频率(BCF)等量化指标及精子运动轨迹图和精子速度分布图显示,能更客观地、真实地反映精子的质量,是常规精液分析所不能的。

精液分析的培训及效果评估

目的:初步探索建立新技术人员精液分析标准化培训及效果评估方法,为国内男科学实验室室内质量控制和培训提供参考。方法:在本实验室根据《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》第5版推荐标准化精液分析方法对新技术人员进行培训,应用统计学分析的方法对精子浓度和活动率考核结果进行评价。结果:新技术人员按照本实验室建立的理论及实践培训方法培训后,分析高、中、低精子浓度样本的变异系数分别为7.72%、3.38%和4.49%;分析高、中、低精子活动率样本的变异系数分别为7.82%、8.09%和6.62%。Bland-Altman分析,与熟练技术人员比较,新技术人员精子浓度检测有4.77%的点在95%的一致性界限以外,在一致性界限范围内,与熟练技术人员检测结果比较,差值的绝对值最大为8×106/ml;活动率分析中7.15%个点在95%一致性界限以外,在一致性界限范围内,差值的绝对值最大为10%。双因素方差分析,两技术人员精子浓度及活动率差异,差异均不显著(P>0.05)。结论:经过培训,新技术人员精液分析结果精确度较好,与熟练技术人员比较,检测结果有较好的一致性,差异不显著。培训达到预期目标,所建立的考核及评估方法对评价培训效果切实可行。

《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》与我国男科实验室现状

2010年出版的《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》第5版是最为全面的一次修订。本文结合我国男科实验室精液分析的现状,从包括精子计数、精子活力、精子形态学、精子功能、抗精子抗体和精浆生化、以及精液分析的质量保证与质量控制等7个方面,对新出版的WHO手册进行了评论。笔者认为,该手册对精子浓度分析方法和参考值下调的推荐缺乏循证医学依据;精子活力分级标准的修订和精子形态学的严格标准和较低的4%的正常参考值与我国男科实验室目前使用的标准差距较大;精子功能指标尚未完善;抗精子抗体和精浆生化指标的检测方法显然不适合我国男科实验室现状;但精液分析的质量保证和质量控制对我国男科实验室有重要指导作用。需要指出的是,WHO手册中并没有涉及来自占世界人口1/5的中国人的任何临床数据和资料。因此,尽管WHO手册非常重要,它能否适应中国人精液分析实验室参考,仍需要评估。

精液分析前质量控制的初步研究

目的:探讨并研究精液分析分析前质控的一些环节对分析结果的影响,结合全面质量管理(TQM)的理念加以讨论,力求减少这些环节对检验结果准确性的影响。方法:21例要求生育前体检,有烟酒嗜好并自愿禁忌烟酒72 d以上的志愿者,分别检测其禁忌烟酒前后及精液留取后的第0.5 h,1 h,2 h和3 h的精液参数。结果:禁忌烟酒后志愿者的精子密度、精子活动率,a+b级精子百分率均显著高于禁忌前,精液留取后随着时间的递增,精子密度无显著差异(P>0.05),但精子活率和a+b级精子百分率多明显下降(P<0.05)。结论:分析前质控的环节众多,影响因素烦杂,包括患者的烟酒嗜好,精液标本的采集运送以及临床医师能否正确的选择检验项目、患者准备等,均可能对分析结果构成影响。必须慎重认真对待每一个环节,以达到整个精液分析过程的TQM,为临床诊疗提供可靠的实验室依据。

男性不育症患者精子DNA完整性与精液分析参数相关性研究

目的探讨男性不育症患者精子DNA完整性与精液参数间的相关性。方法已有生育男性健康者50例(对照组);男性不育症患者100例(不育组),根据精子常规参数检测结果分为参数正常不育组及参数异常不育组。采用计算机辅助精液分析系统分析精液常规和运动参数,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP末端标记法检测精子DNA碎片化指数(DFI)。结果参数正常不育组和参数异常男性不育组精子DFI均高于对照组(P<0.05),参数异常不育组精子DFI高于参数正常不育组(P<0.05);不育组精子DFI与精子密度、正常形态率、活动率、存活率、a级和b级精子活力及精子运动参数(直线速度、曲线速度、平均路径速度和侧摆幅度)呈不同程度负相关(P<0.05),与c级和d级精子活力呈正相关(P<0.05),与精子直线性、前向性、摆动性和鞭打频率无相关性(P>0.05)。结论精子DFI是可用于评估精液质量和男性生育能力的理想指标。

计算机辅助精液分析精子运动参数在体外受精中的应用

目的探讨计算机辅助精液分析(CASA)相关运动参数与行IVF治疗后正常受精率、卵裂率及优良胚胎率的关系。方法288例患者按受精情况分为正常受精率≥50%组,正常受精率<50%组;根据卵裂情况分为卵裂率≥90%组及卵裂率<90%组;根据优良胚胎形成情况分为优良胚胎形成率≥50%组,优良胚胎形成率<50%组,记录取卵前男方2次精液检查精子运动相关参数的均值,用t检验法确定各组间相关参数的均值是否存在统计学差异,从而判定与试管婴儿正常受精率、卵裂率及优良胚胎形成率相关的精子运动参数。结果正常受精率≥50%组VCL、VAP、ALH值明显高于正常受精率<50%组,差异具有统计学意义(P<0.05);卵裂率≥90%组VCL、VAP值明显高于卵裂率<90%组,差异具有统计学意义(P<0.05);优良胚胎形成率≥50%组与优良胚胎形成率<50%组间VCL、VSL、VAP、LIN、STR、WOB、ALH、BCF均无统计学差异(P>0.05)。结论正常受精率、卵裂率与精子运动能力有关;试管婴儿优良胚胎形成率的大小与精子运动参数无关。

精液分析的外部质量控制研究

目的在严格遵循WHO第5版精液分析标准化方法培训的基础上,率先在国内男科学实验室尝试开展外部质量控制,探索精液分析外部质量控制的方法和模式,为在全国范围内开展精液分析的外部质量控制打下基础。方法本实验室根据《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》第5版(WHO5)推荐的标准化精液分析方法,对来自全国23个实验室的技术人员进行理论与实际操作培训。各实验室技术人员带回质控样本,包括冷冻的混合精液、伊红-苯胺黑染色并封片的玻片、未经染色固定的形态学涂片,分别作为精子浓度、精子存活率和精子形态学评估的质控品。各实验室按要求采用血球计数板方法评估精子浓度;×100倍油镜评估精子存活率;巴氏染色法染色质控片并用×100倍油镜评估精子正常形态率;在规定日期内反馈结果。用WHO5推荐方法对外部质控结果进行评估。结果于截止日期前21个实验室反馈了结果。对2个质控品进行精子浓度评估,各实验室间的变异系数(CV)分别为28.54%和27.11%。Youden图分析,15%实验室的2个质控品的检测结果均在95%可信区间内。对2个质控品进行精子存活率评估,各实验室间的CV分别为7.90%和9.59%。Youden图分析,42%的实验室2个质控品检测结果均在95%可信区间内。对2个质控品进行精子正常形态率评估,各实验室间的CV为52.96%和48.66%。Youden图分析,14%的实验室2个质控品检测结果均在95%可信区间内。结论结果表明,严格遵循WHO5精液分析标准化方法培训后,除精子存活率评估各实验室间的CV较低、在控的实验室较多外,精子浓度评估和形态学分析CV均较高、失控的实验室较多。精液分析的质量亟需提高、标准化培训亟待普及和推广,质量控制迫在眉睫。

计算机辅助精液分析与常规精液分析的比较研究

目的 :比较计算机辅助精液分析与常规精液分析的各项参数结果 ,用于临床精子质量的评估。方法 :对2 7例生育男性及 317例不育男性患者采用计算机辅助精液分析 (CASA)与常规精液分析 (RSA)。结果 :与 RSA比较 CASA存在精子畸形率降低 (CASA生育组 2 5 .10± 8.5 7、不育组 31.4 8± 12 .81,RSA生育组 35 .5 6± 9.5 8、不育组 5 4.5 6± 13.4 7) P<0 .0 1;生育组活率 CASA6 1.35± 7.6 2、RSA83.96± 6 .6 7,活力 A、B级精子降低 (CASA9.10± 5 .5 0、31.16± 12 .35 ,RSA30 .33± 8.85、4 9.93± 8.5 6 ) P<0 .0 1;活力 C、D级精子上升 (CASA2 1.0 6±14 .19、38.6 6± 7.6 2 ,RSA3.70± 2 .12、16 .0 4± 6 .6 7) P<0 .0 1;不育组活率无差异时 (CASA4 2 .5 3± 14 .95、RSA4 3.0 9± 13.96 ) ,活力 B级精子降低 (CASA2 2 .6 7± 14 .96、RSA33.32± 13.4 7) ,C级精子上升 (CASA17.0 8±13.4 7、RSA7.6 8± 5 .82 ) ,两者分析均有非常显著性差异 P<0 .0 1;非前向性运动组有 B级精子 CASA2 .77±6 .0 1、RSA0。另外 CASA还增设了直线速度、曲线速度、平均路径速度、精子侧摆幅度、精子轨迹、静态图等。结论 :计算机辅助精液分析对精子形态、活力辨别能力较常规精液分析低 ,但计算机辅助精液分析增设的量?

精液分析中精子浓度室内质量控制方法的研究

目的:建立一种可行的精子浓度检测的室内质控方法。方法:设定20×106和80×106两种浓度的冷冻精液作为高、低值室内质控品(IQC),QC-BEADSTM质控珠(以下简称质控珠)作为对照。采用双盲法,4名技术员分别通过计算机辅助精液分析(CASA)对上述假定的室内质控品及质控珠进行精子浓度的测定,绘制出各自的质控图(Xbar图和Sbar图),连续检测1个月,计算出相应的高、低浓度值批内及批间变异系数(CV%),并进行比较。结果:①假定室内质控品高、低值批内变异系数分别CV3.5%,CV2.4%;批间分别为CV10.2%、CV9.6%。质控珠高、低值批内分别为CV5.1%,CV7.1%,批间分别CV7.1%,CV8.2%。两组高、低值的批内变异均<10%,批间变异均<15%,符合(Levey-Jennings)L-J质量控制原则,均能达到室内质控目的。②两组间高、低值的批内变异系数及批间变异系数无显著性差异(P>0.05),提示假定质控品可代替质控珠行实验室内部质量控制。结论:我们建立的精子浓度测定的室内质控方法是简单、易行、可靠。

中国118家实验室精液分析状况的调查

为在实验室内和实验室间实现精液分析标准化和进行质量控制,必须了解目前男科实验室精液分析的状况。为此,对中国大陆地区的部分精液分析实验室进行了调查。设计的"男科实验室精液分析调查表",包含36个问题,涉及精液分析的相关内容。本研究发放调查表145份,回收有效调查表118份。调查显示,53.6%(59/110)的实验室采用目测法检测精液量;对液化不全精液,70.9%(73/103)的实验室未作任何处理;精子密度、活动率、存活率及形态学分析以手工普通光学显微镜分析和计算机辅助精液分析(CASA)系统检测并存;精子染色方法达5种以上;精子自身抗体检测以酶联免疫吸附试验(ELISA)为主;仅有27.1%(32/118)的实验室开展了精浆生化项目检测。而且,在参与调查的所有实验室中,无一家实验室开展精液分析的室内和室间质量控制。总之,在中国大陆,男科实验室精液分析的方法和报告方式很不统一。采用的精液分析方法与《世界卫生组织人类精液分析实验室手册》第4版推荐的方法也不一致。本研究提示,为使不同实验室的检测结果具有可比性且有意义,中国男科实验室目前使用的精液分析方法急需标准化和质量控制。

计算机辅助精液分析男性不育患者精子运动参数与精子活力的相关性

目的探讨计算机辅助精液分析精子运动参数在评价男性不育患者精子活力中的价值。方法按《WHO人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验检验手册》标准,采用国产WLJY-9000伟力彩色精子质量检测系统对276例男性不育患者的精液进行平均直线运动速度、平均曲线运动速度、运动的前向性、运动的直线性、运动的摆动性、平均路径速度、精子活力及分级等进行检测并分析其相关性。结果276名男性不育患者的平均精子活力为(48.93±19.10)%,分级为A级(32.11±17.25)%、B级(17.03±8.91)%、C级(10.14±5.99)%。平均直线运动速度、平均曲线运动速度、运动的前向性、运动的直线性、运动的摆动性、平均路径速度与精子活力的相关系数分别为0.60(P<0.01)、0.59(P<0.01)、0.51(P<0.01)、0.55(P<0.01)、0.52(P<0.01)、0.67(P<0.01)。结论计算机辅助精液分析精子运动参数平均直线运动速度、平均曲线运动速度、平均路径速度是反映精子活力的有效指标,精子运动参数对男性不育的诊断和生育能力的评估具有实用意义。

计算机辅助精液分析与手工计数法检测精液的比较研究

随着环境污染日益严重,垃圾食品食用过多,生活方式改变及生活压力增大等因素的影响,越来越多的育龄夫妇受到不孕不育的困扰,其中以男性因素较为常见。全世界约有8%的育龄夫妇因各种原因导致不孕不育,该比例在国内约为10%。在导致不孕不育的各种因素中,男性因素占20%,女性因素占38%,27%与夫妇双方有关,另有15%属于不明原因的不孕不育。性功能正常男性不育主要原因在于精液异常。

精液分析标准化和精液质量评估——WHO《人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)出版

精液分析是评估男子生育力的重要方法，也是男科疾病诊断以及疗效观察的试验依据。精液常规分析易受采集方式、射精频度、温度、实验室条件、检验人员的技术熟练程度及主观判断能力等诸多因素的影响，导致分析结果发生偏差，所以精液的采集与分析必须严格按照标准化程序进行，才能提供受检者临床状况的必要信息。近年来随着男科学和生殖医学的快速发展，不少原有的概念和诊疗建议需要修订，为此WHO组织成立了专门的委员会，通过收集临床数据，修订出版了新的《人类精液检查与处理实验室手册》（第5版），以期提高精液分析质量。