不同构型精氨酸改性壳聚糖水凝胶促皮肤创面的修复

背景:目前临床皮肤创面愈合仍然是一大难题,而具有免疫调节功能的生物材料成为当下组织修复领域的研究前沿,因此,研究具有免疫调节功能的创面敷料具有重要意义。目的:制备不同构型精氨酸改性壳聚糖水凝胶,评估其促大鼠创面愈合的能力。方法:①体外实验:采用EDC/NHS体系分别合成了单纯左旋精氨酸、单纯右旋精氨酸及左旋精氨酸与右旋精氨酸联合改性的壳聚糖材料,以醛基化的四臂聚乙二醇为交联剂,通过席夫碱反应构建精氨酸改性壳聚糖水凝胶,依次命名为CS-L、CS-D、CS-DL水凝胶,表征水凝胶的理化性能。将3种水凝胶浸提液分别与成纤维细胞共培养,采用CCK-8法及活死染色评价水凝胶的细胞相容性,通过划痕实验评价水凝胶对成纤维细胞迁移能力的影响。将3种水凝胶分别与大鼠红细胞悬液共孵育,评估水凝胶的血液相容性。将3种水凝胶浸提液分别与巨噬细胞RAW264.7共培养,评估水凝胶对细胞产生NO及极化分型的影响。②体内实验:采用随机数字表法将36只成年SD大鼠分为4组,每组9只,在每只大鼠背部制作2个2 cm×2 cm的全层皮肤缺损创面,对照组创面滴加生理盐水,CS-L组、CS-D组、CS-DL组创面分别滴加对应的水凝胶,包扎固定。术后定期观察创面愈合情况;术后3,10,21 d取材,进行苏木精-伊红染色;术后10 d取材,进行M2型巨噬细胞免疫荧光染色。结果与结论:①体外实验:扫描电镜下可见3种水凝胶内部均有明显的互穿网络结构,孔径范围70-200μm;3种水凝胶均具有良好的溶胀性能、降解性能、自愈合性能及合适的机械强度。3种水凝胶具有良好的细胞相容性与血液相容性,可促进成纤维细胞的迁移。3种水凝胶均具有促进巨噬细胞极化的能力,其中CS-D水凝胶促巨噬细胞极化能力最强;CS-L水凝胶具有促进巨噬细胞产生NO的能力。②体内实验:术后3,10 d,CS-L组、CS-D组大鼠创面愈合率高于对照组(P<0.05);术后21 d,3种水凝胶组大鼠创面愈合率高于对照组。苏木精-伊红染色显示,术后3 d,各组大鼠创面组织中都有大量炎性细胞浸润,伴有新生血管及成纤维细胞;术后10 d,对照组创面中仍有较多炎性细胞浸润,其他3组炎症情况有所改善,特别是CS-D组炎症细胞减少较为明显;术后21 d,各组创面上皮修复良好,CS-L组和CS-D组基本无炎症细胞浸润,对照组仍有少量炎症细胞浸润。免疫荧光染色显示,CS-D组M2型巨噬细胞数量多于其他3组(P<0.05)。③结果表明:不同构型精氨酸改性壳聚糖水凝胶可以通过不同机制促进创面愈合。

杏鲍菇多糖水提物新型护肤乳配方工艺及抗氧化功效

探究了以杏鲍菇多糖水提物为主要成分的护肤乳配比及功效。通过提取物的不同比例来设计配方,以质量分数0、25%、50%和75%的杏鲍菇多糖水提物添加量制备出4种具有抗氧化效果的护肤乳,并通过感官评定、耐热耐寒测试等试验,测定其理化性质及稳定性,同时结合DPPH自由基与超氧阴离子清除试验考察其氧化活性。结果表明4种产品均符合行业标准;由体外抗氧化试验可知,随着多糖水提物添加量的增加,护肤乳对DPPH和超氧阴离子的清除能力也增强。其中,含质量分数75%提取物的护肤乳效果最佳,皮肤水分含量增加8%,DPPH自由基和超氧阴离子能力的最大清除率分别为30.52%和51.86%。杏鲍菇多糖水提物具有良好的抗氧化效果和保湿性,可作为新型化妆品中的天然抗氧化活性物质。

多糖水凝胶对亚甲基蓝吸附的研究进展

多糖水凝胶富含丰富官能团,可为亚甲基蓝(MB)染料的去除提供吸附位点,具有重要的应用价值和广阔的前景。然而,未改性的多糖水凝胶吸附能力较差,通过化学改性或物理改性后其活性基团增多、比表面积增大,对MB的吸附效果显著提高。从多糖水凝胶的结构和性质出发,介绍了静电吸附、氢键和π-π相互作用3种吸附机理,总结归纳了纤维素、壳聚糖、海藻酸钠和琼脂这4种多糖水凝胶的特点,最后对多糖水凝胶吸附MB的研究方向进行了展望。

纤维二糖水解酶在乳酸乳球菌中的表达

为在乳酸乳球菌中表达纤维二糖水解酶II(CBH II)基因,对绿色木霉(T.reesei)CBH II基因序列进行密码子优化和合成,通过PCR及T4 DNA连接酶将人工合成的序列插入到表达载体pNZ8148中,获得重组质粒pNZ8148-CBH II,重组质粒经双酶切及测序鉴定正确后,将正确的重组质粒通过电击转化进入乳酸菌NZ3900感受态细胞,通过选择性抗生素氯霉素筛选阳性克隆,放大培养后使用终浓度为20 ng/mL的Nisin进行诱导表达,诱导后的菌液经SDS-PAGE鉴定,有符合预期大小的条带,说明CBH II基因在乳酸乳球菌NZ3900中表达。研究为乳酸乳球菌的改造及开发临床应用奠定基础。

3D打印壳聚糖水凝胶的设计制备及其在生物医学中的应用

壳聚糖水凝胶具有良好的生物相容性和生物降解性能,被广泛的应用于生物医学领域。壳聚糖水凝胶通常是壳聚糖溶液通过凝胶化过程形成交联结构。具有复杂结构的壳聚糖水凝胶不能通过传统方式制备,进而限制了它在生物医学中的应用。3D打印技术是一种先进的制造技术,可以通过设计模型和调整打印参数制备具有个性化的水凝胶支架和具有高度复杂几何结构的水凝胶,这种水凝胶可以负载细胞和药物,以加速组织再生。壳聚糖水凝胶与3D打印结合在生物医学领域具有广阔的前景。综述了3D打印壳聚糖水凝胶的最新研究进展,根据交联策略的不同,从物理交联壳聚糖水凝胶和化学交联壳聚糖水凝胶两个方向分析了壳聚糖水凝胶的形成机理,讨论了常用的3D打印技术原理,包括喷墨式3D打印、挤出式3D打印以及光固化3D打印(立体光固化成型和投影式光固化成型),介绍了3D打印壳聚糖水凝胶在皮肤伤口愈合、骨组织工程、神经组织工程和药物递送系统中的应用,并对3D打印壳聚糖水凝胶在生物医学中的应用进行展望。

河蚌多糖水提取物对多种恶性肿瘤细胞增殖和迁移的影响

目的探讨河蚌多糖水提取物体外抗肿瘤活性。方法通过离心、浓缩和冷冻干燥的方法制备出可溶性的河蚌多糖水提物,分别采用CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell迁移实验检测河蚌多糖水提取物对肝癌细胞Hep3B、恶性黑色素瘤细胞A375和肺癌细胞PC9增殖、迁移能力的抑制作用。结果CCK-8实验表明,河蚌多糖水提取物具有时间-浓度依赖性抑制上述3种恶性肿瘤细胞的增殖;划痕实验和Transwell迁移实验结果表明,与对照组相比,河蚌多糖水提取物能够有效抑制上述3种恶性肿瘤细胞的迁移(P均<0.05)。结论河蚌多糖水提取物可以有效抑制多种恶性肿瘤细胞增殖和迁移,为其后续开发和应用提供一定的参考价值。

微波杀菌对糖水罐头荔枝感官品质的影响

对糖水罐头荔枝进行常规杀菌和微波杀菌对比试验及感官品质指标分析研究结果表明:微波杀菌对防止和抑制果肉颜色红变优于常规杀菌,制品贮藏前期果肉硬度保持良好,随贮期延长,两种杀菌处理之间的差异呈缩小趋势。

羧甲基壳聚糖水凝胶制备及其在药物控释中的应用

以戊二醛为交联剂制备了一系列羧甲基壳聚糖pH敏感水凝胶 .研究了合成条件对羧甲基壳聚糖水凝胶溶胀性能的影响 .实验结果表明羧甲基壳聚糖的脱乙酰度、交联剂用量对水凝胶溶胀率的影响较大 .pH=3 0时 ,水凝胶收缩 ,而pH =1 0 ,5 0 ,7 4 ,9 0时 ,水凝胶溶胀 ,且在碱性条件下水凝胶的溶胀率远大于酸性条件下的溶胀率 .包埋在此水凝胶中的水杨酸释放随载药介质的pH值和水凝胶半径大小的变化而显著不同 ,pH =1 0条件下载药的水凝胶的释药率大于pH =7 4 ,12 0条件下的释药率 ,且水凝胶的半径越大 。

枸杞多糖水提工艺的优选

目的 :确定枸杞多糖最佳提取条件。方法 :分别以多糖得率及多糖含量为考察指标 ,以正交实验法确定枸杞多糖的最佳提取工艺。结果 :枸杞多糖的最佳提取工艺为 :取枸杞药材 ,第一次加水 10倍 ,以后每次加水 8倍量 ,共冷浸 3次 ;每次冷浸 1h ;每小时搅拌 10min。结论

壳聚糖水凝胶局部注射对心梗的治疗作用研究

目的观察心梗部位局部注射壳聚糖水凝胶的促血管生成及心肌保护作用。方法将19只Wistar大鼠随机分为壳聚糖水凝胶注射组、单纯心肌梗死模型组、PBS注射组。结扎大鼠冠状动脉致心肌梗死30min后,心肌缺血处注射壳聚糖水凝胶。术后1、2、4周,分别处死动物进行组织学、免疫组织化学检查。结果壳聚糖水凝胶注射1、2周后有明显存留,4周后已降解吸收,无明显残留,但注射后明显提高了心梗部位的心室壁厚度,梗死部位的血管密度明显增加,存活的心肌数量增多,结缔组织增生程度减轻。结论心梗部位注射壳聚糖水凝胶可明显促进血管增生,有利于梗死部位心肌细胞的存活,适宜作为可注射性组织工程化心肌的支架材料。

外源多糖水解酶提高红碎茶品质的生化机制研究

本文在肯定红碎茶初制中外源多糖水解酶（PSH）增质效果的基础上，利用电镜及高效液相色谱等分析手段对外源PSH的增质机理进行了探讨。研究结果表明：外源PSH加工红碎茶的水解效果明显，可使还原糖和水浸出物大幅度提高，且发酵过程中存在明显的水解优势期。外源PSH水解叶组织细胞壁中的不溶性多糖，产生生化破损作用，使发酵茶胚酸化，提高多酚氧化酶活性，促进茶黄素形成及叶绿素降解，同时提高成茶有效成分的浸出率，从而较全面地改善红碎茶的内外品质，PSH水解作用所致的细胞生化破损效应是外源PSH综合品质效应的核心因素。

壳寡糖水杨醛系列希夫碱的抗氧化作用

用清除DPPH自由基法、超氧阴离子自由基法和还原能力的测定来探讨壳寡糖水杨醛系列希夫碱的抗氧化活性.结果表明,在0.1～1.0 g.L-1的质量浓度范围内,壳寡糖水杨醛系列希夫碱对DPPH自由基的清除活性不强,而对超氧阴离子自由基的清除活性很强,也都有一定的还原力,而且壳寡糖水杨醛系列希夫碱的抗氧化活性比壳寡糖强.

脐橙新型壳聚糖水凝胶抑菌保鲜研究

以纽荷尔脐橙为试材,研究了壳聚糖水凝胶对青霉菌(Penicillium italicum)的抑制及其对脐橙的保鲜效果。结果表明不同浓度壳聚糖水凝胶对脐橙采后P.italicum均有一定的抑制作用。当浓度为2.0%时,培养5d后,菌落直径15mm,抑菌率42%,抑菌圈直径65mm,且涂膜后贮藏90d品质最好。说明壳聚糖水凝胶对脐橙采后P.italicum具有明显抑制作用,其中以2.0%的壳聚糖水凝胶效果最优,同时能够提高脐橙贮藏品质。

航天特因环境下抑郁模型大鼠行为学食物及糖水消耗量变化

目的:考察航天特因环境下郁证模型大鼠行为学变化。方法:采用经典抑郁模型,从行为学、食物消耗量及1%糖水消耗量考察航天郁证模型。结果:航天特因环境下郁证模型大鼠旷场试验测试发现大鼠在造模后,其在旷场中的穿行格数和直立次数明显的减少;食物消耗量分析,发现试验后郁证模型组与空白组比较相对降低,而糖水消耗量未发现变化。结论:行为学测试结果、食物消耗量考察航天郁证模型基本成功。

聚醚-壳聚糖水凝胶合成工艺条件对性能的影响研究

研究了聚醚-壳聚糖水凝胶的制备方法,聚醚与壳聚糖质量比、凝胶温度、交联剂戊二醛浓度等对聚醚-壳聚糖水凝胶的溶胀度、硬度的影响。采用正交实验对工艺条件进行了优化,正交实验的结果表明:当聚醚与壳聚糖质量比为0.4、凝胶温度为45℃、交联剂浓度为0.05mol/L 时,其凝胶饱和溶胀度为837%;当聚醚与壳聚糖质量比为0.6、凝胶温度为45℃、交联剂浓度为0.15mol/L 时,其凝胶硬度为436g。聚醚-壳聚糖水凝胶具有良好的生物相容性。

里氏木霉纤维二糖水解酶基因cbh1的分子改造

【目的】用分子改造的方法改造里氏木霉（Trichoderma reesei）的纤维二糖水解酶基因cbh1，提高其纤维素酶活力，为工业化生产纤维素酶提供参考。【方法】用DNase Ⅰ消化里氏木霉cbb1，回收100bp左右的片段后用T4DNA连接酶连接，以连接产物作为模板进行PCR扩增，将PCR改造的cbh1基因转化里氏木霉原生质体，使改造的cbh1基因与里氏木霉原有的cbh1基因发生同源重组。通过比较滤纸酶活力的方法筛选纤维素酶活力提高的突变菌株，在NCBI上比对分析突变菌株的cbh1序列。【结果】经克隆测序获得基因片段大小为637bp，与里氏木霉同属菌株cbh1基因的相似性在88％-98％，确定为里氏木霉cbh1的基因片段。经DNaseⅠ消化15min、T4DNA连接酶连接、经PCR扩增获得改造后的cbh1基因。将改造cbh1基因片段转化里氏木霉原生质体，得到cbh1基因突变体库。从cbh1基因突变体库中筛选获得1株纤维素酶滤纸酶活比出发菌株高1．7518倍的突变菌株E2-1。序列比对分析发现，与出发菌株相比，突变菌株E2-1的cbh1基因有14个碱基发生了突变，其中5个碱基为置换突变，8个碱基为缺失突变，1个碱基为插入突变，分布于cbh1基因的9个位置。【结论】改造后的cbhI基因能与里氏木霉的染色体DNA发生同源重组，进而提高突变菌株的纤维素滤纸酶活力。

糖水毛酸浆罐头生产技术的研究

文章对糖水毛酸浆罐头生产技术进行了研究。本研究采用大量实验,选择毛酸浆完熟果实,采用抽空处理,低温、短时杀菌生产工艺,生产的糖水毛酸浆罐头,果实色泽黄,口感脆,风味浓,罐头中的VC含量较高。罐头的胖听率为1.9%,未胖听罐头中的微生物指标达到国家规定指标。

嗜热毛壳菌外切葡聚糖纤维二糖水解酶的纯化和部分性质研究

研究液体发酵嗜热毛壳菌(Chaetomium thermophilum)产生的一种外切葡聚糖纤维二糖水解酶的分离纯化及特性。粗酶液经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子层析、Sephacryl S-100分子筛层析、Q Sepharose Fast Flow强阴离子层析等步骤后获得凝胶电泳均一的外切葡聚糖纤维二糖水解酶。经12.5%SDS-PAGE和凝胶过滤层析方法测得该酶的分子量大小约为66.3kDa和67.1kDa。该酶反应的最适温度和pH值分别为65℃和5.0。在60℃以下酶比较稳定,在70℃酶的半衰期为1h,在80℃下保温20min仍具有20%的活性,该酶的热稳定性较中温真菌的同类酶高,与国外报道的嗜热真菌的同类酶热稳定性接近。以pNPC为底物的Km值为0.956mmol/L。

木瓜蛋白酶中具有壳聚糖水解酶活性成分的分离

应用超滤、离子交换层析、凝胶过滤层析三种方法,对木瓜蛋白酶进行了分离纯化,在CM-Sephadex-C-50的洗脱图谱上得到三个明显蛋白质吸收峰(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),对洗脱液进行蛋白酶活力和壳聚糖酶活力测定表明,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ峰均有蛋白酶活性,同时出现两个壳聚糖酶活峰(A、B),其中峰A与峰Ⅱ重叠,而峰Ⅰ、Ⅲ处未检测出明显壳聚糖酶活。壳聚糖酶活峰A处有溶菌酶活力,而峰B处未检测到。对壳聚糖酶活峰A进一步凝胶过滤层析,发现只有一个蛋白峰,其中蛋白酶活与壳聚糖酶活峰基本重叠,且具有较高溶菌酶活力。

抑郁情绪大鼠模型中糖水偏好实验数据的聚合分析

目的探讨抑郁情绪大鼠模型糖水偏好实验（Sucrosepreferencetest，SPT）中糖水偏好SP（Sucrosepreference，sp）系数的最佳聚合方式。方法慢性温和刺激法复制抑郁情绪大鼠模型。4周造模过程中，每隔一周采集一次大鼠的行为学数据，并对糖水偏好实验数据采用两两聚合的分析方法处理。比对不同聚合手段对模型制备信度及相关性的影响。结果①一致性系数（Kappa）结果显示，只有第3种聚合方式能得到较高的可信度（Kappa=0．611），②组内相关系数（ICC）结果表明，聚合方式中TM的可信度最高（ICC=0．910）。结论恰当的数据聚合方式可以大幅提升抑郁情绪大鼠糖水偏好实验中数据的可信度与稳定性。