大骨节病区粮水对猴软骨糖胺多糖代谢的影响

目的 探讨糖胺多糖 (GAG)代谢与大骨节病发病机制的关系。方法 选用雄性恒河幼猴 ,饲以大骨节病区粮、水 18个月 ,复制出大骨节病动物模型 ,用高效液相色谱法测定实验动物恒河猴软骨糖胺多糖酶解产物中每种二糖的含量。结果 与对照组相比 ,病区粮组和病区水组的猴股骨头、胫骨平台、肋软骨糖胺多糖分子都出现低硫酸化 ,股骨头和胫骨平台软骨 GAG中主要是不饱和 4位硫酸化二糖 (△ Di- 4S)成分减少 ,肋软骨 GAG中主要是不饱和 6位硫酸化二糖 (△ Di- 6 S)成分减少。结论 病区粮和病区水中的致病因素促使猴软骨 GAG分子低硫酸化 ,软骨

黄芪多糖对体外培养大鼠软骨细胞内糖胺多糖合成的影响及其机制

目的:研究黄芪多糖对大鼠退变软骨细胞糖胺多糖(GAG)合成的影响。方法:分离大鼠关节软骨细胞传代培养并加入IL-1β造模,分别将100,10,1,0.1 mg/L的黄芪多糖作用于该软骨细胞,以4.5 mg/L的硫酸氨基葡萄糖作为阳性对照。其后检测细胞增殖、细胞内GAG含量、细胞内葡萄糖醛酸转移酶Ⅰ(GlcAT-1)mRNA含量和透射电镜观察细胞形态学改变。结果:各浓度的黄芪多糖均对大鼠软骨细胞增殖率无影响。100 mg/L的黄芪多糖可以增加软骨细胞内GAG的合成(P<0.01);1,10,100 mg/L的黄芪多糖能够增加GlcAT-1 mRNA的表达。结论:黄芪多糖能逆转IL-1β对体外培养的大鼠软骨细胞GAG合成的抑制作用,其主要机制可能与促进GlcAT-1的表达有关。

力学刺激对三维培养成年及骨关节炎模型兔软骨细胞产生糖胺多糖的对比

目的 研究在三维多孔支架环境里不同动态循环压力刺激对体外培养的成年及骨性关节炎模型兔软骨细胞产生糖胺多糖的影响.方法 取5月龄雄性新西兰大白兔10只,随机分为成年组与骨性关节炎（OA）组,每组5只.OA组采用前交叉韧带切断术制作OA动物模型,成年组仅行双膝关节切开,但不行前交叉韧带（ACLT）.成年组及OA组动物于术后20 w空气栓塞处死,取左侧膝关节标本分别做大体评分及Mankin＇s评分观察OA造模情况.将两组兔膝软骨细胞进行消化分离及体外培养,将每组原代软骨细胞均分别接种于聚乳酸多孔三维支架培养,随机分为对照组细胞和加载组细胞,同置于培养箱内,加压组分别在压缩幅度为0％ ～5％、0％～10％、0％～20％,频率0.1 Hz,时间6 h/d周期性压力下培养,连续作用3d,对照组不予特殊处理,后分别吸取培养细胞上清液,阿尔新蓝染色沉淀法测定上清液糖胺多糖（GAG）含量,比较各组分泌的变化.结果 实验组动物关节软骨退变明显,大体观察及Mankin＇s评分均明显高于对照组；与对照各组细胞相比,成年及OA组细胞进行加压后其压缩幅度为0％～10％的GAG含量最高；且各细胞在周期性压力干预前后GAG分泌随时间变化趋势存在统计学差异.结论 组织工程软骨细胞及其基质的增殖分泌能力受周期性压力强度的调控,其中压缩幅度为0％～10％的周期性压力能更好地促进软骨细胞及其基质的增殖分泌.

胰岛素样生长因子-1及转化生长因子-β2对幼年及成年兔软骨细胞合成糖胺多糖的影响

目的观察胰岛素样生长因子(IGF)-1及转化生长因子(TGF)-β2对体外培养的幼年及成年兔软骨细胞合成糖胺多糖的影响。方法取2月龄幼年及12月龄成年雄性新西兰大白兔,采用酶消化法取兔软骨细胞并培养于第2代软骨细胞,随机分为四组进行培养,分别为空白对照组;IGF-1组;TGF-β2组;IGF-1+TGF-β2组。每周传代1次,连续5 w,用Alcian blue法分别测定留取培养液中GAG的含量;利用光镜观察原代及传代软骨细胞的生长情况,比较各组的变化。结果幼年组GAG的分泌能力优于成年组;第二代传代细胞分泌GAG的能力最强;IGF-1及TGF-β2均可促进传代软骨细胞合成大量的糖胺多糖类基质,IGF1+TGF-β2组明显优于其他组(P<0.05)。结论外源性IGF-I和TGF-β2可促进不同年龄兔关节软骨细胞增殖和GAG的分泌,联合应用发挥协同作用,提示外源性生长因子可抑制软骨细胞在体外培养的老化过程。

原代和传代兔关节软骨细胞糖胺多糖合成的动态观察

背景:软骨细胞体外培养时常发生失分化,传代软骨细胞的失分化程度是确定软骨细胞体外扩增操作时间的重要依据,对组织工程修复软骨效果有重要意义。目的:观察不同接种密度下,软骨细胞合成糖胺多糖的能力。设计、时间及地点:单一样本观察,细胞学体外实验,于2007-01/05在山西医科大学第二医院骨科实验室完成。材料:1月龄新西兰大白兔5只,雌雄不拘。方法:无菌手术切取兔双膝关节软骨,采用0.4%Pronase酶和0.25g/LⅡ型胶原酶消化分离关节软骨细胞,体外培养。待细胞融合时,换无血清培养液。于换液后12,24,36,48,60h分别抽取上清液测量糖胺多糖质量浓度。传代2次,重复上述过程。主要观察指标:①倒置显微镜观察细胞形态。②传代对软骨细胞生长的影响。③P0,P1,P2代细胞上清液糖胺多糖质量浓度的差异。结果:P2代以内,软骨细胞形态无明显变化,但P2代细胞内空泡状颗粒增多。传代后,细胞融合时间缩短,但是上清液糖胺多糖质量浓度随传代逐渐下降(P<0.001),且P0,P1,P2代之间两两比较差异有显著性意义(P<0.001)。换液60h后,P1代软骨细胞糖胺多糖质量浓度较P0代下降24%,P2代较P0代下降74%。换液后时间越长,上清液糖胺多糖质量浓度越大(P<0.001)。换液后时间与传代之间存在交互效应,时间越长,传代细胞与原代细胞上清液糖胺多糖质量浓度相差越大(P<0.001)。结论:在体外单层培养条件下,原代软骨细胞糖胺多糖合成能力最强,传代后很快大幅下降。细胞融合后连续检测上清液糖胺多糖质量浓度是研究软骨细胞分化的有效方法。

椎间盘纤维环中糖胺多糖的实验研究

目的 研究正常和退变腰椎间盘纤维环中糖胺多糖 (GAG)含量及其主要成份百分组成 ,探讨椎间盘退变的发生机理。方法 对 34个正常纤维环和 35个椎间盘突出症纤维环标本中GAG含量进行测定 ,并用醋酸纤维素膜电泳和光密度扫描的方法对GAG主要成份百分组成进行测定。结果 正常纤维环GAG含量为 4 17± 0 94g/10 0 g ,退变纤维环GAG含量为 3 5 7± 0 98g/10 0g ,低于正常组 (P <0 0 5 ) ;退变组GAG中硫酸软骨素 (CS)百分值低于正常组 (P <0 0 5 ) ;而其透明质酸 (HA)和硫酸角质 (KS)高于正常组 (P <0 0 5 )。结论 椎间盘纤维环中GAG含量下降 ,是引起纤维环胶原纤维稳定性降低 ,影响纤维环板层滑动 ,导致椎间盘退变、突出症发生的重要原因之一。

饮水型氟中毒患者的糖胺多糖代谢

氟骨症是氟中毒引起的一种代谢性骨病。印度学者Susheela根据一系列实验研究结果,提出氟中毒时骨组织内胶原蛋白受累最重,认为胶原是氟化物作用的靶组织,从而使氟中毒的研究有了突破性的进展。与此同时。

过量氟化物对软骨基质糖胺多糖、蛋白多糖代谢的影响

在偏食和过量氟喂养条件下,实验大鼠软骨组织PG、GAG代谢受到严重干扰,表现为肋软骨基质中PG聚合体含量明显降低,低聚合的PG含量明显增加,PG单体分子量明显降低。同时也观察到软骨基质中GAG含量的明显升高,这些结果一致地表明,过量氟化物引起动物慢性中毒时软骨组织PG合成代谢受到抑制而其分解代谢增强。

胚胎期下颌髁突软骨中糖胺多糖、纤维粘连蛋白和层粘连蛋白的表达

目的 观察不同时期胎儿髁突软骨中糖胺多糖、纤维粘连蛋白和层粘连蛋白的表达。方法 应用组织化学和免疫组织化学SP法检测 32例 13周～ 33周 (A组 13～ 17周 ,B组 18～ 2 2周 ,C组 2 3～ 2 7周 ,D组 2 8～ 33周 )胎儿髁突软骨中糖胺多糖、纤维粘连蛋白和层粘连蛋白 ,并行体视学图象分析。结果 髁突软骨中AB PAS在各组的灰度及积分光密度均无显著性差异 (P >0 . 0 5 )。FN、LN阳性表达位于软骨细胞外基质 ,增殖层和成软骨细胞层呈强表达 ,尤其在两层交界处 ,而肥大软骨细胞层中明显减弱。体视学分析表明LN在A组表达最强 ,其灰度及积分光密度均值与B、D组间均有显著性差异 (P <0 . 0 5 )。〔灰度 :A组 175 . 0 18± 8. 30 1、B组 187 16 2± 13 6 44、D组 190 5 5 0± 6 46 0 ;积分光密度 :A组 2 739± 0 799,B组 2 0 11± 0 85 5 ,D组 1 5 33± 0 42 7,均存在显著性差异 (P <0 0 5 )。FN在B组表达最强 ,灰度与A、C、D三组间存在显著性差异 (P <0 0 5或P <0 0 1) ;积分光密度与A、D组间有显著性差异 (P <0 0 5 )。〔灰度 :B组 173 0 89± 8 40 7、A组 182 0 45± 10 138、C组 188 70 1± 8 0 94、D组 195 417± 4 82 7;积分光密度 :A组 1 314± 0 86 9、B组 4 332± 2 5 37、D组 2

氨基葡萄糖及硫酸软骨素对豚鼠软骨组织结构及组织中糖胺多糖含量的影响

目的观察氨基葡萄糖（GS）及硫酸软骨素（CS）对原发性骨关节炎（OA）模型雌性豚鼠膝关节软骨组织结构和组织中糖胺多糖（GAG）含量的影响。方法取120只2周龄雌性豚鼠随机分为3个试验组和1个空白对照组。空白对照组给予蒸馏水（对照组），试验组分别给0．5％GS（GS组），0．25％CS（CS组），0．5％GS＋0．25％CS（联合使用组），分别于给药前，给药1个月、2个月、3个月、4个月和5个月后，每组各取5只动物膝关节进行组织病理学（HE染色）和组织化学（PAS、Alcian Blue、和Mallory染色）检查以及组织中GAG含量的检测。结果病理及组化检查：对照组在实验开始1个月后软骨组织病理积分即不断增高：GS组在给药3个月后才开始上升；CS组在给药的5个月中病理积分增高缓慢，仅第4个月上升较明显；联合使用组在给药的5个月中病理积分一直没有增高，并且给药5个月后期的病理积分显著低于同组给药前期的积分。组织中GAG含量：随着豚鼠月龄的增大，各试验组软骨组织GAG含量均有下降，但与同期对照组相比，下降减缓；从第3个月起，各实验组的软骨组织GAG含量开始回升。与同期对照组相比，给药的前2个月，各试验组软骨组织中GAG含量均有显著性差异（P〈0．05）；第3个月开始，GS组与联合使用组软骨中GAG含量差异显著（P〈0．01），而CS组软骨GAG含量差异不如GS组与联合使用组显著（P〈0．05）。给药4个月后，各试验组软骨组织GAG含量开始回升，与各自同期对照组相比均有显著性差异（P〈0．01）。结论GS、CS无论单独使用，还是联合使用，都能促进软骨组织生长并延缓软骨组织的退行性变，特别是联合使用的作用最强。

转化生长因子-β_1对猪关节软骨细胞合成糖胺多糖的作用

目的 :观察转化生长因子 β1 (TGF β1 )对软骨细胞外分泌基质糖胺多糖 (GAG)含量的影响。方法 :通过Ⅱ型胶原酶消化法获得高活性的软骨细胞 ,定量接种 6× 10 6 个细胞于培养皿 ,在细胞贴壁后更换培养基时 ,加入TGF β1 10ng mL ,每周传代 1次 ,连续 5周 ,留取所有培养液用阿利新蓝法测定软骨细胞外分泌基质GAG的变化 ;利用光镜观察原代及传代软骨细胞的生长情况。结果 :体外培养的软骨细胞从传代后合成糖胺多糖类基质 ,第 2代传代细胞分泌GAG的能力最强 ;加入TGF β1 能明显促进传代软骨细胞合成大量的糖胺多糖类基质。结论 :TGF β1

慢性氟中毒对唾液酸、糖胺多糖代谢的影响

为探讨慢性氟中毒对唾液酸 (SA)、糖胺多糖 (GAG)代谢的影响 ,选用 2 5 0只 1日龄蛋鸡 ,随机分为 5组 ,每组 5 0只 ,饲喂相同的全价日粮。Ⅰ组为对照组 ,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组在日粮中添加不同水平的氟化钠 ,使日粮中氟的含量分别为 5 0 0 ,10 0 0 ,15 0 0 ,2 0 0 0mg/kg ,实验期为 15 0d,每隔 30d测定血清中氟、SA、GAG的含量 ,观察试验鸡的临床表现。结果表明 :成功地复制出了不同程度的鸡慢性氟中毒模型 :饲料中加氟量与血清中氟含量呈明显的剂量─效应关系 ;氟中毒组鸡血清中SA含量均低于对照组 ,而血清中GAG含量则均高于对照组 ;血清中氟含量与血清中SA含量呈显著的负相关 (r=- 0 .773,P <0 .0 1) ,与GAG含量则呈显著的正相关(r=0 .798,P <0 .0 1)。由此可见 ,氟中毒明显影响机体内SA、GAG的代谢 ,血清中SA、GAG含量的变化可灵敏地反映氟对机体的损伤情况 ,SA、GAG的异常变化从氟影响物质代谢的角度在一定程度上阐明氟中毒的机理。

维生素E对体外培养的人眼小梁细胞糖胺多糖代谢的影响

目的探讨维生素Ｅ对体外培养的人眼小梁细胞糖胺多糖（ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎ，ＧＡＧ）代谢的影响。方法第３～５代人眼小梁中加入１００、２００、４００、８００μｇ／ｍｌ的ＶｉｔＥ，分离提纯后ＧＡＧ经腊酸纤维薄膜电泳、闪烁测量测得人眼小梁细胞ＧＡＧ的总量和各组份构成比。结果１００、２００、４００μｇ／ｍｌＶｉｔＥ能增加ＧＡＧ的总量，同时增加透明质酸的构成比，降低含硫ＧＡＧ的构成比。８００μｇ／ｍｌＶｉｔＥ降低ＧＡＧ总量而不改变其构成比。结论ＶｉｔＥ似有在发病学上防治ＰＯＡＧ的可能性。

氟浓度对体外培养大鼠软骨细胞糖胺多糖和Ⅱ型胶原分泌的影响

目的 探讨氟浓度对体外培养软骨细胞糖胺多糖（GAG）和Ⅱ型胶原分泌的影响.方法 取2月龄雌性SD大鼠下肢髋关节及膝关节软骨,分离、培养出软骨细胞后,接种于细胞培养瓶,经鉴定后,分为空白对照组和NaF受试组（6.25 μmol/ml、12.50μmol/ml、25.00 tmol/ml、50.00 μmol/ml和100.00 μmol/ml）,孵育6d后,分别进行GAG含量测定、阿利新蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色.结果 NaF受试6d后,大鼠软骨细胞培养液GAG含量各组无显著性差异（P＞0.05）;阿利新蓝染色显示,大鼠软骨细胞内的糖原异染颗粒亦无明显差异;Ⅱ型胶原免疫组化染色则显示,不同剂量NaF可引起对软骨细胞外Ⅱ型胶原染色积分随剂量的升高逐渐上升（P＜0.05）.结论 NaF对大鼠软骨细胞GAG分泌可能无影响,但可能影响Ⅱ型胶原的分泌.

矽肺病人尿液中糖胺多糖(GAG)含量变化的初探

本文利用咔吧唑法对各期矽肺病人尿中糖胺多糖(GAG)的含量进行了分析测定。实验结果表明,Ⅰ、Ⅲ期矽肺病人的GAG排出量高于正常值,而Ⅱ期矽肺病人的GAG排出量则低于此值。经统计学处理,各期矽肺病人间的数值差异均有非常显著性(P<0.01),说明GAG的排出量随矽肺进程发生明显变化,它与矽肺发病密切相关。

高密度细胞培养对兔关节软骨细胞糖胺多糖合成的作用(英文)

背景:软骨细胞体外培养时常发生失分化,合成糖胺多糖的能力下降,延缓软骨细胞的失分化速度是组织工程学需要解决的重要课题。目的:观察不同接种密度下,软骨细胞合成糖胺多糖的能力。设计、时间及地点:对比观察细胞学实验,于2007-01/05在山西医科大学第二医院骨科实验室完成。材料:1月龄新西兰兔5只。方法:采用0.4%Pronase酶和0.025%Ⅱ型胶原酶消化分离双膝关节关节软骨细胞,来源于同一只兔的软骨细胞分为两部分,一部分以2×104/cm2接种,传代时仍以相同密度接种。另一部分在细胞贴壁后,人工降低细胞密度至2×103/cm2培养。倒置显微镜下观察细胞形态和增殖情况。原代和传1代细胞于细胞融合后换液。主要观察指标:换液后12,24,36,48,60h以改良Alcianblue染色沉淀法测定糖胺多糖质量浓度。结果:原代高密度培养组关节软骨细胞为多边形,轮廓清晰,三四天即可见集落形成,集落周边细胞较中心瘦长,为长多边形,传1代细胞形态无明显变化。低密度培养细胞早期散在分布,7d左右形成集落,细胞形态与高密度培养无明显差异。原代低密度培养软骨细胞长到融合所需时间较原代高密度培养细胞所需时间长。原代低密度培养组上清液中糖胺多糖质量浓度显著低于原代及传1代高密度培养组软骨细胞(P<0.001,P<0.05),且时间越长,质量浓度相差越大。结论:与低密度培养相比,平面高密度培养可提高软骨细胞合成糖胺多糖的能力,明显减缓软骨细胞的失分化速度,提示高密度培养更有利于软骨细胞维持表型,是软骨平面培养的较好方式。

细胞高密度培养促进兔关节软骨细胞糖胺多糖合成作用研究

目的研究细胞密度对体外培养兔关节软骨细胞糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)合成的影响。方法1月龄新西兰兔5只,无菌手术切取双膝关节软骨,采用0.4%Pronase酶和0.025%Ⅱ型胶原酶消化分离关节软骨细胞,来源于同一只兔的软骨细胞分为两部分:一部分以密度2×104/cm2接种,传代时仍以相同密度接种;另一部分在细胞贴壁后人工降低细胞密度至2×103/cm2培养。原代(P0)和传1代(P1)细胞均在细胞融合后换液,并且于换液后12,24,36,48,60h分别抽取上清测量GAG浓度。采用重复测量资料的方差分析,比较低密度培养P0组与高密度培养P0组、P1组上清GAG浓度。结果低密度培养P0组上清GAG含量显著低于高密度培养P0组(P<0.001),且低于体外培养时间略长的高密度培养P1组软骨细胞(P<0.05)。结论高密度培养更有利于软骨细胞维持表型,是软骨平面培养的较好方式。

人黄韧带糖胺多糖含量和成分的测定及其临床意义

作者对３２例国人黄韧带糖胺多糖（ＧＡＧ）含量进行了测定，确定了正常值范围，对研究病变黄韧带蛋白多糖代谢提供了正常参考。对三个年龄组黄韧带ＧＡＧ进行醋酸纤维素膜电泳和光密度扫描发现，黄韧带ＧＡＧ组成成分中硫酸软骨素所占比例随年龄增长而增高，文中对其临床意义进行了讨论。

IL-1ra对IL-1α诱导的眼眶成纤维细胞合成糖胺多糖的抑制作用

目的 :明确白介素 1受体拮抗剂 (IL 1ra)是否对白介素 1α(IL 1α)诱导的眼眶成纤维细胞合成糖胺多糖 (gly cosaminoglycans,GAG)有抑制作用 ,探讨IL 1ra在Graves’眼病(GO)治疗及预防中的临床应用前景。方法 :以下述方法分别处理培养的GO患者和正常人眼眶成纤维细胞 :IL 1α 30U/ml或 /和不同浓度的IL 1ra孵育 4 8h ;用IL 1α 30U/ml处理后 ,再加入IL 1ra 75ng/ml共孵育不同时间 (2 4h、4 8h、72h)。用 [3 H]葡萄糖胺掺入法测定 [3 H]GAG的产量。结果IL 1α 30U/ml明显刺激GO患者和正常人成纤维细胞合成GAG ,增加率达 4 6 .6 %～ 12 7.9% (平均 10 3.5 % ,P <0 .0 0 1)。与IL 1α 30U/ml克分子浓度比为 2 5∶1、4 0∶1和 10 0∶1的IL 1ra ,分别抑制IL 1α诱导的GO患者和正常人成纤维细胞合成GAG达 (30 .93± 11.4 6 ) %、(5 9.34± 9.3) %和 (83.15± 8.5 6 ) % (P <0 .0 0 5 )。在 2 4h、4 8h、72h时 ,IL 1ra分别抑制IL 1α诱导的眼眶成纤维细胞合成GAG(2 4 .18± 6 .3) %、(6 0 .4 8± 12 .83) %和 (73.0 4± 7.14 ) % (前两组相比 ,P <0 .0 0 1;后两组相比 ,P =0 .15 9)。结论 :IL 1ra能够剂量和时间依赖性地抑制IL 1α诱导的眼眶成纤维细胞合成GAG ,IL 1ra可望用于GO的治疗和预防。

唾液酸和糖胺多糖在鸡慢性氟中毒早期诊断中的意义

为探讨唾液酸（ＳＡ） 、糖胺多糖（ ＧＡＧ） 在鸡慢性氟中毒早期诊断中的意义，以期筛选出诊断慢性氟中毒早期的敏感指标，选用２５０ 只１ 日龄罗曼蛋鸡，随机分为５ 组，每组５０ 只，饲喂相同的全价日粮。Ⅰ组为正常对照组，Ⅱ～Ⅴ组在日粮中添加不同水平的氟化钠，使日粮中氟含量分别为５００ 、１０００ 、１５００ 和２０００ ｍ ｇ／ｋｇ ，试验期为１５０ ｄ ，每隔３０ ｄ 采集血样１次，测定血清中氟、ＳＡ、ＧＡＧ 的含量，观察试验鸡的临床表现。结果，试验成功地复制出不同程度的鸡慢性氟中毒模型；饲料中所加氟量与血清中氟含量呈明显的剂量效应关系；氟中毒组鸡血清中ＳＡ 含量均低于对照组，而血清中ＧＡＧ 含量则均高于对照组；血清中氟含量与ＳＡ 含量呈显著的负相关（ｒ ＝ － ０ ．７７３ ， Ｐ＜ ０ ．０１） ， 与ＧＡＧ 含量则呈显著的正相关（ｒ ＝ ０ ．７９８ ，Ｐ＜ ０ ．０１） ；各中毒组ＳＡ／ ＧＡＧ 值与正常值相比降低３０ ％ 以上。由此可见，氟中毒可明显影响机体内ＳＡ、ＧＡＧ的代谢，血清中ＳＡ、ＧＡＧ 含量的变化可灵敏地反映氟对机体的损伤情况。可将ＳＡ／ ＧＡＧ 值降低３０ ％ 或更多作为鸡慢性氟中毒的敏感、可靠的早期诊断指标。