以糖蛋白类肿瘤标志物为靶向的嵌合抗原受体修饰T细胞研究进展

嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰T细胞是目前肿瘤治疗中新的靶向疗法,通过单链抗体(single chain fragment variable,sc Fv)-共刺激分子-T细胞信号转导区构成的嵌合模式修饰T细胞,赋予T细胞非MHC依赖性靶向杀伤肿瘤细胞的能力,在动物模型及临床试验中取得了良好的效果。糖蛋白类肿瘤标志物由于其良好的靶向性成为了CAR修饰T细胞新的靶点,针对糖蛋白类肿瘤标志物的靶向研究显示出良好的临床前景,但是也要考虑到脱靶效应,转染方式等问题对该治疗在临床运用的限制。相信随着研究的逐渐深入,基于CAR修饰T细胞的糖蛋白类肿瘤标志物靶向治疗会取得更大的突破。

冠心病患者血浆人类软骨糖蛋白-39、同型半胱氨酸、高敏C反应蛋白水平的变化及其与冠状动脉病变程度的关系

目的探讨不同类型冠心病患者血浆人类软骨糖蛋白-39(YKL-40)、同型半胱氨酸(Hcy)、高敏C反应蛋白(hsCRP)的变化及其与冠状动脉斑块的稳定性、冠状动脉病变程度的相关性。方法依据临床表现、冠脉造影检查确定入选对象并分为4组:急性心肌梗死组(AMI)、不稳定型心绞痛组(UAP)、稳定型心绞痛组(SAP)和冠脉造影正常的患者为对照组。共99例。依据Gensini积分分为对照组、Gensini积分<30分组,30～60分组,≥60分组。采用酶联免疫法检测各组患者血浆YKL-40、Hcy、hsCRP水平,分析各组患者血浆YKL-40、Hcy、hsCRP水平的差异及其与Gensini积分相关性。结果与对照组相比,冠心病不同临床类型组血浆YKL-40、Hcy及hsCRP水平明显升高(P<0.01),血浆YKL-40、Hcy、hsCRP水平在AMI组、UAP组、SAP组依次降低;且随着Gensini积分升高,血浆YKL-40、Hcy及hsCRP水平逐渐升高(P<0.05),两者呈正相关。结论血浆YKL-40、Hcy、hsCRP水平与冠状动脉病变程度和动脉粥样硬化斑块的不稳定性相关,病变越重、斑块越不稳定,血浆YKL-40、Hcy、hsCRP水平越高。

成像毛细管等电聚焦电泳分析糖蛋白类生物技术药物

目的建立成像毛细管等电聚焦电泳分析糖白蛋类生物技术药物的异构体和等电点的方法。方法应用优化的成像毛细管等电聚焦电泳技术,对3种糖蛋白类生物技术药物即聚乙二醇化重组人促红素(PEGlysated erythropoietin,PEG-EPO)、重组人组织型纤溶酶原激活剂TNK突变体(Recombinant human TNK mutant of tissue type plasminogen activator,rhTNK-tPA)和全人源化单抗A的异构体和等电点进行分析。结果采用优化的成像毛细管等电聚焦电泳技术,可较好地分析PEG-EPO、rhTNK-tPA和全人源化单抗A的等电点和异构体,该方法可靠、快速,具有较好的分离度和重现性。结论成像毛细管等电聚焦电泳技术可用于分析糖蛋白类生物技术药物的异构体和等电点,为保证糖蛋白类生物技术药物生产工艺的稳定性及质量控制提供了有效手段。

血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体拮抗剂RGDS肽类作为抗栓剂的研究

位于纤维蛋白原上的ＲＧＤ肽片段是血小板糖蛋白Ⅱｂ／Ⅲａ复合物的识别位点，两者的结合是血栓形成的最后共同通路。合成的ＲＧＤ肽类物质作为血小板糖蛋白Ⅱｂ／Ⅲａ受体拮抗剂，有效地抑制血小板粘附、聚集与阻止血栓形成，对于心脑血管疾病的防治具有重要的潜在临床应用价值。

人类软骨糖蛋白39在类风湿关节炎发病中的作用(英文)

目的:一种可能的自身抗原人类软骨糖蛋白-39(humancartilageglyco-protein-39,HCgp-39)近年来成为国外风湿病学者研究类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA发病及其治疗的热点。探讨将对HCgp-39的来)源、结构和生化意义及其在RA发病中的作用。资料来源:应用计算机检索Medline1990-01/2004-01期间的HCgp-39相关文章,检索词“HCgp-39”,并限定文章语言种类为English。资料选择:选择与HCgp-39相关英文文献100篇。资料提炼:按HCgp-39的最新进展对相关文献进行提炼。资料综合:按HCgp-39的来源、结构及功能、HCgp-39与疾病的关系,尤其是HCgp-39与RA的关系进行综述。结论:HCgp-39可以作为除传统的RA疾病活动性指标之外的又一可测量指标,建立血清学检测方法对于RA的早期诊断、判断RA患者的病情、改善预后和转归也具有一定意义。可考虑用于抗原特异的免疫治疗。

联合检测糖蛋白类抗原153与糖蛋白类抗原125和癌胚抗原在肺癌患者诊断中的应用价值

目的探讨联合检测糖蛋白类抗原153(CA153)与糖蛋白类抗原125(CA125)和癌胚抗原(CEA)在肺癌患者诊断中的应用价值。方法选取2013年3月至2015年3月辽宁省庄河市中心医院收治的43例肺癌患者作为观察组,取同期收治的良性肺部疾病患者45例作为对照组,选取同期健康体检者47例作为健康组。检测3组研究对象血清CA153、CA125及CEA水平。结果观察组患者的CA153、CA125、CEA水平均明显高于对照组及健康组,差异均有统计学意义(均P<0.05);CA153+CA125+CEA的准确性及敏感性均明显高于CA153、CA125、CEA,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论联合检验CA153、CA125及CEA可有效提高肺癌诊断的敏感性与准确性,临床应用价值较高。

卵类糖蛋白手性柱拆分钙离子拮抗剂尼卡地平对映体

研究了在卵类糖蛋白(OGCH I)手性柱上影响钙离子拮抗剂尼卡地平对映体拆分的主要因素,建立了尼卡地平对映体的拆分方法。氨丙基硅胶在0.2 mol/L磷酸钠缓冲液(pH 6.6)中与OGCH I反应,制备的固定相装填于10 cm不锈钢柱中,用高效液相色谱法拆分尼卡地平对映体。优化的色谱条件为:0.05 mol/L磷酸钠缓冲液(pH 5.5)-甲醇(65∶35),流速0.2 mL/m in,紫外检测波长236 nm,柱温:25℃。在此条件下,尼卡地平对映体可得到良好分离。通过改变有机改性剂的种类和比例、流动相的pH值、缓冲溶液的浓度以及流速等色谱条件,确定了影响尼卡地平对映体拆分的主要因素。

上皮型钙黏蛋白在卵巢癌腹腔种植转移中的作用

卵巢癌是女性因癌症死亡的重要原因之一,其预后不良的主要原因是卵巢癌易短期内复发和转移。卵巢癌转移涉及细胞间连接、血管生成、肿瘤微环境等多个方面。研究发现,上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)是卵巢癌转移过程中的重要影响因素,其可以通过改变细胞-细胞间黏附、促进血管生成、调节上皮-间质转化进程、促进肿瘤侵袭及浸润来参与卵巢癌的转移。详细阐述E-cadherin的结构及其在卵巢癌中的表达,并就卵巢癌的种植转移机制及Ecadherin在卵巢癌种植转移中的作用进行综述,以期为卵巢癌的复发监测及后续治疗提供新的思路。

卵类糖蛋白固定相高效液相色谱法测定血浆中尼伐地平对映体(英文)

目的 建立血浆中尼伐地平对映体的HPLC法。方法在弱碱性条件下，血浆样品用环己烷-异丙醇（96．5：3．5，V/V）混合溶剂提取,以卵类糖蛋白为固定相，以含乙醇22．5％的50mmol·L^-1磷酸盐缓冲液（pH5．1）为流动相，采用HPLC法分离测定，检测波长236nm。结果在本实验条件下，血浆内源性物质无干扰，尼伐地平对映体可在30min内得到基线分离。检测信号峰面积与（S）-（＋）或（R）-（-）尼伐地平在10—300μg·L^-1内呈良好的线性关系，检测限约为3μg·L^-1，方法回收率为91．7％～100．5％，RSD〈9．8％。结论本方法具有简便快速、精密度和准确度好的优点，可用于血浆中尼伐地平对映体的分离和测定。

新型抗血小板药物——血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗药

血小板糖蛋白 (GP)Ⅱb/Ⅲa受体拮抗药能明显阻断血小板表面的GPⅡb/Ⅲa受体 ,抑制凝血因子Ⅰ引起的交联从而抑制血小板聚集。因此它能有效地预防冠状动脉介入术后的缺血性并发症 ,并且可以改善不稳定型心绞痛和急性心肌梗死的长期预后 ,是一类很有应用前途的抗血小板药物。本文对该类药物的作用机制、药动学。

96KD糖蛋白诱导肿瘤免疫的实验研究

目的 从 H2 2肝癌细胞中纯化 96 KD糖蛋白 ,并观察其诱导肿瘤免疫作用。方法 ( 1)分离 96 KD糖蛋白 :H2 2肝癌细胞破膜、可溶性蛋白分级硫酸铵盐析、Co A- Sepharose亲和层析、DEAE- Sephacel离子交换层析分离、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。 ( 2 )诱导肿瘤免疫 :用不同剂量 96 KD糖蛋白分别皮下免疫 5组小鼠 ,每周 1次 ,连续两周 ,末次免疫后的第 7天用 2× 10 5H2 2细胞攻击 ,观察各组肿瘤发生率及瘤重并与对照组比较。结果 不同剂量免疫组皆显示保护作用 ,用 18μg/只 96 KD糖蛋白免疫组效果最明显。结论 使用从 H2 2肝癌细胞中分离的 96 KD糖蛋白免疫小鼠后 ,对同类癌细胞攻击显示有效的免疫保护作用。

血小板膜糖蛋白和血小板聚集率变化与冠心病的临床意义

目的观测冠心病(CHD)患者血小板膜糖蛋白(GP)、血小板最大聚集率(PAgT)、血脂水平的变化及相关性。方法选择CHD患者122例,其中稳定性心绞痛(SAP)患者54例(SAP组),不稳定性心绞痛(UAP)患者68例(UAP组),另选健康体检者48例(对照组)。又根据有无冠状动脉事件分为心血管事件组(57例)和无心血管事件组(65例)。测定各组血GP、PAgT及血脂水平。结果 UAP组患者GP、PAgT水平明显高于对照组及SAP组患者。心血管事件组GP、PAgT也明显高于无心血管事件组;SAP组患者血小板表面α颗粒GP-140、PAgT水平明显高于对照者;回归分析发现,CHD患者PAgT水平与GP、LDL-C、脂蛋白(a)呈正相关。结论 PAgT水平升高是CHD患者冠状动脉事件发生的重要因素,高脂血症可以促进血小板在冠状动脉硬化过程中的活化。

乳腺癌患者血清糖类抗原153、E-钙黏蛋白、表皮生长因子受体水平检测的临床意义

目的探究乳腺癌患者血清糖类抗原153(CA153)、E-钙黏蛋白(E-cad)、表皮生长因子受体(EGFR)水平检测的临床意义。方法回顾性分析黄冈市中心医院168例乳腺癌患者临床资料(乳腺癌组),并收集154例行手术治疗的乳腺良性肿瘤患者临床资料(乳腺良性肿瘤组)及152例健康体检者相关资料(健康对照组)。比较3组血清CA153、E-cad、EGFR水平有无差异,利用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清CA153、E-cad、EGFR诊断乳腺癌的应用价值;并分析乳腺癌临床病理特征与血清CA153、E-cad、EGFR表达水平的关系。结果乳腺癌组血清CA153、E-cad、EGFR水平高于乳腺良性肿瘤组、健康对照组(P<0.05),且乳腺良性肿瘤组血清CA153、E-cad、EGFR水平高于健康对照组(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清CA153、E-cad、EGFR对乳腺癌均具有较高的诊断效能。TNM分期较高、组织学分级较高及伴淋巴结转移的乳腺癌患者血清CA153、E-cad、EGFR水平高于TNM分期较低、组织学分级较低和无淋巴结转移者(P<0.05)。结论血清CA153、E-cad、EGFR的检测在乳腺癌诊断及临床病理特征评估中有重要作用,于临床乳腺癌诊疗工作有利。

乳腺癌^(99)Tc^m-MIBI显像与P-糖蛋白和GST-π表达的关系

目的 探讨乳腺癌患者99Tcm 甲氧基异丁基异腈 (MIBI)显像与癌组织中P 糖蛋白 (P gp)、胎盘型谷胱甘肽 S 转移酶 (GST π)表达的关系。方法 对 3 6例未经治疗的乳腺癌患者进行99Tcm MIBI早期 ( 10min)与晚期 ( 180min)平面显像 ,用免疫组织化学方法检测手术后标本中P gp、GST π的表达。根据免疫组织化学检测结果将患者分为 2组 ,比较其早期与晚期的肿瘤与患侧 (T N)放射性比值以及肿瘤部位的放射性清除指数 (WI)。结果 2 7例P gp表达阳性患者的早期T N明显高于P gp阴性患者 (Z =- 3 .3 2 ,P =0 .0 0 2 ,双侧 ) ,两者间WI差异也有显著性 (t=3 .5 9,P =0 0 0 1) ,而GST π阴性与阳性者间早晚期T N及WI的差异均无显著性。GST π与P gp间表达呈正相关。结论GST π与P gp的共表达现象是未治疗的乳腺癌多药耐药机制之一 ,99Tcm MIBI的WI可用于体外判断未治疗的乳腺癌P

West综合征患儿多药耐药基因P糖蛋白的表达水平

目的 :探讨 West综合征与多药耐药基因 (MDR)的关系。方法 :采用流式细胞术检测 West综合征(n=12 )、部分性发作癫痫 (n=9)、全身性发作癫痫患儿 (n=8)及正常健康儿童 (n=8)外周血淋巴细胞膜 MDRP糖蛋白 (P170 )的表达水平。结果 :普通癫痫 (上述部分性发作及全身性发作 )患儿和 West综合征患儿外周血P170表达水平均增高 ,其中 West综合征患儿外周血 P170表达水平 (5 9.5 2 % )明显高于正常对照组 (1.2 2 % )及普通癫痫组 (11.4 7% ) (P<0 .0 0 1,P<0 .0 5 )。结论 :MDR P170表达增高可能为 West综合征难治的重要原因。

红花注射液对急性冠状动脉综合征患者血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体影响的随机对照研究

背景:血小板表面糖蛋白(glycoprotein,GP)Ⅱb/Ⅲa受体是评价血小板活化的重要指标,具有活血化瘀作用的中成药红花注射液对该指标的影响对于探讨其抗血小板凝集作用机制及疗效有重要意义。目的:观察红花注射液对急性冠状动脉综合征患者血小板表面糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体的影响,探讨红花注射液在抗血小板凝集治疗中的作用及其机制。设计、场所、对象和干预措施:选择2008年9月至2009年5月在上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院心血管内科住院的急性冠状动脉综合征患者64例,用随机数字表法分为红花注射液治疗组(32例,常规西药加红花注射液)与对照组(32例,常规西药),两组疗程均为14 d。主要结局指标:采用免疫荧光标记法和流式细胞仪检测治疗前后血小板活化标志物GPⅡb/Ⅲa复合物(CD41)、P选择素(CD62p)和溶酶体膜糖蛋白(CD63)的表达,同时观察红花注射液对急性冠状动脉综合征患者心绞痛症状及近期预后的影响。结果:对照组中有4例患者因提前出院而退出试验。对照组和治疗组的CD41比例、CD41抗体荧光量治疗后比治疗前均有所降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);治疗后治疗组CD41比例、CD41抗体荧光量低于对照组(P<0.05);两组CD62p比例和CD63比例治疗后均呈现出一定的下降趋势,但与治疗前比较差异无统计学意义。两组患者在住院14 d中均未发生死亡、心肌梗死、脑卒中事件,红花注射液治疗组患者心绞痛症状缓解和心电图表现均明显好于对照组。结论:红花注射液具有抑制血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体表达的作用,对急性冠状动脉综合征患者心绞痛具有很好的缓解作用,可增强常规西药抗血小板活化的作用。

p53对肝癌细胞株Hep3BP-糖蛋白表达和耐药表型的影响

目的 :验证野生型p5 3调节肝癌细胞P -糖蛋白 (P -gp)表达的设想。方法 :通过采用脂质体介导转染技术 ,将野生型p5 3cDNA导入一种p5 3和Rb基因缺失的肝癌细胞株Hep3B。经G4 18筛选获得稳定整合了野生型p5 3的克隆 (wt-p5 3 )和空载体克隆 (pNeo)。采用Northern或Western印迹鉴定p5 3、p2 1和P -gp的表达 ;细胞毒性试验分析细胞对化疗药的敏感性 ;流式细胞仪检测细胞内阿霉素的积累浓度。结果 :wt-p5 3细胞表达有转录活性的p5 3 ,p2 1waf1/cip1蛋白升高 ,P -gp表达降低 ,与pNeo细胞相比对阿霉素和丝裂霉素化疗敏感且阿霉素荧光量为pNeo细胞的 13倍。采用 0 .2mg/L阿霉素诱导这 2组转染细胞 ,wt-p5 3细胞出现明显的凋亡。结论 :在肝癌细胞Hep3B中重建野生型p5 3的活性由于降低P -gp的表达而对化疗药敏感。

整合素血小板膜糖蛋白IIb、IIIa在系膜增殖性肾炎中的表达

目的 :观察整合素血小板膜糖蛋白Ⅱb、Ⅲa(GPⅡb、GPⅢa)在人类系膜增殖肾炎 (MsPGN)中肾内表达 ,探讨GPⅡb Ⅲa在MsPGN的作用。方法 :18例肾活检标本均行光镜HE、PAS、PASM Masson染色 ,电镜及免疫荧光检查 ,以SABC法测定肾组织中GPⅡb、GPⅢa、P 选择素 (P 140 )、纤维连接蛋白 (FN)、粘连蛋白 (LN)表达与正常对照组分别比较 ,并行计算机图像分析。结果 :PAS阳性物 (PAS+ )、PASM阳性物 (PASM+ )及FN、LN明显增生 ;GPⅡb、GPⅢa、P 140表达上调 ;肾小球细胞数 (n)、平均肾小球体积 (AVG)及肾小球硬化指数显著增加 ;肾小管、间质轻度受损。结论 :GPⅡb、GPⅢa在肾小球及肾小管间质表达上调与系膜细胞基质增生、细胞浸润、肾小球硬化相关 ;可能与肾小球疾病中凝血功能紊乱。

血小板膜糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物表达变化:健康者与2型糖尿病患者的样本分析(英文)

背景:研究已证实血小板活化参与了糖尿病血管病变的发生发展。血小板膜糖蛋白Ib/IX/V复合物是血小板膜上主要的糖蛋白分子之一,是血管性血友病因子和凝血酶的受体,在血小板活化中起重要作用。目的:观察2型糖尿病患者血小板膜糖蛋白Ib/IX/V复合物及其组分糖蛋白Ibα表达的变化。设计:病例-对照实验。单位:华中科技大学同济医学院附属协和医院中西医结合科。对象:根据1999年世界卫生组织制定的糖尿病诊断标准选择2005-12/2007-01本院门诊就诊的外周血小板计数>50×109L-1的2型糖尿病患者51例,男28例,女23例,纳入对象在检查前两周内未服用影响血小板功能的药物。根据病情控制情况将患者分为控制良好组(n=25)和控制不良组(n=26);根据是否合并血管病变分为合并血管病变组(n=27)和无血管病变组(n=24)。选择同期本院健康体检者23名为健康对照组,年龄、性别与病例组匹配。纳入对象或家属对检测项目和试验知情同意。试验经医院伦理委员会批准。方法:患者均在清晨就诊时抽取空腹肘静脉血进行检测。健康体检者于来院体检时进行相同检测。①生化指标检测:由本院检验科完成空腹血糖、糖化血红蛋白和空腹面胰岛素的检测。②糖蛋白Ib/IX/V复合物及其组分糖蛋白Ibα的表达的检测:采集清晨空腹静脉血3mL,38g/L枸橼酸钠抗凝后10g/L多聚甲醛固定45min。取50μL固定后全血加至流式检测管,同时分别向不同管中加入20μL糖蛋白Ib/IX/V复合物单克隆抗体CD42a-b-c-d和PE标记的糖蛋白Ibα单克隆抗体CD42b,混匀后室温避光孵育30min,然后CD42a-b-c-d标记的样品中加入20μLFITC标记的羊抗鼠IgG,混匀后室温避光孵育30min。于FACS420型流式细胞仪上检测样本平均荧光强度。③血小板聚集率测定:参照文献检测血小板聚集率。主要观察指标:①生化指标。②糖蛋白Ib/IX/V复合物及糖蛋白Ibα的表达情况。③血小板最大聚集率。结果:实验纳入的51例2型糖尿病患者和23名健康体检者全部进入结果分析。①生化指标检测结果:控制良好组和控制不良组患者空腹胰岛素与健康对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。控制不良组患者空腹血糖和糖化血红蛋白均明显高于健康对照组和控制良好组,差异有显著性意义(P<0.01)。②糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物和糖蛋白Ⅰbα表达情况的比较:控制良好组和控制不良组患者糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物和糖蛋白Ⅰbα的表达明显低于健康对照组,控制不良组明显低于控制良好组,差异均有显著性意义(P<0.05～0.01)。无血管病变组和合并血管病变组患者均明显低于健康对照组,差异有显著性意义(P<0.01)。无血管病变组和合并血管病变组患者糖蛋白Ⅰbα明显低于健康对照组,合并血管病变组明显低于无血管病变组,差异均有显著性意义(P<0.05)。糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物平均荧光强度与空腹血糖、糖化血红蛋白和空腹胰岛素呈明显负相关(r=-0.634,-0.573,-0.649,P<0.05);糖蛋白Ⅰbα平均荧光强度与空腹血糖和糖化血红蛋白呈明显负相关(r=-0.602,-0.543,P<0.05)。③血小板聚集功能的比较:2型糖尿病患者血小板最大聚集率较正常人明显升高,差异有显著性意义(t=-3.852,P<0.01),控制不良组明显高于控制良好组,合并血管病变组高于无血管病变组,差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:2型糖尿病患者早期无血管病变时即存在血小板活化,发生血管病变后活化更明显,且血小板活化与血糖呈正相关。血小板糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物作为凝血酶和血管性血友病因子的受体,可能参与了2型糖尿病血管病变的发生发展。