紫外可见光谱法测定抗体偶联药物药物-抗体偶联比的方法建立和验证

目的 建立基于紫外可见光谱检测抗体偶联药物(ADC)药物-抗体偶联比(DAR)的检测方法并进行验证。方法 使用盐酸胍作为变性剂,修正基于氨基酸组成推算的抗体在280 nm处消光系数。利用比尔-朗伯定律测定抗体和小分子药物在252nm处的消光系数及小分子药物在280nm处的消光系数。确定基于紫外可见光谱检测ADC的DAR公式参数和检测方法。根据《中华人民共和国药典》(2020)指导原则,对方法进行验证。结果 抗体在252nm和280nm处的摩尔消光系数分别为91258和228913L/(mol·cm);tubulysin衍生物小分子药物在252和280nm处的摩尔消光系数分别为12798和3186 L/(mol·cm)。DAR=(A280-ADC×91258–A252-ADC×228913)/(A252-ADC×3186–A280-ADC×12798)。方法专属性符合要求。模拟DAR值为1.881~15.045的ADC药物进行准确性验证,回收率为79.38%~99.13%。重复性相对标准偏差(RSD%)为1.93%,中间精密度RSD%为2.36%。以252 nm处吸光值与280 nm处吸光值的比值为纵坐标,以模拟DAR值为横坐标进行线性回归的方程为y=0.0408x+0.414,相关系数r2为0.9954。根据DAR测定公式推算该方法的检测范围为0.60~82.56。不同检测波长[(280±1)或(252±1)nm]、不同放置时间(0~60 min)、不同批次的比色皿条件下,DAR值检测结果的RSD%均<5.0%。结论 基于紫外可见光谱法进行抗体偶联药物DAR测定的方法简单、可操作性强,专属性、准确度、精密度、耐用性满足检测需求,该方法可以用于抗体偶联药物的质量分析和质量控制。

紫外可见光谱法测定酱油中4-甲基咪唑含量

酱油样品在层析柱中用二氯甲烷洗脱,经重氮化后在波长440nm处具有最大吸收,据此建立了紫外可见光谱法测定酱油中4-甲基咪唑的方法。其线性方程为:C=0.0718A+0.0008,线性相关系数为0.9956,4-甲基咪唑标准加入量分别为0.0102mg和0.0602mg的平均回收率为97.25%和99.44%。该方法具有重现性好,灵敏度高,操作简便、快速、准确等优点,可用于检验酱油中的4-甲基咪唑。

紫外可见光谱法测定Cr^(3+)电化学氧化过程中的Cr_2O_7^(2-)

应用紫外可见光谱法对以二氧化铅为阳极,硫酸介质中Cr^(3+)电化学氧化过程中反应生成的Cr_2O_7^(2-)进行了分析测定,并测定了该反应过程的现场光谱。实验结果表明,以350nm作为Cr_2O_7^(2-)的定量吸收波长,可以测定Cr^(3+)电化学氧化过程中的Cr_2O_7^(2-)浓度,其摩尔吸光系数为1.98×10~3L·mol^(-1)·cm^(-1),体系中Pb^(2+)的存在对测定没有干扰。该反应过程的现场光谱测定表明,在以硫酸为介质、二氧化铅为阳极的Cr^(3+)电化学氧化反应生成Cr_2O_7^(2-)过程中,没有检测到中间体。

浊点萃取-紫外可见光谱法测定痕量钴

研究了浊点萃取(CPE)-紫外可见光谱法(UV/Vis)测定微量钴的新方法,利用表面活性剂聚乙二醇辛基苯基醚(TritonX-100)和配合剂2[(5-溴-2-吡啶)-偶氮]-5-(二乙氨基)苯酚(5Br-PADAP)对试样中的钴(Ⅱ)进行浊点萃取。探讨了影响浊点萃取及测定灵敏度的因素。在最佳条件下,钴的富集倍率为5,检出限为1.18ng/mL(n=11),RSD为2.8%(n=5,c(Co2+)=0.20μg/mL),钴含量在(0.01～0.5)μg/mL范围内服从比尔定律。本法对实际样品中的钴进行富集和测定,结果令人满意。

酸性染料与阳离子染料的相互作用——电导率法和紫外可见光谱法的研究

酸性/阳离子染料对酸性染料可染纤维与阳离子染料可染纤维混纺交织制品一浴法染色时易出现因阴阳离子相互作用而引起的沉淀现象,有关这种相互作用的理论研究对实际生产合理选用染料和助剂具有重要的意义。电导率法和紫外可见光光谱法的研究结果表明,酸性和阳离子染料基本上按理论摩尔比发生库仑力作用,并形成复合物,酸性染料与隔离型阳离子染料相互作用强烈,酸性染料的疏水越强,与阳离子染料相互作用的程度就越大。

紫外可见光谱法的计算机辅助教学

本文介绍一个紫外可见吸收光谱法的计算机辅助教学课件，它利用精炼的语言、形象的动画，描述了包括分子吸收理论、分光光度计的工作原理、吸收光谱定量分析方法三个方面的教学内容。

紫外可见光谱法研究芹菜素-铕配合物与ct-DNA的相互作用

以Tris-HCl缓冲溶液为介质,利用紫外可见光谱法研究了芹菜素(Apigenin,简写为Ap)与稀土铕离子配位的酸度及芹菜素-铕(Ⅲ)配合物与小牛胸腺DNA(ct-DNA)的相互作用。实验表明芹菜素与铕(Ⅲ)能形成稳定的配合物;在生理条件(pH=7.4),随ct-DNA浓度的增大,配合物最大吸收峰吸光度降低,吸收带变宽,有微弱的红移,说明芹菜素-铕配合物主要以插入方式与DNA相结合。

β-环糊精增敏紫外可见光谱法测定稀土元素镧

本文研究了β-环糊精(β-CD)对镧-偶氮胂Ⅲ体系的增敏作用。结果表明,La(Ⅲ)在一定实验条件下与偶氮胂Ⅲ反应生成绿色络合物(λ=652nm)。β-CD对于测定具有增敏作用。La(Ⅲ)在0.02～0.80μg/mL范围内符合比尔定律,表观摩尔吸光系数为6.26×104L/(mol·cm)。此方法操作简便,用于试样中微量La(Ⅲ)的测定,结果令人满意。

紫外可见光谱法测定食醋中4-甲基咪唑含量

建立紫外可见光谱法测定食醋4-甲基咪唑的方法。结果表明,食醋样品经沉淀、离心、萃取、脱色及显色反应后,4-甲基咪唑经重氮偶合后在波长440nm处具有最大吸收,据此进行定量测定。方法的线性方程为:A=13.721C+0.0089,线性相关系数为0.9997,检出限为1.2μg,方法的平均回收率为95%~105%,本方法的标准偏差为1.97×10^(-5)~9.37×10^(-5),变异系数为0.002~0.008。

紫外可见光谱法在监测水体有机污染物方面的应用

应用紫外可见光谱法监测水体的有机污染物,并与重铬酸钾法测试COD结果进行比较,发现两者之间具有良好的相关性。对于特定的水体而言,紫外可见光谱法有快速、试样量少、实时在线等特点,值得在实际应用中推广。

紫外可见光谱法在材料耐老化性能检测中的应用

考察了树脂清漆的紫外吸收及加速老化情况,发现两种测试方法之间有很好的相关性,把紫外光谱法用于涂料产品配方的优选可以缩短试验周期,加快产品的开发速度。

紫外可见光谱法鉴定不同厂家圆珠笔油墨的相对书写年代

本文利用单溶剂萃取紫外可见光谱技术对不同厂家不同颜色的圆珠笔油墨的相对书写年代进行了分析研究,方法利用弱溶剂萃取纸张上的书写油墨,以紫外可见光谱法测试萃取溶液中油墨染料的含量,比较萃取的嫌疑油墨和已知日期的萃取油墨的含量,可以估算出嫌疑油墨的书写时间。应用本技术的关键在于找到合适的弱溶剂萃取文件上的油墨,以及从文件中每个待测油墨样品上移取等量油墨的能力。

紫外-可见光光谱法测定COD几种典型算法研究

紫外-可见光谱法是当前检测水体中化学需氧量(COD)的重要方式之一,文中在介绍紫外-可见光谱法的基本原理的基础上,综述了偏最小二乘法、线性回归法、PB神经网络法等几种典型的算法的原理及其在紫外-可见光谱测定COD中应用现状,并浅析了各算法的优缺点。

基于紫外-可见光谱法的工业废水CNN-GRU分类模型研究

工业废水分类是水污染防治和水资源管理的前提和基础,相较于生活污水,工业废水的分类研究相对滞后。水体化学需氧量(COD)是衡量水体质量的核心指标,针对现有工业废水COD分类算法中预测精度较低的问题,提出基于门控循环单元(GRU)的卷积神经网络(CNN)混合模型。该模型首先将紫外-可见光谱法测得的工业废水COD数据进行高斯滤波去噪,然后把去噪后的光谱数据输入CNN模型进行特征提取,最后通过GRU神经网络实现工业废水COD分类。实验结果显示,CNN-GRU分类模型经过200次训练后达到收敛,分类精度达到99.5%,与长短期记忆方法、GRU方法、CNN-LSTM方法相比,该混合模型的分类精度具有显著优势。

棕色环实验的目视法和紫外可见光谱法研究

在遵循实验室废弃物绿色处理的“减量”原则基础上,对硝酸根离子的鉴定实验——棕色环实验从试剂用量,试管直径及类型、亚铁盐的种类和干扰离子等多方面进行了研究,同时结合紫外可见光谱法研究了棕色环物质的稳定性。发现试剂用量,试管直径及NO~-、I~-、SO等离子的存在对棕色环的形成有一定影响。在优化后的实验条件下,可明显观察到棕色环的形成。同时发现棕色环物质在302,450,587nm处有吸收。实验结果运用到教学中效果良好。

一种紫外-可见光谱法检测水质COD的浊度影响实验研究

消除浊度影响是直接光谱法检测水质COD的关键技术问题。此源于紫外-可见光谱法检测水质参数的关键依赖于化学计量法所建立的准确的水质参数分析模型,而浊度是影响其建模的一个重要参数。为此,选取福尔马肼浊度液和邻苯二甲酸氢钾标准溶液,开展了紫外-可见吸收光谱法检测水质COD的浊度影响实验研究,获得了选定溶液在245,300,360和560nm几个特征波长点的吸光度随浊度变化的最小二乘法拟合曲线,分析了吸光度随浊度的变化规律。研究结果表明,在240~380nm的紫外光谱段,由于引起浊度的颗粒物对有机物产生了吸附,致使浊度对水样的紫外光谱影响较为复杂;在380~780nm的可见光谱区域,浊度对光谱的影响则是随着波长的增大而减弱。基于此,开展了多元散射校正法对受浊度影响的水样光谱进行校正试验。对某溪水水样的紫外-可见吸收光谱进行多元散射校正,通过处理前后光谱对比表明,浊度引起各个波长点的基线偏移都得到了有效的校正,而在紫外区域特征并未减弱。接着对选取的三种液体的紫外-可见吸收光谱进行多元散射校正,实验结果表明:该方法可在不影响水样紫外-可见吸收光谱特征的前提下对其吸收曲线进行有效的校正,这不仅提高了光谱法检测水质COD的信噪比,而且还为化学计量法建立准确、有效的水质检测COD分析模型进行数据预处理提供了一种新途径。

紫外-可见光谱法测定高锰酸盐指数的研究

高锰酸盐指数(CODMn)是反映饮用水水源受到有机污染的一项重要指标,现行的国标测定法为滴定法。本文探索研究了紫外可见光谱法测定地表水中高锰酸盐指数的新方法。内容包括:测定波长的选择、H2SO4用量的影响、KMnO4浓度和用量的影响、加热温度和时间的影响、方法的线性关系以及与滴定法的对比试验。通过研究,得到方法的优化测定条件:测定波长为525nm,25%H2SO4的用量为5.00mL,0.01250mol·L-1 KMnO4标准使用液的用量为2.00mL,加热温度为100℃,加热时间为30min。方法用于了嘉陵江、长江水中高锰酸盐指数的实际分析,获得了满意的结果。研究结果表明与国标法相比,本法具有快速、易操作、灵敏度高、精密度好、试样量少,成本低、易实现水质在线监测等特点,是一种环境友好的监测分析新方法。

紫外-可见光谱法测定黑液中木素含量

通过对3,5-二硝基水杨酸(DNS)及草浆黑液木素溶液紫外-可见特定波长区域光谱图的研究,建立了一种快速、简便、准确的草浆黑液中木素含量测定方法。研究结果表明,草浆黑液木素在520nm处DNS溶液吸光度值与木素溶解量二者具有较高的线性关系。该方法在测量时可以排除草浆黑液中还原糖及亚硫酸钠的干扰。不但能测定碱法草浆黑液中木素含量,还可以测定碱性亚硫酸盐法草浆黑液中木素含量。采用该方法测定草浆黑液中木素相对含量是准确可靠的。

一种紫外-可见光谱法水质COD检测的预测模型研究

针对紫外-可见光谱法水质COD检测在线、实时性的测量要求,研究了一种基于主成分分析(PCA)联合粒子群优化极限学习机(PSO-ELM)预测模型,借以预测水质COD检测数据。通过采用PCA对水质COD检测的光谱数据进行降维处理,提取其特征信息,消除向量相关性并送入PSO-ELM模型中进行建模及预测。研究结果表明,基于PCA联合PSO-ELM进行紫外-可见光谱法水质COD检测的预测模型研究,不仅预测精度较单纯的ELM模型提高了近10倍,而且相对于PSO-ELM模型的预测效率(运行时间)提升了一个数量级,这为紫外-可见光谱法水质COD在线、实时性检测创造了条件。

紫外-可见光谱法研究二茂铁衍生物与血红素的相互作用（英文）

采用紫外-可见光谱法(UV-Vis)研究三种二茂铁衍生物[Fc(COOH)_2(λ_(max)=286nm),Fc(OBt)_2(λ_(max)=305nm),Fc(Cys)(λ_(max)=289nm)]与血红素(heme,λ_(max)=386nm)的相互作用。实验结果表明:当固定heme浓度时,heme的吸光度随着Fc(COOH)_2和Fc(Cys)浓度的增加而增大,而heme的吸光度随着Fc(OBt)_2的浓度的增加几乎没有增大;当分别固定Fc(COOH)_2,Fc(Cys)和Fc(OBt)_2的浓度时,Fc(COOH)_2和Fc(Cys)的吸光度随着heme浓度的增加而增大,而Fc(OBt)_2的吸光度随着heme浓度的增加没有变化,说明Fc(COOH)_2和Fc(Cys)与heme存在分子间的相互作用,主要是由于Fc(COOH)_2和Fc(Cys)与heme能形成氢键,分子链增长,吸收的能量增加,导致吸光度增大;而Fc(OBt)_2与heme没有分子间的相互作用,是由于Fc(OBt)_2没有自由的氢,不能与heme形成分子间的氢键。同时考察了三种二茂铁衍生物与heme的吸光度随时间的变化,Fc(COOH)_2和Fc(Cys)与heme的吸光度随着时间的增加而减少,而Fc(OBt)_2与heme的吸光度随时间的变化几乎没有变化。Fc(COOH)_2与Fc(Cys)和heme的反应时间为0.5,18和48h,当固定Fc(COOH)_2浓度时,在λ_(max)=384nm处的吸光度由2.64分别变为2.53和2.51;当固定heme的浓度时,在λ_(max)=384nm处的吸光度由1.76分别变为1.72和1.68;当固定Fc(Cys)浓度时,在λ_(max)=397nm处的吸光度由2.74分别变为2.63和2.55;当固定heme的浓度时,在λ_(max)=397nm处的吸光度由1.82分别变为1.58和1.49。