Box-Behnken响应面法优选紫斑牡丹中丹皮酚和芍药苷提取工艺

目的优选紫斑牡丹中丹皮酚和芍药苷的提取工艺。方法在单因素试验基础上,以液料比、提取时间和乙醇体积分数为影响因素,以丹皮酚和芍药苷提取率的总权重综合评分为评价指标,采用Box-Behnken响应面法优选最佳提取工艺,并进行验证试验。结果最佳提取工艺为液料比28倍,提取时间150 min,乙醇体积分数52%。此工艺条件下,丹皮酚提取率为0.49%(RSD=1.33%,n=3),芍药苷提取率为5.38%(RSD=1.07%,n=3)。结论该提取工艺稳定、可行,可用于紫斑牡丹中丹皮酚和芍药苷的提取。

紫斑牡丹花粉对D-半乳糖致衰老模型小鼠的影响

目的探究紫斑牡丹花粉对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆力及氧化应激损伤的影响。方法60只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、紫斑牡丹花粉组(750、1500、3000 mg·kg^(-1)),采用颈背部皮下注射D-半乳糖(500 mg·kg^(-1)),制备亚急性衰老模型。Morris水迷宫评估小鼠学习记忆力;HE、DAPI染色评估肝、脑组织细胞损伤情况;ELISA法检测小鼠血清、肝脑组织内MDA、T-AOC、GSH-Px、SOD、CAT及γ-H2AX、SA-β-Gal水平。结果水迷宫实验结果表明,紫斑牡丹花粉能明显提高衰老小鼠的学习记忆力。组织染色结果表明,紫斑牡丹花粉对D-半乳糖致衰老小鼠肝脑组织细胞损伤具有保护作用,且高剂量组作用最为明显。ELISA结果显示,与模型组比较,紫斑牡丹花粉各剂量组的MDA、γ-H2AX、SA-β-Gal水平降低,T-AOC、GSH-Px、SOD、CAT水平升高。结论紫斑牡丹花粉能改善D-半乳糖致衰老模型小鼠的学习记忆力,提高衰老小鼠体内抗氧化酶活性和清除自由基、脂质过氧化物的能力,保护肝脑脏器组织细胞免受氧化损伤,提示其具有潜在的延缓衰老的作用。

亚临界萃取结合分子蒸馏提取紫斑牡丹精油及其成分抗氧化能力分析

为优化紫斑牡丹精油提取工艺,分析精油成分与抗氧化能力。采用亚临界萃取与分子蒸馏相结合的方法(亚临界萃取-分子蒸馏法)和水蒸气蒸馏法,对紫斑牡丹精油进行提取。通过气相色谱-质谱联用仪对紫斑牡丹精油进行成分分析,并测定其抗氧化活性。结果表明,用亚临界萃取-分子蒸馏法提取精油的得率明显高于水蒸气蒸馏法。亚临界萃取-分子蒸馏法所得精油含79种主要成分,其中含量最高的是香叶醇,占总含量的14.664%;包含采用常用方法提取的牡丹精油中少见的雪松醇。亚临界萃取-分子蒸馏法提取的牡丹精油不仅对DPPH·、ABTS^(+)·、·OH均有一定的清除能力,也具有一定程度的抑制亚油酸酯质过氧化的作用。综上,采用亚临界萃取-分子蒸馏法提取可减少有效成分的损失,能获得更高品质的牡丹精油,有利于高附加值产品的开发与应用。

紫斑牡丹的化学成分、活性与开发利用研究进展

紫斑牡丹是我国西北牡丹种群的优势种,其作为地方传统药材,具有较高的食药价值和开发潜力。目前,已经从紫斑牡丹中分离和鉴定出了多种化学成分,包括单萜苷类、酚及酚苷类、黄酮类、低聚芪类、挥发油类、脂肪酸类、甾醇类、单宁类、三萜类等。现代研究表明,紫斑牡丹具有抗氧化、抗菌、抗癌等活性,已将其开发为口含片、软胶囊、口服液、保健化妆品、牡丹酒、花茶等新资源产品。本文主要对近10年国内外有关紫斑牡丹的化学成分进行分类整理,对其活性及开发利用现状进行梳理,并对发展前景进行展望,以期为紫斑牡丹的深入研究和综合开发利用提供参考。

微波辅助深共熔溶剂提取紫斑牡丹籽总黄酮的工艺优化及其抗氧化活性

目的:优化紫斑牡丹籽总黄酮的微波辅助深共熔溶剂提取方法,并探究其体外抗氧化活性。方法:以低共熔溶剂作为提取溶剂,采用微波辅助技术提取紫斑牡丹籽中的总黄酮。采用单因素实验以及响应面法进行提取工艺优化。从DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率进行总黄酮的体外抗氧化活性研究。结果:以氯化胆碱作为氢键受体,脲作为氢键供体的低共熔溶剂体系下,在摩尔比为1:3,含水量41.80%(V/V)的深共熔溶剂体系最优,料液比1:19 g/mL,微波功率为110 W,微波时间3.00 min,此时紫斑牡丹籽总黄酮得率为1.76 mg/g。当提取物总黄酮浓度在80μg/mL时,对DPPH·、羟基自由基的清除率分别为82.00%、42.10%。结论:采用微波辅助深共熔溶剂提取紫斑牡丹籽总黄酮,含量高,均具有抗氧化活性,且对DPPH自由基清除率超80%。

紫斑牡丹中PrPDAT基因克隆与表达分析

紫斑牡丹(Paeonia rockii)因种子富含α-亚麻酸(ALA)以及多种不饱和脂肪酸,作为一种具有潜力的木本油用植物被研究。二酰甘油酰基转移酶(PDAT)催化甘油二酯合成甘油三酯,是牡丹种子中脂肪酸生物合成关键酶之一。本研究对紫斑牡丹PrPDAT基因进行了克隆和生物信息学分析,并结合定量数据分析了该基因的时空表达模式。结果表明,该基因含有全长为1 692bp的开放阅读框,共编码563个氨基酸。理论等电点为7.02,表明该蛋白为中性蛋白,相对分子量为6.17 k Da,蛋白质不稳定性指数33.24,表明PrPDAT属于不稳定蛋白,亲水性平均值(GRAVY)为-0.21,表明为亲水性蛋白,网站预测表明该蛋白没有跨膜域。亚细胞定位预测表明该基因在叶绿体和内质网中表达,结构域分析表明该蛋白属于PLN02517超级家族,含有LCAT的结构域。二级结构预测分析表明不规则卷曲和α螺旋为PrPDAT蛋白的主要结构。系统进化结果表明,PrPDAT与芍药德拉瓦伊(Paeonia delavayi)Pd PDAT亲缘关系最近。实时荧光定量PCR的结果表明,PrPDAT基因在种子3个不同发育时期都有相应的表达,但表达的水平有所差异,呈现逐渐升高的趋势。由此推测,在紫斑牡丹种子发育和成熟过程中,PrPDAT基因对于合成油脂、蛋白等是有影响的,可能起到一定的阶段性调控作用,本研究对揭示PrPDAT在紫斑牡丹脂肪酸合成过程中的作用奠定了一定的理论基础。

一种紫斑牡丹全花茶的制作工艺研究

为开发提升紫斑牡丹市场价值,研究紫斑牡丹全花茶制作工艺。通过清理、护型、干燥等方法对紫斑牡丹全花进行加工,研究了烘干、微波干燥以及真空冷冻干燥方法对紫斑牡丹全花的干燥效果,从紫斑牡丹全花的色泽、形态、气味比较不同制作工艺,并测定最佳工艺下紫斑牡丹全花茶的营养成分。结果表明:选择初花期的紫斑牡丹全花,以纸杯护型的方法采用真空冷冻干燥法进行干燥,以程序为冷冻阶段-40℃,9.25 h→-30℃,3 h→-20℃,2 h→-10℃,1.5 h,升华干燥阶段0℃,2.5 h→5℃,2.5 h→10℃,2 h→15℃,2 h→20℃,2 h→30℃,2 h→35℃,2 h→40℃,5 h制得的全花茶效果最佳,其全花色泽靓丽、形态挺立,花茶口感醇正、感官评价高,营养成分丰富,其中可溶性蛋白、总酚、总黄酮、VC及亚麻酸等主要营养成分的含量均高于其他干燥工艺制作的牡丹花茶。

阜新地区油用紫斑牡丹育苗及林下栽培技术

油用紫斑牡丹是木本油料植物,被广泛应用于绿化、食品、医药等领域,深受广大消费者青睐。阜新地区是油用紫斑牡丹的适栽区,因油用紫斑牡丹具有抗寒、抗旱、耐贫瘠、易管理、结实率高、实生育苗简单等特点,其种植面积呈逐年增加的趋势。为促进阜新地区林业经济发展,笔者结合生产实践经验,对油用紫斑牡丹实生育苗、栽植、肥水管理、整形修剪、有害生物防治等技术进行总结。

紫斑牡丹籽粕总黄酮纯化工艺研究

选用D101、AB-8、NKA-9型大孔树脂进行静态吸附及解析性能试验,筛选出AB-8型大孔树脂进行动态试验研究,获得了紫斑牡丹籽粕中总黄酮的最佳纯化工艺条件。结果显示,利用AB-8型大孔树脂在上样液浓度为5 mg·mL^(-1)、p H值为5、流速为3 BV·h^(-1)、上样液体积为5 BV条件下进行吸附,在洗脱液为70%乙醇、洗脱液流速为1.5 BV·h^(-1)、洗脱液体积为7 BV条件下洗脱,纯化后紫斑牡丹籽粕总黄酮含量由8.54%提高到32.36%,该工艺可行性较高,可为紫斑牡丹籽粕中总黄酮纯化提供有效理论依据。

响应面法优化紫斑牡丹籽粕总黄酮提取工艺

以乙醇浓度、提取温度、提取时间及料液比为考察因素,以总黄酮提取率为指标,通过单因素试验和响应面法对紫斑牡丹籽粕总黄酮提取工艺进行了优化。结果表明,紫斑牡丹籽粕总黄酮的最佳提取工艺为乙醇浓度67%、提取温度74℃、提取时间133 min、料液比1∶36(g∶mL)。在该工艺条件下,紫斑牡丹籽粕中总黄酮提取率达到8.63%,工艺可行性较高,可为紫斑牡丹籽粕中总黄酮提取提供有效参考依据。

露地栽培大蒜紫斑病发生及综合防治

大蒜紫斑病是大蒜栽培中的一种常发性真菌性病害,各地均有不同程度发生,主要危害露地栽培大蒜。病害发生后大蒜产量降低10~20%,减少菜农经济效益。本文从大蒜紫斑病的危害症状、传播途径进行总结分析,提出了选用良种,合理轮作,减少病源,加强田间管理,化学药剂相结合的综合防治措施。

紫斑牡丹整形修剪技术及效应分析

紫斑牡丹在临夏地区栽培广泛,但人们对于紫斑牡丹整形修剪重视不够,也未系统掌握紫斑牡丹整形修剪的理论及方法,为改变这一现状,就紫斑牡丹整形修剪理论、方法及效应加以总结阐述。实践表明,通过整型修剪使紫斑牡丹维持均衡适量的枝条和美观匀称的株型,改善牡丹树体营养结构和通风透光性,从而达到紫斑牡丹花芽饱满、花大色艳、花期延长、产量提升的效果。

不同浓度0.2%苯丙烯菌酮微乳剂对高粱紫斑病的防效

为保障贵州省金沙产区红缨子糯高粱产业持续健康发展,开展0.2%苯丙烯菌酮ME 150 mL/667m^(2)、90 mL/667m^(2)、60 mL/667m^(2)3个浓度处理对高粱紫斑病的防效试验,筛选出金沙县防治高粱紫斑病的0.2%苯丙烯菌酮ME最佳浓度。结果表明:0.2%苯丙烯菌酮ME 150 mL/667m^(2)处理对高粱紫斑病的防治效果为79.02%,该处理的高粱产量为340.09 kg/667m^(2),但该处理防控成本投入较高,为240元/667m^(2)。0.2%苯丙烯菌酮ME 90 mL/667m^(2)处理对高粱紫斑病的防治效果为75.02%,高粱产量为338.86 kg/667m^(2),防控成本投入较低,为168元/667m^(2),新增纯收益最高,为195.55元/667m^(2)。综合考虑用药量、用药成本、防治效果和产量等因素,在生产中建议优先选用0.2%苯丙烯菌酮ME 90 mL/667m^(2)喷施防治。

紫斑牡丹花粉化学成分及其体外抗氧化活性

目的研究紫斑牡丹Paeonia rocki i(S.G.Haw&Lauener)T.Hong&J.J.Li花粉化学成分及其体外抗氧化活性。方法紫斑牡丹花粉70%乙醇提取物的正丁醇部位采用硅胶柱、反相硅胶C 18柱、ODS、聚酰胺、Sephadex LH-20进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用DPPH法评价其抗氧化活性。结果从中分离得到15个化合物,分别鉴定为柠檬黄素(1)、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、野漆树苷(3)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、柠檬黄素-3-β-D-葡萄糖苷(5)、limocitrin-3-O-y1-β-D-sophoroside(6)、柯伊利素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、白芍苷R1(8)、苯甲酰芍药苷(9)、白藜芦醇(10)、苯甲酸(11)、3-甲氧基-4-羟基苯甲酸(12)、没食子酸甲酯(13)、胡萝卜苷(14)、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(15)。化合物1~2、10、15的IC 50值均低于0.02 mg/L,化合物15的IC 50值小于抗环血酸,化合物2的IC 50值与抗环血酸相当。结论化合物2~4、7~10、12、15均为首次从该植物中分离得到。化合物1~7、10、12~13、15均表现出一定的体外抗氧化性。

15个油用紫斑牡丹品种核型及亲缘关系分析

为探明不同油牡丹品种的核型特征及亲缘关系,采用根尖压片法对15个不同花色油用紫斑牡丹品种进行核型分析,并作CV_(CL)-CV_(CI)散点图及核型似近系数聚类分析。结果表明,不考虑随体共两种核型公式:2n=2x=10=6m+2sm+2st,2n=2x=10=8m+2st,染色体数目均为10条,核型均为2A型;15个紫斑牡丹品种都有随体,主要在第1,2,4,5对染色体上,核型进化程度较原始。“世纪巨星”与“北极光”的亲缘关系最近,“燕尾白”与“红莲”的亲缘关系最远,CV_(CL)-CV_(CI)散点图中15个紫斑牡丹品种分布在4个区域;当核型似近系数为0.9909时,15个紫斑牡丹品种聚为四类,除“灰鹤”和“紫楼藏玉”聚为一类外,其他三类聚类结果与CV_(CL)-CV_(CI)散点图结果相同。15种不同花色紫斑牡丹核型不同,亲缘关系较近,进化程度和亲缘关系与花色、花型不存在相关性。

紫斑牡丹花粉复合酶解破壁工艺的研究

目的:研究紫斑牡丹花粉酶解破壁工艺。方法:通过单因素试验确定纤维素酶—果胶酶—木聚糖酶3种酶制剂的浓度。在单因素试验基础上,采用响应面分析法优化紫斑牡丹花粉酶解破壁工艺条件,研究酶解温度、酶解pH、酶解时间及液料比四个因素对酶解工艺条件的影响。结果:在纤维素酶浓度为5.0%、果胶酶浓度为1.0%、木聚糖酶浓度为1.0%的基础上,以紫斑牡丹花粉的破壁率为响应值,确定酶解破壁工艺的最佳条件为:酶解时间8h,酶解pH4.65,液料比18∶1(mL/g)和酶解温度52℃,在此条件下破壁率为81.8%。结论:优化得到牡丹花粉复合酶解破壁工艺,合理可行,相关研究结果为紫斑牡丹花粉的开发应用奠定基础。

榆中半干旱地区紫斑牡丹繁育技术

介绍了紫斑牡丹的繁殖技术研究背景,砧木的选择和培育,种子的采收和处理,紫斑牡丹嫁接时间、方法及修剪注意事项,嫁接苗的栽种和管理,为紫斑牡丹的生产繁育提供指导意见。

大蒜紫斑病生防菌的筛选、鉴定及其田间应用

大蒜紫斑病是江苏各产区大蒜生产中常见的病害之一,其造成巨大的经济损失。目前大蒜紫斑病的防治以化学防治为主,在生物防治研究方面则进展缓慢。为提高大蒜紫斑病生防水平,本研究通过筛选对大蒜紫斑病菌有拮抗作用的生防菌,从大蒜种植田土壤中分离得到了122株细菌菌株,其中对大蒜紫斑病菌有拮抗作用的菌株61株,进一步复筛得到12株拮抗能力较强菌株。依据形态学观察,并结合16S rRNA和rpoB基因序列分析,其中两株生防菌JS51和JS62鉴定为贝莱斯芽胞杆菌Bacillusvelezensis。盆栽试验和大田试验结果显示,菌株JS51和JS62对大蒜紫斑病有较好的防治效果,分别达到61.63%和55.05%,与化学药剂咪鲜胺锰盐的防效相当。

基于高通量测序分析高粱紫斑病叶片的微生物组成及多样性

本研究采用ITS高通量测序(扩增子测序)技术对已感染紫斑病(A和B)和未感染紫斑病(CK)的高粱叶片进行检测,以明确其真菌的群落组成及多样性。结果表明:高粱紫斑病病叶中真菌菌群组成丰富,总共检出820种真菌,3个样品共同拥有的为155种,所有菌群分属于9门29纲60目122科和206属。3份样品Shannon指数分别为3.98、4.67、4.11,按大小排序为B>CK>A。同时,含量排名靠前的属之间亲缘关系比较复杂,且没有出现前人报道的高粱尾孢Cercospora sorghi,可能的原因是引起该病害发生的病原菌发生了变化,或是存在由多种真菌共同作用从而导致病害发生的可能性。本研究结果能帮助我们更好地了解高粱紫斑病发病期叶片真菌的组成和分布的多样性,为该病害的研究和防治提供更好的指导作用。

基于专用目标的紫斑牡丹单株评价与筛选

以64株紫斑牡丹为试材,对22个性状进行测定,采用层次分析法建立科学合理的紫斑牡丹观赏评价体系和油用评价体系,筛选出适合观赏、油用和油观两用的单株,以期为紫斑牡丹的科学利用提供参考依据。结果表明:观赏评价体系中I级(优)花朵直立,长势旺盛,各性状表现优良,观赏评价值高,包括12株;Ⅱ级(良)有16株,整体性状良好,适合观赏;Ⅲ级(一般)包括22株,观赏价值较低;Ⅳ级(差)有14株,各性状表现较差,不建议使用。在油用评价体系中,Ⅰ级优良单株有效蓇葖果多,单株产量和含油率高,有10株;Ⅱ级较优单株包含11株,某项性状比较突出,选择性使用;Ⅲ级一般单株有27株,建议保守使用;Ⅳ级劣势植株有8株,综合得分低,不建议使用。最终得到7株油观两用牡丹,5株观赏价值较高牡丹和3株油用价值较高的紫斑牡丹,为高大型牡丹或油观两用牡丹新品种培育提供材料基础。该研究中构建的评价体系,基本能满足生活中对紫斑牡丹观赏和油用的要求,可以有效地指导紫斑牡丹在园林中的应用。