紫斑牡丹花粉对D-半乳糖致衰老模型小鼠的影响

目的探究紫斑牡丹花粉对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆力及氧化应激损伤的影响。方法60只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、紫斑牡丹花粉组(750、1500、3000 mg·kg^(-1)),采用颈背部皮下注射D-半乳糖(500 mg·kg^(-1)),制备亚急性衰老模型。Morris水迷宫评估小鼠学习记忆力;HE、DAPI染色评估肝、脑组织细胞损伤情况;ELISA法检测小鼠血清、肝脑组织内MDA、T-AOC、GSH-Px、SOD、CAT及γ-H2AX、SA-β-Gal水平。结果水迷宫实验结果表明,紫斑牡丹花粉能明显提高衰老小鼠的学习记忆力。组织染色结果表明,紫斑牡丹花粉对D-半乳糖致衰老小鼠肝脑组织细胞损伤具有保护作用,且高剂量组作用最为明显。ELISA结果显示,与模型组比较,紫斑牡丹花粉各剂量组的MDA、γ-H2AX、SA-β-Gal水平降低,T-AOC、GSH-Px、SOD、CAT水平升高。结论紫斑牡丹花粉能改善D-半乳糖致衰老模型小鼠的学习记忆力,提高衰老小鼠体内抗氧化酶活性和清除自由基、脂质过氧化物的能力,保护肝脑脏器组织细胞免受氧化损伤,提示其具有潜在的延缓衰老的作用。

紫斑牡丹花粉乙酸乙酯部位化学成分研究

对紫斑牡丹花粉的化学成分进行研究,综合运用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及制备型高效液相等色谱技术,从该花粉70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到18个化合物,其结构由HR-ESI-MS、1H和13 C NMR等波谱学方法鉴定为腺苷(1)、芹菜素(2)、柠檬黄素(3)、8-甲氧基山萘酚(4)、槲皮素(5)、柠檬素-3-β-D-葡萄糖苷(6)、sexangularetin-3-O-y1-β-D-sophoroside(7)、limocitrin-3-O-y1-β-D-sophoroside(8)、芍药苷(9)、芍药内酯苷(10)、氧化芍药苷(11)、β-谷甾醇(12)、没食子酸(13)、肉豆蔻酸(14)、亚油酸(15)、对羟基苯甲醛(16)、邻苯二甲酸二戊酯(17)和蔗糖(18),以上化合物均为首次从紫斑牡丹花粉中分离得到,其中化合物3、4、6为首次从该属植物中分离得到。

紫斑牡丹花粉不同浓度乙醇提取物抗氧化能力研究

目的评价紫斑牡丹花粉的不同浓度乙醇提取物的抗氧化能力。方法通过测定紫斑牡丹花粉不同浓度乙醇提取物的3种抗氧化能力(铜离子还原能力、DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力),对紫斑牡丹花粉不同浓度乙醇提取物的抗氧化性能进行评价。结果铜离子还原能力法测得紫斑牡丹花粉无水乙醇提取物、75%乙醇提取物、50%乙醇提取物、25%乙醇提取物和水提取物的抗氧化活性没食子酸量依次为26.00、28.33、28.90、14.98、9.24 mg/g;紫斑牡丹花粉不同浓度乙醇提取物的清除DPPH自由基和ABTS自由基能力均低于维生素C,其顺序依次为:50%乙醇提取物>75%乙醇提取物>无水乙醇提物>25%乙醇提取物>水提取物。结论紫斑牡丹花粉不同浓度乙醇提取物均具有较强的抗氧化能力,以50%、75%乙醇提物的抗氧化能力最强。

响应面法优化紫斑牡丹花粉总黄酮的提取工艺

目的:优选紫斑牡丹花粉中总黄酮的最佳提取工艺。方法:通过单因素试验遴选影响紫斑牡丹花粉总黄酮提取工艺的因素和水平,并采用Box-Behnken试验设计法,以总黄酮含量及其3种黄酮类化合物(槲皮素、木犀草素、异鼠李素)总含量的综合评分为评价指标,以乙醇浓度、料液比、提取时间为考察因素,利用响应面法对其总黄酮提取工艺进行优化。结果:优选得到的最佳提取工艺参数为:乙醇浓度73%,料液比1∶22 g/m L,回流提取2次,每次100 min;在此条件下,理论值与实际值接近,偏差为1.60%。结论:优选的紫斑牡丹花粉总黄酮的提取工艺合理可行。

紫斑牡丹花粉中异鼠李素的定性定量分析及总黄酮的含量测定

目的:建立甘肃紫斑牡丹花粉中异鼠李素的定性定量分析及总黄酮含量测定的方法。方法:采用薄层色谱法对紫斑牡丹花粉中异鼠李素进行定性鉴别;采用高效液相色谱法,以Agilent Eclipse plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为固定相,流动相:甲醇-乙腈-0.1%磷酸(25∶13∶62),流速:1.0 m L·min-1,在360 nm波长下,对紫斑牡丹花粉中异鼠李素的含量进行定量分析。采用紫外分光光度法,以芦丁为对照品,在510 nm波长下,对紫斑牡丹花粉中总黄酮含量进行测定。结果:薄层鉴别色谱特征斑点明显,重现性好;异鼠李素浓度在8.4~168.0μg·m L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率(n=9)为100.8%(RSD=2.36%),测得紫斑牡丹花粉中异鼠李素含量为3.21~8.91 mg·g^(-1)。总黄酮浓度在0.01~0.06 mg·m L-1范围内与吸收度呈良好的线性关系(r=0.9992),平均回收率(n=9)为101.06%(RSD=2.56%),测得紫斑牡丹花粉中总黄酮含量为9.44~15.96 mg·g^(-1)。结论:所建方法操作简单,准确可靠,重复性好,可用于甘肃紫斑牡丹花粉的质量控制。

紫斑牡丹花粉破壁工艺优化及其金属元素测定

[目的]优化紫斑牡丹花粉温差破壁工艺,并分析破壁前后10种金属元素的含量变化。[方法]根据Box-benhnken试验设计原理,以解冻温度、解冻时间、液料比为响应变量,以破壁率为响应值设计紫斑牡丹花粉温差破壁工艺,并采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)对紫斑牡丹花粉破壁前、破壁后10种金属元素的含量变化进行研究。[结果]最优破壁工艺为冷冻温度-150℃、冷冻时间24 h、液料比20∶1(mL∶g)、解冻时间7 h、解冻温度20℃,在此最优条件下得到牡丹花粉的平均破壁率为92.82%,经平行验证试验后,优化得到牡丹花粉温差破壁工艺,合理可行。花粉经冷冻破壁后,固体颗粒中的Mn、Zn、Sr、Fe、K、Mg、Ca等金属元素的含量均有所下降,有害元素Pb、As、Cd的含量很低,均低于检出限。[结论]该研究为紫斑牡丹花粉的深度开发和综合利用提供理论依据。

紫斑牡丹花粉复合酶解破壁工艺的研究

目的:研究紫斑牡丹花粉酶解破壁工艺。方法:通过单因素试验确定纤维素酶—果胶酶—木聚糖酶3种酶制剂的浓度。在单因素试验基础上,采用响应面分析法优化紫斑牡丹花粉酶解破壁工艺条件,研究酶解温度、酶解pH、酶解时间及液料比四个因素对酶解工艺条件的影响。结果:在纤维素酶浓度为5.0%、果胶酶浓度为1.0%、木聚糖酶浓度为1.0%的基础上,以紫斑牡丹花粉的破壁率为响应值,确定酶解破壁工艺的最佳条件为:酶解时间8h,酶解pH4.65,液料比18∶1(mL/g)和酶解温度52℃,在此条件下破壁率为81.8%。结论:优化得到牡丹花粉复合酶解破壁工艺,合理可行,相关研究结果为紫斑牡丹花粉的开发应用奠定基础。

HPLC同时测定紫斑牡丹花粉中槲皮素、木犀草素、异鼠李素的含量

目的建立同时测定紫斑牡丹花粉中3个黄酮类化合物槲皮素、木犀草素、异鼠李素含量的RP-HPLC。方法样品用25倍75%乙醇回流提取2 h,提取液加15%盐酸水解2.5 h;采用Agilent Eclipse plus C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-乙腈-0.1%磷酸(25∶13∶62)为流动相等度洗脱,流速:1.0 m L·min^(-1),检测波长:360 nm,柱温35℃。结果槲皮素、木犀草素和异鼠李素分别在1.3~26.0,0.7~14.0,8.4~168.0μg·m L^(-1)内呈良好的线性关系,相关系数均≥0.999 9;加样回收率(n=9)的RSD值分别为99.8%,100.3%,100.8%。结论该方法简单、高效,可作为紫斑牡丹花粉质量控制的参考。

紫斑牡丹花粉HPLC特征图谱及4个成分含量测定

目的:利用高效液相色谱法建立紫斑牡丹花粉的特征图谱,并测定不同产地紫斑牡丹花粉中氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、槲皮素4个成分的含量。方法:采用CAPCELL PAK-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.2%甲酸水(B)为流动相梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,检测波长274nm,柱温30℃;采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012年版)对13批牡丹花粉进行相似度分析,同时测定7批不同产地牡丹花粉中4个成分的含量。结果:13批紫斑牡丹花粉样品得到的指纹图谱相似度大于0.960,标定共有峰16个,并确定了其中4个色谱峰的归属。产自甘肃兰州、安徽亳州、山东菏泽的7批紫斑牡丹花粉样品中氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、槲皮素的含量分别在2.488~7.675、0~15.251、2.339~10.433、6.462~15.924 mg·g^-1之间。结论:HPLC指纹图谱结合定量测定能全面反映紫斑牡丹花粉内在质量,该方法简便可行,快速准确,可为其质量评价提供参考。