紫花牡荆素对脂多糖诱导的BEAS-2B细胞损伤和NF-κB-Keap1-Nrf2/ARE通路的影响

目的:探讨紫花牡荆素(CAS)对脂多糖诱导的人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)损伤和NF-κB-Keap1-Nrf2/ARE通路的影响。方法:利用不同浓度的CAS预处理BEAS-2B细胞1 h、2 h、4 h,用1μg/ml脂多糖处理BEAS-2B细胞,构建细胞损伤模型,ELISA检测细胞上清炎症因子含量,筛选CAS最适作用浓度和时间;再将细胞分为正常组、模型组、Casticin组、ML385组、Casticin+ML385组、地塞米松组;流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA检测细胞上清炎症因子的浓度,Western blot检测细胞NF-κB p65、p-NF-κB p65、Keap1、Nrf2以及细胞核中的Nrf2蛋白水平。结果:CAS最适作用条件为10μmol/L、2 h;与正常组相比,模型组的细胞凋亡率、炎症因子含量、p-NF-κB p65和Keap1蛋白表达水平显著升高(P<0.01),细胞和细胞核中Nrf2蛋白的表达水平显著降低(P<0.01);与模型组相比,Casticin组和地塞米松组的细胞凋亡率和炎症因子含量显著降低(P<0.01),Casticin组p-NF-κB p65和Keap1蛋白表达水平显著降低(P<0.01),细胞和细胞核中Nrf2蛋白的表达水平显著升高(P<0.01);与ML385组相比,Casticin+ML385组的细胞凋亡率,炎症因子含量,p-NF-κB p65和Keap1蛋白表达水平显著降低(P<0.01),细胞和细胞核中Nrf2蛋白的表达水平显著升高(P<0.01)。结论:CAS通过调节NF-κB-Keap1-Nrf2/ARE信号通路,抑制脂多糖诱导的细胞炎症。

紫花牡荆素对浅Ⅱ度烧伤大鼠创面愈合的影响及机制研究

目的基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探究紫花牡荆素(CAS)促进大鼠浅Ⅱ度烧伤创面愈合的作用机制。方法将大鼠随机分为对照组(生理盐水),模型组(5%羧甲基纤维素钠空白基质),CAS低、高剂量组(15 mL浓度为30、60 mmol/L的CAS药液),CAS高剂量+LY294002组[15 mL CAS药液(60 mmol/L)和PI3K抑制剂LY294002溶液(20μmmol/L)的混合溶液]和阳性对照组(厚涂京万红软膏0.5~1.0 cm),每组15只。除对照组外,其余各组均通过点燃皮肤表面混合烧伤燃料来构建浅Ⅱ度烧伤大鼠模型,并于烧伤后2 h内涂抹给药。给药28 d后,计算大鼠烧伤创面愈合率,观察大鼠烧伤创面中央组织病理变化,检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、血管内皮生长因子(VEGF)水平,检测大鼠烧伤组织中PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的磷酸化水平。结果与对照组比较,模型组大鼠皮肤组织表皮层和真皮浅层损伤、愈合状态较差,存在炎症细胞浸润且组织结构不完整等情况;血清中IL-6、IL-1β、TNF-α、MMP-2、MMP-9水平均显著升高(P<0.05),血清中VEGF水平和烧伤创面中央组织中PI3K、AKT、mTOR蛋白的磷酸化水平均显著降低(P<0.05);与模型组比较,CAS低、高剂量组大鼠上述病理变化及血清和烧伤创面中央组织中上述指标水平均显著逆转(P<0.05),且CAS高剂量组上述指标的变化较CAS低剂量组更明显(P<0.05);PI3K抑制剂LY294002的加入可逆转CAS对大鼠浅Ⅱ度烧伤创面愈合的促进作用(P<0.05)。结论CAS可促进大鼠浅Ⅱ度烧伤创面的愈合,其作用机制可能与激活PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

紫花牡荆素抗肿瘤作用机制的研究进展

多甲氧基黄酮类化合物紫花牡荆素是中国传统中草药蔓荆子的主要活性成分之一,具有抗炎、抗肿瘤等功效。本文归纳总结紫花牡荆素抗肿瘤作用机制的研究进展,以期为紫花牡荆素抗肿瘤的进一步开发利用提供一定参考。

紫花牡荆素调控PI3K/AKT通路对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究紫花牡荆素调控磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:肝癌细胞株HepG2、Hep3B经过培养并分为对照组、不同浓度紫花牡荆素(10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)组、溶剂对照(体积分数0.1%的DMSO)组、溶剂+40μmol/L紫花牡荆素组、AKT激动剂SC-79(5μmol/L)+40μmol/L紫花牡荆素组。分组处理48 h后,检测细胞活力、细胞克隆数、细胞凋亡率及B淋巴细胞瘤基因(Bcl-2)、细胞色素C(CytC)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解型caspase-3(Cleaved caspase-3)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化AKT(p-AKT)的表达水平。结果:10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L紫花牡荆素以浓度依赖的方式降低HepG2、Hep3B的细胞活力;40μmol/L紫花牡荆素组HepG2、Hep3B的细胞克隆数及Bcl-2、CytC、p-PI3K、p-AKT的表达水平均低于对照组,Bax、Cleaved caspase-3的表达水平高于对照组(P<0.05);AKT激动剂SC-79削弱40μmol/L紫花牡荆素对HepG2、Hep3B的调控作用。结论:紫花牡荆素通过抑制PI3K/AKT通路抑制肝癌细胞增殖。

紫花牡荆素通过上调miR-342-3p抑制宫颈癌HeLa细胞糖酵解

目的:探讨紫花牡荆素对宫颈癌HeLa细胞miR-342-3p表达和糖酵解的影响,验证紫花牡荆素是否通过上调miR-342-3p表达抑制宫颈癌HeLa细胞糖酵解。方法:使用不同浓度(0,10,30,100 nmol/L)的紫花牡荆素处理HeLa细胞,采用紫花牡荆素(30 nmol/L)联合miR-342-3p模拟物或抑制物转染HeLa细胞,随后用实时荧光定量PCR分析HeLa细胞miR-342-3p的表达水平,通过测定相对葡萄糖消耗量和相对乳酸产物,分析紫花牡荆素及紫花牡荆素联合miR-342-3p模拟物或抑制物转染对宫颈癌HeLa细胞糖酵解的影响。结果:紫花牡荆素以浓度依赖方式上调HeLa细胞miR-342-3p表达水平,同时降低HeLa细胞的葡萄糖消耗量和抑制乳酸产生。此外,miR-342-3p模拟物协同紫花牡荆素抑制HeLa细胞的葡萄糖消耗和乳酸产生;相反miR-342-3p抑制物减弱紫花牡荆素上调miR-342-3p表达水平的作用和减弱紫花牡荆素抑制HeLa细胞的葡萄糖消耗和乳酸产生作用。结论:紫花牡荆素通过上调miR-342-3p表达水平抑制HeLa细胞糖酵解。

紫花牡荆素通过miR-148a-3p/Wnt1信号通路抑制肝癌MHCC97H细胞的迁移和侵袭

目的用紫花牡荆素(casticin,CAS)处理MHCC97H细胞,观察其迁移和侵袭能力的变化,并初步探讨CAS的分子作用机制。方法CCK-8试剂盒检测不同浓度CAS对MHCC97H细胞活力的影响;分组开展细胞迁移和侵袭实验,评估MHCC97H细胞的迁移和侵袭能力;逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CAS处理后,MHCC97H细胞的miR-148a-3p和Wnt1 mRNA表达变化;迁移侵袭相关蛋白(MMP2、MMP9)和Wnt1蛋白表达量采用Western blot检测;Dual-Luciferase报告基因检测miR-148a-3p与Wnt13′-UTR的结合情况。结果CAS明显抑制MHCC97H细胞的生存活力,其对这种细胞的IC_(50)约为10.0μmol·L^(-1),亚细胞毒浓度的CAS(3.0μmol·L^(-1))可减弱这种细胞的迁移和侵袭能力;miR-148a-3p mimic或CAS均能抑制MHCC97H细胞迁移和侵袭能力,且两者联合处理后的抑制作用强于单独使用;过表达Wnt1能有效减弱CAS的抑制作用;CAS能明显上调MHCC97H细胞miR-148a-3p表达,同时Wnt1、MMP2和MMP9的表达呈现下降;Dual-Luciferase报告基因发现,miR-148a-3p可以直接靶向Wnt13′-UTR。结论CAS可通过miR-148a-3p/Wnt1信号通路减弱肝癌细胞的迁移和侵袭。

紫花牡荆素体内抗炎作用的研究(英文)

目的:探讨中药蔓荆子中主要成分紫花牡荆素的抗炎作用。方法:通过急性抗炎模型——二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验、鸡蛋清致大鼠足跖肿胀实验以及腹腔注射0.7%醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的实验,观察紫花牡荆素的抗炎作用。结果:紫花牡荆素对二甲苯所致小鼠耳廊肿胀、鸡蛋清所致大鼠足肿胀以及醋酸所致小鼠毛细血管通透性增加均有明显的抑制作用。结论:紫花牡荆素具有明显的体内抗炎作用,为蔓荆子抗炎作用的有效成分。

紫花牡荆素体外抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖的研究

背景与目的:紫花牡荆素(Casticin)是一种从蔓荆子中提取的具有广泛药理活性的多甲基黄酮化合物。有研究表明Casticin能诱导多种肿瘤细胞凋亡,但其对人宫颈癌细胞的作用尚缺乏文献资料。本研究旨在探讨Casticin抑制体外培养人宫颈癌HeLa细胞增殖作用及其机制。方法:MTT法检测Casticin对人宫颈癌HeLa细胞活性的抑制作用;平皿集落形成法检测Casticin对HeLa细胞集落形成率的影响;流式细胞术(FCM)检测Casticin对HeLa细胞周期的影响;采用Western blot分析蛋白表达的变化。结果:Casticin对人宫颈癌HeLa细胞增殖活性有较强的抑制作用,呈剂量和时间依赖性,作用48h的IC50值为2.82μg/mL;与对照组比较,细胞集落形成率明显下降(P<0.05);Casticin作用48h,以浓度依赖方式阻滞HeLa细胞于G2/M期,同时降低CyclinB1蛋白表达,增高P21蛋白表达。结论:Casticin抑制HeLa细胞的增殖作用可能与其降低CyclinB1蛋白表达、活化P21蛋白有关。

紫花牡荆素对肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨紫花牡荆素对肺癌A549细胞（简称肺癌细胞）增殖及凋亡的影响,为其用于临床治疗肺癌提供依据。方法取对数生长期的肺癌细胞,分别加入终浓度为0.1、0.5、1、5、10、25、50、100μmol/L紫花牡荆素溶液,分别作用24、48 h,采用SRB法检测增殖抑制率,计算50%抑制浓度（IC50）。取对数生长期的肺癌细胞,分别加入最终浓度为0、5、15μmol/L紫花牡荆素溶液,Hoechst33258染色后共聚焦显微镜下观察细胞凋亡形态;采用流式细胞术检测细胞周期时相分布。结果随紫花牡荆素浓度升高,作用24、48 h的肺癌细胞增殖抑制率均呈上升趋势。经0.5～100μmol/L紫花牡荆素作用48 h的肺癌细胞增殖抑制率均明显高于同一浓度作用24 h的肺癌细胞（P均〈0.05）。紫花牡荆素作用24、48 h时的IC50分别为14.74、8.16μmol/L。随紫花牡荆素浓度升高,作用24 h的肺癌细胞核染色质固缩偏向一边、核裂解和细胞碎片等细胞凋亡形态学改变越来越明显;与同浓度紫花牡荆素作用24 h比较,作用48 h的肺癌细胞凋亡形态学改变更明显。经0、5、15μmol/L紫花牡荆素作用24、48 h的肺癌细胞凋亡率均逐渐升高,处于G1、S期的比例均逐渐降低,处于G2/M期的比例均逐渐升高（P均〈0.05）。与同一浓度紫花牡荆素作用24 h的肺癌细胞比较,经5、15μmol/L紫花牡荆素作用48 h的肺癌细胞凋亡率均升高,处于G1、S期的比例均降低,处于G2/M期的比例均升高（P均〈0.05）。结论紫花牡荆素可将肺癌细胞阻滞于G2/M期,具有增殖抑制作用和凋亡促进作用,并呈时间、浓度依赖性。

紫花牡荆素对佐剂性关节炎小鼠足肿胀度和细胞因子的影响

目的研究紫花牡荆素对佐剂性关节炎小鼠血浆炎症相关细胞因子的作用及其与足跖肿胀度的相关性。方法 36只Bal b/c小鼠,随机分为6组:空白对照组、模型组、阳性药物组、紫花牡荆素12.5,25.0和50.0mg·kg^(-1)剂量组;小鼠右足垫皮内注射弗氏完全佐剂后连续灌胃给药12d,每日1次。第13天测量小鼠后足爪的肿胀度,第14天采血,用流式细胞仪的微球阵列(CBA)法检测佐剂性关节炎小鼠外周血中的致炎性细胞因子(IL-2、IFN-γ和TNF-α)和抗炎性细胞因子(IL-4和IL-5)的水平。结果紫花牡荆素可剂量依赖性地抑制Bal b/c小鼠后足爪的肿胀度;明显降低致炎性Th1细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平,显著提高抗炎性Th2细胞因子IL-4和IL-5的水平;小鼠后足爪肿胀度与血清细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平呈正相关,与IL-4和IL-5的水平呈负相关。结论紫花牡荆素改善佐剂性关节炎小鼠足跖肿胀度,可能是通过增加血液IL-4和IL-5含量,降低IL-2、IFN-γ和TNF-α含量,调节细胞因子平衡的结果。

紫花牡荆素体外抑制人卵巢癌HO-8910细胞增殖和诱导凋亡的研究

目的:探讨紫花牡荆素(casticin)体外抑制人卵巢癌HO-8910细胞增殖和诱导凋亡的效应及其机制。方法:MTT法检测casticin对人卵巢癌HO-8910细胞增殖的抑制;Hoechest33258染色观察细胞凋亡形态学改变;流式细胞术(FCM)检测casticin处理HO-8910细胞的凋亡率;Western blotting分析caspase-3、CyclinB1、p21蛋白表达变化。结果:casticin对人卵巢癌HO-8910细胞增殖有较强的抑制作用,呈剂量和时间依赖性。经casticin作用48h后HO-8910细胞表现出典型的凋亡形态特征,并剂量依赖性地增加亚二倍峰,降低CyclinB1蛋白表达,增高caspase-3和p21表达。结论:casticin通过降低CyclinB1表达、活化p21和caspase-3抑制HO-8910细胞增殖并诱导凋亡。

蔓荆子中紫花牡荆素和对羟基苯甲酸的吸附薄层色谱分析

本文用吸附薄层色谱分析分离蔓荆子时,优化了展开剂,结合薄层扫描仪,建立了系统定量测定蔓荆子中紫花牡荆素和对羟基苯甲酸的分析方法,回收率试验满意。

紫花牡荆素抑制FOXM1诱导乳腺癌细胞凋亡的研究

背景与目的:紫花牡荆素分离自传统中草药蔓荆子,具有广泛的抗肿瘤活性。转录因子FOXM1在多种肿瘤中高表达,对肿瘤发生发展具有重要影响。本研究旨在探讨紫花牡荆素诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及其作用机制是否涉及FOXM1。方法:碘化丙啶(Propidium iodide,PI)流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测经不同浓度紫花牡荆素处理的体外培养MDA-MB-231细胞的凋亡率。免疫酶联试验(ELISA)测定细胞组蛋白/DNA碎片水平。DNA琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡梯形条带图谱。蛋白质印迹法(Western blot)分析细胞FOXM1和Survivin蛋白表达。结果:紫花牡荆素以浓度依赖的方式(0、0.1、0.5和1.0μmol/L)增加MDA-MB-231细胞凋亡率[(4.36±0.12)%、(6.37±0.28)%、(11.30±0.62)%和(34.50±0.85)%]和增高细胞组蛋白/DNA碎片水平。紫花牡荆素处理MDA-MB-231细胞基因DNA琼脂糖电泳图谱呈现典型凋亡"梯型条带",Western blot检测结果显示,紫花牡荆素以浓度依赖方式下调FOXM1和Survivin蛋白表达。结论:紫花牡荆素能有效诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞细胞凋亡,其作用机制涉及下调FOXM1和Survivin表达。

紫花牡荆素抗肿瘤作用及其作用机制

多甲氧基黄酮类化合物紫花牡荆素是中国传统中草药蔓荆子的主要活性成分之一,具有抗炎、抗肿瘤等功效。本文对紫花牡荆素的来源、构效关系、抗肿瘤作用及其作用机制等的研究进展进行总结,以期为紫花牡荆素抗肿瘤作用机制的深入研究和临床开发应用提供参考。

紫花牡荆素诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的研究

目的研究紫花牡荆素(Casticin)对肝癌HepG2细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用,并探讨其作用机制。方法用终浓度为0、0.5、1.0及2.0μmol/L的Casticin作用于HepG2细胞,于12、24及48h后采用MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst33342核染色,观察细胞形态学变化;24h后收集各组肝癌HepG2细胞,流式细胞术检测细胞周期及凋亡率;RT-PCR检测survivinmRNA表达。结果 MTT法检测显示,Casticin对肝癌HepG2细胞有增殖抑制作用,并存在浓度和时间依赖关系;Hoechst33342染色后,可见核染色质凝集,凋亡细胞呈致密浓染。与对照组相比,Casticin处理后凋亡细胞比例增加。Casticin作用24h后,细胞被阻滞于G2/M期,随药物质量浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加。RT-PCR结果显示,Casticin下调肝癌HepG2细胞sur-vivinmRNA表达。结论 Casticin在体外对肝癌HepG2细胞有明显的增殖抑制和凋亡诱导作用,初步推断Casticin诱发肝癌细胞凋亡的作用与其对survivin基因表达的抑制有关。

紫花牡荆素对宫颈癌HeLa细胞凋亡及DAPK基因甲基化的影响

目的探讨紫花牡荆素(casticin)对人宫颈癌HeLa细胞的凋亡和DAPK基因甲基化以及DAPK蛋白表达的影响。方法用不同浓度的casticin处理体外培养的HeLa细胞;AnnexinV-PI染色流式细胞术定量分析细胞凋亡率;DNA琼脂糖凝胶电泳法观察细胞DNA断裂;基因甲基化特异性PCR检测DAPK基因甲基化状态;Western blotting检测DAPK蛋白表达。结果 casticin可以浓度依赖性的方式有效诱导HeLa细胞凋亡;casticin作用于宫颈癌HeLa细胞48小时后,DAPK基因甲基化程度显著降低;casticin以浓度依赖的方式上调DAPK蛋白表达。结论 casticin可能通过使DAPK基因去甲基化上调DAPK蛋白的表达,进而诱导HeLa细胞凋亡。

紫花牡荆素对人卵巢癌HO-8910细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的研究紫花牡荆素(Casticin)对人卵巢癌HO-8910细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法建立人卵巢癌HO-8910细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成5组,每组3只:生理盐水组、多西紫杉醇组(0.5mg/kg)、低剂量Casticin组(5mg/kg)、中剂量Casticin组(10mg/kg)和高剂量Casticin组(20mg/kg)。观察各组裸鼠移植瘤生长情况和裸鼠体重的变化;观察裸鼠血清乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、肌酐值和外周血白细胞计数的变化;FCM测定瘤组织细胞凋亡率;Western Blot分析瘤组织细胞凋亡的分子生物学机制。结果 Casticin对移植瘤生长有明显抑制作用,呈剂量和时间依赖性;而对裸鼠体重、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酐值和外周血白细胞计数均无影响。经Casticin作用16d,裸鼠移植瘤细胞表现出剂量依赖性增加的亚二倍峰,Bcl-2蛋白表达降低,caspase-3蛋白表达增高。结论 Casticin具有抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的作用,并通过降低Bcl-2蛋白表达,活化Caspase-3蛋白表达诱导瘤组织细胞凋亡。

紫花牡荆素对肝癌细胞凋亡的影响及其机制研究

目的研究紫花牡荆素(casticin)诱导肝癌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法体外培养人肝癌PLC/PRF/5和HepG2细胞系。通过碘化丙啶(PI)染色流式细胞术分析细胞凋亡率,ELISA法检测组蛋白/DNA碎片的含量,琼脂糖凝胶电泳观察DNA断裂条带,Western blotting检测细胞内DR4和DR5蛋白表达水平。结果 Casticin以浓度依赖方式增加PLC/PRF/5和HepG2细胞系sub-G1细胞的百分率和组蛋白/DNA片段的含量(P<0.05),casticin(30μmol·L-1)作用细胞24h后可出现DNA梯度条带;casticin可以浓度依赖性方式诱导PLC/PRF/5内DR5蛋白水平的表达,但对DR4蛋白表达无影响;DR5/Fc嵌合蛋白预处理能有效降低casticin诱导的细胞凋亡。结论 Casticin可以浓度依赖性方式诱导肝癌细胞凋亡,其机制可能与上调细胞的DR5蛋白表达有关。

紫花牡荆素诱导食管癌细胞凋亡的分子机制

目的观察紫花牡荆素对食管癌(esophagus carcinoma,EC)细胞增殖能力的影响并探讨其分子机制。方法以噻唑蓝比色法与侵袭实验检测不同浓度紫花牡荆素处理对食管癌细胞株EC9706与EC109细胞增殖能力的影响,流式细胞术定量分析细胞凋亡率,Western blotting检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(B-cell lymphoma-2 associated X protein,BAX)、活化型Caspase-3及血管内皮生长因子(vascular endo-thelial growth factor,VEGF)表达变化。结果不同浓度紫花牡荆素处理显著抑制EC9706与EC109细胞增殖水平并诱导细胞凋亡,同未加药(0μmol/L)组比较差异均有统计学意义(P<0.05);紫花牡荆素处理可以上调BAX与Caspase-3表达水平,下调VEGF表达水平。结论紫花牡荆素处理后导致BAX和活化型Caspase-3表达上调、VEGF表达下调可能是其抑制食管癌细胞增殖并诱导细胞凋亡的重要分子机制。