纤维蛋白胶与兔角膜3种细胞构建组织工程细胞片研究

目的:观察兔角膜3种细胞能否在体外构建的纤维蛋白胶体上良好生长,探讨纤维蛋白胶作为组织工程细胞片支架材料的可行性。方法:将培养扩增的兔角膜3种细胞分别接种于纤维蛋白胶表面,采用倒置显微镜,HE染色和扫描电子显微镜,观察兔角膜3种细胞在纤维蛋白胶表面生长情况。结果:制备的薄层纤维蛋白胶支架光滑、透明,随培养细胞的生长部分降解,可获得仅带少量纤维蛋白胶的细胞片。角膜3种细胞在纤维蛋白胶表面生长良好,可保持生理状态的细胞形态。角膜上皮细胞可形成单层和复层,细胞间连接紧密。角膜内皮细胞呈圆形或多角形,细胞大小一致,排列紧密。角膜基质细胞拉长生长,呈三角形或树枝状,细胞间连接明显,可形成网状连接。结论:体外构建的纤维蛋白胶与角膜3种细胞有组织相容性,纤维蛋白胶有望作为角膜3种细胞的生长载体构建可供移植的组织工程细胞片。

浓缩自体骨髓复合纤维蛋白胶修复兔桡骨陈旧性骨缺损

目的采用浓缩自体骨髓复合纤维蛋白胶修复陈旧性骨缺损,初步探讨其促进成骨的机制。方法将36只新西兰大白兔随机平均分为3组:单纯纤维蛋白胶组(A组),纤维蛋白胶复合自体骨髓组(B组),纤维蛋白胶复合浓缩自体骨髓组(C组)。每只动物均在左侧桡骨中段制造长1.5 cm的段缺性骨与骨膜缺损,1个月后在骨缺损处分别植入3种方法制备的组织工程复合材料。取浓缩骨髓、纤维蛋白胶复合物行电镜观察、长期培养及细菌学培养。术后4、8、12周行X线检查、硬组织切片观察成骨效果,并行半定量分析。结果电镜下可见骨髓有核细胞与纤维蛋白胶相容性良好,无细菌污染,长期培养无致瘤性。X线观察显示B组和C组的修复效果明显高于A组。术后8、12周,C组的Yang氏评分分别为(9.348±0.364)和(12.664±0.388)分,明显高于B组的(7.984±0.229)(F=40.167,P=0.001)和(10.584±0.836)分(F=20.3647,P=0.004)。B组(F=36.004,P=0.001)和C组(F=155.141,P=0.000)术后12周的Yang氏评分均明显高于术后8周。随着时间的延长,组织学切片见B组和C组均有不同程度的骨缺损修复。结论自体骨髓或浓缩自体骨髓复合纤维蛋白胶可修复兔桡骨陈旧性骨缺损,单纯纤维蛋白胶无此作用。

肝癌术中丝裂霉素纤维蛋白胶局部缓释化疗的应用效果研究

目的探讨肝癌术中丝裂霉素纤维蛋白胶局部缓释化疗的应用效果。方法选取2007年7月—2009年6月我院收治的具有手术指征的肝癌患者30例,随机分为观察组和对照组,每组15例。对照组患者行单纯手术治疗,观察组患者在瘤体切除后的手术创面喷涂丝裂霉素纤维蛋白胶2.5 ml进行局部缓释化疗。观察两组患者术前及术后1个月、3个月、6个月、1年肝功能指标,血清甲胎蛋白(AFP)水平及凝血酶原时间(PT);记录两组患者中位无瘤生存期,计算1、2、3年无瘤生存率;建立Cox风险回归模型分析肝癌术后复发的影响因素。结果两组患者术前肝功能指标、血清AFP水平及PT比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组术后1个月、3个月、6个月、1年血清AFP水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),两组肝功能指标、PT比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组中位无瘤生存期为15.5个月〔95%CI(13.9,17.6)〕,观察组为21.3个月〔95%CI(2.4,28.2)〕,两组比较差异有统计学意义(χ2=6.190,P<0.05);对照组1、2、3年无瘤生存率分别为62.2%、40.4%及12.7%,观察组分别为81.3%、54.6%及30.7%,两组比较差异均有统计学意义(χ2值分别为4.013、4.267、4.826,P<0.05)。Cox风险回归模型显示,术中缓释化疗、肿瘤结节数目对Cox风险回归模型的影响有统计学意义(P<0.05)。结论肝癌术中应用丝裂霉素纤维蛋白胶局部缓释化疗可明显延长患者无瘤生存期,降低术后血清AFP水平,对肝功能无明显影响。

以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料修复犬桡骨骨缺损的实验研究

目的了解以纤维蛋白胶(FS)为载体的注射型骨修复材料对犬桡骨节段性缺损的修复作用。方法18只成年健康家犬随机均分为实验组b(FS+bFGF+bBMP)、实验组r(FS+bFGF+rhBMP-2)和对照组(FS),制成右侧桡骨中上段2.0cm骨缺损实验模型,然后严密缝合皮下组织及皮肤,将实验材料经伤口周围正常皮肤注射到骨缺损处,于术后4、8、12、16、20、24周进行放射学检查,术后24周进行组织学和骨密度检查,研究其成骨效应。结果实验组b和实验组r骨缺损区在成骨活跃程度、骨密度和再生髓腔结构等方面均显著优于对照组(P<0.01),骨缺损得到了成功修复。结论以FS为载体复合BMP和bFGF的注射型骨修复材料具有高效的骨修复能力,对犬的骨缺损有良好的修复作用。

阿霉素-纤维蛋白胶缓释化疗系统的实验研究

目的探讨医用纤维蛋白胶携载阿霉素(Adriamycin,ADM)的缓释作用。方法体外实验:用纤维蛋白胶(FG)携载ADM,观察ADM体外缓释情况;体内实验:将其注入兔体内,定时采取外周血作为样本,测试样本中的ADM质量浓度,计算外周血中ADM的动力学参数。结果体外释放实验显示,2h后ADM的累积释放率为(30.53±0.56)%,24h后为(42.16±0.86)%,120h后释放趋于平衡。动物实验表明:外周血峰质量浓度(ρmax)实验组显著低于对照组,差异有显著性意义(P<0.01);外周血T1/2和曲线下面积(AUC)实验组均明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.01)。结论在体内外条件下,ADM在生物蛋白胶中均有良好的缓释作用。在兔子肝脏局部使用本制剂,可延长ADM在肝脏的滞留时间,降低其在外周血中的质量浓度。

金葡液以纤维蛋白胶为载体修复大鼠颅骨缺损

目的初步探讨金葡液以纤维蛋白胶为载体修复骨缺损的可行性。方法选用Wistar大鼠30只在颅顶骨两侧对称各制造直径为5 mm的圆形骨缺损模型后分为实验组、对照组及空白组,将纤维蛋白胶-金葡液复合物植入骨缺损处作为实验组,单纯纤维蛋白胶植入作为对照组,空白组不植入任何物质。于术后4,6周行大体观察,X线拍片,组织学检查,修复骨灰重与湿重测定。结果术后4,6周,X线片显示实验组缺损区的成骨面积百分比明显大于对照组及空白组,三组两两比较差异均有统计学意义(P<0.01);术后6周,组织学检查,实验组骨缺损内可见纤维蛋白胶已完全吸收,缺损已骨性愈合,对照组缺损内纤维蛋白胶已降解吸收,缺损边缘有大量新生骨质,空白组缺损边缘亦可见到少量新生骨质,其他部分为致密纤维结缔组织覆盖;修复骨湿重/灰重比值低于对照组与空白组,三组比值两两比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论金葡液以纤维蛋白胶为载体修复骨缺损是可行的,能减少金葡液局部注射的缺陷,提高其药物疗效。

Z形皮瓣与纤维蛋白胶联合应用预防乳腺癌术后皮下积液

目的探讨Z形皮瓣联合纤维蛋白胶对乳腺癌术后皮下积液的预防作用。方法观察组74例,采用Z形皮瓣,术中创面喷洒纤维蛋白胶;对照组36例,采用传统纵形切口,创面不喷洒纤维蛋白胶,腋窝常规放置引流管3～4 d。结果观察组术后皮下积液、患侧上肢水肿发生率为1.4%,明显低于对照组的11.1%（P〈0.05）。观察组术后患侧上肢功能受限发生率为0%,明显低于对照组的22.2%（P〈0.05）。结论Z形皮瓣联合纤维蛋白胶创面喷洒有利于乳腺癌术后皮下积液的预防。

丝裂霉素纤维蛋白胶凝胶瘤内注射治疗裸鼠肝癌

目的探讨丝裂霉素纤维蛋白胶凝胶(MMC-FG)瘤内注射对裸鼠肝癌的治疗效果,为其临床应用提供实验依据。方法 30只成功建模的皮下荷肝癌裸鼠随机分成5组,分别是瘤内注射MMC-FG组(A组)、腹腔内注射MMC-FG组(B组)、瘤内注射丝裂霉素MMC组(C组)、瘤内注射FG组(D组)、瘤内注射生理盐水组(E组)。给药后观察裸鼠肿瘤生长情况,称取肿瘤重量并计算瘤重抑制率,检测裸鼠外周血液白细胞(WBC)及血小板(PLT)。另50只荷肝癌裸鼠随机分成上述5组,同法给药后观察各组裸鼠的生存时间。结果 A组裸鼠肿瘤体积增长最缓慢,瘤重抑制率为53.40%,肿瘤重量明显低于其他组(P<0.05)。C组裸鼠外周血液WBC及PLT检测低于A组(P<0.05),与B、D组及E组均无明显差异(P>0.05)。A组裸鼠的生存时间长于其他组(P<0.05)。结论瘤内注射MMC-FG可有效抑制肿瘤生长,减小MMC的不良反应,延长裸鼠生存时间,是一种有效、安全、简便的化疗方法。

纤维蛋白胶为载体构建人羊膜上皮细胞植片的实验研究

目的:探讨利用纤维蛋白胶作为支架构建组织工程人羊膜上皮细胞(HAECs)植片重建眼表的可行性。方法:取足月剖宫产胎盘羊膜,经胶原酶和胰蛋白酶消化后,获得HAECs。在体外构建的纤维蛋白胶片上培养HAECs,细胞融合成片后,利用气液界面复层化,采用倒置显微镜、组织切片、HE染色、细胞角蛋白免疫组织化学染色和扫描电子显微镜观察HAECs的生长情况。结果:HAECs在纤维蛋白胶表面生长良好,细胞呈圆形或多角形,长满后呈上皮细胞特有的铺路石样外观,扫描电镜观察细胞表面有丰富的微绒毛,细胞广谱角蛋白单克隆抗体染色阳性。细胞有复层生长趋势,植片较为透明。结论:以纤维蛋白胶为载体构建组织工程人HAECs植片,具有眼表重建的潜在运用价值。

重组人类骨形态发生蛋白2复合纤维蛋白凝胶与血管内皮生长因子进行的脊柱融合

背景:骨形态发生蛋白2具有骨诱导作用,血管内皮生长因子对骨形成及修复起正性调节作用,那么二者用于骨融合的效果如何呢?目的:观察重组人类血管内皮生长因子165和重组人类骨形态发生蛋白2复合纤维蛋白凝胶进行脊柱横突间融合的效果。方法:将30只日本大耳白兔随机分3组,每组10只,实验组于L5-6横突间置入重组人类血管内皮生长因子165/重组人类骨形态发生蛋白2/纤维蛋白凝胶复合材料,对照组于L5-6横突间置入重组人类骨形态发生蛋白2/纤维蛋白凝胶复合材料,空白对照组于L5-6横突间置入纤维蛋白凝胶材料。置入后6周,进行影像学、生物力学与组织学检查。结果与结论:实验组、对照组横突间成骨融合,且实验组成骨效果优于对照组,空白对照组无成骨。实验组成骨融合强度高于对照组(P<0.01)。实验组成骨融合标本可见大量软骨细胞、骨细胞、成熟骨组织与胶原组织,对照组成骨融合标本可见大量软骨细胞、骨细胞及骨组织。结果表明,重组人类血管内皮生长因子165和重组人类骨形态发生蛋白2联合应用有助于促进成骨融合。

纤维蛋白胶和自制负压瓶在乳腺癌手术中的应用

乳腺癌根治术后常发生皮下积液、淋巴漏、皮瓣坏死等并发症，导致切口延期愈合。为减少并发症的发生，促进切口愈合，2003—2006年我们在乳腺癌改良根治术52例病人中，应用纤维蛋白胶喷洒创面和自制负压瓶引流的方法．取得显著效果。现报道如下。

人脂肪来源干细胞复合纤维蛋白胶构建可注射型工程化脂肪组织的实验研究

目的探讨构建可注射型组织工程化脂肪组织的可行性，为临床修复软组织缺损寻求简便、微创的方法。方法采用酶消化法从人脂肪抽吸术的抽吸物中脂质部分获取人脂肪来源干细胞（ASC），以经成脂诱导和未经成脂诱导的ASC作为种子细胞，行DiI体外荧光标记后，分别以1×10^7个／ml细胞密度与纤维蛋白胶可注射支架复合。取6只裸鼠，将成脂诱导ASC-支架复合物注射于其背部左下方皮下（诱导组），未诱导ASC-支架复合物注射于背部右下方皮下（未诱导组），不加细胞的纤维蛋白胶注射于颈部正中皮下（空白支架组），每点注射0．2ml。第12周末处死裸鼠取出移植物，通过大体观察、湿重测定、常规组织病理学检测、油红O染色和DiI荧光标记检测判断体内成脂能力。结果诱导组和未诱导组均获得了外观类似脂肪组织的新生物，新生物湿重分别为（28±15）、（22±16）mg（t=23．238，P〈0．01）。诱导组新生物常规组织病理学检查及油红O染色均证实为成熟脂肪组织，DiI荧光标记呈阳性，证实为外源性ASC；未诱导组新生物中见少量成熟脂肪组织，大部分为纤维样结构；空白对照组未见新生组织形成。结论从人吸脂术抽吸物脂质部分提取的ASC能作为种子细胞，经成脂诱导后与纤维蛋白胶可注射支架复合，可在体内成功构建成熟脂肪组织。

脊柱膜与生物蛋白胶联合应用预防硬膜外粘连的实验研究

目的观察椎板切除术后联合使用脊柱膜与生物蛋白胶预防硬膜外粘连的效果,探讨从三维上预防粘连的最佳方案。方法本课题采用动物实验,运用拉丁方实验设计,分别做无植入(A组),植入生物蛋白胶(B组),脊柱膜(C组),脊柱膜和生物蛋白胶(D)于兔的4个节段,术后4周对椎板切除部位进行大体观察、组织学观察及MR I检查,比较各组瘢痕形成和粘连情况。结果①A组可见大量瘢痕组织增生,以硬膜囊后方明显,粘连严重。②B组防粘连的效果差。③C组的防粘连的效果优于A组和B组,但差于D组。④D组,不但能够防止后方肌肉及疤痕组织的长入,而且可防止前方、周围硬膜及神经根的粘连。结论联合使用硬体材料脊柱膜和流体材料生物蛋白胶是防止椎板切除术后硬膜粘连的最佳方案。

经内镜组织胶注射术治疗胃底静脉曲张破裂出血对门脉高压性胃病的影响分析

【目的】探讨内镜下胃底静脉组织胶注射治疗胃底静脉曲张破裂出血对门脉高压性胃病（portalhypertension gastropathy，PHG）的影响。【方法】回顾性分析2008年1月至2012年4月在本院行内镜下注射组织胶治疗后的30例胃底静脉曲张破裂出血患者（A组）的临床资料，与同期行常规药物治疗的30例胃底静脉曲张破裂出血患者（B组）比较，观察6个月后重度PHG的发生率。【结果】治疗6个月后A组的重度PHG发生率为63．33％（19／30）显著高于B组的30．33％（10／30），差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】内镜下胃底静脉组织胶注射治疗胃底静脉曲张破裂出血可导致其患者的PHG明显加重。

生物蛋白胶固定补片在腹腔镜经腹腹膜前疝修补术中的应用

目的探讨腹腔镜经腹腹膜前疝修补术中使用生物蛋白胶固定补片的临床价值。方法回顾分析2014年2月~2015年8月80例行腹腔镜腹膜前疝修补术患者的临床资料,术中均使用生物蛋白胶固定补片。结果 80例患者均顺利完成腹腔镜手术,无中转开腹,术中无大出血发生。1例术后出现腹股沟区血肿,经理疗、穿刺抽吸并局部加压包扎3 d后血肿消失,无局部感染发生,未出现腹股沟区感觉迟钝或疼痛。80例随访6~24个月,均无复发。结论腹腔镜经腹腹膜前疝修补术中使用生物蛋白胶固定补片安全有效,并发症少。

生物蛋白胶联合胸膜掩盖预防食管癌术后食管-胃吻合口瘘

目的评价生物蛋白胶联合胸膜掩盖对经胸食管癌根治术后胸腔内食管-胃吻合口瘘的预防作用。方法上海交通大学附属胸科医院2005年3月～2009年1月行经胸食管癌根治、胃代食管术、胸腔内吻合术498例,其中226例采用生物蛋白胶联合胸膜掩盖方法,设为治疗组;272例行常规胃浆肌层缝合包埋,设为对照组。观察两组术后食管-胃吻合口瘘的发生率。结果治疗组发生吻合口瘘1例,发生率0.4%;对照组发生吻合口瘘11例,发生率4.0%。12例食管-胃吻合口瘘均经食管镜或X线钡剂造影证实,两组发生率比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论生物蛋白胶具有良好的生物相容性、较低的免疫原性和极强的促进组织再生性,带蒂胸膜瓣血供丰富、取材容易、制作简单,二者联合应用对预防胸腔内食管-胃吻合口瘘有积极作用。

翼状胬肉切除联合结膜自体移植术中纤维蛋白胶应用的Meta分析

目的探讨纤维蛋白胶（FG）在翼状胬肉切除联合结膜自体移植术中的临床疗效。方法应用循证医学的研究方法检索美国国立医学图书馆、荷兰医学文摘、循证医学数据库、中国知网、万方数据库、中国期刊全文数据库及维普中文科技期刊数据库并辅以手工检索，遵循Cochrane Handbook 5．0质量评价原则评价纳入研究的质量，采用RevMan5．0软件进行统计学处理。结果纳入7项随机对照实验，共366只眼。Meta分析结果显示：与缝线组相比，FG组在术后复发方面，差异有统计学意义[RR=0．28，95％CI（0．10，0．76），P=0．01]；在术后并发症方面，两组比较差异无统计学意义[RR：2．53，95％CI（0．47，13．51），P=0．28]。结论在翼状胬肉切除联合结膜自体移植术中，应用FG封闭伤口可降低术后复发。

局部应用纤维蛋白胶对全髋关节置换术止血效果有效性和安全性的Meta分析

目的通过Meta分析评价局部应用纤维蛋白胶（Fs）治疗全髋关节置换术（THA）失血的有效性及安全性。方法计算机检索CochraneLibrary、Medline、Embase、Pubmed、Ovid等英文数据库以及中国生物医学文献数据库、维普中国科技期刊数据库、万方数据库及中国知网数据库中所有关于局部应用Fs治疗THA术后出血的随机对照试验，使用Cochrane风险评估工具对纳入的文献进行方法学质量评价，使用RevmanManager5．30进行Meta分析。结果共纳入7篇文献，纳入患者473例，其中局部应用Fs组229例，对照组244例。局部应用FS可以减少THA术后失血量（WMD=-131．89，95％CI-258．11～-5．66，P〈0．05）、输血率（RD=-0．06，95％CI-0．17-0．05，P〉0．05）、引流管中失血量（WMD=-93．44，95％CI-171．58～-15．29，P〈0．05）、引流量（WMD=-32．59，95％CI-64．19～-0．99，P〈0．05）及血红蛋白（Hb）下降值（SMD=-0．31，95％CI-0．53～-0．09，P〈0．05）。两组患者术后深静脉血栓（DVT）发生率、感染发生率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论局部应用FS可以减少THA患者术后失血量、引流量及Hb下降值，而不增加术后血栓形成及感染发生的概率。

纤维蛋白凝胶包裹的万古霉素藻酸盐微球的制备与优选

目的制备和优化纤维蛋白凝胶包裹的万古霉素藻酸盐微球（fibrin-gel-coated vancomycin alginate beads，FG-Vanco-AB），探讨其在骨科抗感染治疗中的可能应用。方法应用滴注法制备万古霉素藻酸盐微球，通过分别改变万古霉素和藻酸盐溶液的浓度，优选万古霉素含量高的微球；然后用不同浓度纤维蛋白凝胶包裹，通过检测各组万古霉素有效的释放时间来筛选适当包裹微球。结果随着万古霉素和藻酸盐溶液浓度的升高，微球中的万古霉素含量增高，16％藻酸盐和50mg/ml万古霉素等体积混合液制备的微球中万古霉素含量最高，达（27．36±0．90）％；在前述微球的基础上，用不同浓度纤维蛋白包裹的微球的缓释实验显示，75mg／ml纤维蛋白包裹的微球释放的万古霉素的浓度达到可有效杀灭金黄色葡萄球菌的天数为19d。结论优选后的FG-Vanco-AB可达到有效杀菌浓度的释放天数显著延长，增加了临床应用的可能性。