血清游离三碘甲状腺原氨酸含Ⅲ型纤连蛋白域蛋白5联合检测对阿尔茨海默病的诊断及病情评估价值

目的探讨阿尔茨海默病(AD)患者血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、含Ⅲ型纤连蛋白域蛋白5(FNDC5)水平联合检测对AD的诊断及病情评估中的价值。方法选取2019年9月至2022年9月上海市杨浦区市东医院收治的98例AD患者作为AD组,同期选取97例轻度认知功能障碍(MCI)患者作为MCI组,94名于本院体检正常、经相关评估后显示无焦虑、抑郁等精神障碍疾病、记忆力良好的健康人群作为对照组。采用简易智力状态检查量表(MMSE)评分评估认知功能;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清FNDC5水平,采用放射免疫法检测血清FT3水平;采用Pearson法分析AD患者血清FT3、FNDC5水平与MMSE评分的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清FT3、FNDC5水平对AD的鉴别诊断价值。结果AD组MMSE评分为(17.2±2.2)分,血清FT3为(3.1±0.8)pmol/L,FNDC5为(154.3±30.4)μg/L,明显低于MCI组的[(24.4±1.6)分,(5.2±1.6)pmol/L,(200±32)μg/L]和对照组的[(29.0±1.1)分,(7.9±1.8)pmol/L,(260.72±50.04)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。AD患者血清FT3、FNDC5水平与MMSE评分均呈正相关(r=0.65、0.64,P<0.05)。中重度AD组血清FT3为(2.51±0.39)pmol/L,FNDC5为(128±30)μg/L,明显低于轻度AD组的[(3.9±0.9)pmol/L,(190±40)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。FT3、FNDC5水平及二者联合鉴别诊断AD的AUC分别为0.813、0.788、0.886。结论血清FT3、FNDC5水平对于AD病情评估及早期诊断均具有重要参考价值。

激活PPARδ对梗死心肌MMP-9及纤连蛋白表达的影响

目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)激动剂GW610742X对梗死心肌重塑过程中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及细胞间基质纤连蛋白(FN)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠,分为对照组、假手术组、心肌梗死(MI)组和MI+GW610742X(GW)组。结扎大鼠左冠状动脉建立MI模型,GW组予以GW610742X(100mg.kg-1.d-1)喂养。术后3个月检测各组大鼠左心室游离壁(LVFW)中PPARδ、MMP-9及FN的mRNA及蛋白表达;免疫荧光法检测LVFW中FN的分布。结果:MI组术后3个月LVFW心肌有不同程度的坏死及纤维化。MI组PPARδ表达高于对照组、假手术组及GW组(P<0.01),GW组PPARδ表达低于对照组及假手术组(P<0.05);MI组及GW组MMP-9表达高于对照组及假手术组,FN表达低于对照组及假手术组(P<0.01或P<0.05)。GW组MMP-9表达低于MI组(P<0.05),FN表达高于MI组(P<0.01)。假手术组与对照组MMP-9及FN的表达无显著差异(P>0.05)。结论:梗死心肌重构过程中,MMP-9表达上调,FN被降解;激活PPARδ可能通过抑制MMP-9的表达,减轻FN的降解,从而改善心肌重塑。

纤连蛋白在乳腺病变的组织表达差异及与病灶弹性模量的相关性

目的探讨纤连蛋白(FN)在乳腺良、恶性病变中的表达差异及与病灶剪切波弹性模量值的关系。资料与方法回顾性分析2014年5月-2015年12月解放军总医院超声诊断科行乳腺切除术或真空辅助旋切活检,经病理确诊为乳腺癌或乳腺良性肿瘤,且在活检前进行剪切波弹性成像检查的120例患者,其中恶性组及良性组各60例。患者均行剪切波弹性成像检查,测量并记录病灶弹性模量值的最大值(Emax)、最小值(Emin)、平均值(Emean)和周围组织弹性模量比值(Ratio)。采用免疫组化法检测FN(阴性或阳性)。比较阴性组和阳性组患者组织间FN染色结果及两组病灶间弹性模量值的差异,分析FN的表达与各弹性模量值的相关性。结果良性病变中以纤维腺瘤为主(41例),恶性病变中以浸润导管癌为主(52例)。恶性组60例在细胞外基质中FN均呈阳性,而良性组病灶细胞外基质中27例呈阴性,两组在细胞外基质中FN表达差异有统计学意义(P<0.05),而肿瘤细胞中FN表达差异无统计学意义(P>0.05)。恶性组Emax、Emean与Ratio均大于良性组,差异有统计学意义(P<0.05),而两组Emin差异无统计学意义(P>0.05)。细胞外基质中FN的表达与各弹性模量值间无显著相关性(P>0.05)。结论 FN在良、恶性乳腺肿瘤细胞外基质中的表达存在差异,良、恶性肿瘤的弹性模量值不同,但肿瘤的硬度与细胞外基质中FN的表达不存在相关性。

纤连蛋白对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导肝星状细胞凋亡的影响

目的研究纤连蛋白(FN)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导肝星状细胞(HSC)凋亡的影响及调控机制。方法 MTT比色法、流式细胞术检测加入FN时,外源性TRAIL对HSC-T6细胞增殖和诱导细胞凋亡的影响;采用Western Blot检测粘着斑激酶(FAK)、磷酸化粘着斑激酶(pFAK)、Bax的表达。结果 TRAIL可以抑制HSC-T6细胞增殖,可以诱导HSC-T6细胞凋亡,而FN的存在可以使TRAIL诱导的HSC-T6细胞凋亡明显减少(P<0.05),Western Blot分析显示TRAIL诱导HSC-T6细胞凋亡时加入FN,细胞浆pFAK表达上调而线粒体Bax表达下降。结论 FN可以使外源性TRAIL诱导的HSC-T6细胞凋亡减少,机制可能与FN促使FAK磷酸化,pFAK表达上调并减少线粒体Bax表达有关。

层黏连蛋白和纤维连接蛋白对传代人晶状体上皮细胞生长和Cx43表达的影响

目的:观察层黏连蛋白(Ln)和纤维连接蛋白(Fn)对传代培养的人晶状体上皮细胞(hLECs)形态学和连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法:以层黏连蛋白(Ln)和纤维连接蛋白(Fn)处理培养皿表面,以倒置显微镜观察第3代培养的hLECs生长的形态,MTT法记录其生长曲线,免疫荧光法检测Cx43表达,比较两组表达阳性率的变化。结果:在层黏连蛋白处理组,传代细胞以典型的六角形上皮细胞形态为主,而纤维连接蛋白处理组则表现为以梭形的成纤维细胞为主。MTT实验显示,传代后4～7d纤维连接蛋白处理组细胞数多于层黏连蛋白处理组(P<0.05)。免疫荧光反应中,两组Cx43表达的阳性率有明显差别(23/28vs16/28,P<0.05)。结论:层黏连蛋白可以提供适宜hLECs保持上皮细胞状态的体外培养微环境,而纤维连接蛋白可以促进hLECs的增殖和分化。

胎儿纤连蛋白对先兆早产孕妇发生早产的预测价值

目的研究胎儿纤连蛋白(fetal fibronectin,fFN)对先兆早产孕妇发生早产的预测价值,进而提出可能的干预措施。方法对126例有先兆早产症状的孕妇进行宫颈阴道部分泌物fFN的测量,追踪这些孕妇的妊娠结局。结果126例先兆早产孕妇中,78例fFN阳性,阳性率为61.9%,早产57例。fFN阳性孕妇7 d内、14 d内、37周前分娩率分别为25.6%、39.7%、69.2%,fFN阴性孕妇则分别为0%、0%、12.8%。对7 d内、14 d内和37周内分娩的阴性预测值分别为100%、100%和87.2%。结论先兆早产孕妇宫颈阴道部分泌物fFN阳性对早产的发生有一定的预测价值,但当fFN阴性对预测其短期内不发生早产的临床价值更大。

SGK1超表达对人足细胞合成纤连蛋白的影响

目的:研究高糖刺激对人足细胞血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)和纤连蛋白(FN)表达的影响,以及SGK1超表达和灭活条件下FN的合成变化,揭示SGK1介导的信号转导途径在高糖诱导足细胞细胞外基质聚集,引发早期糖尿病肾损害过程中的作用。方法:高糖刺激人足细胞24h,Western blotting方法检测SGK1和FN蛋白水平的表达。利用构建好的SGK1激活型质粒(pIRES2-EGFP-SGK1SD)、灭活型质粒(pIRES2-EGFP-SGK1KN)和空载体(pIRES2-EGFP)分别转染人足细胞,免疫荧光方法检测足细胞合成FN的水平。结果:人足细胞中存在SGK1的表达,高糖刺激SGK1表达上调(50±4vs35±3),与此同时,FN合成亦明显增加(19±4vs12±2)。SGK1SD转染的足细胞中FN合成明显增加,相反,SGK1KN转染的足细胞中FN合成明显减少。结论:SGK1参与了高糖诱导的人足细胞FN的合成,可能在糖尿病肾病早期足细胞的受损活化过程中发挥重要作用。

纤维粘连蛋白对培养的自发性高血压大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的 :观察纤维粘连蛋白 (FN)对培养的SHR和WKY大鼠心肌成纤维细胞 (CFb ,CFbSHR,CFbWKY)增殖及胶原合成的影响。方法 :CFb取自 12周的SHR和WKY大鼠 ,采用组织块贴壁法培养 ,以直接细胞计数法和[3 H]-TdR掺入率反映细胞增殖 ,以 [3 H]-脯氨酸 ([3 H]-proline)掺入率反映胶原合成。使用FN(5 μg/cm2 )预先处理 2 4孔培养板。结果 :与 0 4 %FCS对照组相比 ,经 72h孵育FN明显促进CFbSHR和CFbWKY细胞数增多 ,分别为对照组的 16 3 75 % (CFbSHR)和 170 4 2 % (CFbWKY)。FN促进CFbSHR和CFbWKY[3 H]-TdR掺入增加 ,[CFbSHR:(44 734±8981)counts/minvs (2 92 33± 6 74 6 )counts/min ,P <0 0 5 ;CFbWKY:(314 6 1± 6 2 2 4 )counts/minvs (2 2 976± 4 782 )counts/min ,P <0 .0 5 ]。FN促进CFbSHR和CFbWKY[3 H]-proline掺入增加 [CFbSHR:(342 4± 114 5 )counts/minvs (1936± 76 3)counts/min ,P <0 .0 5 ;CFbWKY:(2 12 7± 4 15 )counts/minvs (15 32± 4 0 7)counts/min ,P <0 .0 5 ]。结论

低温保存皮肤组织中纤维连接蛋白和层粘连蛋白的表达

目的 :观察细胞外基质中纤维连接蛋白 (FN)、层粘连蛋白 (LN)在不同温度保存皮肤组织中的分布及表达 ,探讨其与皮肤冷冻保存的关系 .方法 :用FN ,LN抗体对新鲜皮肤以及 4℃ ,- 2 0℃ ,- 80℃或 - 196℃保存的皮肤作免疫组化染色 ,用图像分析仪测定并比较它们在表皮组织中的含量 ,并通过HE染色比较观察皮肤的组织结构变化 .结果 :与新鲜皮肤组相比 ,- 196℃ ,H抗冻液中皮肤组织结构保存较好 ,FN ,LN含量变化不明显 ,而 4℃ ,- 2 0℃ ,- 80℃保存皮肤的组织结构均有明显破坏 ,FN ,LN含量亦明显下降 .结论 :皮肤低温冷冻保存时细胞外基质中FN 。

人前磨牙牙髓牙本质复合体纤维粘连蛋白在不同年龄阶段的表达及其临床意义

目的 :研究牙髓牙本质复合体纤维粘连蛋白在不同年龄阶段的表达 ,探讨其与牙衰老和老年牙病间的关系。方法 :收集健康新鲜的前磨牙 ,按年龄分组 ,石蜡包埋切片 ,免疫组织化学与图像定量分析。结果 :随年龄增长 ,牙髓内纤维粘连蛋白免疫反应物增加、增粗 ,密度增高 ,积分光密度、体密度、线密度增加 ;牙本质内者与此相反。结论 :随年龄增长 ,牙髓内纤维粘连蛋白增加 ,使其细胞与血管间距离增大 ;牙本质内纤维粘连蛋白减少 ,韧性下降 。

新基因AngRem104对纤粘连蛋白基因上游序列的调控分析

目的:探讨新基因AngRem104对纤粘连蛋白(FN)基因启动子转录活性的影响,为揭示AngRem104对FN表达的调控机制提供线索。方法:构建了FN基因上游调控序列的系列缺失体-荧光素酶(luciferase)报告基因,瞬时转染人系膜细胞,检测报告基因的活性变化。结果:FN507-pGL3+正义AngRem104质粒转染组和FN1280-pGL3+正义AngRem104质粒转染组的luciferase相对活性较FN122-pGL3+正义AngRem104质粒转染组luciferase相对活性明显升高(P<0.01)。结论:在FN基因上游调控序列中-122到-507之间存在新基因AngRem104的正反应调控区。

少加样高收效制备创伤修复剂纤维粘连蛋白的方法(英文)

背景纤维粘连蛋白不仅对细胞起支架作用,而且是细胞间重要的连结因子,具有类似调理素作用,可促进单核吞噬细胞系的吞噬功能,在炎症和创伤中起修复作用。目的以新鲜健康男性“O”型血浆为原料,为制备纤维蛋白结合素筛选出加样量小,方法简便、收得率高的纯化方法。设计开放性实验。单位广州市红十字会医院暨南大学第四附属医院创伤外科研究所。材料实验于2000-07/2002-07在广州市红十字会医院创伤外科研究所完成。材料主要包括新鲜健康男性“O”型血浆、明胶、CNBr-activatedSepharose4B、交联葡聚糖G-25、尿素、三羟甲基氨基甲烷等。方法用明胶与溴化氰活化琼脂糖珠偶联的亲和层析柱对纤维蛋白结合素进行纯化。①加人血浆取新鲜健康男性O型血浆150m L,每次向柱内加入25m L,停留20min,流速3.5m L/m in。②去杂蛋白用pH7.5的Tris-柠檬酸钠平衡液洗柱,洗至流出液280nm下吸光度值<0.02,再用含1mol/L NaCl的Tris-柠檬酸钠洗去其他杂蛋白。③收集纤维蛋白结合素用3m ol/L脲-Tris洗脱液洗柱,收集纤维蛋白结合素。④纤维蛋白结合素收集液去尿素取纤维蛋白结合素的收集液,过SephadeG-25,去除尿素。⑤除菌用0.22μm滤菌器过滤除菌。主要观察指标①十二烷基黄酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果。②停留时间对提纯纤维蛋白结合素收得率的影响。③加入血浆量对提纯纤维蛋白结合素收得率的影响。结果①十二烷基黄酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果分离胶浓度为7%,浓缩胶浓度为3%,纤维蛋白结合素电泳结果为单一蛋白区带。②停留时间对提纯纤维蛋白结合素收得率的影响血浆加样量为150m L,柱内不停留和停留时间为10,20,30m in时纤维蛋白结合素收得率分别是(65.24±3.45)%,(74.77±4.05)%,(86.99±4.10)%,(80.47±3.75)%。③加入血浆量对提纯纤维蛋白结合素收得率的影响柱内停留时间为20m in时,血浆加样量为100,130,150,180m L时纤维蛋白结合素收得率分别是(72.56±3.63)%,(77.61±3.14)%,(86.99±4.12)%,(74.67±3.05)%。结论在明胶亲和柱体积不变的条件下,制备纤维蛋白结合素的量与血浆加样量、血浆在柱内停留时间密切相关。明胶亲和柱的血浆最佳加样量为150m L,每次血浆在柱内停留时间应为20m in,此法制备的纤维蛋白结合素加样量小,收得率高。

层粘连蛋白和纤连蛋白在大鼠视神经和坐骨神经的表达

目的 观察层粘连蛋白 (L N)和纤连蛋白 (FN)在大鼠不同发育时期视神经及坐骨神经的表达 ,探讨视神经与坐骨神经细胞外基质的差异。 方法 5 0只 SD大鼠按出生后天数分成 5组 ,取视神经和坐骨神经 ,免疫组织化学方法和计算机图像分析技术 ,测定大鼠视神经和坐骨神经 L N和 FN表达。 结果 L N和 FN在坐骨神经表达水平明显高于视神经 ,出生后 7d组明显高于其他年龄组。 结论 大鼠视神经和坐骨神经 L N和

极低密度脂蛋白对大鼠系膜细胞增殖及分泌纤连蛋白的作用

目的 观察极低密度脂蛋白 (VLDL)对大鼠系膜细胞分泌纤连蛋白 (FN)及系膜细胞增殖的作用 ,探讨VLDL对系膜细胞的毒性作用。 方法 ELISA法测定细胞上清液FN的分泌 ;采用还原四氮唑盐复合物(XTT)检测系膜细胞增殖情况。 结果 (1)不同浓度VLDL(10～ 5 0 0 μg/mL)、不同时间 (6～ 4 8h)与XTT光密度值 (D)呈线性关系 [r分别为 0 911(P <0 0 1) ,0 6 5 1(P <0 0 5 ) ]。当VLDL浓度达 10 0 0 μg/mL时 ,D下降。(2 )在VLDL浓度在 5 0 0 μg/mL左右时 ,随着刺激时间以及浓度的升高 ,VLDL大致可以依时间、浓度依赖关系促进系膜细胞FN分泌。 结论 VLDL可以促进系膜细胞分泌FN以及细胞增殖 ,提示其具有肾脏毒性作用。

胎儿纤连蛋白预测早产100例分析

目的:分析100例胎儿纤连蛋白(fFN)早产预测的结果。方法:利用fFN测定试剂盒对100例有先兆早产征孕妇进行测定,并追踪病例结果。结果:本组中测试结果阳性36例,早产实际发生31例(86.1%)。测试结果阴性64例,早产实际发生7例(10.9%)。结论:fFN检测可有效预测早产。测试结果阳性时,应及时保胎以提高早产儿生存率;测试结果阴性时,可以减少过度干预。

纤连蛋白对人外周血单核细胞TLR4介导的脂多糖反应的影响

目的研究纤连蛋白(Fn)刺激对人外周血单核细胞(PBMCs)炎症因子释放和Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法采用梯度离心法从浓缩人外周血白细胞中分离出PBMCs,设立空白对照组、Fn刺激组、LPS刺激组以及Fn+LPS复合刺激组,分别刺激PBMCs 0.5、2、4、8、12h后收集细胞培养上清,采用酶联免疫法(ELISA)检测其炎症因子人白介素6(IL-6)、人白介素10(IL-10)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;采用Western blotting法检测各刺激物对TLR4表达的影响。结果 4、8h复合刺激组IL-6释放量分别为727.00±37.73和918.25±26.78pg/ml,明显高于同时间点其他3组(P<0.05);2h复合刺激组TNF-α释放量明显增加,且高于同时间其他3组(P<0.05);0.5、2、4h复合刺激组IL-10释放量呈缓慢递增,8、12h分别达784.74±91.96、1081.74±57.98pg/ml,与同时间其他3组比较明显增加(P<0.05)。Western blotting结果显示,1、2h复合刺激组TLR4的表达水平明显高于各时间点的其他3组(P<0.05)。结论单纯Fn或LPS刺激即可促进PMBCs TLR4表达上调,Fn复合LPS刺激可进一步增强TLR4的表达,并导致炎症介质IL-6、TNF-α释放的显著增加,提示Fn可增强PMBCs对LPS刺激的敏感性。

PKA抑制剂在雌激素调控乳腺癌细胞纤连蛋白表达中的作用及机制

目的:观察蛋白激酶A(PKA)的抑制剂H89在雌激素(E2)依赖人乳腺癌细胞(MCF-7)纤连蛋白(fibronectin,FN)表达及其与CANP2的关系。方法:分别用E2和PKA抑制剂H89刺激对数生长期MCF-7细胞和CANP2-shRNA转染MCF-7模型细胞,采用伤口愈合实验检测细胞迁移率、Western-blot法测FN蛋白的表达。结果:与对照组比较,H89预处理后,E2诱导的MCF-7细胞迁移率可明显增加,E2与H89联用可使FN蛋白表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.05);H89和E2+H89组的可促使CANP2-shRNA转染MCF-7细胞的迁移率明显降低,并抑制CANP2-shRNA转染MCF-7细胞中FN蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:PKA抑制剂能明显增强E2诱导的乳腺癌细胞迁移和FN蛋白表达,而该效应可被CANP2基因沉默所逆转。