青海省春油菜主推品种的指纹图谱构建和纯度鉴定

在190对甘蓝型油菜SSR引物中筛选出具有多态性、条带清晰、重复性好的16对SSR标记,使用16对核心引物对青杂系列春油菜品种的15份亲本材料进行指纹图谱构建。结果表明,16个标记共扩增出44个位点,每对引物平均扩增的位点为2.5个,使用UPGMA法将15份材料在遗传距离为0.65处分为三类。同时利用其中的两对SSR标记(A04-10、A06-10)、与波里马细胞质雄性不育恢复基因(Rfp)紧密连锁的标记YSSR3对青杂4号、青杂7号、青杂有限1号、青杂5号、青杂9号、青杂15号、青杂12号、青杂16号、青杂18号的杂交种进行纯度鉴定,表明SSR标记用于杂交种的纯度鉴定更有优势。

基于InDel标记的长杂谷2922杂交种纯度鉴定

为了鉴定谷子杂交种长杂谷2922的纯度,本研究从11个候选InDel标记中筛选出在长杂谷2922及其双亲之间具有多态性的InDel标记Re2632,利用Re2632对长杂谷2922进行分子标记鉴定,并喷施除草剂进行验证。分子鉴定结果显示,杂交种纯度在20.83%~44.68%之间,平均纯度为33.72%。除草剂鉴定结果显示,杂交种纯度在18.32%~50.60%之间,平均纯度为32.59%。t测验结果显示,2种方法鉴定结果无显著差异,表明Re2632可以作为长杂谷2922分子鉴定的标记。

甘蓝型油菜种子真伪及纯度鉴定的研究进展

甘蓝型油菜是我国最主要的栽培品种,其种子真伪及纯度鉴定是确保种质资源优质的必要保障。本文简要阐述了形态学鉴定、生化鉴定和分子标记鉴定在甘蓝型油菜种子真伪辨别和纯度鉴定中的研究进展,同时评述了这几种方法各自的优缺点和应用现状。针对甘蓝型油菜种子真伪及纯度鉴定的发展,对几种鉴定技术进行了小结与讨论,对建立在分子生物学、遗传学和基因组测序技术上的分子标记鉴定的应用前景进行了展望。

应用SSR技术进行黄瓜杂交种种子纯度鉴定

种子纯度鉴定是保证种子质量的关键环节。随着育种进程的加快，黄瓜新品种数量不断增加，需要进行品种纯度鉴定的材料将会越来越多。以往纯度鉴定都是在田间进行，存在周期长、工作量大、易受环境因素的影响、表型特征会有一定程度偏差等问题，可能影响品种纯度鉴定的准确性，并直接影响到良种的推广；

我国主要杂交水稻组合及其亲本SSR标记和纯度鉴定

选用分布于水稻 1 2条染色体上的 2 6对 SSR引物对我国 9个主要的杂交水稻组合及其亲本进行了 SSR标记分析 ,2 1对多态性引物共扩增出 62条条带 ,平均 2 .95条 ,能够有效地区分所有恢复系和大部分不育系。杂交种条带均为父母本的互补型 ,很适合做杂交种纯度鉴定。用引物 RM1 7对杂交稻组合汕优 63和两优培九进行了 1 0 0粒单种子 SSR鉴定 ,所测纯度分别为 96.0 %和 98.0 % ,与田间纯度 96.2 %和 97.7%非常接近 ,显示出 SSR技术在品种认证和纯度鉴定中有广阔的前景。

辣椒RAPD系统的建立及在杂种纯度鉴定中的应用

对辣椒RAPD反应的各个环节 ,包括DNA提取、PCR反应和电泳检测进行了筛选和优化 ,确定了一个简单、高效、相对稳定的RAPD系统 ,并筛选出 12个较稳定的RAPD标记。可以用于“中椒”系列辣椒的 9个杂交种的纯度鉴定。

甘蓝型油菜自交不亲和系杂种纯度鉴定

利用共显性分子标记技术SSR、显性形态标记性状花叶及显性生化标记种子芥酸含量鉴定甘蓝型油菜自交不亲和系SI-1300与恢复系花叶恢杂种F1种子纯度。结果表明,3种方法鉴定结果基本一致,F1杂种种子纯度达到91%以上;不同SSR引物鉴定结果完全相同,一对SSR引物即可用于鉴定F1杂种纯度。SSR扩增产物具有很高的多态性和严格的保守性,不仅可以用于油菜杂种纯度鉴定,亦可以用于不同品种(组合)真实性鉴别。研究结果还表明,自然条件下放养蜜蜂用于自交不亲和系杂种制种是一种稳妥、切实可行的方法。

茄子SSR多态性引物的筛选及品种纯度鉴定

为应用分子标记建立一套快速准确的杂交种鉴定方法,利用已有的236对SSR分子标记对3个茄子品种进行多态性标记筛选,并进行待测品种的分子标记纯度鉴定以及田间纯度鉴定,获得特定品种的指纹信息。结果显示,筛选出用于茄子纯度鉴定的多态性引物15对,利用该系列引物进行纯度鉴定,品种1-2010、3-2010和9-2010纯度结果分别为98%,96%和100%,在此基础上获得了对应品种的指纹信息。应用SSR进行茄子品种纯度鉴定与田间检测结果一致,证明分子标记检测茄子杂交种纯度可行且高效,具有一定的理论和应用价值。

两系杂交稻亲本SSR指纹图谱的建立及其在种子纯度鉴定中的应用

利用筛选到的 2 0对SSR引物建立了两系杂交稻 3 2个亲本 (2 4个光温敏不育系和 8个恢复系 )的DNA指纹图谱 ,针对所涉及的 9个杂交稻组合 ,获得能在父、母本间表现出多态性的特异SSR标记 48个。以杂交稻组合两优 93 2为例 ,在实验室用一个特异SSR标记 (RM3 0 2 )对 2 0 0粒种子样本进行了纯度鉴定 ,结果鉴定纯度为 90 .5 0 % ,与田间种植鉴定结果 90 .60 % (海南鉴定 )和91.5 7% (武汉鉴定 )基本一致 。

SSR标记技术在甘蓝型油菜杂交种纯度鉴定中的应用

利用简化的SSR标记技术对甘蓝型油菜杂交种丰油701、丰油730和湘杂油4号的制种样进行纯度分析,并将丰油701收获样各单株的SSR分析结果与其育性表现进行了比对.结果筛选了38对SSR引物,其中引物Na10-D09在3个品种的不育系与恢复系间的扩增片段大小均存在差异.种植鉴定和SSR鉴定的纯度比较分析表明,SSR技术得到的纯度鉴定结果较种植鉴定的结果更为可靠.

青研系列大白菜杂交种及亲本指纹图谱构建和杂种纯度鉴定

利用SSR分子标记技术构建了青研系列7份大白菜杂交种及其11个亲本的DNA指纹图谱,筛选出5对具有较高多态性的SSR核心引物,核心引物组合扩增,可以鉴别亲本及其杂交种的真伪。利用其中一对共显性SSR标记P3鉴定青研早9号、青研桔15和青研春白一号三个杂交种的纯度。对比苗期性状调查结果表明,SSR分子标记用于杂交种纯度鉴定结果是可靠的。本试验为大白菜杂交种纯度鉴定提供了可靠的方法,对亲本保护及杂交种推广具有重要意义。

基于高光谱图像技术的玉米杂交种纯度鉴定方法探索

对玉米种子高光谱图像的光谱维信息进行分析,探索利用高光谱图像技术鉴定玉米杂交种纯度的可行性。实验中利用高光谱成像系统采集玉米品种农华101的母本和杂交种的高光谱图像,波长范围871～1699nm;在每个玉米样本上提取感兴趣区域的平均光谱信息,利用处理后的数据建立农华101母本和杂交种的鉴定模型。讨论了样品的摆放方式(种子胚正对光源和背对光源,种子在样品台上的位置)和实验环境对鉴定模型性能的影响。鉴定模型对不同摆放方式和实验环境下获得的同种样品的光谱的正确识别率和正确拒识率均达到90%以上,模型稳健性良好。利用Qs方法选择特征波段[1],发现在1 230nm附近(1 195～1 246nm)农华101的母本和杂交种差异最大。实验中利用特征波段内的数据进行建模和测试,正确识别率和正确拒识率达到90%以上,与利用全波段(925～1597nm)获得的识别效果相当。分析结果表明,利用高光谱图像技术鉴定玉米杂交种纯度是可行的。

黄瓜线粒体基因组SSR标记开发及其在种子纯度鉴定中的应用

[目的]基于黄瓜线粒体父系遗传特性,研究线粒体基因组SSR(mitochondria genome simple sequence repeat,mt SSR)标记技术在黄瓜杂交种纯度鉴定上的可行性。[方法]根据黄瓜线粒体基因组序列开发特异性标记,选用不同生态型的黄瓜品种对标记进行筛选,利用多态性引物对人为掺假的黄瓜F1种子进行纯度检测。[结果]从72对标记中,共筛选出4对在30份黄瓜品种呈现出多态性的引物,其中mt SSR4引物扩增出102和107 bp的多态性片段;mt SSR10引物扩增出196、224和242 bp的多态性片段;mt SSR29引物扩增出226、239和280 bp的多态性片段;mt SSR44引物扩增出184和194 bp的多态性片段。利用引物mt SSR4和mt SSR10对4份黄瓜F1种子纯度进行鉴定,结果显示黄瓜F1种子的带型与父本的一致,可将掺入杂交组合中的假种子区分开。田间试验数据表明:分子标记检测与田间鉴定结果基本一致,可用于黄瓜杂交种种子纯度的鉴定。[结论]线粒体基因组特异序列SSR标记能够准确地鉴定黄瓜杂种一代种子,在保证黄瓜种子生产质量方面具有广泛的应用前景。

春性双低甘蓝型油菜杂交种和亲本指纹图谱构建及杂交种纯度鉴定

从140对SSR引物中筛选出13对多态性好的引物,构建了14份材料的DNA指纹图谱,筛选出青杂2号、青杂5号共显性SSR标记,检测了青杂2号、青杂5号大田抽样F1群体L15、L41的纯度。结果表明SSR标记鉴定检测方法比大田检测更快更准确。

SSR技术对杂交稻种冈优188的纯度鉴定

运用SSR分子标记,以冈46 A和乐恢188为材料,从463对引物中,筛选出4对在双亲间有特异多态性条带的引物:RM6、RM252、RM263和RM 526。利用该4对特异性引物,对2家市售的冈优188杂交种进行纯度鉴定,其纯度分别为98.01%和98.65%,其田间纯度鉴定结果分别为97.89%和98.38%,二者结果无显著差异。因此,可利用该4对特异性SSR多态性引物对冈优188进行纯度鉴定。

调节性T细胞的MACS分选和纯度鉴定

目的 建立CD4+ CD2 5 + 调节性T细胞 (RegulatoryTCells ,Treg)的磁珠 (MACS)分选方法 ,并对分选结果进行纯度鉴定。方法 采用T细胞纯化柱分离小鼠脾脏T淋巴细胞 ,以抗 CD8 FITC抗体和抗FITC标记磁珠相结合的阴性选择法剔除CD8+ T细胞 ,再以抗 CD2 5 FITC抗体和抗FITC标记磁珠相结合的阳性选择法选出CD2 5 + T淋巴细胞 ;以FACS流式细胞法检测分选的CD4+ CD2 5 + 调节性T细胞纯度。结果 MACS磁珠分选法能够成功分选出CD4+ CD2 5 + 调节性T细胞 ,分选平均纯度达到73 % ,分选细胞活力为 95 %。结论 MACS磁珠分选法能够分选出高纯度的Treg细胞 。

种子纯度鉴定技术进展及其评论

该文对种子纯度的常规鉴定方法作了简要的评述．重点介绍和评价了生化鉴定法尤其是电泳法近年来的进展以及分子生物学实验方法在种子纯度鉴定中的应用。

麦醇溶蛋白电泳技术在杂交小麦种子纯度鉴定中的应用

为了探索一种能准确用于鉴定杂交小麦种子纯度的方法与技术,采用种子醇溶蛋白酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)技术对杂交小麦品种(组合)西杂一号、西杂三号和西杂五号进行分析,建立了西杂一号、西杂三号和西杂五号的标准图谱库,同时利用Gel 2.0软件建立了相应的模式图。人为混种试验结果表明,本研究得到的醇溶蛋白标准图谱可以用于鉴定杂交小麦种子的纯度。

荔枝多糖分离纯化及纯度鉴定

目的:从荔枝肉中提取多糖,并对其进行分级纯化及纯度鉴定。方法:利用热水提取,乙醇沉淀提取荔枝多糖,通过去蛋白、去色素对多糖进行纯化,用凝胶色谱柱sephadex G-25对荔枝多糖进行分级纯化,纯化后的多糖分别用聚丙烯酰胺凝胶柱P-100、聚丙烯酰胺凝胶电泳和醋酸纤维薄膜电泳法检测多糖的纯度。结果:经水提醇沉后,经sephadex G-25分级得两种级分得到多糖A1和多糖A2,A1、A2的得率分别为0.726%、0.957%。对A2进行纯度鉴定:从聚丙烯酰胺凝胶P-100柱的洗脱图谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳和醋酸纤维薄膜电泳的电泳色带均证明A2为纯品。结论:荔枝多糖存在两个级分。

油菜杂交种合油杂2号纯度鉴定的SSR引物筛选

以陕西渭北旱塬最新审定的双低油菜品种合油杂2号以及亲本为试验材料,用SSR标记技术研究杂种与双亲之间的扩增谱带多态性以甄别真假杂种。结果发现,200对SSR引物先用亲本进行预选,有45对引物可以特异区分两亲本,进一步反复筛选,其中引物CB10524分别在杂交种和其双亲之间存在扩增条带的多态性,表现为杂交种条带均为父母本的互补型,很适合做杂交种纯度鉴定。用该引物对合油杂2号杂交种进行SSR纯度鉴定,所测纯度分别为93%,与田间实测纯度94.27%非常接近,表明开发的SSR标记技术在合油杂2号油菜杂交种子纯度室内快速检测中具有广阔的应用前景。