羊消化道4种易混淆线虫虫卵的形态学观察与比较

为了方便临床上鉴定羊消化道常见且易混淆线虫虫卵并丰富相关资料,试验从羊消化道中采集疑似捻转血矛线虫、夏伯特线虫、食道口线虫和奥斯特线虫共4种线虫,采用形态学和分子生物学方法鉴定虫种,将4种线虫于体外短暂培养后得到纯种虫卵,通过观察虫卵不同发育阶段的胚胎形态变化获取每种线虫虫卵形态特征,并对虫卵的长径、宽径和长宽比进行测定。结果表明:经鉴定4种线虫分别为捻转血矛线虫、绵羊夏伯特线虫、粗纹食道口线虫和普通奥斯特线虫。4种线虫虫卵初期胚胎多呈收缩状态且形似桑葚,在外观形态上具有相似性,均为双层卵壳,多数对称,少数不对称。捻转血矛线虫虫卵呈短椭圆形,颜色较浅;绵羊夏伯特线虫虫卵呈椭圆形,颜色较捻转血矛线虫虫卵深;粗纹食道口线虫虫卵呈长椭圆形,颜色较捻转血矛线虫虫卵深,与绵羊夏伯特线虫虫卵相近;普通奥斯特线虫虫卵亦呈长椭圆形,颜色与捻转血矛线虫相近,较绵羊夏伯特线虫和粗纹食道口线虫虫卵浅。虫卵在生理盐水中培养1~6 d后,捻转血矛线虫、绵羊夏伯特线虫和普通奥斯特线虫依次进入蝌蚪期和幼虫期,但仅凭肉眼依然难以区分虫卵种类;绵羊食道口线虫未观察到含蝌蚪或含幼虫的虫卵,仅在桑葚期观察到胚胎收缩成1团及分裂成2团或3团不同形态的虫卵。部分粗纹食道口线虫和普通奥斯特线虫虫卵可观察到明显的气室。捻转血矛线虫卵大小为(61.22~102.05)μm×(37.96~69.33)μm,长宽比为1.51;绵羊夏伯特线虫卵大小为(81.89~139.14)μm×(43.97~90.60)μm,长宽比为1.57;粗纹食道口线虫卵的大小为(84.57~104.59)μm×(40.86~59.18)μm,长宽比为1.83;普通奥斯特线虫卵大小为(82.83~117.22)μm×(41.70~71.79)μm,长宽比为1.76。说明4种线虫虫卵的外观形态虽有细微差异,但没有特征性标识,临床上易造成误判,因此采用分子生物学方法进行鉴定更为可靠。

松材线虫病疫木在药用石斛人工栽培中的应用

通过比较不同基质中药用石斛生长量和有效成份质量分数,探究经过无害化处理的松材线虫病疫木在铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)人工栽培中作为配方基质的使用效果。结果表明:在铁皮石斛人工种植中使用经过无害化处理后的松材线虫病疫木作为栽培基质切实可行。不同栽培方式适用的松材线虫病疫木替代基质的比例不同。以盆栽方式种植铁皮石斛时,1号基质(V(粒径9~12 mm疫木颗粒)∶V(新鲜树皮)∶V(饼肥)=1∶1∶1)充分发酵后可以在实际生产中替代常规栽培基质使用;以盘栽方式种植铁皮石斛时,3号基质(V(疫木锯末)∶V(新鲜树皮)∶V(饼肥)=1∶1∶1)充分发酵后可以在实际生产中替代常规栽培基质使用。

松材线虫胁迫对5种松树的代谢组共性表达

为研究松树在松材线虫胁迫下的分子防御机制,分别选取15~20年生的辽宁抚顺的油松(LY)、辽宁抚顺的红松(LH)、山东威海的赤松(SC)、山东威海的黑松(SH)、湖南长沙的马尾松(HM)5种代表性松树作为研究对象,运用液相色谱-质谱联用技术的非靶向代谢组学,将以上5种松树分为健康组和感病组,分别对5组松树样本的差异代谢物分布情况、差异代谢物的共性特征、共有差异代谢物的表达显著性、代谢通路富集分布情况、差异性代谢通路的共性特征等进行研究。结果表明:5种松树感染松材线虫后的代谢产物在苯和取代衍生物、羧酸及其衍生物、脂肪酰基、酚类、孕烯醇酮脂类、类固醇及其衍生物、其他类等7类化合物中分布较为集中;HM、LH、LY和SC,HM、LY、SC和SH这两种组合,只有1种共有的显著性差异代谢物,分别是百里酚和6-姜酮酚,5种松树以及剩下的其他4种松树的组合都没有共有的显著性差异代谢物;HM、LY、SC和SH感染松材线虫后,6-姜酮酚表达量显著升高,LH感染松材线虫后,6-姜酮酚表达量无显著性差异;HM、SC、LY和LH感染松材线虫后,百里酚表达量显著升高,SC感染松材线虫后,百里酚表达量无显著性差异;HM、LH、LY、SC、SH分别富集到51、55、46、71、43条差异显著的信号通路,5种松树共有的差异显著的信号通路共有19条,主要反映在植物的抗逆相关信号通路上,包括花生四烯酸代谢、亚油酸代谢、苯丙烷生物合成、多种氨基酸代谢等。

食用菌线虫种类鉴定

2002～2003年在福建省进行食用菌线虫种类调查。共鉴定食菌性线虫5种,食菌茎线虫Ditylenchusmycelioph agus、蘑菇滑刃线虫Aphlenchoidescomposticola、双尾滑刃线虫Aphelenchoidsbicaudatus、燕麦真滑刃线虫Aphelenchusave nae和小杆线虫Rhabditidasp.。

番茄响应南方根结线虫侵染相关转录因子的初步分析

为明确番茄接种根结线虫后基因种类和表达量在转录水平的变化规律,利用RNA-seq对未接种及接种南方根结线虫2龄幼虫6、12、24和48 h的番茄进行转录组测序,探究番茄响应南方根结线虫侵染相关的关键转录因子,并采用qRT-PCR方法对测序结果进行验证。结果显示,接种南方根结线虫后6、12、24和48 h分别有350、390、580、1154个基因差异表达,其中差异表达转录因子分别为11、11、19、50个。这些转录因子属于15个家族,其中数量最多的为MYB家族和bHLH家族(均为20个),其次是ERF家族19个、WRKY家族15个、bZIP家族9个。南方根结线虫侵染过程差异表达最明显的主要为ERF、WRKY、MYB和bHLH家族转录因子,其中Solyc03g005520、Solyc02g094270和Solyc09g066350显著上调,接种后48 h log2FC分别为9.16、6.49和6.33;Solyc02g079280、Solyc12g100140和Solyc04g072460显著下调,接种后48 h log2FC分别为-2.60、-1.72和-1.70。qRT-PCR验证结果显示,6个随机选取基因的表达趋势与测序结果基本一致。以上结果表明,ERF、WRKY、MYB和bHLH家族转录因子可能参与番茄与南方根结线虫互作,在番茄响应南方根结线虫侵染反应中发挥着重要的调控作用。

果树线虫病害的研究进展

线虫作为植物病原,引起作物的线虫病害早已为人们所熟知。一些研究起步较早的种类如大豆胞囊线虫、花生根结线虫和甘薯茎线虫等都能造成毁灭性的灾难,从而酿成严重的经济损失。但线虫对果树的危害性尚未引起足够的重视,这是因为线虫危害果树所造成的损失不象一年生作物上那样明显,一般很少立即使果树植株致死,而是逐渐侵染其根系,虽然仍能生长并开花结果,但其长势却逐年衰弱,随之产量和品质也渐趋下降。线虫对果树主要是以取食根系的方式进行危害,导致根组织受损乃至死亡。有的线虫引起根部畸形,出现膨大,形成“根结”或短粗状分枝根,以至影响根的吸收功能,最终导致地上部长势衰弱,表现矮化、萎蔫、果实变小、产量下降,严重者植株枯死。有些线虫不仅自身取食根系造成直接危害,还能传带病毒侵染果树。

驴消化道3种线虫的扫描电镜观察及其系统发育分析

为深入研究采集到的驴消化道3种寄生线虫的体表形态及其系统发育关系,本试验利用扫描电子显微镜技术首次对寄生于驴消化道内的马圆形线虫[Strongylus equinus(Mueller,1780)]、无齿圆形线虫[Strongylus edentatus(Looss,1900)]和杯状彼得洛夫线虫[Petrovinema poculatum(Looss,1900)]的体表形态进行详细观察和描述。提取线虫核糖体DNA内转录间隔区(ITS)基因,对其进行系统发育分析,建立系统发育树。扫描电子显微镜观察结果显示,马圆形线虫有内叶冠80枚,外叶冠180枚,雄虫生殖锥具有2对指状突起,一长一短;无齿圆形线虫有外叶冠80枚,雄虫尾部生殖锥较长,具有2对附属物,分别为乳头状和细长状;杯状彼得洛夫线虫外叶冠呈刺状,32枚,雄虫尾部具有1对小囊状附属物。系统发育分析结果显示,上述3种线虫形态学鉴定结果与系统发育树中该种的分类学地位一致。本试验结果为上述3种线虫的分类鉴定提供更精确的形态和分子生物学依据。

昆虫病原线虫N-Yz1对水稻二化螟的控制作用

昆虫病原线虫N-Yz1是自二化螟罹死虫体分离的小卷蛾斯氏线虫,作为防治二化螟的生物因子具有广泛应用潜力。本文通过小卷蛾斯氏线虫N-Yz1对二化螟幼虫的侵染过程、不同龄期二化螟的感染和田间二化螟的控制作用分析,研究N-Yz1对水稻二化螟的控制作用及防治技术。结果表明,N-Yz1对二化螟具有较强的侵染活性,可以直接穿透昆虫表皮入侵虫体组织。病原线虫的迁移依赖接触表面游离水的存在,线虫个体侵染能力也表现出显著差异性,直接影响到N-Yz1的感染速度和感染效率。N-Yz1对不同龄期的二化螟都具有较高的致死活性,低龄幼虫(1~2龄)敏感性高于高龄幼虫(3~5龄)。室内模拟试验表明,水稻拔节期使用N-Yz1对二化螟防效不高,2.4×10^(5) IJs/m^(2)剂量仅为37.3%,而防治稻茬越冬代二化螟防效明显提高,N-Yz1相同剂量防效达85.2%。田间试验进一步证明,夏季稻田2.4×10^(5) IJs/m^(2)剂量N-Yz1防治二代二化螟防效21.23%,增加使用剂量可以提高控制效果;而春季稻茬田应用N-Yz1,1.2×10^(5) IJs/m^(2)剂量药后15 d防效达53.7%,45 d后高达79.1%。因此,可以针对稻茬二化螟主要繁殖虫源,采用N-Yz1防治稻桩中越冬代二化螟幼虫,显著降低害虫发生基数,控制水稻钻蛀害虫二化螟的发生和危害。

绵羊毛圆科线虫卵在不同温度下的发育情况观察

观察了寄生于绵羊体内的优势虫种细颈线虫、奥斯特线虫、捻转血矛线虫、马歇尔线虫等毛圆科线虫卵在不同环境中的发育能力 ;研究了细颈线虫卵在相对湿度 10 0 % ,0、3、5、10、15、2 0、2 5、30、35℃共 9个不同温度梯度的发育率和发育周期 ;并对毛圆科线虫卵在 - 17～ - 2 5℃自然冷冻环境中的发育情况和幼虫在干燥环境中的抗干旱能力进行了测试。结果表明 ,细颈线虫卵在 2 0℃、相对湿度 10 0 %的条件下发育率最高 ,发育周期最短 ;毛圆科线虫卵在 - 2 5～ 0℃环境中不发育 ,也不死亡 ;毛圆科线虫的幼虫在无水分的干燥环境中可存活 10 0d左右。

月季线虫病风险初步分析

通过月季线虫种类的调查、鉴定及月季线虫病害危险性分析 ,结果表明 :国内月季线虫的种类较少 ,只有 12属 14种 ,其中 6种线虫即卢兹垫刃线虫 (Tylenchusluci)、诺曼琼斯丝尾垫刃线虫 (Filenchusnorhanjonesi)、卡文斯螺旋线虫 (Helicotylenchuscavenessi)、粗尾矮化线虫 (Tylenchorhynchuscrassicaudatus)、蘑菇滑刃线虫 (Aphelench oidescomposticola)及燕麦真滑刃线虫 (Aphelenchusavenae)等在国内外首次报道为月季寄生线虫 ,1种即双宫螺旋线虫 (Helicotylenchusdihystera)为国内首次报道为月季寄生线虫 ;月季寄生线虫对中国月季生产存在潜在的危险性 ,特别是以北方根结线虫 (Meloidogynehapla)、伤残短体线虫 (Pratylenchusvulus)、双宫螺旋线虫 (H .dihystera)、裂尾剑线虫 (Xiphinemadiversicaudatum)、印度剑线虫 (X .indica)等 5种线虫危害最严重。对中国来说 ,应加强对北方根结线虫 (M .hapla)、伤残短体线虫 (P .vulnus)、裂尾剑线虫 (X .diversicaudatum)等

种传线虫病及其治理措施

本文简要介绍了小麦粒线虫(Anguina tritici)、水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi)、水稻茎线虫(Ditylenchus angustus)、剪股颖粒线虫(Anguina agrostis)等4种种传线虫病害的发生分布为害、侵染部位、症状、传播途径、寄主植物及检疫检验和治理措施。

植物寄生线虫与其它病原微生物的关系

植物寄生线虫与其它病原微生物的关系刘志明（广西农科院植保所南宁５３０００７）自１８９２年Ａｔｋｉｎｓｏｎ首次报道植物寄生线虫与其它病原微生物的关系以来，这方面的研究越来越受到人们的重视，特别是近３０年来，随着研究的深入而逐渐发展成植物病理学的新支学科...

伞滑刃线虫属4个种rDNA的PCR扩增

从161份病松树样本中分离、鉴定出拟松材线虫(Bursaphelenchusmucronatus)、霍夫曼伞滑刃线虫(B.hof manni)和赫列尼库斯伞滑刃线虫(B.hellenicus)3个种,其中后二者是中国新记录种,华山松和云南松分别是这两个种的世界新寄主记录。本试验以松材线虫(B.xylophilus)为对照,用伞滑刃属线虫rDNA相关引物对这4种伞滑刃线虫进行PCR扩增,进一步印证形态鉴定的可靠性。试验结果表明,霍夫曼伞滑刃线虫、赫列尼库斯伞滑刃线虫与松材线虫、拟松材线虫,均扩增到约800bp的分子片段,为霍夫曼伞滑刃线虫和赫列尼库斯伞滑刃线虫的鉴定从分子生物学角度提供了一定依据。

噻唑膦和吡虫啉二元复配剂防治水稻干尖线虫效果评价

水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi)是水稻上的重要病原之一,主要通过种子传播,因此浸种剂的开发与应用对该线虫的防治十分重要。基于浸渍法,室内测定和评价了噻唑膦和吡虫啉及其混配剂对水稻干尖线虫杀灭活性的效果,计算混剂的共毒系数,并将杀虫活性最高配比组合加工成农药制剂用于田间防效试验。结果表明,噻唑膦和吡虫啉单剂对水稻干尖线虫致死中浓度LC_(50)值分别为71.96 mg/L和317.07 mg/L;噻唑膦和吡虫啉按质量比1∶2至1∶8的比例混配后均对水稻干尖线虫杀灭活性具有相加作用,其中1∶3配比的杀虫活性最高;按此配比加工的10%和40%噻唑膦·吡虫啉可分散油悬浮剂按1∶1000倍液浸种对水稻干尖线虫的田间防效分别为94.48%和96.26%,线虫减退率分别为97.01%和96.28%,同时显著提高水稻百粒重以及降低籽粒受损率。综上,噻唑膦和吡虫啉二元复配剂可用于水稻干尖线虫的有效防治,进一步开发和应用对保障水稻安全生产具有重要意义。

作物根结线虫病化学防治研究进展

根结线虫Meloidogyne spp.是严重威胁农业生产的重要病原生物,对世界上大多数作物都存在负面影响。在我国,随着保护地栽培模式的扩大及作物复种指数的不断提高,根结线虫病的发生日趋严重,而目前的管理措施尚不能完全控制根结线虫的危害。使用化学杀线虫剂仍然是目前防治根结线虫最常见的短期管理策略。本文总结了目前我国作物根结线虫病的发生现状,介绍了生产中防治该病害的主要化学药剂,分析了其化学防治存在的主要问题,并讨论了目前化学杀线虫剂及其应用技术的优化;展望了未来根结线虫化学防治的研究方向;提出根结线虫的化学防治应该与其他管理措施相结合,实现根结线虫高效、安全、可持续发展的综合治理。

百合线虫病害及其综合防控研究进展

本文对国内外百合(Lilium)相关植物线虫的种类、分布、危害程度及其防控技术等方面进行了综述。全世界已报道百合相关植物线虫40种和12个未定种,隶属于3目15科22属,美国和荷兰的百合植物线虫比较丰富,分别报道了20种和11种,我国百合上仅记录了7种植物线虫。草莓滑刃线虫(Aphelenchoides fragariae)、菊花滑刃线虫(Aphelenchoides ritezemabosi)、穿刺短体线虫(Pratylenchus penetrans)和鳞球茎茎线虫(Ditylenchus dipsaci)对百合的生长危害最大,对百合上这4种植物线虫的致病性和防控技术研究较多。精选健康种球、田间管理、热水处理、合理轮作和化学防治是有效防控百合线虫病害的综合措施。本文还对我国百合寄生线虫的研究方向进行了探讨,为今后百合线虫病害调查和防控工作提供重要参考。

湖南省松材线虫病防控现状与对策

松材线虫是极具危险性的外来入侵物种,是重大植物疫情来源之一,严重威胁生态安全、生物安全和经济发展。为适应新形势下松材线虫病疫情防控工作,开创防控工作新局面,笔者选取32个松材线虫病重型疫区、18个轻型疫区和9个预防区开展实地调查,广泛征求地方政府、林业主管部门、乡镇林业站、林农和相关防控企业的意见建议,采取查看现场、走访询问、问卷调查、座谈研讨等多种方式,对当前防控现状、存在的问题开展深入调查,针对性地提出加强我省松材线虫病防控工作的对策。