多基因组合荧光原位杂交技术鉴别皮肤黑色素瘤良恶性的价值

目的:分析多基因组合荧光原位杂交技术(FISH)鉴别皮肤黑色素瘤良恶性的价值。方法:在商丘市第一人民医院皮肤科2019年1月至2021年12月期间收诊的皮肤恶性黑色素瘤患者中选取40例作为恶性组,另在同期收诊的皮肤良性黑色素瘤患者中选取40例作为良性组,对两组患者进行FISH检查,计算FISH检查的鉴别皮肤黑色素瘤的准确率、灵敏度、特异度,并观察扩增表现。结果:80例患者均经FISH检验获得满意荧光信号,可以判读FISH结果。FISH鉴别皮肤黑色素瘤良恶性的准确率为92.50%(74/80),特异度为95.00%(38/40),灵敏度为90.00%(36/40)。恶性组中有36例经FISH检验为阳性,表现为CCND1、RREB1和MYB基因异常改变,其中CCND1扩增占36.11%,RREB1扩增占22.22%,RREB1扩增合并MYB缺失占36.11%,CCND1、RREB1和MYB同时异常的仅占5.56%。结论:FISH在皮肤黑色素瘤的良恶性鉴别中具有较高的效能,并能在早期检出黑色素瘤异常的基因改变。

应用组合荧光原位杂交技术检测慢性淋巴细胞白血病的基因组异常

目的探讨应用组合荧光原位杂交(panelfluorescenceinsituhybridization,panelFISH)技术对慢性淋巴细胞性白血病(chroniclymphocyticleukaemia,CLL)基因组异常检测的价值。方法分别应用3号、12号、18号的着丝粒探针和序列探针D13S272(13q14.3)、ATM(11q23)等5种荧光素标记的DNA探针,对22例CLL患者进行FISH检测,并和常规细胞遗传学检测结果进行比较,以确定何种方法对检测CLL的染色体和基因组异常更为敏感可靠。结果22例CLL患者中,常规细胞遗传学检测出8例(36.3%)有染色体异常,包括单纯+123例;+3、+121例;+3、+12、+181例;t(5;15)1例;13q-1例;3q-、18p+1例;4q+和13q-1例;组合FISH检测出15例(68,1%)有染色体异常,包括+34例、+126例、+181例、11q-6例、13q-8例。结论组合FISH技术是检测CLL患者染色体基因组异常的有效手段,与常规细胞遗传学方法相结合则可明显提高CLL染色体异常的检出率。

人工智能TPS辅助阅片系统联合荧光原位杂交技术在诊断尿路上皮癌中的应用价值

目的 探讨人工智能尿液细胞学巴黎报告系统(TPS)辅助阅片系统联合荧光原位杂交技术(FISH)在诊断尿路上皮癌中的应用价值。方法 回顾性选取2021年3月至2024年3月中国医科大学附属第一医院收治的128例疑似尿路上皮癌患者为研究对象,采用人工智能TPS辅助阅片系统对尿液细胞学检查进行结果判读,并进行FISH检查,以组织病理学检查结果为金标准,评估人工智能TPS辅助阅片系统联合FISH检查对尿路上皮癌的诊断效能。结果 组织病理学检查显示,阴性11.72%(15/128),尿路上皮非典型增生7.03%(9/128),低度乳头状尿路上皮肿瘤27.34%(35/128),高级别乳头状尿路上皮癌53.12%(68/128),其他恶性肿瘤转移性癌0.78%(1/128),TPS诊断结果显示,TPS 1级占1.56%(2/128),TPS2级占14.84%(19/128),TPS 3级占12.50%(16/128),TPS 4级占68.75%(88/128),TPS 5级占2.34%(3/128),TPS 6级占2.34%(3/128);FISH诊断结果显示,CEP3异常占61.72%(79/128),CSP7异常62.50%(80/128),CEP17异常34.38%(44/128),GLP-pl6异常19.53%(25/128);TPS、FISH单一及联合诊断尿路上皮癌准确度分别89.84%、88.28%、96.88%,联合诊断优于单一诊断(χ^(2)=4.870,P<0.05)。结论 人工智能TPS辅助阅片系统联合FISH检查可以大大提高尿路上皮癌患者诊断准确度,值得临床推广应用。

荧光原位杂交技术检测乳腺癌HER2基因的影响因素

探究荧光原位杂交技术(Fluorescence In Situ Hybridization,FISH)在乳腺癌人类表皮生长因子受体2(Human Epidermal Growth Factor Receptor 2,HER2)基因状态检测中的影响因素。方法 选择40例2021年1月至2023年12月我院外科手术切除乳腺癌组织标本,使用FISH检测HER2基因状态,观察不同的酶消化时间、煮片的温度与时间、组织前期处理固定效果对FISH检测HER2基因扩增的影响。结果 酶消化11分钟癌细胞杂交成功率>75%,实验较为稳定;酶消化9分钟时提示消化时间不足;酶消化13分钟提示消化过度。煮片水温在92℃,时间在15~25分钟左右会出现荧光杂交信号弱量较少情况;温度在97℃,时间15分钟会出现荧光杂交信号弱量较少情况,时间在20~25分钟会出现荧光杂交信号强度不均匀情况;煮片水温在95℃,时间保证在20分钟左右最佳。在乳腺组织离体30min内使用10%中性缓冲福尔马林固定最佳,乳腺组织离体到固定时间间隔不超过1h,不宜用微波快速固定。结论 使用荧光原位杂交技术检测人类表皮生长因子受体2基因扩增时,在乳腺组织离体30min内使用10%中性缓冲福尔马林固定、酶消化11分钟、煮片水温在95℃,时间保证在20分钟左右具有较高的杂交成功率,同时可以保持实验的稳定性。

基于病理组织行RNA原位杂交技术联合原位免疫荧光染色检测结核分枝杆菌的应用研究

目的:探讨RNA原位杂交技术联合原位免疫荧光染色在结核分枝杆菌检测中的应用价值。方法:采用回顾性研究方法,选取肺或淋巴结穿刺或者手术标本病理诊断为肉芽肿性炎病人100例作为研究对象。其中70例为确诊结核病病人(确诊组),30例为非结核病病人(对照组)。以实时荧光定量PCR检测结果为参照,均进行抗酸染色、原位免疫荧光染色、RNA原位杂交技术检测。评价RNA原位杂交技术联合原位免疫荧光染色检测结核分枝杆菌的诊断效能。结果:以实时荧光定量PCR检测结果为金标准,抗酸染色的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度、约登指数分别为30.00%、93.33%、91.33%、36.36%、49.00%、0.233,原位免疫荧光染色分别为51.43%、93.33%、94.74%、45.16%、64.00%、0.447,RNA原位杂交技术分别为77.14%、100.00%、100.00%、65.22%、84.00%、0.771,RNA原位杂交技术联合原位免疫荧光染色分别为84.29%、100.00%、100.00%、73.17%、89.00%、0.843。RNA原位杂交技术联合原位免疫荧光染色的ROC曲线下面积(AUC)为0.951,RNA原位杂交技术AUC为0.768,原位免疫荧光染色AUC为0.843。结论:RNA原位杂交技术联合原位免疫荧光染色的灵敏度及特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度及约登指数均较高,是一种具有潜力的结核分枝杆菌检测方法。

荧光原位杂交技术在植物细胞遗传学和绘制基因图谱中的应用现状与展望

荧光原位杂交是在分子水平上检测外源染色质的一种有效方法。其探针主要有染色体重复序列、总基因组 DNA、寡单拷贝序列和染色体涂色集中等 ,该技术在研究植物细胞遗传学、基因扩增、基因作图及植物进化和亲缘关系的鉴定上已广泛应用。

免疫组织化学法双色银染原位杂交与荧光原位杂交技术检测乳腺癌HER-2基因状态的应用

目的:比较免疫组织化学法(IHC)、双色银染原位杂交(DISH)、荧光原位杂交技术(FISH)对乳腺癌HER-2基因状态的应用效果。方法:回顾性的选取2017年1月至2019年12月我院收治的180例乳腺癌患者作为研究对象,均为女性、单侧,取组织标本行IHC、DISH、FISH检查HER-2。结果:180例患者中各检测方式对HER-2基因的检查效果:IHC检查HER-2表达阴性118例、HER-2表达阳性49例,可疑阳性13例;DISH检查HER-2基因扩增56例、无扩增107例、不确定17例;FISH检查HER-2扩增54例、无扩增107例、不确定19例。各检测方式比较:DISH与IHC检查HER-2基因的Kappa值为0.788,一致性较好;FISH与IHC检查HER-2基因的Kappa值为0.784,一致性较好;DISH与FISH检查HER-2基因的Kappa值为0.939,一致性高。结论:IHC、DISH、FISH均可对乳腺癌患者的HER-2基因状态行评估,可以IHC作为筛查手段,若医疗资源许可应当结合DISH检查结果制定治疗方案。

荧光原位杂交技术在产前诊断染色体嵌合体中的应用价值

目的:探讨荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)在产前诊断染色体嵌合体中的应用。方法:22例行绒毛/羊水细胞体外培养染色体核型结果提示可能存在染色体嵌合现象的病例,进一步用染色体微阵列比较基因组杂交检测(chromosomal microarray analaysis,CMA)和FISH技术分析确定其异常核型及嵌合比例。结果:22例核型结果提示嵌合体的病例中,性染色体数目嵌合13例,常染色体三体嵌合6例,性染色体结构异常嵌合3例。近50%病例CMA结果未检测到嵌合现象,可能与CMA技术仅能检测基因拷贝数变化且无法检测低比例嵌合有关。因常染色体数目异常对胎儿生长发育影响较大,常染色体数目异常嵌合病例中,除1例病例外其余均选择终止妊娠。3例结构异常嵌合病例经核型分析结合CMA及FISH结果确定均为性染色体双着丝粒染色体复杂结构嵌合。结论:对于产前诊断提示可能存在染色体嵌合的病例,不应急于终止妊娠,需采用多种方法加以验证,应充分应用CMA技术和FISH技术结合G显带核型结果进行综合分析,并需要对胎儿形态进行细致的超声评估,从而更加准确地确定嵌合类型以及异常核型的嵌合比例,为临床医师指导遗传咨询提供更加可靠的依据。

荧光原位杂交技术及其研究现状

从荧光原位杂交探针的类型、探针的标记方法、探针和染色体的杂交、染色体显带、荧光显微镜检测等方面介绍了荧光原位杂交技术,并对荧光原位杂交技术目前的发展状况进行了阐述。

荧光原位杂交技术在上尿路肿瘤诊断中的应用

目的评价荧光原位杂交技术(FISH)在上尿路肿瘤诊断中的应用价值。方法采用FISH技术检测20例正常人的3、7、17号染色体及9号染色体p16位点的变异情况,建立阈值。15例上尿路肿瘤患者及7例对照组患者留取晨尿,分别进行尿脱落细胞学检查和FISH检测。以至少两种探针检测结果超过阈值或一种探针检测结果存在至少两种异常为阳性。结果15例上尿路肿瘤患者中14例FISH检测阳性,而尿脱落细胞学检查仅2例阳性。对照组7例中6例FISH检测阴性,尿脱落细胞学检查均阴性。结论FISH对上尿路肿瘤的诊断效果优于尿脱落细胞学检查。

联合应用染色体G显带和间期荧光原位杂交技术检测急性早幼粒细胞白血病

目的 联合染色体G显带和间期荧光原位杂交技术 (interphasefluorescenceinsituhybridization ,I -FISH)对急性早幼粒细胞白血病 (acutepromyelocyticleukemia ,APL)患者进行早期诊断和治疗后微小残留病的监测 ,同时对两种方法的灵敏度进行比较。方法 应用染色体G显带技术和I -FISH对 2 0例APL患者进行遗传学检测 ,包括 13例初诊患者和 8例治疗后获完全缓解的患者 (其中有初诊中的 1例 )。结果 ① 13例初诊病例中 ,9例染色体G显带检测t( 15 ;17)阳性 ,2例阴性 ,2例因分裂相缺乏无法分析结果 ,阳性检出率为 9/13 ( 69 2 %) ;I -FISH检测PML/RARa融合基因 13例为阳性 ,阳性检出率为 13 /13 ( 10 0 %) ,细胞阳性率为 76%～ 10 0 %,平均 91 3 %。② 8例治疗后血液学获完全缓解病例 ,染色体G显带后核型分析 6例正常 ,2例无分裂相可供分析 ;I -FISH检测 7例均为阴性 ,1例阳性。结论 联合运用染色体G显带和I

应用荧光原位杂交技术分析乳糖不耐受者结肠菌群

目的 : 探讨结肠菌群构成与乳糖不耐受 (lactose intolerance,LI)症状之间的关系 ,以及饮奶对结肠双歧杆菌数量的影响。方法 : 根据乳糖负荷试验 ,结合问卷调查筛选成人乳糖吸收不良者、轻度及重度乳糖不耐受者作为试验对象。收集受试者一次新鲜全便 ,选用 5种特异性的 1 6S r RNA寡核苷酸探针 ,应用荧光原位杂交技术检测结肠细菌总数以及几种主要菌属 (种 )的构成。结果 : 乳糖不耐受组与吸收不良组相比 ,细菌总数和双歧杆菌数有显著性差异 (P<0 .0 5) ,细菌总数与乳糖不耐受症状评分之间呈负相关 (P<0 .0 5) ;每次饮奶以平均 2 0 0 ml计 5～ 7次 / w饮奶组与 0～ 2次 / w饮奶组或 0次 / w饮奶组相比 ,双歧杆菌数量显著增高 (P<0 .0 5)。结论 : 结肠细菌总数和双歧杆菌数可能与 LI症状的产生有关 ,同时饮奶习惯可能对双歧杆菌数量有潜在影响。

应用双色荧光原位杂交技术检测克氏综合征

探讨用双色荧光原位杂交技术(dual colorfluorescenceinsituhybridization,D FISH)检测性染色体数目异常克氏综合征的应用价值,建立常规分裂期染色体和间期细胞FISH技术的实验方法。以Biotin标记的X染色体α 卫星DNA(pBamX7)探针和以Digoxigenin标记的Y染色体长臂末端重复序列(pY3.4)探针对19例克氏综合征标本同时进行外周血染色体及其间期细胞核的原位杂交,分别用Avidin FITC和Rhodamine FITC及其Anti avidin进行信号的检测与放大,DAPI复染。于OlympusAX 70型荧光显微镜下,分别通过WIB、WIG及其WU滤光镜观察杂交信号及其染色体或间期核背景,并统计外周血中期染色体及其间期细胞核的杂交信号颗粒数量。在显微镜下可见以Biotin标记的pBamX7探针显示2个绿色杂交信号,以Digoxigenin标记的pY3.4探针显示1个红色杂交信号,染色体或间期核背景经DAPI复染显示蓝色;18例出现XXY杂交信号的细胞,染色体及其间期细胞核杂交平均出现率分别为95.89%和95%,明显大于正常对照标准值2.75%,证实核型为47,XXY,与染色体检测的结果一致;其余1例染色体核型检测为嵌合体,XXY杂交信号细胞出现率为92%,同时检出6.7%的XY杂交信号细胞(>正常对照标准值4.17%)。用FISH技术检测性染色体数目异常克氏综合征具有快速、敏感度高、信号强、

荧光原位杂交(FISH)技术在厌氧颗粒污泥研究中的应用

本文介绍了荧光原位杂交(FISH)技术的基本原理和操作步骤,重点介绍和讨论了FISH技术在厌氧颗粒污泥研究中的应用现状,并对该技术在国内的应用前景进行了展望。

免疫组织化学法与荧光原位杂交技术检测乳腺癌HER-2状态一致性的对比研究

目的对比研究免疫组织化学法(IHC)与荧光原位杂交技术(FISH)检测乳腺癌人类表皮生长因子受体2(HER-2)蛋白表达和基因状态的一致性,并评价其临床意义。方法采用IHC法及FISH法分别检测1 032例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本的HER-2蛋白表达和HER-2基因状态,并进行对比分析。结果 1 032例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本,用IHC检测HER-2蛋白表达阳性者373例,占36.1%(373/1 032);表达阴性者659例,占63.9%(659/1 032)。FISH检测HER-2基因扩增325例,占31.5%(325/1 032);基因非扩增707例,占68.5%(707/1 032)。373例HER-2蛋白为阳性的患者中,HER-2基因扩增293例,符合率为78.6%(293/373);659例HER-2蛋白为阴性的患者中,HER-2基因非扩增627例,符合率为95.1%(627/659)。2种方法检测结果比较一致性较好(Kappa=0.758 1,P<0.000 1)。结论 IHC检测乳腺癌HER-2蛋白与FISH检测HER-2基因结果一致性较高。

急性早幼粒细胞白血病染色体易位联合R显带和间期荧光原位杂交技术分析

目的探讨荧光原位杂交(FISH)及常规细胞遗传学染色体核型分析技术对急性早幼粒细胞白血病(APL)患者PML/RARa融合基因检测的灵敏度和特异度及其在临床中应用价值。方法选取51例APL患者,应用常规细胞遗传学染色体核型分析方法及FISH技术检测患者PML/RARa融合基因的表达情况。结果在进行常规染色体核型分析的51例患者中41例(80.4%)为t(15;17)(q22;q21)易位的核型异常,其中38例(74.5%)为单纯t(15;17)(q22;q21)易位的核型异常,3例(5.9%)为伴t(15;17)(q22;q21)易位的复杂核型异常;10例(19.6%)无t(15;17)(q22;q21)易位的核型异常中1例(2.0%)为不伴t(15;17)(q22;q21)易位的复杂核型异常,1例(2.0%)为t(11;17)(q13;q21)易位的核型异常,3例(5.9%)为正常核型,5例(9.8%)未见分裂相。在进行FISH检测的51例患者标本中48例(94.1%)有PML/RARa融合基因异常,同时进行常规染色体核型分析和FISH检测的41例患者同时存在t(15;17)(q22;q21)易位的核型异常和PML/RARa融合基因异常,两者符合率为100%;在15例正常骨髓标本的FISH检测中15例标本结果均未发现有PML/RARa融合基因,提示FISH检测技术具有较高的敏感度和特异性。结论对于初发的APL患者,常规染色体核型分析和间期荧光杂交技术结合分析APL患者细胞遗传学特征是诊断该病的有力工具,FISH技术操作更为简单,省时直观。

荧光原位杂交技术在膀胱肿瘤诊断中的应用

目的:评价荧光原位杂交技术(FISH)在膀胱肿瘤诊断中的应用价值。方法:20例正常人通过FISH技术检测9号染色体P16位点、3号染色体、7号染色体及17号染色体的变异情况,建立阈值。20例血尿患者留取晨尿,分别进行尿脱落细胞学检查和FISH检查。以至少两种探针检测结果超过阈值或一种探针检测结果至少存在两种异常为诊断阳性。结果:20例血尿患者除1例为泌尿系结石、1例为BPH外,病理检查证实的18例膀胱肿瘤患者中,FISH检出16例,尿脱落细胞学检出4例。结论:FISH无创快速,检出率高,在膀胱肿痛早期诊断中优于尿脱落细胞学检查方法。

荧光原位杂交技术在先天性心脏病产前诊断中的应用

目的探讨采用荧光原位杂交技术(FISH)检查法对先天性心脏病胎儿进行染色体22q11微缺失产前诊断的临床应用。方法应用常规染色体核型分析及FISH检查法,对2012年3月至2014年10月中山市博爱医院收治的52例疑似妊娠22q11微缺失胎儿的孕妇进行产前22q11微缺失检查并跟踪随访。结果所有胎儿染色体核型分析均无异常,FISH检查结果显示3例呈阳性。结论染色体核型分析无法检测22q11微缺失综合征,因此对有22q11微缺失先天性心脏病风险的胎儿产前诊断应用FISH检查法,可提高检测的准确性。

荧光原位杂交技术在膀胱癌诊断中的应用

膀胱肿瘤是泌尿系统最常见的肿瘤。膀胱癌主要依靠膀胱镜检查并取活组织检查确诊,但膀胱镜检查为有创检查,且与膀胱炎症不易区别。