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胶原-透明质酸-硫酸软骨素复合三维支架体外构建组织工程软骨的实验研究 被引量:30
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作者 阎继红 刘玲蓉 +4 位作者 李学敏 王福君 朱太文 袁平 张其清 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期130-133,共4页
目的探讨以胶原(collagen,Col)-透明质酸(hyaluronicacid,HA)-硫酸软骨素(chondroitinsulfate,CS)为支架材料构建组织工程软骨的可行性。方法以乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐为交联剂通过冷冻干燥的方法制备Col-HA-CS复合支... 目的探讨以胶原(collagen,Col)-透明质酸(hyaluronicacid,HA)-硫酸软骨素(chondroitinsulfate,CS)为支架材料构建组织工程软骨的可行性。方法以乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐为交联剂通过冷冻干燥的方法制备Col-HA-CS复合支架及单纯Col支架。通过扫描电镜、HE染色对Col-HA-CS复合支架材料形态进行观察。分离培养幼兔关节软骨细胞,将体外扩增的软骨细胞接种在两种支架上,通过组织学、扫描电镜观察软骨细胞在支架上的生长形态;通过生物化学功能检测细胞-支架复合物中DNA、糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量;RT-PCR方法检测在Col-HA-CS复合支架上的软骨细胞Col的表达情况。结果软骨细胞在Col-HA-CS复合支架材料上增殖分化良好,并保持软骨细胞特异的分化Col表型,培养21d后已有软骨样组织形成,出现软骨陷窝。DNA和GAG含量测定显示软骨细胞在复合支架上随时间增加逐渐扩增并分泌大量的GAG,含量明显高于单纯Col支架材料,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Col-HA-CS复合支架材料可为软骨细胞生长分化及组织形成提供一个良好的环境,在软骨组织工程的支架材料领域有较广泛的应用前景。 展开更多
关键词 组织工程软骨 胶原 透明质酸 硫酸软骨
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组织工程软骨与柚皮苷联合修复兔膝关节软骨缺损的组织学证实 被引量:11
2
作者 李春根 曲弋 +6 位作者 叶超 陈婧 王逢贤 李鹏洋 李素华 任敬佩 亓建 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第20期3165-3171,共7页
背景:目前临床上虽有多种方法用于治疗软骨缺损,但没有从根本上解决关节软骨缺损修复问题。目的:通过组织学研究进一步评价柚皮苷结合组织工程软骨修复兔关节软骨缺损的效果。方法:取兔骨髓间充质干细胞体外增殖后,复合于改建后的脱细... 背景:目前临床上虽有多种方法用于治疗软骨缺损,但没有从根本上解决关节软骨缺损修复问题。目的:通过组织学研究进一步评价柚皮苷结合组织工程软骨修复兔关节软骨缺损的效果。方法:取兔骨髓间充质干细胞体外增殖后,复合于改建后的脱细胞真皮基质载体上,制成组织工程软骨,植入到兔膝关节软骨缺损,并以柚皮苷汤灌胃,于4,8周后分别对修复组织进行苏木精-伊红、Masson三色染色、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原染色、Ⅹ型胶原染色等组织学检查。结果与结论:术后8周,柚皮苷结合干细胞复合体组缺损处修复组织变成乳白色,半透明光滑组织,缺损修复组织与周围正常软骨已基本难区分,表面光滑。组织学检查发现修复缺损处基本为新生软骨填充。结果证实,柚皮苷结合组织工程软骨能提高家兔膝关节软骨缺损的修复质量。 展开更多
关键词 组织构建 软骨组织工程 软骨缺损 骨髓间充质干细胞 脱细胞真皮基质 组织工程软骨 柚皮苷
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骨髓间充质干细胞复合纤维蛋白封闭剂体内构建可注射性组织工程软骨 被引量:17
3
作者 葛薇 姜文学 +3 位作者 李长虹 尤佳 邱录贵 赵春华 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期139-143,共5页
目的探讨利用人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)与可注射性纤维蛋白封闭剂(fibrinsealant,FS)复合,在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性。方法体外分离扩增健康人MSCs,以含有转化生长因子β1(transforminggrowthfac... 目的探讨利用人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)与可注射性纤维蛋白封闭剂(fibrinsealant,FS)复合,在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性。方法体外分离扩增健康人MSCs,以含有转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGF-β1)、地塞米松、维生素C的培养基进行成软骨诱导,诱导第7、14天分别检测软骨细胞特异的生物学特性。将诱导7d的MSCs与FS复合,接种于裸鼠背部皮下作为实验组,同时设单纯只注射FS或MSCs的支架对照组和细胞对照组。分别于接种后6、12周取材进行大体观察,行HE、阿尔新蓝染色和型胶原免疫组织化学染色评价其成软骨能力。结果MSCs以特定的培养基诱导后由纺锤形变为多角形,并表达软骨细胞分泌的基质。复合物接种6和12周后,实验组均可形成软骨样组织块,6周时形成的组织块较小而质地柔韧,陷窝清楚,可检测到阳性阿尔新蓝及型胶原表达;12周形成的组织块较大,质地较硬,表面光滑,软骨细胞位于成熟的陷窝中,阿尔新蓝及型胶原免疫组化阳性染色较6周增强。两个对照组均无软骨样组织块形成。结论MSCs复合FS可以作为一种较优良的可注射性组织工程软骨的构建方法。 展开更多
关键词 组织工程软骨 骨髓间充质干细胞 可注射性纤维蛋白封闭剂
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以藻酸钙为载体的可注射性组织工程软骨和骨研究 被引量:12
4
作者 雷德林 陈书军 +3 位作者 羊书勇 杨维东 陈富林 毛天球 《中国临床康复》 CSCD 2002年第22期3351-3352,I002,共3页
目的在裸鼠背部皮下注射软骨细胞/藻酸钙复合物、骨髓基质成骨细胞/藻酸钙复合物,观察体内软骨、骨形成的可行性。方法分别从兔耳软骨和髂骨获取软骨细胞和骨髓基质干细胞,体外扩增培养,将获得的软骨细胞和骨髓基质成骨细胞与藻酸盐复合... 目的在裸鼠背部皮下注射软骨细胞/藻酸钙复合物、骨髓基质成骨细胞/藻酸钙复合物,观察体内软骨、骨形成的可行性。方法分别从兔耳软骨和髂骨获取软骨细胞和骨髓基质干细胞,体外扩增培养,将获得的软骨细胞和骨髓基质成骨细胞与藻酸盐复合,注射于裸鼠背部皮下,以单纯藻酸钙植入作为对照组,6,12周后进行组织学检查和X线检查,观察软骨和骨的形成。结果注射软骨细胞复合物组,裸鼠背部皮下有软骨样组织形成,软骨细胞位于类似于正常软骨组织的陷窝中,注射骨髓基质成骨细胞复合物组,裸鼠背部皮下有骨样组织形成,具有骨髓腔样结构,而对照组无软骨或骨形成。结论藻酸钙可用作软骨和骨组织工程的支架材料,以藻酸钙为载体的可注射性组织工程软骨和骨是可行的。 展开更多
关键词 藻酸钙 载体 可注射性 组织工程软骨
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骺板软骨细胞复合三维支架体外构建组织工程软骨的研究 被引量:11
5
作者 周强 李起鸿 戴刚 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2004年第2期92-95,共4页
目的 探讨将骺板软骨细胞复合三维支架经体外培养 ,构建组织工程软骨的效果及其生物学特点。 方法 将 3周龄幼兔第 1代骺板软骨细胞与液态的生物凝胶混合 ,接种于聚磷酸钙纤维 /L -聚乳酸 (CPPF/PL L A)三维支架材料 ,构建组织工程... 目的 探讨将骺板软骨细胞复合三维支架经体外培养 ,构建组织工程软骨的效果及其生物学特点。 方法 将 3周龄幼兔第 1代骺板软骨细胞与液态的生物凝胶混合 ,接种于聚磷酸钙纤维 /L -聚乳酸 (CPPF/PL L A)三维支架材料 ,构建组织工程软骨组织块 ,连续培养 4周。行大体、倒置显微镜及组织学、 型和 型胶原免疫组织化学光镜观察 ,定量检测硫酸糖胺多糖 (GAG)含量。 结果 构建的组织工程软骨块在培养过程中能保持其初始外形 ,种子细胞呈稳定的三维均相分布 ,外观逐渐呈乳白色、半透明 ,硬度亦不断增加。培养 1周有软骨细胞陷窝形成 ,2周后形成富含 型胶原和蛋白聚糖、具有典型软骨组织结构的工程化软骨 ,且 型胶原逐渐转为阴性。 4周时构建软骨的组织结构与天然骺板软骨相类似 ,硫酸 GAG含量平均为天然骺板软骨的 34%以上。 结论 骺板软骨细胞复合三维支架体外培养可生成典型软骨 ,且可形成类似天然骺板软骨的组织结构 ,能满足修复骺板缺损的基本要求。体外培养 1~ 2周可能是植入体内修复骺板缺损的较佳时机。 展开更多
关键词 骺板 软骨细胞 三维支架体 组织工程软骨 生物学特点
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人脐带Wharton胶中间充质干细胞体外无支架组织工程软骨的构建 被引量:5
6
作者 侯克东 袁玫 +6 位作者 张莉 郭全义 彭江 眭翔 赵斌 刘舒云 卢世璧 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第37期6841-6846,共6页
背景:构建组织工程软骨的方法多为自体种子细胞复合天然或合成物支架,目前多存在种子细胞来源有限、支架安全性和生物相容性、以及细胞在支架中分布不均的问题。目的:探讨人脐带Wharton胶中间充质干细胞向软骨诱导分化并体外构建无支架... 背景:构建组织工程软骨的方法多为自体种子细胞复合天然或合成物支架,目前多存在种子细胞来源有限、支架安全性和生物相容性、以及细胞在支架中分布不均的问题。目的:探讨人脐带Wharton胶中间充质干细胞向软骨诱导分化并体外构建无支架组织工程软骨的可行性。方法:分离培养人脐带Wharton胶中的间充质干细胞,进行流式细胞学鉴定。对软骨诱导前后的细胞进行组织学和免疫组织化学染色,对其表达的葡萄糖胺聚糖和Ⅱ型胶原进行定量研究,并应用RT-PCR检测软骨诱导前后Ⅱ型胶原和Sox-9mRNA的表达。采用密集诱导培养→离心管培养→生物反应器培养,进行体外构建无支架软骨组织。结果与结论:人脐带Wharton胶富含干细胞,流式细胞仪检测结果显示这些细胞不表达造血干细胞标志,表达CD44,CD105、CD271等间充质干细胞表面标志;HLA-ABC阳性表达,HLA-DPDQDR阴性表达。未进行软骨诱导的细胞弱表达软骨细胞标志,诱导后葡萄糖胺聚糖和Ⅱ型胶原显著增高。RT-PCR结果显示人脐带Wharton胶间充质干细胞诱导前后均表达Sox-9、Ⅱ型胶原mRNA。说明人脐带Wharton胶间充质干细胞具有前软骨细胞的特性。采用密集诱导培养结合生物反应器培养,不用支架,体外可以构建成大块组织工程软骨。表明人脐带Wharton胶间充质干细胞是一种良好的构建组织工程软骨的种子细胞。 展开更多
关键词 脐带 间充质干细胞 软骨 支架 组织工程软骨
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壳聚糖与型胶原复合制作组织工程软骨支架及其性能研究 被引量:29
7
作者 史德海 蔡道章 +3 位作者 周长忍 李立华 曾春 李晓峰 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期278-282,共5页
目的 探讨采用壳聚糖与 型胶原复合制作新型组织工程软骨三维多孔支架的方法,并对其理化性能进行检测。 方法 将精制88%脱乙酰度壳聚糖溶于0 .2 mol/ L 醋酸溶液制成2 %溶液,高纯度猪 型胶原溶于0 .5 m ol/ L醋酸溶液制成1%溶液,两者... 目的 探讨采用壳聚糖与 型胶原复合制作新型组织工程软骨三维多孔支架的方法,并对其理化性能进行检测。 方法 将精制88%脱乙酰度壳聚糖溶于0 .2 mol/ L 醋酸溶液制成2 %溶液,高纯度猪 型胶原溶于0 .5 m ol/ L醋酸溶液制成1%溶液,两者按4∶1(重量比)充分搅拌混合,采用冷冻干燥法制成壳聚糖与 型胶原复合支架。采用碳化二亚胺/ N-羟基琥珀酰亚胺对支架进行交联,力学测定比较支架交联前后的强度变化,扫描电镜观察其超微结构,于2、4、6和8周经溶菌酶体外降解实验测定其体外降解性。 结果 制备的复合支架成形良好,交联后其力学强度明显增加。扫描电镜显示壳聚糖与 型胶原成分在支架内分布均匀,支架内孔洞相互连通似海绵状,孔径10 0~2 5 0 μm。各时间段复合支架体外降解较单纯壳聚糖支架快。 结论 壳聚糖与 型胶原复合成功地制作成了三维多孔复合支架。其理化性能及体外降解测定,可以作为支架载体,应用于组织工程软骨的构建。 展开更多
关键词 胶原复合 壳聚糖 性能研究 软骨支架 制作 N-羟基琥珀酰亚胺 组织工程软骨 mol/L 三维多孔支架 Ⅱ型胶原 复合支架 扫描电镜观察 体外降解 理化性能 碳化二亚胺 冷冻干燥法 脱乙酰度 强度变化 超微结构 支架成形 胶原成分
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组织工程软骨修复兔关节软骨缺损的初步研究 被引量:7
8
作者 陈雷 杨志明 李秀群 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2003年第3期251-254,共4页
目的 探讨运用组织工程软骨植入修复兔胫骨平台外侧髁全关节软骨浅层缺损的可行性。 方法 取 2周龄乳兔软骨细胞体外培养传代至第 3代后 ,与人胎盘 型胶原蛋白海绵复合后植入成年兔的胫骨体平台外侧髁浅层完全软骨缺损区 ,并设立空... 目的 探讨运用组织工程软骨植入修复兔胫骨平台外侧髁全关节软骨浅层缺损的可行性。 方法 取 2周龄乳兔软骨细胞体外培养传代至第 3代后 ,与人胎盘 型胶原蛋白海绵复合后植入成年兔的胫骨体平台外侧髁浅层完全软骨缺损区 ,并设立空白对照组 ,分别于术后 4、12和 2 4周取材 ,观察修复效果。 结果 实验组术后 4周缺损表面未见明显的新生软骨形成 ;12周 ,缺损表面有少量的新生软骨形成 ,组织学切片上可见软骨细胞呈边缘不规则的 ,小蜂窝状结构 ,软骨细胞周围有软骨陷窝形成 ;2 4周 ,缺损表面的新生软骨较 4、12周的新生软骨明显 ,表面光滑 ,且与周围组织结合紧密 ,但仍存在部分缺损尚未修复。组织学切片上可见软骨陷窝形成 ,并分泌甲苯胺蓝异染的软骨基质。而对照组则均未见明显的修复。 结论 制成的组织工程软骨对兔胫骨平台软骨浅层完全缺损有修复作用 ,但不能完全修复缺损。 展开更多
关键词 组织工程软骨 修复 关节软骨缺损 研究 软骨细胞 体外培养
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同种异体组织工程软骨修复兔气管软骨缺损实验研究 被引量:7
9
作者 吴海涛 钟翠平 +2 位作者 王薇 王正敏 顾云娣 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期310-310,T006,共2页
关键词 同种异体 组织工程软骨 修复 气管软骨缺损 实验研究
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BMSCs构建组织工程软骨的研究进展 被引量:21
10
作者 许澍洽 许扬滨 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期163-166,共4页
目的综述BMSCs构建组织工程软骨的进展。方法查阅近10年来有关BMSCs构建组织工程软骨的文献,并进行综述。结果支架为软骨细胞的生长提供了理想的环境,细胞因子和基因修饰可促进BMSCs分化为软骨细胞,三者在软骨组织工程中具有重要作用。... 目的综述BMSCs构建组织工程软骨的进展。方法查阅近10年来有关BMSCs构建组织工程软骨的文献,并进行综述。结果支架为软骨细胞的生长提供了理想的环境,细胞因子和基因修饰可促进BMSCs分化为软骨细胞,三者在软骨组织工程中具有重要作用。结论三维支架的改良、合理使用细胞因子及基因修饰技术的提高,将推动临床上软骨重建技术的发展。 展开更多
关键词 组织工程软骨 BMSCS 基因修饰 细胞因子
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“双相”组织工程软骨修复兔关节骨软骨缺损 被引量:13
11
作者 尹战海 张璐 +4 位作者 王金堂 刘淼 曹峻岭 王民 韩学哲 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期652-657,共6页
目的探讨“双相”异体骨基质明胶(bonematrixgelatin,BMG)作为组织工程软骨载体,与同体骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)结合,构建组织工程软骨修复兔关节骨软骨缺损的效果。方法4月龄新西兰兔32只,雌雄不限,体重2~... 目的探讨“双相”异体骨基质明胶(bonematrixgelatin,BMG)作为组织工程软骨载体,与同体骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)结合,构建组织工程软骨修复兔关节骨软骨缺损的效果。方法4月龄新西兰兔32只,雌雄不限,体重2~3kg。1体外实验:取5只新西兰兔,处死后取髂骨和四肢骨,制备一侧松质骨,一侧皮质骨的“双相”异体BMG载体,扫描电镜观察。另取新西兰兔18只,抽取骨髓,分离MSCs并诱导成软骨分化;将诱导而来的软骨前体细胞与“双相”BMG载体复合构建组织工程软骨,分别于1、3和5周取材行Masson、PAS染色和扫描电镜观察。2体内实验:将抽取骨髓的18只及余下的9只新西兰兔制成双侧股骨内髁骨软骨缺损模型,将前期制备的组织工程软骨同体植入18只兔的右股骨内髁骨软骨缺损(A组),左侧缺损移植异体BMG(B组),其余9只双侧软骨缺损未予处理作为空白对照(C组),分别于术后1、3和6个月取材,行大体、组织学和型胶原mRNA原位杂交观察,改良Wakitani法评分,比较各组修复效果差异。结果1体外实验:“双相”BMG松质骨面孔隙大小100~800μm,细胞于其中增生,形成富含细胞的软骨层;皮质骨面孔隙大小10~40μm,细胞层状覆盖于其表面,可作为起支撑作用的软骨下骨。2体内实验:A组术后1个月即可重建关节骨软骨缺损;修复软骨在观察期内逐渐变薄,但在6个月内始终保持关节面及软骨下骨结构完整。B、C组未能修复缺损,缺损周边软骨磨损加剧。改良Wakitani评分显示A组在3个时间点的各项评分结果,除6个月软骨厚度外,其它指标均优于B、C组,且差异有统计学意义(P<0.01)。型胶原mRNA原位杂交显示,A组缺损区修复组织中细胞阳性染色率明显高于B、C组,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论“双相”异体BMG可作为组织工程软骨载体材料,其结合自体MSCs诱导的软骨前体细胞制备的组织工程软骨,可修复兔关节软骨和软骨下骨。 展开更多
关键词 组织工程软骨骨髓间充质干细胞骨基质明胶关节骨软骨缺损
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组织工程软骨研究进展 被引量:5
12
作者 王建 周跃 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2001年第6期492-496,共5页
Chondrocytes are initially used as the preferred cell type but are shown to have some disadvantages. Mesenchymal stem cells can be effectively used to overcome the limitation experienced with the use of differentiated... Chondrocytes are initially used as the preferred cell type but are shown to have some disadvantages. Mesenchymal stem cells can be effectively used to overcome the limitation experienced with the use of differentiated chondrocytes. With either type of cell, cartilages are formed by high density cell cultures without scaffolds. A three dimensional scaffold or matrix is required for formation of large amounts of tissue engineered cartilage, and bioreactors present numerous advantages for growing tissue engineered cartilage in vitro . Various scaffold materials have been tested including both naturally derived and synthetic polymers. Cell density and cultivation time which play crucial roles in the chondrogenesis in vitro and in vivo , are therefore important parameters for cartilage tissue engineering. Although tissue engineered cartilage is good for regeneration of articular cartilage in current experiment, none of studies reviewed here have created a tissue that fully regenerates the integration of any newly formed tissue with the existing cartilage, even after one year in 展开更多
关键词 组织工程软骨 种子细胞 构建 关节软骨
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脱细胞猪小肠黏膜下层支架复合软骨细胞构建组织工程软骨 被引量:1
13
作者 吴迪 谢瑜 +4 位作者 王少云 朱晓松 李青 董坚 李世和 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第21期3829-3833,共5页
背景:关节软骨损伤后无论是否施加干预,都难以达到满意的修复效果。目的:观察以猪自体软骨细胞为种子细胞复合脱细胞猪小肠黏膜下层构建组织工程软骨的可行性。方法:将培养至第3代的猪膝关节软骨细胞接种于小肠黏膜下层膜上,复合培养48h... 背景:关节软骨损伤后无论是否施加干预,都难以达到满意的修复效果。目的:观察以猪自体软骨细胞为种子细胞复合脱细胞猪小肠黏膜下层构建组织工程软骨的可行性。方法:将培养至第3代的猪膝关节软骨细胞接种于小肠黏膜下层膜上,复合培养48h,构建细胞-载体复合物,光学显微镜、扫描电镜观察软骨细胞在小肠黏膜下层膜上的生长情况。结果与结论:苏木精-伊红染色见细胞在小肠黏膜下层基质层表面呈单层或复层生长;免疫组织化学染色结果显示软骨细胞与小肠黏膜下层表面之间形成一条连续阳性表达条带;扫描电镜见软骨细胞在支架孔隙内贴壁良好生长。 展开更多
关键词 小肠黏膜下层 关节软骨 自体 组织工程软骨
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在琼脂糖表面无支架条件下构建组织工程软骨 被引量:1
14
作者 王金良 赵建宁 +3 位作者 郭亭 岳鹏举 何劼 何志伟 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期3625-3628,共4页
背景:实验表明,软骨细胞在体外培养时,经常发生表型的丢失。但形成软骨细胞团块时可以维持软骨细胞表型,由此人们探讨无支架结构培养组织工程软骨的技术。目的:拟建立软骨细胞聚集培养体系,观察在琼脂糖表面培养软骨细胞,无支架条件下... 背景:实验表明,软骨细胞在体外培养时,经常发生表型的丢失。但形成软骨细胞团块时可以维持软骨细胞表型,由此人们探讨无支架结构培养组织工程软骨的技术。目的:拟建立软骨细胞聚集培养体系,观察在琼脂糖表面培养软骨细胞,无支架条件下构建组织工程软骨的特点。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-10/2007-04在解放军南京军区总医院骨科研究所完成。材料:SPF级新西兰白兔4只,2周龄,雌雄不限。方法:分离、提取兔关节软骨原代软骨细胞,将低熔点琼脂糖铺于24孔培养板表面,按每孔2.5×105接种提取的兔原代软骨细胞,在培养箱内培养,定期换液。主要观察指标:取10d标本行组织学、Ⅱ型胶原免疫组织化学检测。结果:10d时,软骨细胞自聚集形成有一定形状、大小的类软骨组织,苏木精-伊红染色可见软骨陷窝结构,甲苯胺蓝染色见紫红色异染,说明有蛋白聚糖的分泌。钙染色未见钙化,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色有棕黄色颗粒,说明有Ⅱ型胶原分泌。结论:在琼脂糖表面构建组织工程软骨的培养体系,琼脂糖膜阻止软骨细胞的黏附和伸展,从而保持软骨细胞的圆形形态;软骨细胞在琼脂糖表面直接接触,加强了细胞之间的信息交流,有利于维持细胞的表型,维持软骨细胞分泌细胞外基质的特征。 展开更多
关键词 无支架 组织工程软骨 琼脂糖 免疫组织化学 组织构建
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膨体聚四氟乙烯(ePTFE)内支撑组织工程软骨的构建实验研究 被引量:5
15
作者 李德保 田甜 章庆国 《中国美容医学》 CAS 2009年第6期823-826,共4页
目的:探讨骨髓间充质干细胞和软骨细胞混合培养体外构建ePTFE软骨复合体的可能性。方法:实验组:分离、获取、扩增兔骨髓间充质干细胞和软骨细胞,二者按7:3比例混和,接种到以膨体聚四氟乙烯(ePTFE)为内支撑外裹聚羟基乙酸(PGA)支架上,体... 目的:探讨骨髓间充质干细胞和软骨细胞混合培养体外构建ePTFE软骨复合体的可能性。方法:实验组:分离、获取、扩增兔骨髓间充质干细胞和软骨细胞,二者按7:3比例混和,接种到以膨体聚四氟乙烯(ePTFE)为内支撑外裹聚羟基乙酸(PGA)支架上,体外培养8周后,行大体、组织学、Ⅱ型胶原免疫组织化学和生物化学检测。对照组:利用实验组支架单纯接种骨髓间充质干细胞行体外培养。结果:实验组:体外培养8周后形成形态良好的软骨样组织复合体,组织学可见成熟软骨陷窝、异染基质、Ⅱ型胶原表达阳性。对照组:无软骨形成。结论:兔骨髓间充质干细胞和软骨细胞混合培养,可以在体外构建出特定形状、结构组织学良好的ePTFE软骨复合体。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 软骨细胞 组织工程软骨 膨体聚四氟乙烯 聚羟基乙酸
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组织工程软骨修复全层大面积关节软骨损伤的实验研究 被引量:1
16
作者 宇丽 唐明乔 +4 位作者 颜炜群 杨同书 郑辉 山艳春 刘一 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期97-100,共4页
目的 观察由软骨细胞体外培养的人工软骨组织对家兔膝关节软骨全层缺损修复的可行性。方法 分离收集兔软骨细胞 (4周龄 ) ,用培养液悬浮 ,经离心管体外培养成组织工程软骨 ,然后植入兔膝关节股骨负重面的缺损 (5mm× 4mm)部位 ,观... 目的 观察由软骨细胞体外培养的人工软骨组织对家兔膝关节软骨全层缺损修复的可行性。方法 分离收集兔软骨细胞 (4周龄 ) ,用培养液悬浮 ,经离心管体外培养成组织工程软骨 ,然后植入兔膝关节股骨负重面的缺损 (5mm× 4mm)部位 ,观察 2 ,4,8,12周软骨缺损的修复情况 ,并进行大体和组织学观察。结果 移植后第 8周 ,移植部位填充物与宿主已完全整合 ,缺损处表面光滑 ;组织学显示 ,缺损部位新生软骨与所移植软骨有较好的连续性 ,并且缺损底部有软骨下骨及海绵状骨生成 ;对照组 (未移植组 ) ,从组织学观察到缺损部位呈纤维样修复 ,未见有由新生软骨细胞形成软骨组织。 展开更多
关键词 全层大面积关节软骨损伤 实验研究 软骨修复 组织工程软骨 组织学观察 软骨组织 细胞体外培养 缺损部位 膝关节软骨 缺损修复 软骨细胞 软骨缺损 移植部位 软骨下骨 细胞形成 培养液 离心管 12周 移植后 填充物 连续性
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离心管内组织工程软骨培养的初步研究 被引量:3
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作者 王建 杨志明 周跃 《骨与关节损伤杂志》 2003年第2期114-117,共4页
目的 探讨几种材料与软骨细胞的生物相容性 ,离心管内培养形成组织工程软骨。方法 自 3周龄兔分离关节软骨细胞 ,按 3× 10 6细胞 /管于离心管内接种软骨细胞 ,离心 (10 0 0r/min) 5min后连续培养 2周。分别将脱脂脱蛋白骨、羟基... 目的 探讨几种材料与软骨细胞的生物相容性 ,离心管内培养形成组织工程软骨。方法 自 3周龄兔分离关节软骨细胞 ,按 3× 10 6细胞 /管于离心管内接种软骨细胞 ,离心 (10 0 0r/min) 5min后连续培养 2周。分别将脱脂脱蛋白骨、羟基磷灰石、糖蛋白微孔膜、胶原海绵和明胶海绵置于离心管底 ,按 3× 10 6细胞 /管加入软骨细胞 ,离心 (2 0 0r/min) 5min后连续培养 2周。含钙组织首先经脱钙处理后 ,与其它组织工程软骨行组织学检查。结果 软骨细胞无支架培养形成软骨 ,具有一定的骺软骨组织学特征。支架材料与软骨细胞有良好的生物相容性 ,均能形成软骨样组织。组织工程软骨具有不同的组织学结构 ,细胞及其细胞外基质形态差异明显。结论 支架材料与软骨细胞具有良好的生物相容性 。 展开更多
关键词 组织工程软骨培养 离心管 脱脂脱蛋白骨 羟基磷灰石 糖蛋白微孔膜 胶原海绵 明胶海绵 生物相容性
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组织工程软骨种子细胞研究进展 被引量:2
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作者 王师平 郭树忠 《中国美容医学》 CAS 2012年第9期1655-1658,共4页
组织工程是应用生命科学和工程学原理,研究开发能够修复、维持或改善组织损伤能力的生物替代物的一门学科[1]。利用组织工程方法再造软骨,为临床上软骨缺损的修复带来了新的途径,种子细胞作为软骨组织工程学研究的首要方面,它的来源途... 组织工程是应用生命科学和工程学原理,研究开发能够修复、维持或改善组织损伤能力的生物替代物的一门学科[1]。利用组织工程方法再造软骨,为临床上软骨缺损的修复带来了新的途径,种子细胞作为软骨组织工程学研究的首要方面,它的来源途径也就尤为重要。目前的组织工程软骨种子细胞的来源主要为自体软骨细胞、同种异体软骨细胞、成纤维细胞、干细胞、转基因细胞等,成熟软骨细胞是最常被关注的种子细胞,人们已经深入研究了其产生、维持和改造软骨细胞外基质的作用; 展开更多
关键词 组织工程软骨种子细胞 同种异体软骨细胞 组织工程 自体软骨细胞 组织工程方法 骨细胞外基质 生物替代物 成纤维细胞
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组织工程软骨体外构建的相关实验研究 被引量:1
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作者 张英 周广东 殷德民 《组织工程与重建外科杂志》 2005年第3期157-160,共4页
目的探索组织工程软骨体外构建技术体系可行性。方法种子细胞选用胎儿软骨细胞(口服药物流产胎儿,胎龄3-6个月)。酶消化法获得第1代细胞,以50×106/ml浓度均匀接种于经聚乳酸(PLA)包埋聚乙醇酸(PGA)高分子聚合物支架,形成细胞-支架... 目的探索组织工程软骨体外构建技术体系可行性。方法种子细胞选用胎儿软骨细胞(口服药物流产胎儿,胎龄3-6个月)。酶消化法获得第1代细胞,以50×106/ml浓度均匀接种于经聚乳酸(PLA)包埋聚乙醇酸(PGA)高分子聚合物支架,形成细胞-支架复合体,在体外静态培养。分别于2周、4周、8周进行大体观察、扫描电镜及组织学检测。结果体外构建的组织工程软骨,随培养时间延长,色泽由2周时的乳白色逐渐呈现半透明,8周时接近正常软骨外观。扫描电镜显示软骨细胞与材料具有良好相容性,培养7天PGA纤维之间有基质沉积。HE染色示2周有大量软骨陷窝形成和均匀嗜碱性基质分泌,Safranin’O染色示基质有酸性蛋白多糖分布,Massons’s trichome染色示基质有胶原成分,但含量较少,经免疫组织化学检测为特异Ⅱ型胶原。培养4周胶原成分开始明显增多,软骨陷窝形态接近成熟,8周细胞外基质蛋白多糖和Ⅱ型胶原含量丰富且分布均匀。结论以成熟软骨细胞为种子细胞,运用组织工程技术在体外能构建出具有正常软骨组织结构特征的人组织工程软骨。 展开更多
关键词 胎儿软骨细胞 组织工程软骨 体外
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透明质酸改性聚乳酸支架组织工程软骨的构建 被引量:2
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作者 刘春栋 张志光 +1 位作者 苏凯 申晓青 《广东牙病防治》 2012年第3期124-129,共6页
目的利用透明质酸(hyaluronic acid,HA)改性聚乳酸(polylactic acid,PLA)支架来构建同种异体组织工程软骨,分析探讨HA改性PLA支架构建组织工程软骨的可行性。方法采用盐析法制备出高孔隙率的PLA支架,采用低浓度NaOH、碳化二亚胺和HA进... 目的利用透明质酸(hyaluronic acid,HA)改性聚乳酸(polylactic acid,PLA)支架来构建同种异体组织工程软骨,分析探讨HA改性PLA支架构建组织工程软骨的可行性。方法采用盐析法制备出高孔隙率的PLA支架,采用低浓度NaOH、碳化二亚胺和HA进行支架改性。支架预湿后接种第3代兔髁突软骨细胞悬液,体外培养1周后用于动物实验。软骨细胞-HA改性PLA支架复合体为实验组,软骨细胞-PLA支架复合体为对照组。分别于4、6、8周按照标记取出植入物,进行组织学检测。利用ImageJ软件进行免疫组化染色阳性强度的分析。结果细胞-支架复合体植入后,未产生排斥反应。HE染色结果示软骨样组织形成。Masson染色及甲苯胺蓝染色结果显示染色逐渐加深。Ⅱ型胶原免疫组化染色随时间增加阳性强度增加,实验组4、6、8周时的免疫组化染色强度差异有统计学意义(F=26.68,P=0.000),对照组4、6、8周时的免疫组化染色强度差异有统计学意义(F=20.59,P=0.000)。相同时间点实验组Ⅱ型胶原分泌强度高于对照组。结论利用HA改性PLA支架可以构建同种异体软骨,且其质量高于未改性PLA。 展开更多
关键词 透明质酸 聚乳酸 组织工程软骨 同种异体
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