黑色素瘤相关抗原家族A1蛋白(melanoma associated antigen family A1,MAGEA1)在生殖细胞和多种组织学来源的肿瘤中有表达,但其作用机制尚不清楚。本研究通过构建带Flag和GFP标签的MAGEA1真核表达重组质粒,将其转染至HeLa、HEK293T细胞...黑色素瘤相关抗原家族A1蛋白(melanoma associated antigen family A1,MAGEA1)在生殖细胞和多种组织学来源的肿瘤中有表达,但其作用机制尚不清楚。本研究通过构建带Flag和GFP标签的MAGEA1真核表达重组质粒,将其转染至HeLa、HEK293T细胞内。利用Western印迹、免疫细胞荧光法、免疫共沉淀、细胞核蛋白质与细胞质蛋白质分离和线粒体提取等技术,检测其在细胞内的表达与定位以及与其他蛋白质的相互作用情况。免疫细胞化学和蛋白质印迹结果显示,过表达的MAGEA1主要定位于细胞质,并部分与线粒体共定位。通过免疫共沉淀验证了MAGEA1与TRIM31、SNW1、HDAC1之间存在相互作用,并且发现MAGEA1可能主要与位于细胞质中的HDAC1相互作用。以上研究表明,MAGEA1可能参与不同的细胞内调节途径,部分与线粒体共定位;与TRIM31、SNW1、HDAC1相互作用,且可能主要与位于细胞质中的HDAC1蛋白相互作用,推测其可能参与到蛋白质泛素化和Notch信号通路。本研究的结果为后续深入研究MAGEA1的作用机制奠定了实验基础。展开更多
目的:研究组蛋白乙酰转移酶结合起始复合物1(histone acetyltransferase binding to ORC1,HBO1)和Geminin在胶质瘤中表达及其与胶质瘤临床病理特征关系。方法:运用免疫组织化学方法检测59例胶质瘤中HBO1和Geminin的表达,分析HBO1和Gemi...目的:研究组蛋白乙酰转移酶结合起始复合物1(histone acetyltransferase binding to ORC1,HBO1)和Geminin在胶质瘤中表达及其与胶质瘤临床病理特征关系。方法:运用免疫组织化学方法检测59例胶质瘤中HBO1和Geminin的表达,分析HBO1和Geminin二者表达的相关性,以及HBO1与临床病理因素间的关系。结果:HBO1、Geminin的总阳性率分别为78.0%、83.1%。HBO1在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中阳性率分别为40.0%(6/15)、81.0%(17/21)、100.0%(23/23),并与肿瘤坏死及细胞核分裂像多少有关(P<0.05)。Geminin在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中阳性率分别为53.3%(8/15)、85.7%(18/21)、100.0%(23/23),在不同级别胶质瘤中HBO1和Geminin表达差异有统计学意义(P<0.05),表达强度与肿瘤分级呈正相关(r=27.802、32.340,P<0.05)。胶质瘤中HBO1与Geminin表达呈正相关(r=0.692,P<0.05),在胶质瘤中随着Geminin表达增高,HBO1也表达增高。结论:HBO1和Geminin表达与胶质瘤分级相关,联合检测HBO1和Geminin有助于判断胶质瘤恶性程度及预后。展开更多
文摘目的探讨乳酸脱氢酶A(LDH-A)与组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)在肠型胃癌中表达的相关性及其与预后的关系。方法应用Western blotting法检测HDAC1蛋白在慢病毒介导的LDH-A siRNA转染肠型胃癌细胞株SGC7901中表达的变化;应用免疫组织化学方法检测661例肠型胃癌组织及癌旁正常组织中LDH-A与HDAC1蛋白的表达情况并分析其表达与预后的关系。结果 Western blotting检测结果显示,LDH-A蛋白在SGC7901细胞株中的表达明显上调,且LDH-A的沉默可显著下调HDAC1的表达。肠型胃癌组织中LDH-A蛋白的高表达率为54.8%(362/661),明显高于癌旁正常组织的12.9%(85/661),两者差异有统计学意义(P<0.01);肠型胃癌组织中HDAC1的高表达率为51.3%(339/661),明显高于癌旁正常组织的15.4%(102/661),两者差异有统计学意义(P<0.01)。LDH-A与HDAC1蛋白在肠型胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.324,P<0.001)。单因素生存分析结果显示,LDH-A与HDAC1均低表达患者的生存曲线明显优于其他组合(P<0.001);多因素生存分析结果显示LDH-A与HDAC1表达均为肠型胃癌独立的预后因素。结论在肠型胃癌中,LDH-A与HDAC1的表达呈正相关,采用LDH-A和HDAC1双靶点抑制治疗可能具有潜在的生存获益。
文摘黑色素瘤相关抗原家族A1蛋白(melanoma associated antigen family A1,MAGEA1)在生殖细胞和多种组织学来源的肿瘤中有表达,但其作用机制尚不清楚。本研究通过构建带Flag和GFP标签的MAGEA1真核表达重组质粒,将其转染至HeLa、HEK293T细胞内。利用Western印迹、免疫细胞荧光法、免疫共沉淀、细胞核蛋白质与细胞质蛋白质分离和线粒体提取等技术,检测其在细胞内的表达与定位以及与其他蛋白质的相互作用情况。免疫细胞化学和蛋白质印迹结果显示,过表达的MAGEA1主要定位于细胞质,并部分与线粒体共定位。通过免疫共沉淀验证了MAGEA1与TRIM31、SNW1、HDAC1之间存在相互作用,并且发现MAGEA1可能主要与位于细胞质中的HDAC1相互作用。以上研究表明,MAGEA1可能参与不同的细胞内调节途径,部分与线粒体共定位;与TRIM31、SNW1、HDAC1相互作用,且可能主要与位于细胞质中的HDAC1蛋白相互作用,推测其可能参与到蛋白质泛素化和Notch信号通路。本研究的结果为后续深入研究MAGEA1的作用机制奠定了实验基础。
文摘目的:研究组蛋白乙酰转移酶结合起始复合物1(histone acetyltransferase binding to ORC1,HBO1)和Geminin在胶质瘤中表达及其与胶质瘤临床病理特征关系。方法:运用免疫组织化学方法检测59例胶质瘤中HBO1和Geminin的表达,分析HBO1和Geminin二者表达的相关性,以及HBO1与临床病理因素间的关系。结果:HBO1、Geminin的总阳性率分别为78.0%、83.1%。HBO1在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中阳性率分别为40.0%(6/15)、81.0%(17/21)、100.0%(23/23),并与肿瘤坏死及细胞核分裂像多少有关(P<0.05)。Geminin在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中阳性率分别为53.3%(8/15)、85.7%(18/21)、100.0%(23/23),在不同级别胶质瘤中HBO1和Geminin表达差异有统计学意义(P<0.05),表达强度与肿瘤分级呈正相关(r=27.802、32.340,P<0.05)。胶质瘤中HBO1与Geminin表达呈正相关(r=0.692,P<0.05),在胶质瘤中随着Geminin表达增高,HBO1也表达增高。结论:HBO1和Geminin表达与胶质瘤分级相关,联合检测HBO1和Geminin有助于判断胶质瘤恶性程度及预后。
