流式细胞光度术的初步建立——在MPVⅡ显微光度计基础上改装的流式细胞光度计

流式细胞光度术(Flow Cytometry)是六十年代末发展起来的一项新技术。它可以在细胞群体中对单个细胞逐个进行高速的定量分析和分类,从一个细胞中可同时测得蛋白质、DNA、细胞体积及核与细胞直径比例等多种参数,具有高速度多信息分析的特点,是研究细胞生物学、免疫生物学、体细胞遗传学、生物化学、肿瘤学的有力手段。目前使用的流式光度计基本上有两种类型:一种是以汞灯作光源,在落射光照明条件下,激发通过流动室的细胞悬液,测量细胞发出的荧光强度。

胃癌及其癌前期病变的流式细胞光度分析

目前,对癌及其癌前期病变的诊断和分级主要以病理学家借助光学显微镜观察组织结构和细胞形态的异型性,凭经验作出的诊断为依据,故带有一定的主观性。因此,探索客观的定量诊断方法甚为必要。本实验应用快速、准确、客观的流式细胞光度术(FlowCytometry,FCM)定量分析胃癌及其癌前期病变细胞核DNA含量及其细胞周期各时相分布,探讨胃癌与其癌前期病变的关系,试图应用FCM作为预示癌前期病变发展趋势、胃癌普查中筛选病例及发现早期癌变的辅助工具。材料和方法 1、样品来源:采用我院胃癌研究室1985～1987年胃癌普查中胃镜咬检标本68例,胃癌术后标本59例,共计127例。

流式细胞光度术分析胃癌石蜡标本DNA含量及P53蛋白含量的测定

用免疫组织化学的方法检测了４９例胃癌组织和１０例胃良性病变组织Ｐ５３蛋白的含量，用流式细胞光度术检测了ＤＮＡ倍体和１０例免疫组化Ｐ５３蛋白表达阳性标本的Ｐ５３蛋白含量。结果提示，ＤＮＡ倍体和Ｐ５３蛋白表达与胃癌生物学行为有重要关系，ＦＣＭ定量基因表达产物及ＤＮＡ含量双参数分析预后，对临床有重要指导意义。

胎儿食管粘膜上皮细胞DNA含量的细胞光度术及细胞增殖分析

本文采用Feulgen-DNA含量细胞分光光度术动态地测量了林县不同胎龄人的食管上皮细胞DNA含量及其染色体倍性的精确变化,DNA含量及相关细胞频数关系用直方图显示吸收光度量。结论是:胎龄愈高,DNA含量愈集中分布,最大峰值的G_1的造型愈高,DNA值的标准差(s)和标准误(s_?)愈小。DNA含量在2～4C范围,符合一个增殖细胞群体的特征。食管上皮的增殖和分化情况由细胞分光光度计所测量的DNA含量的分级依据和细胞形态学特征所反映,同时探讨了在增殖与分化“失常”的微细形态学改变之前可能显示出精微的DNA含量的改变。

流式细胞光度计在细胞增殖动力学研究中的应用

流式细胞光度计(FLOW CYTOMETER,简称FCM)是近年来用于细胞生物学研究中的一种重要仪器。由于它可在数秒钟内精确定量测定成千上万个细胞,并能对一杂合的细胞群体中逐个测定单细胞多种参数等特点。FCM已成为近十多年来推动细胞生物学、肿瘤学和免疫学在细胞水平上进行研究的不可缺少的仪器。本文仅简要介绍FCM测定单细胞内DNA、RNA与蛋白质,用于细胞增殖动力学的研究。以期在国内推广应用FCM技术解决临床医学和肿瘤学的问题。

一种快速简便检测TGF-β生物活性的细胞光度比色法

转化生长因子是一类影响细胞生长和表型的生物活性多肽。它在不同靶细胞和微环境下,不仅具有刺激或抑制细胞生长、诱导细胞分化和其它多种生物学效应,还能引起一些正常细胞失去接触抑制,转化成为锚着不依赖生长。通常利用这种特性使长在软琼脂上的成纤维细胞形成细胞集落来检测TGF-β活性。此法操作繁琐,周期长至一周以上。

流式细胞光度术DNA分析在非何杰金氏淋巴瘤预后中的意义

用流式细胞光度术对一组非何杰金氏淋巴瘤(NHL)存档石蜡标本进行DNA分析。DNA异倍体肿瘤占总例数的47.4％,高、中度恶性组异倍体肿瘤的比例(76.8％和51.9％)分别高于低度恶性组(17.6％)(P<0.05)。S期细胞比例(synthetic phase fraction,SPF)随组织学恶性程度升高而增大,低、中和高度恶性淋巴瘤平均SPF值分别是6.5(0.6—18.8)％,13.5(3.2—37.3)％和23.4(4.4—41.4)％。二倍体和异倍体肿瘤患者的生存率无差别。全部病例中高SPF值肿瘤患者具有生存短的趋向(P=0.1)。低度恶性组内也存在此种趋向(P=0.08)。上述结果表明流式细胞光度术DNA分析对估价非何杰金氏淋巴瘤生物学行为是一种不依赖形态学的有用方法。

人食管鳞癌细胞及癌旁细胞流式细胞光度术分析

本研究应用流式细胞光度术对１４例人食管鳞癌手术切除标本的癌、癌旁组织和正常食管上皮细胞进行细胞动力学和细胞ＤＮＡ含量分析。结果表明；处于Ｓ期癌细胞的数量明显高于癌旁细胞和正常食管上皮细胞；癌细胞ＤＩ值明显高于癌旁细胞。因此，应用流式细胞光度术作癌和癌旁细胞核的ＤＮＡ分析，对于食管鳞癌的临床诊断有一定的帮助。

流式细胞光度术用于草莓倍性鉴定的研究

利用流式细胞光度术对草莓３个二倍体、１个五倍体、２个八倍体试管苗的细胞核ＤＮＡ的相对含量进行测定。结果表明，随着倍性水平的增加，细胞核ＤＮＡ相对含量随之成倍增加，说明可利用流式细胞光度术测定细胞核ＤＮＡ含量来进行倍性鉴定；利用这一技术对草莓几个杂交后代及诱变植株的倍性水平进行了鉴定，发现一诱变植株存在两群核ＤＮＡ相对含量相差近一倍的细胞，初步认为这一诱变植株为倍性嵌合体，该结果进一步证明这种方法的可靠性。

利用流式细胞光度术鉴定苹果倍性的研究

利用流式细胞光度术测定了苹果１２个二倍体，５个三倍体细胞核ＤＮＡ含量。结果表明：二倍体细胞核ＤＮＡ含量平均为２．２７ｐｇ，三倍体细胞核ＤＮＡ含量平均为３．１３ｐｇ。不同倍性品种间细胞核ＤＮＡ含量差异显著；对６个苹果实生苗诱变植株细胞核ＤＮＡ含量测定的结果表明，这些诱变植株均存在两群细胞核ＤＮＡ含量相差１倍的细胞，这说明这些诱变植株均为倍性嵌合体。研究表明，利用流式细胞光度术可以进行倍性鉴定。利用流式细胞光度术测定细胞核ＤＮＡ含量，试样制备简单，测量快速，精度高，因此是进行倍性鉴定的理想方法之一。

人大肠癌细胞DNA含量的细胞光度法研究

进行~3H—TdR放射自显影术和福尔根细胞光度法分析大肠癌的细胞DNA含量。DNA异倍体程度以DJ定值。外周淋巴细胞选为倍体水平的基准。我们结果显示,10例大肠癌的全部细胞(G_0,G_1,S G_2)有非二倍体DNA 6.11-12.61(DI=0.85-1.74)。此外,在7例癌细胞的放射自显影中,标记指数LI=2.2％-12.4％,在上述相同制片中。6例癌的末标记细胞(G_0·G_1)呈现DI=0.98-1.36,其中3例癌为二倍体水平,其余3例癌有超二倍体DNA含量,这与静止淋巴细胞的二倍体值差异显著。认为非整倍体可能是大肠癌重要的预后因子,倍体值测量可能成为大肠癌临床估计的有效辅助资料。

肝脏炎性假性肿瘤 形态学、细胞光度测定和鉴别诊断

肝脏大部分占位性病变为恶性肿瘤,一为原发性肿瘤,另为转移癌。组织学诊断一般无困难。除常规形态学检查外,目前许多单克隆抗体用于鉴别诊断的免疫组化检查。肝脏炎性假肿瘤的形态学诊断十分困难。

应用流式细胞光度分析法对卵巢肿瘤的研究

自1985年1月～1986年10月,我组应用美国Beton Dickinson公司生产的FACS420型流式细胞光度分析仪(简称FCM),对28例卵巢肿瘤细胞DNA含量进行分析,并对其与卵巢肿瘤病理组织学、临床分期、恶性度及预后的关系进行初步观察,结果报导如下:

睾丸肿瘤的流式细胞光度分析

睾丸肿瘤的流式细胞光度分析霍红旭李景东杨书文黑兰荪张玉敏附属二院泌尿外科（０５００００）关键词睾丸肿瘤；流式细胞光度分析流式细胞光度分析（ＦＣＭ）是近年来发展的一种对单细胞快速分析的新技术。本研究采用该技术对睾丸肿瘤石蜡包埋组织进行测定，分析其ＤＮ...

双模态碳量子点间充质干细胞成像及细胞分化研究

目的制备双模态碳量子点(carbon dots,CDs)探针并探索其示踪间充质干细胞(MSCs)的可行性。方法2022年10月至2023年5月,以钆喷酸葡胺、柠檬酸及二乙烯三胺为前驱体,采用水热法合成Gd∶CDs[钆(Gd)掺杂的碳量子点],进行表征并用于MSCs标记及成像。检测不同浓度Gd∶CDs(10、25、50 nmol/L)对MSCs成骨分化及成脂肪分化的影响。结果Gd∶CDs生物安全性好,荧光量子产率为76%,纵向弛豫率为5.5727 mmol^(-1)·s^(-1),具备双模态成像潜力,可用于MSCs标记。不同浓度Gd∶CDs(10、25、50 nmol/L)标记的MSCs经成骨诱导后,吸光度[D(λ)]分别为2.368±0.014、2.253±0.084及2.133±0.127,与对照组D(λ)(2.334±0.062)相比,高浓度Gd∶CDs对MSCs成骨分化有少许影响(P<0.05),中低浓度的Gd∶CDs标记对MSCs成骨分化无明显影响(P>0.05)。不同浓度Gd∶CDs(10、25、50 nmol/L)标记的MSCs经成脂肪诱导后,D(λ)分别为0.274±0.036、0.286±0.032、0.262±0.065,与对照组D(λ)(0.254±0.026)相比,各组对MSCs的成脂肪分化无明显影响(P>0.05)。结论采用水热法制备的Gd∶CDs荧光量子产率及纵向弛豫率高,具有示踪MSCs的潜能,且对MSCs的分化影响较小。

雌激素对乳腺癌细胞作用的流式细胞光度分析

用流式细胞光度计分析雌激素及其拮抗剂对 ER(+)和 ER(-)乳腺癌细胞的作用。所测结果表明:雌激素对 ER(+)乳腺癌细胞具有显著促分裂作用,而雌激素的拮抗剂三苯氧胺则能对抗这种促分裂作用;雌激素及其桔抗荆对 ER(-)乳腺癌细胞无显著作用。

流式细胞光度法早期诊断大鼠肝癌

采用细针吸引肝细胞和新鲜组织块流式细胞光度法(FCM)对比分析大鼠正常肝脏、肝硬化、非典型增生和肝癌组织,以探讨其对肝脏病变程度估计及肝癌早期诊断的可行性及临床意义。材料与方法1.动物模型制备体重120g 左右的 Wistar 大鼠70只,分为两组:一组为60只饮用150ppm 的二乙基亚硝胺水溶液,另组10只饮用自来水,饲养1.5个月。2.材料收集将大鼠在全麻下剖腹,用7号注射用针头抽吸肝脏,后在同一部位取活组织块,均固定于70%冷酒精中,再处死动物,10%甲醛固定肝脏,依据病理改变分为:正常肝脏、肝硬化、非典型增生和肝癌四组。将细针吸引物和组织块分别制成单细胞悬液,后采用溴化乙啶一步插入法将细胞悬液中的 DNA 定量染色。使用 FACS420型流式细胞仪测定 DNA 含量,根据细胞核发出的荧光信号和光散射信号,经计算机分析得出细胞核相对 DNA 含量的分布频率。

显微分光光度计测量细胞DNA对肿瘤诊断和预后价值的研究

目的 :研究显微分光光度计测量细胞DNA对肿瘤诊断和预后的价值。方法 :应用OPTON 0 3型扫描分光光度计和改良的DNA Feulgen染色方法对 15例涎腺发生的肿瘤、17例恶性淋巴瘤、2 3例早期胃癌和 2 0例食管及贲门早期浅表癌的癌细胞DNA含量进行了测量。测量结果与病理组织学诊断及随访结果进行了对比分析。结果 :癌细胞DNA含量增高 ,胞核DNA含量分布广泛 ,出现非整倍体细胞核。非整倍体型早期食管癌的复发率较二倍体型早期食管癌高 (P <0 0 5 )。结论 :细胞光度术测量细胞DNA含量对鉴别良、恶性肿瘤可以提供客观依据。DNA倍体数对食管癌预后判断有一定价值。本研究建立的DNA Feulgen染色方法效果极佳。