细胞周期素E的干扰RNA对HeLa细胞增殖的抑制作用

目的利用RNAi技术下调宫颈癌HeLa细胞中cyclin E mRNA水平，研究对HeLa细胞增殖及周期的影响。方法构建针对cyclin E基因的RNAi真核表达载体，脂质体转染HeLa细胞下调细胞中cyclin E mRNA含量。RT-PCR检测抑制效果；MTr检测细胞生长情况；流式细胞仪分析HeLa细胞周期变化。结果成功构建针对cyclin E基因的RNAi真核表达载体，可以特异下调cyclin E mRNA含量，并抑制细胞恶性增殖。细胞周期分析显示干扰使细胞停留在G0-G。期，S期细胞明显减少。结论RNAi能特异地下调HeLa细胞中cyclin E mRNA含量，抑制宫颈癌细胞恶性增殖，提示cyclin E可能成为宫颈癌基因治疗中的一个新的靶点。

细胞周期素E、D1与增殖细胞核抗原在肝癌中的表达及临床意义

目的研究肝癌组织中细胞周期素E(cyclin E)、细胞周期素D1(cyclin D1)与增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况,探讨其在肝癌发生发展中的作用及临床意义。方法用免疫组化链霉菌素-生物素(SP)法,对术前未使用过化疗、放疗及免疫治疗的60例肝癌组织及35例癌旁肝组织进行检测。结果cyclin Ec、yclin D1与PCNA的表达在肝癌组织中高于癌旁肝组织(P<0.01),在分化差的和有转移的肝癌中表达高于分化好的和无转移的,而且cyclin E与cyclin D1的表达密切相关(P<0.01)。结论cyclin E、cyclin D1与PCNA表达与肝癌的增殖、分化、转移有关,其表达状况可以作为判断恶性程度及预后的指标。

细胞周期素E表达阈值的定量分析

背景与目的:细胞周期素(cyclins)表达阈值的分析是细胞周期运行机制研究的一个重要方面,但目前尚缺乏一种较为科学且统一的定量计算方法。本研究试图对细胞周期素E(cyclinE)的表达阈值进行标准化定量分析。方法:用cyclinE/DNA双参数流式细胞术对人类急性淋巴细胞性白血病细胞株(MOLT-4细胞)在不同的光电倍增管(Photomultipliertubes,PMT)电压下进行检测;另取MOLT-4细胞经咖啡因(caffeine)和放线酮(cycloheximide,CHX)分别处理后用同样方法在同一电压下进行检测;最后对MOLT-4细胞和另外一种人类急性淋巴细胞性白血病细胞株(JURKAT细胞)在同一电压下进行检测,分析以上3组实验所得的CyclinE/DNA二维等高图,用公式B2/A×C(A,B,C分别为cyclinE/DNA二维等高图上cyclinE荧光强度的最低值,阈值和最高值)定量计算cyclinE表达阈值。结果:用公式B2/A×C计算出MOLT-4细胞cyclinE的表达阈值在不同电压下保持恒定;经咖啡因处理后阈值下降,经放线酮处理后阈值不变;同时计算出JURKAT细胞cyclinE表达阈值比MOLT-4细胞明显要低。结论:公式B2/A×C适用于细胞cyclinE表达阈值的定量计算。

益气化瘀中药对大鼠胃癌前病变蛋白激酶C及细胞周期素E蛋白表达的影响

目的观察益气化瘀中药对大鼠胃癌前病变胃黏膜蛋白激酶C(PKC)、细胞周期素E(CyclinE)表达的影响。方法采用甲硝基亚硝基胍(MNNG)、乙醇、饥饱失常等多因素造模。造模成功后,将造模存活大鼠随机分为自然恢复组及中药高、中、低剂量组,各组大鼠做相应的处理后,免疫组化法检测各组大鼠胃黏膜组织PKC、CyclinE表达水平。结果各治疗组PKC表达及CyclinE蛋白阳性率较自然恢复组下降,有显著差异(P<0.05)。结论益气化瘀中药可能是通过下调PKC及CylinE的表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,而发挥对大鼠胃癌前病变的治疗作用。

家蚕细胞周期素E基因在5龄幼虫组织表达的剪切变体和表达谱特征

细胞周期素E（cyclinE）是调控细胞周期从G1期进入S期的关键因子。利用家蚕基因组数据库信息设计引物,克隆家蚕cyclinE在5龄幼虫不同组织表达的cDNA序列,获得该基因的6种不同剪切变体,这6种剪切变体前4个外显子和最后一个外显子都相同,变化主要集中在第5~7外显子处。同源性比对显示,不同物种来源的cyclinE周期蛋白盒区域具有较高的保守性,有35个氨基酸的共同保守序列,该区域可能也是家蚕cyclinE的特异识别并结合细胞周期素依赖蛋白激酶的功能区域。利用实时定量PCR分析显示,cyclinE在家蚕5龄第3天幼虫的中肠、脂肪体、丝腺、脑、马氏管、精巢、卵巢、血液等8种组织、器官中均有表达,并且在脂肪体中的表达相对较高,推测cyclinE基因在家蚕脂肪体细胞分裂过程中发挥重要作用。

细胞周期素E和P53蛋白在胃癌组织中表达及预后意义

目的 :研究细胞周期素E(cyclinE)和P53蛋白在胃癌组织中的表达水平及其与生物学行为和对预后的作用。方法 :应用免疫组化方法检测 1 2 8例胃癌组织中cyclinE和P53蛋白表达水平。 结果 :本组 1 2 8例中 ,cyclinE蛋白阳性 57例 ,占 44 .5 % ;P53蛋白阳性 67例 ,占 52 .3 % ,P53 +/cyclinE +者 48例 ,占 37.5 %。胃癌组织中cyclinE和P53蛋白表达水平与肿瘤大小、浸润深度、局部淋巴结转移、脉管侵犯和远处转移均相关。单因素生存分析显示 ,cyclinE阳性表达组五年生存率 (5 .3 % )显著低于cyclinE表达阴性组 (36 .6 % ,P <0 .0 0 1 ) ,P53蛋白表达阳性的病例五年生存率 (7.8% )显著低于P53表达阴性的病例 (2 2 .6 % ,P <0 .0 0 1 ) ,cyclinE和P53均阳性的病例五年生存率 (2 .3 % ) ,明显低于其他组的病例 (2 7.3 % ,P <0 .0 0 5)。COX模型多因素分析显示 ,cyclinE蛋白表达水平是独立的预后指标 ,P53蛋白表达水平不能作为独立的预后指标。结论 :CyclinE在胃癌中表达具有一定的预后意义 。

细胞周期素E、p21、转录因子E2F-1在尖锐湿疣中的表达

目的 探讨细胞周期相关因子细胞周期素E(cyclinE)、p2 1(WAF1/CIP1)、核转录因子E2F 1在尖锐湿疣 (CA)皮损中的变化及其意义。方法 应用原位杂交技术检测HPV 6/ 11相关CA ,应用SP免疫组化技术检测 3 8例HPV 6/ 11阳性CA患者皮损和 13例正常人皮肤中cyclinE、p2 1、E2F 1与分布。 结果 ①CA皮损中cyclinE、p2 1、E2F 1的表达均较正常皮肤增强 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,阳性信号主要分布于表皮棘层和颗粒层。②CA皮损中cyclinE与p2 1的表达间存在正相关性 ,cyclinE与E2F 1、p2 1与E2F 1间无相关性。 结论 HPV 6/ 11CA可能通过细胞周期调控蛋白的相互协调与制约 。

缺氧诱导因子-1α和细胞周期素E在骨肉瘤中的表达及其预后意义

[目的]探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和细胞周期素E(cyclinE)蛋白表达情况与骨肉瘤生物学特性的关系及预后意义。[方法]采用免疫组化SP法检测36例骨肉瘤组织中HIF-1α和cyclinE的表达情况,并分析与临床病理参数及预后的关系。[结果](1)HIF-1α、cyclinE蛋白在骨肉瘤中的阳性率和平均阳性标记指数分别为[61.6%(22/36),(19.64±8.78)、55.6%(20/36),(19.20±9.27)];(2)HIF-1α和cyclinE蛋白表达的一致符合率为65.8%,且两者表达呈正相关(r=0.7435,P(0.05);(3)HIF-1α、cyclinE蛋白表达强度与骨肉瘤细胞分化程度密切相关(P(0.01);(4)有转移组病例的HIF-1α蛋白表达强度高于无转移组病例(P(0.01);(5)单因素和多因素生存分析显示HIF-1α、cyclinE高表达与患者预后不良有关(P(0.05)。[结论]HIF-1α、cy-clinE高表达可能参与骨肉瘤的恶性进展,二者的联合检测对评价骨肉瘤患者的预后有一定价值。

细胞周期素E与转录因子在子宫内膜癌的表达及意义

目的检测细胞周期素E(Cyclin E)与转录因子(Twist)在子宫内膜癌的表达,并探讨Cyclin E与Twist在子宫内膜癌发生发展中的关系。方法采用免疫组化法检测子宫内膜癌中Cyclin E和Twist的表达情况,并用半定量方法对镜下的阳性细胞百分比以及染色强度给予评分。结果 Cyclin E在子宫内膜癌中的阳性表达率(71.25%)明显高于正常子宫内膜组织(6.00%),差异有统计学意义(P<0.001);Twist在子宫内膜癌中的阳性表达率(77.50%)明显高于正常子宫内膜组织(10.00%),差异有统计学意义(P<0.001)。在子宫内膜癌中,Cyclin E和Twist的表达呈正相关(P<0.05)。结论 Cyclin E及Twist在子宫内膜癌中高表达,二者在子宫内膜癌的发生发展过程中存在一定联系。

细胞周期素E和第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因在大肠癌中的表达与预后的关系

肿瘤的浸润和转移是一个多因素、多步骤的极为复杂的过程，它是肿瘤细胞、宿主细胞及细胞外基质之间的一系列复杂的多步骤相互作用的结果，涉及众多的基因产物及分子事件。研究肿瘤细胞恶性潜能的生物学标志以预测肿瘤转移趋势，已成为目前肿瘤防治研究的一个重点。大肠癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一，对人类危害严重。目前已认识到大肠癌的发生发展与多个癌基因的激活和肿瘤抑制基因的失活有关。

鳞状细胞抗原和细胞周期素E对宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的影响

目的:研究鳞状细胞抗原(squamous cell antige,SCC-Ag)和细胞周期素E(Cyclin E)在宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌中的水平以及临床意义。方法:选取2012年11月至2015年11月共308例CIN和宫颈癌患者作为研究对象,选取同时期收治的因为子宫平滑肌瘤或子宫腺肌症进行子宫切除手术并经过病理检查为非恶性癌变的患者170例作为对照组,比较不同宫颈病变患者血液中的SCC-Ag水平、阳性表达率以及宫颈组织中Cyclin E的阳性表达率。结果:宫颈癌、CIN与对照组患者相比较,血液中的SCC-Ag水平以及阳性表达率、宫颈组织中的Cyclin E的阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.05);不同CIN分级以及不同宫颈癌分期的患者血液中的SCC-Ag水平以及阳性表达率、宫颈组织中的Cyclin E的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血液中的SCC-Ag水平以及阳性表达,宫颈组织中的Cyclin E阳性表达与CIN以及宫颈癌的发生、发展有密切的关系。

细胞周期素E在下咽癌中的表达及临床意义

目的探讨细胞周期素E(CyclinE)在下咽癌组织中的表达及其与各临床病理因素的关系。方法采用免疫组化S-P法检测35例下咽癌组织和20例正常下咽黏膜组织中CyclinE的表达情况。结果 (1)CyclinE在下咽癌组织中的阳性表达率为62.9%,明显高于正常下咽黏膜(0)(P<0.05)。(2)CyclinE蛋白在下咽癌组织中的表达与淋巴结转移、临床分期、病理分级、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无相关性(P>0.05)。结论 CyclinE蛋白的高表达可能促进下咽癌的发生,可以作为下咽癌早期诊断和靶向治疗的重要标志物。

细胞周期素E与妇科肿瘤研究进展

细胞周期素E(cyclinE)是G1期重要的调控因子之一,调节细胞DNA的合成及有丝分裂。宫颈癌、子宫内膜癌及卵巢癌中可见cyclinE高表达。cyclinE在妇科肿瘤的发生、发展中起一定作用。cyclinE有助于诊断人乳头瘤病毒相关的宫颈癌前期病变,并可能成为妇科恶性肿瘤的一项预后指标。

细胞周期素E与甲状腺肿瘤的关系

目的 检测甲状腺肿瘤组织中CyclinE和PCNA的表达 ,探讨CyclinE与肿瘤发生及恶性程度的关系。方法 利用免疫组织化学技术分析 17例甲状腺腺瘤、43例甲状腺癌及 19例瘤旁“正常”组织中的CyclinE及PCNA的表达。结果 CyclinE及PCNA在“正常”组织与甲状腺腺瘤组织中表达无显著性差异 ;CyclinE及PCNA在甲状腺癌中的表达显著高于“正常”组织和甲状腺腺瘤组织 ,且随肿瘤恶性程度的增加而增加 ;CyclinE和PCNA的表达在“正常”组织、甲状腺腺瘤和甲状腺癌组织中均呈正相关。结论 CyclinE的表达可以作为诊断甲状腺癌及预测肿瘤恶性程度的指标。

鳞状细胞抗原和细胞周期素E在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的表达

目的研究鳞状细胞抗原和细胞周期素E在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的水平以及临床意义。方法将2012年11月至2015年11月期间的一共有154例宫颈上皮内瘤变和宫颈癌病人最为研究对象,选择同时期我院收治的因为子宫平滑肌瘤或子宫腺肌症进行子宫切除手术并经过病理检查正常的病人85例作为对照组,比较不同宫颈病变病人血液中的SCCAg水平、阳性表达率以及宫颈组中中Cyclin E的阳性表达。结果宫颈癌、CIN、对照组病人血液中的SCC-Ag水平以及阳性表达率、宫颈组织中的Cyclin E的阳性表达率具有显著的差异(P<0.05);不同CIN分级以及不同宫颈癌分期病人血液中的SCC-Ag水平以及阳性表达率、宫颈组织中的Cyclin E的阳性表达率具有显著的差异(P<0.05)。结论血液中的SCC-Ag水平以及阳性表达,宫颈组织中的Cyclin E阳性表达与CIN以及宫颈癌的发生、发展有密切的关系。

皮肤血管瘤组织中细胞周期素E的阳性面积率和平均光密度的表达

目的:探讨细胞周期素E(cyclinE)在皮肤血管瘤组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学(S-P法),检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织血管内皮细胞的cyclinE表达水平,利用图像分析技术检测不同时期血管瘤和正常皮肤组织的阳性面积率和平均光密度。结果:增生期血管瘤内皮细胞cyclinE表达水平明显高于退化期及正常皮肤组织,差异有显著性意义(P<0.01);退化期与正常皮肤组织血管内皮细胞cyclinE表达水平差异无显著性意义(P>0.05)。结论:血管瘤的发生、发展与细胞周期的调节密切相关。

致瘤病毒与细胞周期素E

细胞周期失调是肿瘤形成的重要原因。致瘤病毒可通过诱导细胞周期的一些调控因子发生改变而引发肿瘤。细胞周期素E是调节细胞G1 S期转变的关键因子 ,因此致瘤病毒对其基因表达及其活性的影响是引起细胞周期失调进而形成肿瘤的重要途径之一。

细胞周期素E及细胞周期依赖性激酶2在甲状腺乳头状癌中的表达

目的探讨细胞周期素E（cyclin E）和细胞周期依赖性激酶2（Cdk2）在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其生物学行为。方法用免疫组织化学S—P法检测细胞周期素E和细胞周期依赖性激酶2在甲状腺乳头状癌组中的表达，并利用HPIAS-2000图像分析系统测定细胞周期素E和细胞周期依赖性激酶2在其中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果癌旁组织中细胞周期素E及细胞周期依赖性激酶2呈阴性表达，甲状腺乳头状癌组织内细胞周期素E细胞周期依赖性激酶2表达呈强阳性，细胞周期素E和细胞周期依赖性激酶2在癌旁组织和甲状腺乳头状癌组织之间平均光密度及阳性面积率比较，差异有显著性（P〈0．05）。结论细胞周期素E和细胞周期依赖性激酶2在甲状腺乳头状癌癌组织中呈高表达，其表达及聚集程度与甲状腺乳头状癌的生物学行为及其发生、发展有关。