当归多糖对小鼠骨骼肌卫星细胞增殖及干细胞因子受体蛋白表达的影响

目的观察在体外造血微环境中,当归多糖(angelica polysaccharides,APS)对不同培养条件下乳鼠骨骼肌卫星细胞(muscle satellite cells,MSCs)增殖及干细胞因子受体蛋白(c-kit)表达的影响。方法原代培养MSC,5天后采用结蛋白(desmin)免疫细胞化学鉴定;细胞随机分为8组,即空白对照组,骨髓基质细胞培养上清组,加入含100、200、300μg/mLAPS的DMEM/F12培养基实验组及经100、200、300μg/mLAPS干预后骨髓基质细胞条件培养基组,采用MTT法检测各组细胞的增殖活性及对细胞进行c-kit免疫细胞化学染色。结果分离培养的MSCs呈desmin染色阳性;MTT法检测发现各条件培养基实验组MSCs增殖显著;c-kit免疫强阳性反应存在于条件培养基培养的各组MSCs中,c-kit主要表达于细胞质。结论经APS干预的骨髓基质细胞条件培养基可以有效改变MSCs的生长特性,明显促进MSCs增殖及c-kit的表达,c-kit在MSCs增殖过程中可能起某种调节作用。

调节Lnk/干细胞因子-干细胞因子受体通路对糖尿病状态骨髓间充质干细胞成骨功能的影响

目的探讨调节Lnk/干细胞因子(SCF)-干细胞因子受体(c Kit)通路对糖尿病状态大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨功能的影响。方法分离糖尿病大鼠BMSCs,免疫细胞化学染色鉴定后,将细胞分为空白对照组、阴性对照组、RNA干扰组,并用免疫印迹实验检测干扰效果。体外模拟糖尿病状态下诱导BMSCs成骨分化,并检测Lnk/SCF-c Kit通路主要蛋白Lnk、SCF、c Kit及成骨相关蛋白碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原蛋白a1(ColⅠa1)的表达。结果分离培养的细胞表达CD_(44)、CD_(90),不表达CD11b、CD_(45),符合BMSCs表面标记物特征。与其他糖尿病状态BMSCs相比,RNA干扰组Lnk表达降低,SCF、c Kit表达增加(P<0.05)。成骨诱导分化28 d,与其他糖尿病状态BMSCs相比,RNA干扰组细胞Lnk表达降低,SCF、c Kit、ALP、OCN、ColⅠa1表达增加(P<0.05)。结论抑制Lnk表达、激活SCF-c Kit通路可改善糖尿病状态大鼠BMSCs的成骨功能。

细胞因子受体在抑郁模型大鼠电休克治疗中的表达

目的:观察细胞因子受体对抑郁模型大鼠海马神经元及胶质细胞再生中的作用。方法:采用慢性轻度不可预见性的应激建立大鼠抑郁模型,对模型大鼠行电休克(Electric convulsive therapy,ECT)及丙泊酚无抽搐电休克(Modified electricconvulsive therapy,MECT)疗法,旷场分析进行行为学观察,免疫荧光方法观察神经元和胶质细胞上细胞因子受体的表达情况。结果:应激+ECT组、应激+MECT组与应激+假电击组比较,旷场分析、免疫荧光实验均有显著差异。结论:MECT治疗和ECT治疗能促进抑郁模型大鼠海马神经元及胶质细胞上细胞因子受体表达的改变,细胞因子可能参与抑郁症的病理机制,MECT治疗疗效可能较ECT治疗为优。

人干细胞因子受体膜外区1～3免疫球蛋白样结构域的表达、纯化及活性

目的 在原核和真核细胞中表达人干细胞因子受体（c-Kit）配体结合区膜外N端1～3免疫球蛋白样结构域（c-Kit/Ig1～3）,研究其配体结合活性.方法 采用重叠延伸PCR定点诱变法合成c-Kit/Ig1～3双突变片段（c-Kit/Ig1～3DM）,构建pET16b-c-Kit/Ig1～3DM表达质粒,转化E.coli BL21（DE3）诱导表达,稀释复性,镍柱纯化.将C端添加组氨酸标签的c-Kit/Ig1～3基因克隆入真核表达载体pEAK12中,转染HEK293 ET细胞构建c-kit/Ig1～3高效表达细胞株,从细胞培养上清中使用镍金属螯合柱收集纯化蛋白.His-tag pull-down和酶联免疫结合实验检测融合蛋白配体结合活性.结果 在大肠杆菌中c-Kit/Ig1～3^DM以包涵体形式表达,复性后配体结合活性很低.在HEK293 ET细胞中筛选到2个高效表达c-Kit/Ig1～3的细胞株,上清表达量为2μg/ml,融合蛋白相对分子质量为58 000;受体配体结合实验显示真核表达的c-Kit/Ig1～3有明显的干细胞因子特异结合活性,解离常数Kd值为9.39 nmol/L.结论获得了具有较高配体结合活性的c-Kit/Ig1～3融合蛋白.

银屑病患者真皮间充质干细胞中细胞因子受体因子-1白细胞介素-6水平的变化及意义

目的检测细胞因子受体因子-1(CRLF1)、白细胞介素(IL)-6在寻常性银屑病患者皮损处真皮间充质干细胞(DMSCs)中的表达,并分析其与银屑病发病的关系。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法测定15例银屑病患者皮损处DMSCs内CRLF1、IL-6水平的变化,并与银屑病皮损面积及严重度指数评分做相关性分析。另取15例健康的皮肤组织作为正常对照组。结果 (1)银屑病患者组CRLF1、IL-6水平低于正常对照组;(2)CRLF1、IL-6与银屑病皮损面积及严重度指数评分无明显相关性。结论 CRLF1、IL-6表达异常可能与银屑病免疫学JAK/STAT信号途径有关。

对虾白斑综合征病毒的细胞因子受体基因的分析与表达

在对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)的基因组中发现一个具有细胞因子受体特征的开放阅读框,该阅读框全长2022个核苷酸,编码674个氨基酸,蛋白质理论分子量为76kDa。该基因含有真核生物细胞因子gp130受体特征序列。为了研究该基因的功能,采用PCR方法从病毒基因组中扩增出基因片段,克隆到pGEM-T Easy载体中,经BamH Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切后插入pET28b表达载体中。重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,IPTG诱导后,经SDS-PAGE电泳表明在76kDa处有目的蛋白表达。用冰浴超声波对诱导后的菌液进行处理以获得初步纯化的蛋白,作为抗原人工免疫实验兔子以获得含特异性抗体的抗血清。该基因的表达成功,为其功能的进一步深入研究奠定了基础。

趋化性细胞因子受体在Tc1和Tc2亚群的差异表达

目的 研究趋化性细胞因子受体在体外长期培养的人Tc1和Tc2细胞系中的表达。方法 将新鲜分离的PBMC在特定细胞因子及细胞因子抗体存在条件下 ,定向诱导为Ⅰ型和Ⅱ型T细胞系 ,用免疫荧光染色结合流式细胞术分析鉴定 ,并以膜表面及胞内三色流式细胞术检测趋化性细胞因子受体在不同T细胞亚群的表达。结果 ①在Ⅰ型和Ⅱ型T细胞整体水平上 ,CXCR4的表达水平接近 ,CXCR3和CCR5的表达在Ⅰ型T细胞明显高于Ⅱ型T细胞 ,CCR3在 2种T细胞系的表达水平均较低 ,但在Ⅱ型T细胞的表达略高于Ⅰ型T细胞 ;②趋化性细胞因子受体在Tc1和Tc2亚群细胞的表达与上述结果类似 ,即CXCR的表达水平接近 ,CXCR3和CCR5的表达在Tc1高于Tc2 ,CCR3的表达水平较低 ,但在Tc2则略高于Tc1。

细胞因子受体的信号传导

细胞因子受体信号传导是当前细胞因子研究领域的热点。由于多种细胞因子受体存在共同的信号传导链。使得细胞因子在功能上具有多效性和重复性。细胞因子通过与其受体结合后诱导受体聚化成多肽复合物，其中包含了信号传导链，聚化的受体复合物使受体本身和细胞浆内的酪氨酸...

细胞因子受体的组成、结构功能及信号传导机制

细胞因子受体种类繁多，分属于不同受体超家族。活化受体的功能可分为：ＰＴＫ型受体或其结合蛋白具有ＰＴＫ活性、丝／苏氨酸蛋白激酶型受体以及与Ｇ蛋白耦联的受体等。不同受体与其配体结合后，通过对受体后信号传导成分的可逆的磷酸化反应传递信号，最终通过对其终端成分，如酶活力、基因表达、细胞骨架蛋白的功能、膜通透性等的调节，导致细胞的生物效应。

可溶性细胞因子受体及基质金属蛋白酶与胰腺癌的关系

目的探究可溶性细胞因子受体及基质金属蛋白酶与胰腺癌的关系.方法选取2014年4月至2016年5月期间西双版纳州人民医院收治的59例胰腺癌患者为观察组,并选取同时间段同龄的59名体检显示健康的人员为对照组,检测与比较对照组和观察组的血清可溶性细胞因子受体及基质金属蛋白酶相关指标水平,然后比较观察组中不同Hemrick分期及病理分类患者的检测结果,以Logistic分析可溶性细胞因子受体及基质金属蛋白酶与胰腺癌的关系.结果观察组的血清可溶性细胞因子受体及基质金属蛋白酶相关指标水平均高于对照组,且Hemrick分期较高患者的检测水平高于Hemrick分期较低的患者,P<0.05,但是不同病理分类患者的检测水平差异无统计学意义,P>0.05,经Logistic分析显示,可溶性细胞因子受体及基质金属蛋白酶均与胰腺癌有密切的关系.结论胰腺癌患者的可溶性细胞因子受体及基质金属蛋白酶呈现高表达状态,且对于Hemrick分期也有一定的反应价值,因此对胰腺癌患者进行上述指标的监测价值较高.

细胞因子受体介导的JAK-STAT信号传导途径

细胞因子通过与其相应受体的相互作用来介导其生物效应。细胞因子受体大多数虽不含蛋白激酶催化结构域,但配体的结合却能诱导受体上的酪氨酸被磷酸化。最近的研究发现,有一个胞内酪氨酸激酶家族——Janus kinases(Jaks)与此有关。Jaks与受体胞内近膜区相联,导致Jaks的磷酸化和活化;激活的Jaks则磷酸化受体及胞内一类转录因子——signal trans-ducers and activators of transcription(STAT)。从而揭示了细胞因子信号传导的一个新途径,JAK-STAT途径。

TH_2型细胞因子受体研究进展

TH2 型细胞因子受体包括白介素 - 4R、白介素 - 6R和白介素 - 10R。许多疾病存在细胞因子及其受体的异常 ,分别对现有的关于TH2 型细胞因子受体的几个研究热点作一综述。揭示其在疾病发病中的作用 。

可溶性细胞因子受体与疾病发生发展以及治疗的研究进展

细胞因子 (Cytokine ,CK)是免疫反应和炎症反应的主要介质 ,其异常产生常常是炎性疾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤、变态反应性疾病等多种疾病的主要病理因素之一 ,因此也是此类疾病生物治疗的主要靶点之一。可溶性细胞因子受体 (solublecytokinereceptor,sCR)一般能特异性抑制相应配体与其膜受体的结合 ,有拮抗CK活性的作用 ,因此对上述疾病有显著的治疗和控制作用 ,目前认为是一种新型的免疫治疗制剂。本文就近年sCR与疾病发生发展以及治疗的研究进展加以综述。

人干细胞因子受体c-Kit稳定表达细胞株的构建

干细胞因子 (SCF)是一种重要的造血因子 ,其受体c Kit具有酪氨酸激酶活性 .SCF c Kit介导的细胞内信号转导在造血、肥大细胞的生成及其功能、以及生殖细胞和黑色素细胞的发育中起着关键的作用 .通过构建人c kitcDNA的pcDNA3.1真核表达载体 ,转染不表达人c kit的小鼠髓系祖细胞FDC P1.经Zeocin抗性筛选 ,PCR、RT PCR、Western印迹分析、流式细胞仪分析等方法检测到人c kit基因的稳定整合和表达 ,并分布于细胞表面 ,证明获得了稳定表达人c Kit受体的细胞株 .用MTT法检测重组细胞株增殖特性 ,表明重组人SCF可刺激其增殖 .为进一步研究人c

细胞因子受体信号转导的JAKs-STATs途径

细胞因子信号转导的ＪＡＫｓ┐ＳＴＡＴｓ途径是当前细胞因子研究领域的热点。多数造血生长因子通过此途径转导信号，表达相应的生理功能。此途径的异常活化与多种疾病密切相关。ＪＡＫｓ是一类非受体型酪氨酸激酶，ＳＴＡＴｓ是一类转录因子，它们均是由多个成员构成的一个家族。细胞因子与其受体结合后诱导受体二聚化，在胞浆内形成ＪＡＫｓ结合位点结合并活化ＪＡＫｓ，活化的ＪＡＫｓ进一步活化ＳＴＡＴｓ，由ＳＴＡＴｓ转入细胞核内启动相应基因的转录，从而表达细胞因子的功能。本文就造血生长因子受体、ＪＡＫｓ、ＳＴＡＴｓ的结构和活化以及ＪＡＫｓ┐ＳＴＡＴｓ途径的异常活化与疾病的关系，参与ＪＡＫｓ┐ＳＴＡＴｓ途径的调节因子综述如下：

趋化性细胞因子受体CCR4和CXCR3在特应性皮炎患者外周血的表达

目的为研究特应性皮炎患者外周血趋化性细胞因子受体CCR4和CXCR3在特应性皮炎的发病过程中的作用。方法采用三色流式细胞仪测定20例特应性皮炎患者和30例健康对照者外周血趋化性细胞因子受体CCR4和CXCR3的表达水平。结果特应性皮炎患者外周血CCR4+CD4+T细胞的水平明显高于对照组(P<0.01);特应性皮炎患者外周血CCR4/CXCR3比率明显高于对照组P<0.01);特应性皮炎患者外周血CXCR3+CD4+T细胞的水平与对照组差异无统计学意义。结论趋化性细胞因子受体CCR4可能促进了Th2细胞从血液进入特应性皮炎患者炎症皮损。

基质细胞衍生因子-1/CXC族细胞因子受体4轴在缺氧预处理骨髓间充质干细胞移植促进Sprague-Dawley大鼠急性心肌梗死心脏功能恢复中的作用

目的观察缺氧预处理的同种异体骨髓间充质干细胞(MSCs)移植入受体后,基质细胞衍生因子(SDF)-1/CXC族细胞因子受体(CXCR)4轴在促进Sprague-Dawley(SD)大鼠急性心肌梗死(AMI)心脏功能恢复中的作用。方法对SD大鼠的MSCs进行体外培养、鉴定,并行缺氧预处理。128只SD大鼠被随机分入MSCs移植组(MSCs组)、缺氧预处理MSCs移植组(预处理MSCs组)、AMI组、假手术组,每组32只。MSCs组、预处理MSCs组和AMI组大鼠均予冠状动脉左前降支结扎造成AMI 10min后,预处理MSCs组大鼠在梗死区域、梗死区边缘局部共注射5×105/\mL经缺氧预处理的MSCs,MSCs组大鼠注射5×105/\mL MSCs,AMI组大鼠注射相同容量的0.9%氯化钠溶液。假手术组大鼠仅行开胸处理。造模前和造模后28d采用超声心动图测量左心室舒张末期内径(LVDd)、左心室收缩末期内径(LVDs)、左心室射血分数(LVEF)3项反映心脏功能的指标。分别于造模后1、7、14和28d每组各处死8只大鼠取其心脏组织行免疫组织化学、常规病理染色,计算心肌梗死面积百分比、梗死区心室壁厚度和心室肌内微血管密度(MVD)。采用实时定量PCR和免疫激光共聚焦定性、定量测定各组心肌组织内SDF-1和CXCR4的表达。结果造模后28d时超声心动图检测结果显示,预处理MSCs组、MSCs组、AMI组的LVDd和LVDs均显著长于假手术组(P值均<0.05),LVEF均显著低于假手术组(P值均<0.05);预处理MSCs组、MSCs组的LVDd和LVDs均显著短于AMI组(P值均<0.05),LVEF均显著高于AMI组(P值均<0.05);预处理MSCs组的LVDd和LVDs均显著短于MSCs组(P值均<0.05),LVEF均显著高于MSCs组(P<0.05)。造模后28d,预处理MSCs组、MSCs组的心肌梗死面积百分比均显著小于AMI组(P值均<0.05),预处理MSCs组显著小于MSCs组(P<0.05);预处理MSCs组、MSCs组左心室前壁厚度均显著厚于AMI组(P值均<0.05),预处理MSCs组显著厚于MSCs组(P<0.05)。造模后28d,预处理MSCs组、MSCs组、AMI组心肌梗死区的MVD定量和AMI组梗死边缘区的MVD定量均显著低于假手术组(P值均<0.05),预处理MSCs组、MSCs组梗死边缘区的MVD定量均显著高于假手术组(P值均<0.05),预处理MSCs组、MSCs组心肌梗死区和梗死边缘区的MVD定量均显著高于AMI组(P值均<0.05),预处理MSCs组心肌梗死区和梗死边缘区的MVD定量均显著高于MSCs组(P值均<0.05)。造模后1、7、14和28d,预处理MSCs组、MSCs组和AMI组的SDF-1和CXCR4蛋白荧光强度均显著高于假手术组(P值均<0.05),预处理MSCs组、MSCs组均显著高于AMI组(P值均<0.05),预处理MSCs组均显著高于MSCs组(P值均<0.05)。结论SD大鼠AMI区局部注射缺氧预处理的MSCs或MSCs后可使SDF-1和CRCR4在受损组织局部表达上调,同时心功能得到改善。SDF-1/CRCR4轴在心肌梗死区局部表达上调可能是缺氧预处理MSCs或MSCs移植后改善心脏功能的重要途径之一。

Ⅰ型细胞因子受体在骨髓增殖性疾病发病中的作用和意义

骨髓增殖性疾病(myeloproliferative disease,MPD)是一组异质性的造血干细胞克隆性疾病,主要包括真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、特发性骨髓纤维化等。该文重点介绍Ⅰ型细胞因子受体在MPD发病中的作用和意义。

新型的Ⅱ类细胞因子受体——白介素22结合蛋白

白介素22结合蛋白为一种新型的Ⅱ类细胞因子受体家族成员,已弄清了其蛋白质结构、基因及其表达。它能直接结合IL-22,作为IL-22的拮抗剂,发挥着多种生物学功能。