连续细胞循环——真空发酵生产乙醇研究

通过连续细胞循环实现了高菌体浓度发酵 ,常压连续细胞循环发酵生产乙醇产率为 9～ 10g/(h·L) ;通过抽真空消除了乙醇抑制 ,连续细胞循环———真空发酵的乙醇产率达 2 3 0 3g/(h·L)。

毕氏酵母细胞循环模型及实验验证

基于芽殖酵母细胞形态的特征,提出了毕氏酵母甘油流加发酵过程的细胞循环模型.模型的输入为比生长速率,由宏观动力学模型得到.通过细胞循环模型,求得与细胞循环过程相关的变量,如细胞带芽分率和细胞数目浓度.实验验证了模型的有效性.

面包酵母细胞循环模型的实验验证

本文对作者早期提出的面包酵母细胞循环模型CCM进行了改进和动态实验验证。结果表明,CCM的动态特性基本与真实过程相符。基于该模型设计的酵母流加发酵最优进料控制策略的实施结果证实,CCM能够用于酵母生产的质量控制。

L-色氨酸发酵中的细胞循环工艺研究

在L-色氨酸发酵过程中,为了提高生物量及细胞的利用率、目的产物产量及糖酸转化率,研究了发酵罐与碟片式分离机相偶联的细胞循环发酵模式,通过分析不同的细胞循环策略及其对生物量、L-色氨酸产量与糖酸转化率的影响,确定了最佳的细胞循环培养策略。结果表明:当采用V(上清液)∶V(浓缩液)=1∶1、细胞循环周期为20~26 h的循环培养策略时,发酵生物量(55.26 g/L)、L-色氨酸产量(52.45 g/L),糖酸转化率(19.75%)均最高;副产物乙酸积累量(0.87 g/L)、谷氨酸生成量(4.24 g/L)及NH+4浓度(86.52 mmol/L)均最低。因此,细胞循环发酵可提高生物量、L-色氨酸产量及糖酸转化率,降低副产物积累量及缩短发酵周期。

发现调控细胞循环周期的神秘物质——2001年诺贝尔生理学或医学奖揭晓

２００１年１０月８日,瑞典卡罗林斯卡医学院诺贝尔评奖委员会宣布,将２００１年诺贝尔生理学或医学奖授予美国科学家利兰·哈特韦尔(ＬｅｌａｎｄＨａｒｔｗｅｌｌ)及两名英国科学家蒂莫西·亨特(ＴｉｍｏｔｈｙＨｕｎｔ。

新型肌腱细胞循环牵伸载荷系统的研制及运行效果观察

目的研制一种能对体外培养肌腱细胞进行循环载荷牵伸的实验装置并观察其运行效果。方法用聚二甲基硅氧烷预聚物与固化剂制备微沟槽硅树脂培养皿;用可编程控制器配控制循环载荷牵伸装置的运转速度及时间,调节对培养皿的牵拉频率和时间;更换不同大小凸轮对培养皿实行不同牵拉强度。观察循环牵伸载荷系统的运行情况及稳定性;初步观察不同牵拉强度、频率和时间对体外肌腱细胞的生物学表现。结果循环牵伸载荷系统能按不同的强度、频率和时间对硅树脂微沟槽培养皿进行牵拉,运行良好且稳定。微沟槽硅树脂培养皿能对其表面生长的肌腱细胞进行改向,细胞呈平行排列,与体内肌腱细胞排列方向具有相似性。结论本研究研制的新型肌腱细胞循环牵伸载荷系统是一个较好的体外细胞牵伸载荷模型,具有运行稳定、可控性强的优点。

叶酸受体阳性循环肿瘤细胞对可切除Ⅲ期鳞癌患者新辅助化疗联合免疫治疗后疗效的预测价值

目的研究治疗后叶酸受体阳性循环肿瘤细胞(folate receptor-positive circulating tumour cells,FR+-CTCs)对可切除Ⅲ期鳞癌患者新辅助化学药物治疗(以下简称化疗)联合免疫治疗疗效的预测价值。方法收集首都医科大学附属北京胸科医院2021年6月至2023年6月入院可切除Ⅲ期鳞癌患者,经过2周期新辅助化疗联合免疫治疗,记录患者以下指标:①一般临床资料:年龄、性别、临床分期、肿瘤位置、治疗前后白细胞计数;②治疗前后肿瘤标志物——血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment,CYFRA 21-1)、鳞状上皮细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)、FR+-CTCs数据;③患者术后病理结果,根据术后病理结果将患者分为两组,肿瘤病灶在病理层面上残存肿瘤细胞占比≤10%(缓解组,E组),肿瘤病灶在病理层面上残存肿瘤细胞占比>10%(NE组),比较E组和NE组患者的一般临床资料,治疗前后白细胞计数、肿瘤标志物和FR+-CTCs水平,将组间比较差异有统计学意义的变量纳入二元Logistic回归分析,统计分析出可切除Ⅲ期鳞癌患者新辅助化疗联合免疫治疗疗效的影响因素,采用受试者工作特征(receiver operating characteristics,ROC)曲线分析FR+-CTCs对其的预测价值。结果最终纳入24例患者,E组15例,NE组9例,两组患者一般临床资料、治疗前CEA、CYFRA 21-1、SCC、FR+-CTCs比较差异均无统计学意义(P>0.05),治疗后CEA、CYFRA 21-1、SCC差异无统计学意义(P>0.05),E组治疗后FR+-CTCs显著低于NE组(P<0.05),二元Logistic回归分析显示,治疗后FR+-CTCs(OR=1.28,95%CI:1.00~1.63,P=0.047)是新辅助化疗联合免疫治疗的影响因素,ROC分析显示,治疗后FR+-CTCs截点值为10.10,特异度0.87,灵敏度0.89,曲线下面积(area under the curve,AUC)0.837。结论对可切除Ⅲ期鳞癌患者,治疗后FR+-CTCs低于10.10 FU/3 mL是预测新辅助化疗联合免疫治疗缓解效果的可靠指标。

外周血循环肿瘤细胞与胃癌患者临床病理特征及新辅助化疗疗效的关系

目的探讨外周血循环肿瘤细胞(CTC)与胃癌患者临床病理特征及新辅助化疗疗效的关系。方法选择2015年3月至2016年2月新乡医学院第三附属医院收治的112例胃癌患者为研究对象。所有患者均于治疗前1 d抽取空腹外周静脉血4 mL,采用阴性富集联合免疫荧光法检测外周血CTC,根据CTC检测结果将患者分为CTC阳性组和CTC阴性组。2组患者均给予新辅助化疗,奥沙利铂130 mg·m^(-2),静脉滴注,第1天;卡培他滨1000 mg·m^(-2),口服,每日2次,第1~14天;21 d为1个疗程,共治疗3个疗程。比较2组患者临床病例特征。采用Kappa检验分析实体瘤疗效评价标准(RECIST)和CTC数目评价标准的一致性,应用Kaplan-Meier生存分析计算患者3、5 a累积生存率,log-rank检验比较CTC阳性组和CTC阴性组患者治疗后3、5 a累积生存率。结果112例胃癌患者中,64例(57.14%)外周血CTC阳性,48例(42.86%)外周血CTC阴性。经新辅助化疗后,完全缓解、部分缓解、疾病稳定、疾病进展者分别为0例、76例、21例、15例,治疗总有效率为67.86%(76/112)。CTC阳性组患者肿瘤浸润深度、TNM分期与CTC阴性组比较差异有统计学意义(P<0.05);CTC阳性组与CTC阴性组患者的性别、年龄、病理分型、肿瘤大小、肿瘤位置、肿瘤分化程度、脉管癌栓比较差异均无统计学意义(P>0.05)。CTC阳性组患者治疗总有效率为59.38%(38/64),CTC阴性组患者治疗总有效率为79.17%(38/48);CTC阳性组患者治疗总有效率显著低于CTC阴性组(χ^(2)=4.926,P<0.05)。RECIST评价标准与CTC数目评价标准具有中度一致性(Kappa=0.546)。CTC阳性组患者3、5 a累积生存率分别为75.6%、26.7%,CTC阴性组患者3、5 a累积生存率分别为85.2%、46.6%。CTC阳性组患者3 a累积生存率与CTC阴性组比较差异无统计学意义(P>0.05);CTC阳性组患者5 a累积生存率显著低于CTC阴性组(P<0.05)。结论检测CTC有助于评估胃癌患者肿瘤浸润程度、临床分期,且能够评估新辅助化疗效果,并对患者的远期生存情况有一定预测价值。

循环肿瘤细胞上细胞程序性死亡配体1表达对宫颈癌同步放化疗预后的评估价值

目的探讨循环肿瘤细胞(CTC)上细胞程序性死亡配体1(PD-L1)表达对宫颈癌同步放化疗预后的评估价值。方法回顾性选取2021年6月至2023年12月入临汾市人民医院的60例宫颈癌患者,均经病理学确诊,CTC PD-L1经CytoSorter CTC系统测定。对宫颈癌病理特征与PD-L1^(+)CTC之间的相关性予以分析,并比较PD-L1^(+)CTC和PD-L1-CTC宫颈癌患者同步放化疗前后的无进展生存期(PFS),评估宫颈癌放化疗后PD-L1^(+)CTC数量对预后的评估价值。结果同步放化疗前后外周血CTC检出率及数量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。较同步放化疗前,宫颈癌患者同步放化疗后PD-L1^(+)CTC检出率更低(38.33%vs.56.67%),PD-L1^(+)CTC检出数量更少[(0.77±1.20)个vs.(1.27±1.51)个],差异均有统计学意义(P<0.05)。同步放化疗前,宫颈癌患者PD-L1^(+)CTC与肿瘤直径、FIGO分期、分化程度及淋巴结转移联系紧密(P<0.05)。同步放化疗后,宫颈癌患者PD-L1^(+)CTC表达水平与肿瘤直径、FIGO分期、分化程度及淋巴结转移密切相关(P<0.05)。PD-L1^(+)CTC患者的PFS短于PD-L1-CTC患者,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析显示,局部晚期宫颈癌患者同步放化疗前后的CTC PD-L1表达水平均可作为PFS预后因素。结论宫颈癌放同步放化疗前后测定的CTC PD-L1表达水平可作为预后评估的辅助指标。

循环肿瘤细胞联合血清标志物检测对胃癌患者术后复发的预测价值

目的循环肿瘤细胞(CTCs)联合血清标志物(STM)检测对胃癌患者术后复发的预测价值。方法选取2020年6月至2021年12月沧州市中心医院收治的80例胃癌手术患者为研究对象,根据术后复发情况分为对照组(n=51,术后未复发)和观察组(n=29,术后复发),比较两组患者CTCs、STM检测情况,并通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析CTCs联合STM检测对胃癌患者术后复发的预测价值。结果观察组癌胚抗原(CEA)、胃癌抗原724(CA724)、糖类抗原199(CA199)含量及CTCs数量均显著高于对照组(P<0.05);观察组CEA阳性检出率、CA724阳性检出率、CA199阳性检出率、CTCs阳性检出率均高于对照组(P<0.05);绘制ROC曲线发现,CEA、CA724、CA199、CTCs检测及联合预测胃癌患者术后复发的曲线下面积(AUC)为0.683~0.754,灵敏度和特异度均较高。结论CTCs联合STM(CEA、CA199、CA724)检测可显著提高胃癌患者术后复发早期诊断准确性,在预测胃癌术后复发方面具有一定的评估效能。

循环肿瘤细胞PD-L1表达对鼻咽癌患者的预后价值评估

目的探讨循环肿瘤细胞(CTC)上细胞程序性死亡配体1(PD-L1)表达对鼻咽癌患者预后的意义。方法收集2021年6月10日—2023年7月10日经病理学确诊的鼻咽癌患者59例,检测患者外周血CTC和PD-L1的表达情况。分析CTC和PD-L1+CTC与鼻咽癌患者临床病理特征的相关性;评估CTC和PD-L1+CTC检测对鼻咽癌患者预后的临床诊断价值。结果59例患者的CTC检出率为76.3%(45/59),检出数量为(1.4±1.1)个。不同M分期,CTC检出数量的差别有统计学意义(P=0.026)。PD-L1+CTC的检出率为35.6%(21/59),检出数量为(0.4±0.7)个。鼻咽癌患者的2 a疾病进展率为8.5%(5/59),PD-L1+CTC患者相较于PD-L1-CTC患者具有更低的无进展生存率(PFS)和总生存率(OS),差别均有统计学意义(P=0.016,P=0.012)。Cox回归分析显示,PD-L1+CTC是鼻咽癌患者PFS(HR=9.244,95%CI:1.030~82.991,P=0.047)和OS(HR=190.642,95%CI:1.389~341.562,P=0.023)的预后影响因素。结论PD-L1+CTC是鼻咽癌患者PFS和OS的预后影响因素,CTC和PD-L1检测可能辅助鼻咽癌患者的预后评估。

叶酸受体阳性循环肿瘤细胞检测在胃癌患者中的临床意义及相关性分析

目的 研究叶酸受体阳性循环肿瘤细胞(folate receptor positive circulating tumor cells, FR+CTC)检测在胃癌患者中的临床意义。方法 回顾性分析术前检测过FR+CTC表达量的胃癌手术患者的临床资料。绘制FR+CTC、白蛋白、总蛋白、血红蛋白、CA125、CA199及CEA预测胃癌患者合并腹膜转移、淋巴结转移、脉管侵犯、神经侵犯、肿瘤突破浆膜层及进展期胃癌的ROC曲线。研究FR+CTC值与胃肠道肿瘤标志物和临床常用营养指标相关的相关性。探讨FR+CTC值及临床相关指标在不同类型胃癌中表达量的统计学差异情况。结果 FR+CTC诊断胃癌患者合并腹膜转移、淋巴结转移、脉管侵犯、神经侵犯、肿瘤突破浆膜层及Ⅲ~Ⅳ期胃癌的AUC值分别为0.933、0.653、0.614、0.628、0.714、0.703,明显优于传统肿瘤标志物(CEA、CA199、CA125)。通过Spearman相关性分析显示,FR+CTC值与白蛋白含量呈负相关(R=-0.26,P=0.0043)。FR+CTC表达量在腹膜转移、淋巴结转移、脉管侵犯、神经侵犯、肿瘤突破浆膜层及Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者中明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 FR+CTC值较传统肿瘤标志物能更准确地预测胃癌患者合并腹膜转移、淋巴结转移、脉管侵犯、神经侵犯、肿瘤突破浆膜层及肿瘤处于Ⅲ~Ⅳ期的概率,并且FR+CTC在这些类型胃癌患者中表达量明显增加,可常规作为新型的临床肿瘤标志物。

循环纤维细胞在坠积性肺炎中的检测及意义

目的:定量分析循环纤维细胞(CFs)在坠积性肺炎(HP)患者外周血中的含量,探究其与疾病严重程度的相关性及在发病风险预测中的应用价值。方法:选取2023年8月-2023年11月潍坊市人民医院重症医学科新发HP患者49例,另选取同期查体健康对照(CON)人员35名;采用流式细胞术检测外周血CD45+细胞中CFs(CD45+ColⅠ+细胞)比例,分析其与白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比(NE%)、中性粒细胞绝对值(NE)、C反应蛋白(CRP)等感染指标相关性;构建ROC曲线评估CFs含量在HP辅助诊断中的价值。结果:HP患者中CFs比例(15.81±10.20)%显著高于健康人群(7.54±3.31)%(P<0.0001)。ROC曲线显示,CFs比例对HP具有辅助诊断价值(AUC为:0.746,cutoff值为:11.32%)。Spearman相关性分析显示,CFs比例与WBC(r=-0.3413,P=0.0164)、NE%(r=-0.2881,P=0.0495)、NE(r=-0.3352,P=0.0185)明显负相关。结论:HP患者体内CFs比例上调,具有较好的疾病鉴别价值,与临床感染指标负相关,提示CFs可能在HP临床诊疗中具有重要应用价值。

叶酸受体阳性循环肿瘤细胞结合肿瘤标志物对肺癌诊断的研究

目的探讨叶酸受体阳性循环肿瘤细胞(FR^(+)-CTC)单独及联合肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)辅助诊断肺癌的有效性。方法收集2019年12月至2022年10月于四川省人民医院就诊的肺部结节患者的临床资料,根据结节的病理性质分为良性组188例和恶性组412例。分析FR^(+)-CTC与肺癌之间的关系,探讨联合检测肿瘤标志物对肺癌的诊断价值。结果恶性组FR^(+)-CTC水平高于良性组;恶性组中不同病理类型、TNM分期、临床分期患者的FR^(+)-CTC水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。FR^(+)-CTC在单独诊断肺癌的灵敏度、特异性均显著优于两种肿瘤标志物,联合诊断后FR^(+)-CTC在诊断肺癌的特异性方面有提升(P<0.05)。结论FR^(+)-CTC对于肺癌的诊断能力突出,可对患者病情进展、预后评估提供参考;联合肿瘤标志物能够提升诊断肺癌的特异性。

循环肿瘤细胞及糖类抗原125新型联用诊断模式在卵巢上皮性癌诊断中的价值

目的:探讨循环肿瘤细胞(CTCs)联合糖类抗原125(CA 125)对卵巢上皮性癌(EOC)的诊断价值。方法:选择2013年9月1日至2020年12月31日于北京大学第三医院收治经病理确诊的160例EOC患者和非癌对照(50例卵巢良性病变患者及40例健康成年女性)为研究对象。采用免疫磁珠分离法检测CTCs的表达,通过酶联免疫法检测CA 125的表达,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线探讨两者诊断EOC的最佳组合方式。结果:①EOC患者与非癌对照时,CA 125>35 U/ml和CTCs阳性诊断EOC的敏感度分别为75.6%、79.4%,特异度分别为82.2%、91.1%。EOC患者与卵巢良性病变患者时,CA 125>35 U/ml及CTCs阳性诊断EOC的敏感度不变(仍分别为75.6%、79.4%),特异度均有所下降(分别为68.0%、86.0%)。②传统的并联试验诊断EOC的敏感度提高至95.0%,但特异度降低至58.0%;传统的串联试验诊断EOC的特异度提高至96.0%,但敏感度降低至60.0%。③定义CTCs及CA 125的新型联用诊断模式检出阳性为:CA 125≥90 U/ml或25 U/ml<CA 125<90 U/ml且CTCs阳性。采用新型联用诊断模式诊断EOC的敏感度为88.8%,特异度为86.0%。结论:CTCs或CA 125单独区分卵巢良恶性肿物时的敏感度均不高,且特异度偏低,特别是CA 125。传统的并联或串联试验不能提高EOC诊断效能;CTCs及CA 125新型联用诊断模式提高了EOC诊断的敏感度,同时保证了特异度没有降低。

胃癌循环肿瘤细胞与临床病理特征及预后的相关性研究

目的研究胃癌循环肿瘤细胞(CTCs)及其亚型与临床病理特征及预后的相关性。方法采取前瞻性研究方法,随机选择2015年5月至2019年1月期间在广西医科大学附属肿瘤医院胃肠外科就诊,经病理诊断为胃腺癌并符合入组条件的初始治疗患者作为研究对象,利用Canpatrol TM技术平台富集分离入组病例术前外周血CTCs,采取多重原位mRNA杂交技术对CTCs进行鉴定、分型并计数;分析CTCs及其亚型与患者年龄、性别、分化程度、神经侵犯、脉管侵犯、Lauren分型、肿瘤部位、浸润深度(T分期)、淋巴结转移(N分期)、AJCC病理分期之间的相关性;对所有入组病例进行随访,分析CTCs与预后相关性。结果共入组病例58例,其中男性37例,女性21例,平均年龄54.4岁;基于Canpatrol TM技术平台,将CTCs分为上皮型(eCTCs)、混合型(mixCTCs)及间质型(mCTCs)3个亚型;CTCs总检出率为90.7%,其中eCTCs检出率68.5%,mixCTCs检出率74.1%;mCTCs检出率61.1%;CTCs及其亚型检出数量与年龄及Lauren分型相关,年龄<60岁的胃癌病例术前外周血CTCs总数及mixCTCs显著低于年龄≥60岁的胃癌病例,P=0.016;Lauren肠型胃癌中CTCs总数及eCTCs、mCTCs数量显著高于弥漫型胃癌(P<0.05);CTCs及其亚型检出数量与病理分期无显著相关性(P>0.05),但当按Lauren分型进行分层后,肠型胃癌组eCTCs数量与病理分期显著正相关(P<0.05);CTCs及其亚型检出数量与性别、神经脉管侵犯、肿瘤部位、浸润深度(T分期)、淋巴结转移(N分期)等指标均无明显相关(P>0.05);本组病例平均随访时间50个月尚未到达中位生存时间,进一步COX回归分析提示肿瘤TNM分期、Lauren分型、神经侵犯是胃癌独立预后因子,CTCs检出数量与生存预后无相关性。结论胃癌外周血CTCs检测到不同上皮-间质标记亚群,提示胃癌外周血CTCs存在上皮-间质转化(EMT)现象;胃癌外周血CTCs及其亚型数量与Lauren分型显著相关,肠型胃癌CTCs检出数量与病理分期关系密切,提示胃癌CTCs的检测在肠型胃癌的预后监测方面可能更有应用价值。

循环肿瘤细胞及其血管内皮生长因子受体2分型和表达水平预测肝癌疗效的研究进展

原发性肝癌在我国发病率很高,主要类型为肝细胞肝癌,约80%患者与乙肝病毒感染相关,手术切除是早期肝癌的理想治疗手段,故肝癌患者的早期诊断、预后评估及治疗监测非常重要。循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)及其VEGFR-2的水平检测在肝癌诊疗过程中可对其实施全阶段监测,提前进行肝癌进展的干预,指定合理的预后复查,将有助于降低肝癌患者转移和复发率,改善长期生存率。本文对CTC及其VEGFR-2分型和表达水平预测肝癌治疗疗效进行综述。

生物信息学分析鉴定循环肿瘤细胞APOH基因作为结直肠癌肝转移核心基因的研究

目的 循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)是结直肠癌(colorectal cancer,CRC)肝转移的关键环节,目前对CTCs进行检测和再培养仍存在局限性,迫切需要新的标志物来提高CRC患者血液中CTCs的检出率。方法 经综合生物信息学分析获得由CTCs分泌的在CRC肝转移中起重要作用的血液蛋白,并通过蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络分析和外部高通量基因表达(gene expression omnibus,GEO)数据集对核心基因进行筛选和验证。结果 共鉴定出由CTCs分泌的在CRC肝转移中起重要作用的4个核心基因,其中载脂蛋白H (apolipoprotein H,APOH)最为重要,其在CTCs和肝转移灶中的表达水平显著高于CRC原发灶和其他转移部位,且在血液中CTCs的APOH表达水平显著高于白细胞。受试者操作特征曲线分析显示APOH对CRC肝转移具有较佳的诊断效能。基于APOH预测的EHT1864、Lisitinib和Oxaliplatin可能是CRC患者的潜在治疗药物。结论APOH是由CTCs分泌且在CRC肝转移中起重要作用的核心基因。

循环肿瘤细胞分离富集技术及其在肺癌中的临床应用进展

癌症是一个主要的公共卫生问题,在中国,肺癌在所有癌症中发病率与死亡率均居于首位。由于肺癌患者随着病程进展生存率降低,因此肺癌的筛查与早期诊断显得尤为重要。液体活检具有微创、便捷、可重复的优点,是肺癌早期诊断与筛查的有力手段,其中循环肿瘤细胞(CTCs)是重要的液体活检标志物。CTCs作为转移病灶的“种子”,在癌症的早期诊断、转移监测、预后评价以及患者的个体比治疗中具有重要作用。但CTCs在血液中含量稀少,需要将其从血细胞中分离富集出来,再进行分析。因此,本文对目前循环肿瘤细胞的分离富集技术,以及循环肿瘤细胞在肺癌中的临床应用进行综述。