光甘草定/羟丙基-β-环糊精包合物的释放特性、黏液渗透性及细胞摄取

将光甘草定(glabridin,GLD)用羟丙基-β-环糊精(hydroxypropyl-β-cyclodextrin,HP-β-CD)包合制备GLD/HP-β-CD包合物,以提高GLD在水中的溶解度;通过扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)、差示扫描量热(differential scanning calorimetry,DSC)法、傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)法和分子对接分别研究包合物的形貌、包合物中GLD的存在形式、GLD与HP-β-CD的相互作用和空间构象。在此基础上,进一步采用体外模拟实验研究GLD/HP-β-CD包合物在胃、肠液条件下的溶出和释放特性;利用Transwell小室法研究GLD/HP-β-CD在黏液层中的渗透性,分子对接技术研究GLD与黏蛋白的空间构象及相互作用;采用Caco-2细胞研究GLD/HP-β-CD中GLD的小肠摄取,探讨载体HP-β-CD对GLD吸收的影响及可能机制。结果表明:GLD/HP-β-CD中GLD的包合率和载药率分别为90.03%、14.51%,载体HP-β-CD能使GLD在水中的饱和溶解度显著提高至109.36 mg/m L。SEM显示GLD/HP-β-CD固体包合物呈形状不规则的片状。DSC显示GLD在GLD/HP-β-CD包合物中以无定形非晶体结构存在;FTIR及DSC充分证明了HP-β-CD已将GLD包合在空腔内形成了包合物。分子对接显示GLD分子能够完整地进入到HP-β-CD的空腔内,与HP-β-CD之间的最佳结合能为-7.37 kcal/mol,分子间的相互作用主要靠范德华力维持。GLD经HP-β-CD包合后,在胃、肠液中1 h时的累积溶出率分别提高至GLD的15.75、12.4倍,在连续胃、肠液中24 h时的累积释放率提高约53倍;透过黏液层的表观渗透系数由9.24×10^(-9) cm/s提高至1.43×10^(-5) cm/s,分子对接研究表明GLD与黏蛋白MUC2分子间存在较强的相互作用;Caco-2细胞的摄取量由0.039 mg/g提高至0.349 mg/g。研究表明:GLD/HP-β-CD包合物可显著提高GLD的溶出和释放,极大改善GLD透过肠上皮表面黏液层的渗透性和肠上皮细胞的摄取,具有增强GLD吸收、提高GLD生物利用度的潜力。

白头翁皂苷B4和PD-L1 siRNA共递送cRGD修饰靶向脂质体的制备及体外细胞摄取研究

目的制备白头翁皂苷B4(AB4)和程序性死亡配体1(PD-L1)小干扰RNA(siP)共递送环精氨酰甘氨酸天冬氨酸序列(cRGD)修饰靶向脂质体(AB4/siP-c-L),并考察其体外细胞摄取行为。方法采用乙醇注入法制备cRGD修饰的AB4靶向脂质体(AB4-c-L),将AB4-c-L与20 nmol/L的siP等体积混合,通过静电吸附得到AB4/siP-c-L。分别采用激光散射粒径测定仪、透射电子显微镜、超滤离心法、透析法、琼脂糖凝胶电泳法考察AB4/siP-c-L的粒径、Zeta电位、形态、包封率、药物含量、体外释放行为、血清稳定性。分别采用流式细胞术和共聚焦激光扫描技术评价小鼠Lewis肺癌细胞LLC对AB4/siP-c-L的摄取及其在细胞内的分布情况。结果AB4/siP-c-L的平均粒径为(187.4±3.1)nm,Zeta电位为(33.5±1.4)mV,形态呈类球形,AB4的包封率和含量分别为(95.2±0.4)%、(1.0±0.2)mg/mL;AB4/siP-c-L可较好地包裹siP,并具有较好的血清稳定性、pH敏感性以及缓释特性。LLC细胞对AB4/siP-c-L的摄取率显著高于游离药物,并能实现细胞质内富集。结论AB4/siP-c-L可有效实现AB4与基因药物siP共载,且对LLC细胞具有一定的体外靶向性。

血卟啉衍生物在3种肺癌细胞系中的细胞摄取和定位

目的以支气管上皮BEAS-2B细胞系为对照,比较不同肺癌细胞系(肺腺癌A549、肺鳞癌H520、肺小细胞癌H446细胞)之间血卟啉衍生物(HPD)的细胞摄取和定位差异。方法用不同浓度HPD测得的荧光值绘制HPD荧光值的标准曲线。将4种细胞分别与HPD孵育不同时间后,用多功能酶标仪检测荧光强度。进一步用流式细胞仪量化细胞摄取,比较4种细胞HPD摄取差异。用激光扫描共聚焦显微镜观察比较细胞内HPD摄取和分布情况。结果4种细胞系摄取HPD随着时间增加而增加,但HPD的累积速率有所差异。5 mg/L的HPD孵育细胞24、48 h,4种细胞内平均荧光强度差异有统计学意义(F=199.00、71.15,P<0.001),其中A549细胞内平均荧光强度显著高于H446、BEAS-2B、H520细胞,H446和BEAS-2B细胞内平均荧光强度显著高于H520细胞(P<0.05)。15 mg/L的HPD孵育细胞48 h,4种细胞内呈现出强度不等的红色荧光信号,均呈点状分布于细胞质内。结论不同类型肺癌细胞系摄取HPD存在差异,其中肺腺癌A549细胞摄取HPD的能力最强,支气管上皮BEAS-2B细胞与肺小细胞癌H446细胞次之,肺鳞癌H520细胞摄取能力最弱;HPD细胞内定位均位于细胞质内,呈点状分布。

DHA藻油纳米脂质体粉末制备:壁材对储存稳定性、体外消化及细胞摄取的影响

为开发具有更高储存稳定性和生物利用度的负载DHA藻油的脂质体粉末,以DHA藻油为原料,首先利用大豆卵磷脂制备负载DHA藻油的纳米脂质体悬液,继而分别使用3种壁材(麦芽糊精、羟丙基-β-环糊精及二者质量比为1∶1的混合物)对脂质体悬液包埋后进行喷雾干燥,制得DHA藻油纳米脂质体粉末,最后比较了3种壁材对脂质体粉末氧化稳定性、体外消化和细胞摄取的影响。结果表明:DHA藻油脂质体悬液制备的最佳条件为大豆卵磷脂与DHA藻油质量比3∶1、超声时间1 min、旋蒸温度45℃、PBS的pH 7.0、PBS浓度0.02 mol/L、PBS用量10 mL(大豆卵磷脂与藻油总质量0.4 g时),在此条件下DHA藻油脂质体悬液的包封率为88.01%;3种脂质体粉末粒径范围在(253.87±1.96)~(408.80±1.23)nm之间,Zeta电位在(-40.80±0.78)~(-34.87±0.25) mV之间;羟丙基-β-环糊精与麦芽糊精混合物为壁材时,DHA藻油纳米脂质体粉末具有更高的氧化稳定性、更低的水分含量和更慢的脂肪酸体外消化释放率;3种脂质体粉末使Caco-2细胞中SLC27 A4、FABP4和CD36基因表达增加,说明脂质体粉末均具有良好的细胞摄取。综上,基于大豆卵磷脂制备的DHA藻油纳米脂质体及喷雾干燥技术有效改善了DHA藻油的氧化稳定性。

蜂蜡含量对纳米结构脂质载体消化释放行为及巨噬细胞摄取率的调控影响

脂质相组成对纳米结构脂质载体(nanostructured lipid carriers,NLCs)消化释放行为和巨噬细胞摄取具有调控作用。本实验通过体外模拟消化实验、离体肠黏附渗透实验和RAW264.7小鼠巨噬细胞摄取实验探究脂质相中蜂蜡质量比对NLCs物性、脂质消化、姜黄素释放、小肠黏附渗透以及巨噬细胞摄取效率的影响。结果显示:随脂质相中蜂蜡含量的增加,NLCs粒径增加,负载率及包封率均有所提高。相比未添加蜂蜡的NLC0(其油相为中链脂肪酸甘油三酯),油相中添加5%(质量分数,下同)或10%蜂蜡(NLC5和NLC10)提升了NLCs表观黏度和物理稳定性,增强了小肠黏膜黏附渗透效率(NLC5和NLC10组姜黄素在上皮组织细胞的荧光信号强度比NLC0组分别提高了20.27%和55.02%)。随蜂蜡含量增加,NLCs的脂解效率、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)释放速率和姜黄素释放量均有所下降(FFA释放速率KNLC0(0.13 min^(-1))>KNLC5(0.08 min^(-1))>KNLC10(0.06 min^(-1)));姜黄素释放量RNLC0((99.93±0.09)%)>RNLC5((96.38±0.05)%)>RNLC10((90.05±0.05)%),体现出缓释的特性。相比游离的姜黄素,NLCs促进了姜黄素在RAW264.7小鼠巨噬细胞内富集(增强了5.68~6.25倍)。本研究可为蜂蜡基NLCs在亲脂活性成分口服递送和健康效应调控的应用提供指导。

马钱子碱新型壳聚糖纳米粒体外肝癌细胞摄取特性的研究

以新型高分子材料N-glycyrrhetinic acid(GA)-polyethylene glycol(PEG)-chitosan(NGPC)为载体材料,采用离子交联法制备载马钱子碱(Brucine)的壳聚糖纳米粒(Brucine/NGPC-NPs)。以Hep G2细胞为模型细胞,考察药物作用时间、药物作用浓度、加入外源甘草次酸和细胞内吞抑制剂对细胞摄取的影响,并结合激光共聚焦显微镜成像技术观察纳米粒在细胞内的转运。结果显示,Brucine/NGPC-NPs平均粒径为(197.6±11.2)nm,包封率和载药量分别为(63.48±4.67)%和(5.49±0.38)%。Hep G2细胞对马钱子碱溶液剂和Brucine/NGPC-NPs的摄取均具有时间和浓度依赖性,其中对NGPC-NPs的摄取明显强于溶液剂,具有显著的主动转运特征,且摄取量随外源甘草次酸的加入而减少,其摄取途径主要依赖网格蛋白介导的内吞,之后被细胞内化。结果表明,NGPC-NPs可以作为肝细胞靶向的载体,显著提高药物进入肝癌细胞的量,达到减毒增效的目的。

硬脂酸纳米粒混悬液表面性质的测定与体外细胞摄取

目的 研究不同表面活性剂制备的硬脂酸纳米粒混悬液的表面性质与体外细胞摄取之间的关系。方法 以不同的表面活性剂采用乳化蒸发 低温固化法制备硬脂酸纳米粒混悬液并测定其表面接触角和表面张力 ,以小鼠腹腔巨噬细胞为细胞模型作体外细胞吞噬实验。结果 用苄泽类Brij 78[聚氧乙烯 (2 0 )硬脂酸醚 ],Myrj 5 3[聚氧乙烯 (5 0 )硬脂酸酯 ],Myrj 5 9[聚氧乙烯 (10 0 )硬脂酸酯 ]和PluronicF6 8[聚氧乙烯和聚氧丙烯嵌段聚合物 ,普郎尼克 188]为表面活性剂制备了粒径分别为 (16 2 .0± 6 7.4) ,(5 0 .2± 2 8.9) ,(32 6 .8± 195 .2 )和 (2 0 4.5± 91.3)nm的硬脂酸纳米粒。体外细胞摄取实验证明 ,各种纳米粒相对于硬脂酸溶液均可增加巨噬细胞对硬脂酸的摄取 ,其中以Myrj 5 9组摄取量最少 ;硬脂酸纳米粒表面的亲水性与巨噬细胞对纳米粒的摄取之间存在着明显的相关关系。

反义寡核苷酸阳离子脂质体的制备和体外细胞摄取研究

目的 制备高效促进细胞摄取反义寡核苷酸 (ASON)和保护ASON的脂质体。方法 以 3β[N (N′,N′ 二甲氨基乙基 )氨甲酰基 胆固醇 (DC Chol)为类脂成分制备阳离子脂质体 (以下简称DC Chol脂质体 ) ,与ASON混合得到载药脂质体 ,测定载药率。用琼脂糖凝胶电泳分析载药脂质体的结构特点 ;流式细胞仪检测不同条件下细胞摄取荧光标记ASON的情况 ;变性聚丙烯酰胺电泳考察DC Chol脂质体对ASON的保护作用。结果 载药率与DC Chol脂质体和药物的 + -电荷比有关 ,当 + -电荷比大于 2时 ,载药率达 90 %以上 ;琼脂糖凝胶电泳显示ASON同时存在于DC Chol脂质体的周围和包裹于其内部的两种形式 ;流式细胞仪测定结果表明 ,DC Chol脂质体可明显增加细胞对ASON的摄取 ,阳性细胞染色率和胞内平均荧光强度均较对照组有明显增加 ,增加程度主要取决于 + -电荷比例 ,血清可降低细胞的摄取 ;变性聚丙烯酰胺电泳证实DC Chol脂质体具有保护ASON的作用。结论 DC Chol脂质体具有显著增加细胞摄取ASON和保护ASON的作用 ,有望成为反义类药物的高效传递系统。

载阿霉素介孔二氧化硅纳米粒的细胞毒性及细胞摄取

目的制备载阿霉素的介孔二氧化硅纳米粒(mesoporous silica nanoparticles,MSN),对其理化性质及细胞摄取行为进行初步研究。方法通过聚合法制备MSN,透射电镜表征纳米粒的形态,动态光散射粒径测定仪测定粒子的平均粒径及分布。紫外分光光度计测定阿霉素的负载行为,MTT比色分析法研究粒子的细胞毒性,激光共聚焦显微镜观察其人乳腺癌MCF-7细胞对载药粒子的摄取。结果纳米粒分布均一,平均粒径约70 nm(PDI<0.1),载药量质量分数达到20%。MCF-7细胞对载药粒子的摄取较快,空白纳米粒具有较低的细胞毒性。结论介孔二氧化硅纳米粒具有较高的药物载药量和良好的生物相容性,能较快地被对人乳腺癌MCF-7细胞摄取,有望成为一种新型的药物化疗载体。

载紫杉醇的大黄酸偶联物胶束对MCF-7细胞的毒性与细胞摄取研究

通过MTT法评估了羧甲基壳聚糖-大黄酸偶联物(CR偶联物)和载紫杉醇(PTX)的CR偶联物胶束(PTX/CR偶联物胶束)对MCF-7细胞的细胞毒性,结果显示,CR偶联物具有良好的安全性;PTX/CR偶联物胶束24 h内表现出优于Taxol?的抗肿瘤活性。通过包载环境响应型荧光探针P4,考察了共载P4和PTX的CR偶联物胶束[(P4+PTX)/CR偶联物胶束]在MCF-7细胞中的摄取情况,结果显示,MCF-7细胞对其具有较好的摄取效果,(P4+PTX)/CR偶联物胶束组与其加维拉帕米组摄取量无显著性差异,提示CR偶联物胶束可以保护其所载荧光探针和/或药物不被P-gp外排到细胞外。该研究结果为CR偶联物及PTX/CR偶联物胶束的进一步体内研究奠定了基础。

脂蟾毒配基PLGA-TPGS纳米粒的体外细胞摄取及毒性研究

目的:研究脂蟾毒配基(RBG)乳酸羟基乙酸共聚物-水溶性维生素E(PLGA-TPGS)纳米粒(RPTN)体外被人肝癌Hep G2细胞、小鼠腹水型高淋巴道转移肿瘤HCa-F细胞的摄取情况和对Hep G2细胞的毒性。方法:制备包载RBG和荧光标记物香豆素6的PLGA-TPGS纳米粒(RCPTN),荧光倒置显微镜观察Hep G2、HCa-F细胞对RCPTN的体外摄取情况。将试验分为阴性对照组、空白PLGA-TPGS纳米粒(EPTN)组、5-氟尿嘧啶溶液(FS)组、RBG溶液(RS)组、RBG/PLGA纳米粒(RPN)组、RPTN组,采用水溶性四氮唑(WST-1)法考察不同终质量浓度(1.25、2.5、5、10、20μg/m L)的FS、RS、RPN和RPTN作用24、48、72 h后Hep G2细胞在450 nm波长下的光密度,计算细胞存活率(CV)和半数抑制浓度(IC_(50))。结果:RCPTN分布在Hep G2、HCa-F细胞的细胞核周围。RPN组和RPTN组细胞的CV随RBG浓度增加而减小,随作用时间延长而减小;与FS组比较,RPTN组细胞的CV均减小(P<0.05或P<0.01)。FS、RS、RPN和RPTN作用于Hep G2细胞的IC_(50)随时间的延长而减小,且IC_(50)的大小依次为RS>FS>RPN>RPTN;RPN和RPTN作用48、72 h的IC_(50)明显小于FS与RS(P<0.05或P<0.01)。结论:RPTN可将RBG带入Hep G2、HCa-F细胞内部,其对Hep G2细胞具有抑制作用,且作用强于RPN、RS和FS。

双吡啶α,β-不饱和酮抗肿瘤药物的细胞摄取研究

以4-吡啶甲醛与环己酮或N-甲基-4-哌啶酮通过Claisen-Schmidt缩合得到两个吡啶取代的α,β-不饱和酮药物,并通过1HNMR、FT-IR、元素分析等表征其结构。CCK-8法评价其对A549、MCF-7、He PG2、SGC-7901、OVCA-433等肿瘤细胞系的抗肿瘤活性及对正常细胞HUVEC的细胞毒性。研究显示,2,6-二(4-吡啶亚甲基)-1-环己酮对胃癌SGC7901和肝癌He PG2,药物3,5-二(4-吡啶亚甲基)-4-哌啶酮对A549、SGC7901、He PG2均有较好的抑制活性,其中IC50<10μmol/L,但对正常细胞HUVEC的细胞毒性较小。此外,通过共聚焦显微成像技术,实时检测了He PG2细胞对两种药物体外的摄取情况,随着药物浓度的升高和作用时间的不断延长,荧光强度也不断增强,说明细胞对药物的摄取量与时间和浓度呈正相关关系。

双配体修饰脂质聚合物杂化纳米粒的制备及细胞摄取研究

目的制备双修饰的主动心肌靶向的载荧光探针香豆素-6(C-6)的脂质-聚合物杂化纳米粒(LPHNs),并考察其细胞摄取。方法通过巯基化反应,合成导向化合物心肌细胞靶向肽-聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺(PCM-PEG-DSPE)。选取C-6为荧光探针,采用自动组装法制备包载C-6的LPHNs,再通过插入法,用PCM和细胞穿膜肽(TAT)对C-6-LPHNs进行修饰。以心肌细胞(H9C2)为模型做体外细胞摄取实验。结果双修饰的C-6-LPHNs的平均粒径为74.5±4.2 nm,分散系数(PDI)为0.051±0.013,Zeta电位为-32.8±1.2 mV,包封率为87.04%±3.19%。双修饰的C-6-LPHNs对H9C2心肌细胞的摄取率明显高于未修饰的C-6-LPHNs。结论LPHNs经双修饰后可促进H9C2心肌细胞的摄取。

两株人肺癌细胞摄取^(99)Tc^m-MIBI的比较

比较2株人肺癌细胞对亲肿瘤显像剂99Tcm-MIBI的不同摄取特征。细胞摄取99Tcm-MIBI的动力学行为显示99Tcm-MIBI在小细胞肺癌(H446)中的摄取显著高于肺腺癌(SPC-1),H446细胞对99Tcm-MIBI的摄取在120 min内逐渐升高至最大峰值,然后缓慢下降;此摄取可被未标记的MIBI所抑制;H446细胞对99Tcm-MIBI的摄取与细胞数量呈正相关而与放射性浓度呈负相关;SPC-1细胞对99Tcm-MIBI的摄取处于低水平状态,无明显峰值。结果显示,不同的肺癌细胞具有对99Tcm-MIBI的不同摄取特性,这与临床不同类型肺癌患者的99Tcm-MIBI显像结果不同相符。

PEG表面修饰硬脂酸脂质纳米粒的制备与体外细胞摄取

目的 研究不同分子量聚乙二醇 [poly(ethyleneglycol) ,PEG]表面修饰的硬脂酸脂质纳米粒的制备方法及体外细胞摄取的情况。方法 以亲脂端为硬脂基 ,亲水端为不同链长度PEG的非离子性表面活性剂 ,用“乳化蒸发 低温固化”的方法制备硬脂酸纳米粒。以小鼠腹腔巨噬细胞为细胞模型做体外细胞吞噬实验。结果 用Brij 78,Myrj5 3和Myrj5 9为表面活性剂制备了粒径分别为 (16 2 0± 6 7 4)nm ,(5 0 2± 2 8 9)nm和 (32 6 8± 195 2 )nm的纳米粒。体外细胞摄取实验证明 ,各种纳米粒相对于硬脂酸溶液均可增加巨噬细胞对硬脂酸的摄取 ,其中以Myrj5 9组摄取最少 ;在样品中加入小鼠血浆可以增加巨噬细胞对硬脂酸纳米粒的摄取。结论 用“乳化蒸发 低温固化”的方法可以制备PEG表面修饰的硬脂酸纳米粒 ;表面修饰PEG链的长度可以影响硬脂酸纳米粒体外细胞的摄取。

隐丹参酮PEG-PE纳米胶束的制备、细胞摄取及诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的研究

目的制备隐丹参酮PEG-PE纳米胶束,并进行体外评价、细胞摄取及诱导乳腺癌细胞凋亡研究。方法采用薄膜水化法制备隐丹参酮PEG-PE纳米胶束,从体外释药、细胞摄取和细胞凋亡等方面对该药物载体进行系统评价。结果隐丹参酮PEG-PE纳米胶束粒径为(16.5±1.1)nm,Zeta电势为-(21.6±0.8)mV,包封率为(85.4±4.9)%,载药量为(5.4±0.3)%。TEM电镜可直观显示隐丹参酮PEG-PE纳米胶束呈形态规则的圆球形结构;采用芘测定法表明PEG-PE纳米胶束的临界胶束浓度(CMC)约为6.1μg·mL^-1;细胞摄取试验结果表明,PEG-PE纳米胶束可以增强药物细胞摄取量,细胞外残留量减少;MTT肿瘤细胞毒性试验结果显示,隐丹参酮PEG-PE纳米胶束对乳腺癌MDAMB-231细胞的增殖抑制率明显优于隐丹参酮。隐丹参酮PEG-PE纳米胶束可以明显促进肿瘤细胞凋亡,提高促凋亡Caspase 3活性和促凋亡蛋白Bax的表达,减少抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,这些结果与游离隐丹参酮的结果比较,差异具有统计学意义。结论隐丹参酮PEG-PE纳米胶束粒径小,释药缓慢,可很大程度地提高隐丹参酮在肿瘤细胞内的摄取量,增强药物的诱导乳腺癌细胞凋亡作用。

神经母细胞瘤细胞摄取Beta淀粉样蛋白形态学观察

目的观察人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)对细胞外β-淀粉样蛋白(Aβ)摄取作用和在亚细胞结构定位。方法接种培养SH-SY5Y细胞,采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)直接观察SH-SY5Y对细胞外Aβ1-42-fluo摄取的时程变化;用图像分析技术比较24h时SH-SY5Y对细胞外三种不同浓度Aβ1-42-fluo摄取的差异,同时采用免疫荧光多重染色分析SH-SY5Y摄入Aβ1-42-fluo的亚细胞结构定位。结果SH-SY5Y与200nmol/LAβ1-42-fluo共孵育1h后就开始摄取Aβ,Aβ被摄入的量随着时间的增加而增加;细胞外Aβ1-42-fluo浓度愈高,被摄入到细胞内Aβ1-42-fluo量也愈多,不同浓度各组间相比具有统计学差异(P<0.01或P<0.05);免疫荧光染色显示部分被内吞Aβ荧光颗粒与溶酶体标记物Lamp-1共定位。结论SH-SY5Y通过摄入Aβ机制以清除Aβ,呈时间和浓度依赖关系;被摄入的Aβ部分定位于溶酶体。

GC-1200γ计数器在^(125)I体外细胞摄取实验中测量问题分析

目的探讨国产GC-1200γ放免计数器在^(125)I-FSH体外细胞摄取实验中可能会影响测量结果的几个相关问题。方法样品进入测量室前先做本底测量;通过变换空白放免管、低计数管、高计数管在同一测量架的不同位置及在待测区的不同位置所测得的CPM进行统计比较。结果在高计数单个样品达1.9×10~6 CPM时对相邻位低计数管计数的影响为7%;对相邻探测器中低计数管计数的影响为7.33%;将所有样本由高到低排列并将高计数样品架放置于紧贴探测器的待测位置,对低计数管的计数影响为5.33%。结论国产GC-1200γ放免计数器适用于^(125)I核素标记的体外细胞摄取实验的测量。

PEG化聚乳酸羟基乙酸纳米粒的抗黏性及HeLa细胞摄取

目的制备单甲氧基聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸纳米粒(monomethoxy polyethylene glycol-poly-actic coglycolic acid-nanoparticles,mPEG-PLGA-NPs)并研究其理化性质及体外抗黏性能,考察人宫颈癌细胞HeLa对mPEG-PLGA-NPs的摄取能力。方法采用溶剂扩散法制备mPEG-PLGA-NPs,测定其平均粒径和zeta电位。采用黏蛋白结合法,考察mPEG-PLGA-NPs的体外抗黏性能。以香豆素-6(coumarin 6)为荧光标记物,通过共聚焦显微镜及HPLC法进行HeLa细胞的体外摄取研究。结果 mPEG-PLGA-NPs的平均粒径为(106.2±4.3)nm,Zeta电位为-(12.40±0.11)mV。PLGA-NPs的抗黏蛋白黏附率为35.5%,而mPEG-PLGA-NPs的抗黏蛋白黏附率为92.5%,比PLGA-NPs高3倍左右。相同孵育时间内,HeLa细胞对mPEG-PLGA-NPs的摄取量是PLGA-NPs的近2倍,HeLa细胞对PLGA-NPs和mPEG-PLGA-NPs的摄取量与孵育时间成明显的依赖关系。结论 mPEG-PLGA-NPs具有较强的抗黏性;HeLa细胞对mPEG-PLGA-NPs的摄取明显高于PLGA-NPs(P<0.01),表现出更好的细胞亲和性。

9-硝基喜树碱纳米脂质载体系统的释放、细胞摄取及组织分布特性

目的研究9-硝基喜树碱纳米脂质载体系的体外释放、巨噬细胞摄取及体内组织分布特性。方法以BLB／C小鼠腹腔巨噬细胞为细胞模型进行9-硝基喜树碱纳米脂质载体系统的体外细胞吞噬实验；以一级昆明种小鼠为动物模型进行体内组织分布实验；并进行多晶X-射线衍射及体外释放实验的测定。结果9-硝基喜树碱可能以无定形物分散在纳米脂质载体中，液态脂质的加入并没有改变纳米粒固态内核的性质；体外释放实验表明纳米脂质载体系统具有一定的缓释特性；PEG的修饰使巨噬细胞对纳米粒的摄取减少，且能够增强纳米粒抵抗蛋白吸附的能力；纳米脂质载体系统能够延长9-硝基喜树碱在血中的滞留时间，并改变其在小鼠体内的分布特征。结论由Myrj59制备的纳米脂质载体系统具有缓释特性，且具有良好的长循环性及肝、肺靶向性。