细胞膜色谱法与液相色谱-质谱联用筛选佛手的活性成分

目的从佛手中筛选对主动脉血管有舒张作用的有效成分。方法采用大鼠血管平滑肌细胞膜色谱模型(VSM/CMC)筛选,液相色谱-质谱(LC/MS)离线分析,并结合离体药理实验确定佛手舒张血管的有效成分。结果佛手柑内酯是佛手中作用于血管的活性成分,药理实验结果表明其具有舒张血管作用,化合物在VSM/CMC的保留特性和其药理作用有显著相关性。结论 VSM/CMC模型可以反映化合物与细胞膜及膜蛋白(包括受体)的相互作用;VSM/CMC和LC/MS技术联用,为从天然产物中快速寻找新的活性成分提供了途径。

大鼠大脑皮层细胞膜色谱法筛选老瓜头镇痛活性成分研究

从老瓜头二氯甲烷、乙酸乙酯萃取层得到4个化合物,分别为新白前酮(1)、邻苯二甲酸二丁酯(2)、华北白前醇(3)、β-谷甾醇(4);正丁醇层得到2个化合物,分别为3-甲氧基-4-羟基苯甲酸(5)、对羟基苯基酸(6);总生物碱中分离到1个化合物,鉴定为7-脱氧基娃儿藤碱(7)。大鼠大脑皮层细胞膜色谱模型上发现乙酸乙酯、正丁醇层在CMC固定相上无保留,二氯甲烷层有弱保留,总生物碱有强保留;化合物1有弱保留,化合物3、7有强保留,保留因子分别为1.5、23.0、20.0。本实验建立的CMC模型可正确反映活性部位、活性成分与细胞膜及膜受体的相互作用,初筛得到3个可能具有镇痛活性的痕量单体化合物,2个为非生物碱,1个为菲骈吲哚里希啶类生物碱,为老瓜头后续研究奠定基础。

细胞膜色谱法及其在药理学研究中的应用进展

细胞膜色谱法是研究药物与受体之间相互作用的一种新型亲和色谱技术,将药物在体内的作用过程在色谱柱内进行动态模拟。随着CMC法研究的深入,为天然植物药中有效成分的提取,中药复方的定性定量分析等方面提供了实验依据,为研究药物与受体作用及创新药物的高通量筛选提供了细胞水平筛选平台。文章简要综述近年来细胞膜色谱法及其在药理学中的应用进展。

细胞膜色谱法应用于中药质量控制的思考

通常的中药质量控制方法存在检测指标单一,质控指标与药效作用相关性不强等问题,一般很难全面有效地控制中药质量。本文简述了细胞膜色谱法的特点与应用,并结合本实验室的研究基础,就细胞膜色谱法应用于中药质量控制的问题,谈一点体会。

细胞膜色谱法在防治心脑血管疾病研究中的应用

随着社会压力和老龄化的发展,心脑血管疾病成为严重影响人们健康的重要疾病,高通量筛选和开发防治心脑血管疾病的药物成为中药研究的热点。生物色谱膜因其具有高稳定性、高重复性、灵敏快捷等特点逐渐在防治心脑血管疾病药物开发中受到重视。细胞膜色谱法的运用加快了中药有效成分分离纯化的进展,有望实现其高通量的筛选,对心脑血管疾病的防治具有深远的影响。

用细胞膜色谱法筛选当归中的有效成分

目的 :筛选当归中对主动脉血管有舒张作用的有效成分。方法 :采用细胞膜色谱法 (CMC)筛选 ,薄层层析法分离 ,并结合离体药理实验确定当归中的有效成分。结果与结论 :血管CMC模型基本可以反映化合物与细胞膜及膜蛋白 (包括受体 )的相互作用 ;化合物在CMC体系中的保留特性和其药理作用有显著的相关性 ;DG 2是当归中对血管有舒张作用的有效部位 ,而DG 2 1则是其有效成分。

细胞膜色谱法在中药活性成分筛选中的应用

细胞膜色谱法是近年来应用于中药研究的生物色谱技术。现对细胞膜色谱法的原理、特性及已用于中药研究的不同细胞膜类型进行简要概括,并对中药单体及中药复方活性成分筛选中的典型应用进行了综述。同时就细胞膜色谱法在中药活性成分筛选中存在的问题和其应用中存在的局限性提出了建议和设想,为今后更好的将细胞膜色谱法应用于中药研究提供参考。

细胞膜色谱法筛选红花中的有效成分

目的 :筛选红花中对主动脉血管有舒张作用的有效成分。方法 :采用细胞膜色谱法 ( cell membrane chromatography)筛选 ,薄层层析法分离 ,并结合离体药理实验确定红花中的有效成分。结论 :血管 CMC模型基本可以反映化合物与细胞膜及膜蛋白 (包括受体 )的相互作用 ;化合物在 CMC体系中的保留特性和其药理作用有显著的相关性 ;HH- S是红花中对紧张血管有舒张作用的有效部位 ,而 HH-

用细胞膜色谱法筛选菟丝子的有效成分

目的 :筛选菟丝子中对主动脉血管有作用的有效成分。方法 :采用细胞膜色谱法筛选 ,薄层层析法分离 ,并结合离体药理实验确定菟丝子中的有效成分。结论 :T2 是菟丝子中对血管有收缩作用的有效部位 ,T2

细胞膜色谱法在中药应用中的研究进展

细胞膜色谱法(CMC)是将细胞膜结合到活化硅胶表面,制成细胞膜固定相,并利用药物与细胞膜受体之间具有特异性亲和力的特性和色谱学理论来研究流动相中药物与受体相互作用的规律。CMC集合了高效液相色谱技术、细胞分子生物学及受体药理学的优点,并实现了在细胞膜色谱柱内近似动态地模拟药物活性成分在体内的作用过程。这是一种全新的亲和生物色谱技术,其自提出以来迅速在中药研究中成为热点。近年来,随着CMC方法学原理的不断发展和完善,其已大量应用于药物活性成分筛选、药物与受体的亲和作用及中药质量控制等方面,下一步将朝毛细管细胞膜色谱法和微型细胞膜色谱法等更加微型、高效的色谱技术发展。

细胞膜色谱法在中药研究中的应用进展

细胞膜色谱法(cell membrane chromatography,CMC)是由贺浪冲教授在1996年创建的一种新型的具有生物活性的亲和色谱技术。该技术将高效液相色谱、细胞生物学与受体药理学结合起来,通过将活性细胞膜固定在特定载体表面,制备成细胞膜固定相,用液相色谱的方法研究药物与固定相上细胞膜及膜受体的相互作用,利用药物与膜受体间存在的特异亲和力,将药物在体内的作用过程在色谱柱内进行动态模拟。该文重点针对CMC的原理、特性及在中药等方面的典型应用研究进行概述,为进一步深入研究和开发利用CMC提供理论依据和实践指导。

高表达β_1肾上腺素受体细胞膜色谱法靶向筛选夏天无中活性成分

目的:从夏天无中筛选与高表达β1肾上腺素受体(β1-AR)作用的活性成分,并考察其对β1-AR的抑制作用。方法:建立β1-AR细胞膜色谱与UPLC/MS联用分析方法筛选鉴别夏天无中的活性成分;用美托洛尔(10μmol·L-1),药根碱(1,5μmol·L-1)处理β1-AR/CHO-S 24 h,换异丙肾上腺素(50μmol·L-1)损伤细胞10 h后,ELISA法测定活性成分对β1-AR下游因子c AMP,PKA水平的影响,评价其对β1-AR的抑制作用。结果:药根碱是夏天无中作用于β1-AR的活性化合物;细胞实验结果表明,与ISO组相比,药根碱和美托洛尔对c AMP,PKA水平均有下调作用(P<0.01)。结论:药根碱是夏天无中具有β1-AR抑制作用的活性化合物;建立的β1-AR/CMC-offline-HPLC/MS分析方法可快速有效筛选出作用靶点明确的活性成分,且筛选结果与生物效应相一致。

细胞膜色谱法及其在药物研究中的应用进展

目的综述细胞膜色谱法(cell mumbrane chromatography,CMC)近几年的研究现状及发展。方法查阅国内外有关文献,从CMC的基本原理、特点及其在药物研究中的应用等最新研究进展进行较为详细的介绍和总结,并探讨其在发展中所面临的问题及对策。结果CMC已成功应用于中药药效物质基础研究、中药质量控制、单体化合物活性筛选、药物与受体及受体亚型亲和作用研究等方面,并且CMC在不断的发展和完善。结论随着CMC研究的不断深入,其在药物研究、分析领域等方面具有广阔的发展前景。

细胞膜色谱法及其在中药活性成分研究中的应用

细胞膜色谱法作为一种新兴的色谱技术,将药物效应成分的分离和活性筛选结合在一起,因此特别适用于中药及天然药物的物质基础研究。对细胞膜色谱技术在中药活性成分研究方面的应用做一简要综述,为该技术的进一步研究和应用提供参考。

细胞膜色谱法用于药物与受体相互作用研究进展

药物与受体相互作用研究在药物研发过程中发挥着非常重要的作用,其研究方法的便捷程度以及准确度直接影响药物研发的效率。细胞膜色谱法是贺浪冲教授于1996年提出的一种基于生物色谱的方法,用于复杂体系活性成分筛选以及药物与受体相互作用研究近20年。对细胞膜色谱法用于药物受体相互作用的研究进展进行综述。

用细胞膜色谱模型筛选长春七抑制HeLa细胞增殖的活性成分

目的筛选药用植物长春七中具有细胞毒性作用的活性成分。方法用细胞膜色谱模型,筛选条件:红细胞膜色谱柱(50 mm×2 mm),流动相为三蒸水,柱温37℃,检测波长244 nm,流速0.2 mL·min-1,以阿霉素为对照进行筛选;对筛选得到的活性成分用紫外、红外和质谱方法测定结构,并与文献数据比较确定为蛇床子素;并用MTT法测定了其对HeLa细胞增殖的抑制作用。结果长春七所含蛇床子素在红细胞膜色谱模型系统中,具有类似于阿霉素的保留特性;蛇床子素可抑制HeLa细胞增殖,且随着浓度增加而抑制作用增强,最大抑制率达76.6%,半数抑制浓度为10.0-11.0μg·mL-1。结论红细胞膜色谱模型可用于筛选药用植物中的细胞毒性成分,长春七所含蛇床子素能够作用于红细胞膜及膜蛋白表面,并对HeLa细胞增殖有较强的抑制作用。

一种提高细胞膜色谱精确性和灵敏性的方法

目的改进细胞膜色谱模型,提高细胞膜色谱法的精确性和灵敏性,评价此法用于亚型受体研究的科学性和可行性。方法质粒转染得稳定高表达HEK293α1B细胞株,构建HEK293α1B细胞膜色谱系统,测定9种α-肾上腺素受体配体在系统中的容量因子(k'HEK293α1B),对其亲和力排序,并分别与大鼠肝脏组织匀浆和原代培养的肝细胞制备的细胞膜色谱系统测得的容量因子进行相关性研究。结果细胞膜色谱法测定9种配体的亲和力顺序与文献报道完全一致,配体在HEK293α1B细胞膜色谱柱的保留时间最长,在大鼠肝脏组织匀浆细胞膜色谱柱的保留时间最短。结论细胞膜色谱法用于亚型受体的研究准确、可行;与大鼠肝脏组织匀浆和原代培养的肝细胞制备的细胞膜色谱系统比较,应用HEK293α1B细胞株制备的细胞膜色谱系统具有更高的精确性和灵敏性。

细胞膜色谱技术应用于中药活性成分筛选的研究进展

目的了解细胞膜色谱技术在中药活性成分筛选应用中的研究进展,为该技术的进一步开发和应用提供参考。方法通过查阅国内外相关文献,进行总结、分析,对细胞膜色谱技术在中药活性成分筛选中的应用进行综述。结果细胞膜色谱技术已成功应用于中药药效物质基础研究,对于中药活性成分的筛选涉及到多个方面,包括抗炎镇痛、抗心血管疾病、抗糖尿病和抗肿瘤等活性成分,并在不断发展和完善。结论细胞膜色谱技术还存在一些问题,随着对该技术研究的不断深入,其在中药药效物质基础研究等方面具有广阔的前景。