人类白细胞抗原-DQA1、细胞色素P4503A5*3基因多态性与特发性膜性肾病遗传易感性关联性研究

目的:探讨分析人类白细胞抗原(HLA)-DQA1、细胞色素P450(CYP)3A5*3基因多态性与特发性膜性肾病(IMN)遗传易感性的关联性。方法:将IMN患者62例作为研究组,另将健康者62例作为对照组。采用聚合酶链反应(PCR)技术和基因测序技术检测入组患者的HLA-DQA1(rs2187668)、CYP3A5*3(rs776746)基因型,判断各基因型与IMN患者的关系。结果:研究组中HLA-DQA1 rs2187668基因型AA占比高于对照组(P<0.05),基因型GG、AG占比低于对照组(均P<0.05);研究组等位基因A占比高于对照组(P<0.05)。研究组与对照组CYP3A5*3 rs776746不同基因型占比及等位基因占比比较无统计学差异(均P>0.05)。HLA-DQA1 rs2187668AA基因型IMN患者24 h尿蛋白量和血肌酐水平显著高于AG和GG型,肾小球滤过率显著低于AG和GG型(均P<0.05)。结论:HLA-DQA1 rs2187668位点的基因多态性与IMN的发生有关,AA基因型和等位基因A可增加IMN易感性。

4种中药调节细胞色素P4503A4转录表达的研究

目的:从中药中筛选通过激活人孕烷X受体(PXR)诱导细胞色素P450 3A4(CYP3A4)转录表达的中药;研究其诱导能力与药物浓度和作用时间之间的关系。方法:在HepG2细胞中,采用瞬时共转染报告基因试验筛选对CYP3A4转录表达有诱导作用的中药,研究其在不同浓度和不同作用时间下对PXR介导的CYP3A4的转录调节作用。结果:中药莪术、苍术、白术和茯苓均能通过激活PXR诱导CYP3A4的转录表达,且具有浓度-效应关系和时间-效应关系。在浓度-效应关系中,500 mg.L-1的莪术、苍术、白术和茯苓,在作用时间24 h时,其诱导倍数分别为0.1%DMSO处理细胞的(6.82±0.09),(6.76±0.20),(5.49±0.13),(4.97±0.07)倍。在时间-效应关系研究中,500 mg.L-1的莪术、苍术、白术和茯苓,在作用时间为48 h时,其诱导倍数分别为0.1%DMSO作用细胞的(7.74±0.54),(7.34±0.10),(5.54±0.11),(5.32±0.18)倍。结论:中药莪术、苍术、白术和茯苓均能够通过激活PXR诱导CYP3A4的转录表达。

回顾性研究细胞色素P4503A5基因多态性对肾移植病人环孢素浓度的影响

目的回顾性研究稳定期肾移植的病人在合用地尔硫卓后,CYP3A5基因多态性对环孢素(免疫抑制剂)浓度的影响。方法用RFLP-PCR检测CYP3A5基因型;采用回顾性研究方法,分析肾移植病人CYP3A5基因型与环孢素血药浓度的关系。结果合用地尔硫卓的病人,按CYP3A5不同基因型分组,3组病人之间的环孢素剂量和剂量调整浓度有明显差异;而不用地尔硫卓的病人进行分组后,环孢素剂量调整浓度也存在显著差异;环孢素剂量调整浓度,CYP3A5表达者显著低于不表达者组。结论 CYP3A5基因型对稳定期肾移植病人环孢素药代动力学有显著影响,且此相关性不受合用地尔硫卓影响。

枸杞多糖对酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P4503A的影响

目的:通过观察枸杞多糖(LBP)对酒精性脂肪肝(AFL)大鼠肝细胞色素P4503A基因和活性的影响,揭示其部分治疗机制。方法:用乙醇灌胃10周造成大鼠慢性AFL模型,再用5%和10%的LBP治疗10周,10%阿托莫兰(GSH)治疗组和戒酒组作为阳性对照,作治疗前后比较:肝脏病理形态,肝匀浆还原型谷光甘肽GSH、丙二醛MDA含量,肝细胞色素P4503A(CYP3A)活性及基因表达水平。结果:LBP能明显改善酒精所致大鼠肝脏脂肪性病理变化,增加GSH含量,减少MDA产生,抑制CYP3A活性和基因表达,其改善脂肪病变与阿托莫兰组无显著差异,优于单纯戒酒组。结论:LBP抑制CYP3A活性及基因表达,减轻脂质过氧化,有效治疗AFL。

细胞色素P4503A选择性探针药物的评价

理想的细胞色素P4 5 0 3A(CYP3A)探针药物有助于检测CYP3A活性 ,辅助临床合理用药。本文对CYP3A选择性探针药物进行比较和综合分析 ,评价各种CYP3A选择性探针药物的特点 ,阐明对临床合理用药的指导意义。在已筛选的CYP3A选择性探针药物中 ,咪哒唑仑是一较理想的探药。

橙皮苷对辛伐他汀调脂作用及细胞色素P4503A mRNA表达的影响

目的 研究橙皮苷对辛伐他汀 (simvastatingroup ,SV)调脂作用及CYP450 3AmRNA表达的影响。方法 将Wistar大鼠随机分为 :对照组 (controlgroup)、高脂血症模型组 (modelgroup)、辛伐他汀组 (simvastatingroup ,SVgroup)、低剂量橙皮苷 +辛伐他汀组 (lowdosehesperidin +SV group ,LDHS)、高剂量橙皮苷 +辛伐他汀组 (highdosehesperidin +SV group ,HDHS)。除对照组外 ,余组均饲喂高脂饮食 ,各实验组按 5mg·kg- 1SV灌胃 ,并分别加用不同剂量的橙皮苷。实验 8wk后 ,检测各组大鼠血脂水平 ,肝脏及小肠CYP450 3A基因表达水平。结果 高脂饲养 8wk后 ,模型组TC、TG和LDL C均升高 (P <0 0 1) ;SV组TC、TG和LDL C较模型组降低 (P <0 0 1或P <0 0 5) ;加用橙皮苷后 ,TC和TG均较SV组呈剂量依赖性降低。模型组肝脏CYP450 3AmRNA表达量与对照组比较无统计学意义 (P >0 0 5) ,小肠CYP450 3AmRNA表达量较对照组升高 (P <0 0 5)。使用SV后 ,肝脏CYP450 3AmRNA表达量较模型组有增加趋势 ,小肠表达量增加 (P <0 0 5)。SV与橙皮苷合用后 ,随橙皮苷剂量的加大 ,肝脏及小肠CYP450 3AmR NA的表达呈下降趋势 ,以HDHS组明显 (P <0 0 5)。结论 橙皮苷能增加SV的调脂作用 ,其机制可能与橙皮苷抑制了CYP450 3A基因表达?

细胞色素P4503A研究进展

P45 0 3A是细胞色素P45 0中含量最多的同工酶 ,临床中有 60 %以上的药物由其代谢。总结了CYP3A的分布、含量、亚型、表达与调控、与疾病的关系以及活性研究方法等研究进展。

兔激素性股骨头坏死与肝细胞色素P4503A酶活性的相关性研究

目的:探讨兔激素性股骨头坏死与肝细胞色素P4503A酶活性的相关性。方法:将18只SPF级健康新西兰家兔随机分成3组,即空白对照组、诱导剂组、抑制剂组,每组6只。空白对照组以生理盐水灌胃,诱导剂组肌肉注射苯巴比妥注射液,抑制剂组以伊曲康唑混悬液灌胃。连续用药3周后,测定血清肝细胞色素P4503A酶活性,并采用肌注甲泼尼龙琥珀酸钠方法造模。继续用药3周后处死动物,制作并观察病理组织标本,计算股骨头坏死面积和坏死率。结果:①肝细胞色素P4503A酶活性。空白对照组用药前后肝细胞色素P4503A酶活性比较,差异无统计学意义(t=1.859,P=0.122);诱导剂组用药后肝细胞色素P4503A酶活性升高(t=7.482,P=0.002);抑制剂组用药后肝细胞色素P4503A酶活性降低(t=5.060,P=0.004)。用药前3组肝细胞色素P4503A酶活性比较,差异无统计学意义(F=1.428,P=0.259);用药后3组肝细胞色素P4503A酶活性比较,差异有统计学意义(F=8.577,P=0.001);两两比较,诱导剂组高于空白对照组和抑制剂组(P=0.018,P=0.003),抑制剂组低于空白对照组(P=0.045)。②股骨头坏死面积。3组家兔股骨头坏死面积比较,差异有统计学意义(F=5.289,P=0.005)。组间两两比较,诱导剂组坏死面积小于空白对照组和抑制剂组(P=0.024,P=0.008),抑制剂组大于空白对照组(P=0.039)。③股骨头坏死率。3组家兔股骨头坏死率比较,差异有统计学意义(F=4.831,P=0.007)。组间两两比较,诱导剂组坏死率小于空白对照组和抑制剂组(P=0.045,P=0.015),抑制剂组大于空白对照组(P=0.031)。④肝细胞色素P4503A酶活性与股骨头坏死面积及坏死率的相关性。肝细胞色素P4503A酶活性与股骨头坏死面积和坏死率均呈负相关(r=-0.740,P=0.001;r=-0.753,P=0.001)。结论:肝细胞色素P4503A酶在兔激素性股骨头坏死中起重要作用,其活性与兔激素性股骨头坏死的发生呈显著负相关。

液-质联用法测定中年妇科病人咪达唑仑及其代谢物的血药浓度并研究其细胞色素P4503A4酶活性分布特征

目的研究中年妇科手术病人应用咪哒唑仑(抗焦虑药)及其CYP3A4酶活性分布特征。方法以咪哒唑仑作为探针药物,用液-质联用法测定血桨中咪达唑仑、1′-羟基咪达唑仑的单点药物浓度,以1′-羟基咪达唑仑/咪达唑仑的比值评估CYP3A4酶活性。结果 260例妇科手术病人CYP3A4酶的活性为0.46±0.14,推测中年妇科手术病人CYP3A4酶活性的正常值范围为0.18～0.73。结论 CYP3A4酶活性在中年妇科手术病人中呈正态分布,酶活性的个体差异较小,对术后的个体化药物治疗影响不大。

体外灌流慢性重型肝炎患者血浆对C3A细胞的细胞色素P4503A活性和表达的影响

目的:通过比较未经灌流处理的重肝血浆及处理过的重肝血浆对CYP3A的影响,阐明C3A细胞安定代谢变化的原因,为未来C3A细胞的改造与功能优化奠定基础。方法:制备血浆和培养C3A细胞;实验分为4组:正常胎牛血浆(NFBP)组,正常人血浆(NHP)组,体外灌流慢性重型肝炎患者血浆(HPP)组,体外未灌流慢性重型肝炎患者血浆(CSHP)组。用分光光度法测定红霉素N-脱甲基酶(ERD)活性即CYP4503A的活性,Western blot法测定CYP4503A4的表达。结果:CSHP组ERD活性低于NFBP组(P<0.05)及NHP组(P<0.05),HPP组ERD活性也低于NFBP组(P<0.05)及NHP组(P<0.05),HPP组ERD活性高于CSHP组(P<0.05);CSHP组CYP4503A4的表达低于NFBP组(P<0.05)及NHP组(P<0.05),HPP组CYP4503A4的表达也低于NFBP组(P<0.05)及NHP组(P<0.05),HPP组CYP4503A4的表达高于CSHP组(P<0.05)。结论:经慢性重型肝炎患者血浆培养的C3A细胞,CYP4503A活性及蛋白表达降低。与之相比,经过体外灌流的慢性重型肝炎患者血浆其C3A细胞CYP4503A活性及蛋白表达有所增加,CYP4503A活性增加可能是导致安定代谢变化的原因。

人细胞色素P4503A活性测定

目的:建立测定人细胞色素P4503A酶活性的方法。方法:收集24h尿液,以HPLC法测定尿液中氢化可的松(HC)与6β-羟基氢化可的松(6β-OHC)的含量,以6β-OHC/HC来评估细胞色素P4503A酶的活性。结果:健康志愿者尿中6β-羟基氢化可的松和氢化可的松的比值为(8.5±3.0),肿瘤患者为(6.2±4.5)。结论:细胞色素P4503A酶的活性可以通过测定6β-OHC与HC的比值进行预测。

葡萄柚汁对小白鼠肝和小肠细胞色素P4503A活性的影响

目的:了解细胞色素P4503A在正常普通小白鼠肝和小肠的含量,探讨葡萄柚汁对小白鼠肝和小肠细胞色素P4503A活性的影响。方法:选取普通雌性小白鼠50只,随机分为5组,分别给予生理盐水,50%,100%纯度的葡萄柚汁,按55ml/kg.d分两次给小白鼠灌胃,连续1或2周后,用颈椎脱臼法处死,取肝脏及小肠制备微粒体匀浆,用红霉素脱甲基酶活性测定法测定各组小白鼠肝和小肠细胞色素P4503A的活性。结果:正常组小肠细胞色素P4503A活性为27.3648±9.5750pmolHCHO.min-1.mg-1Pro,较肝细胞色素P4503A活性23.4962±7.6137pmolHCHO.min-1.mg-1Pro稍高,但无统计学意义。实验各组肝脏和小肠细胞色素P4503A活性均下降,随着葡萄柚汁摄入时间的延长、浓度的提高,小肠和肝脏细胞色素P4503A活性总体呈下降趋势,且以小肠下降为显著。结论:正常普通小白鼠小肠细胞色素P4503A的活性稍高于或相当于肝脏,葡萄柚汁灌胃连续1或2周后可抑制小白鼠肝脏和小肠的细胞色素P4503A活性。

细胞色素P4503A46基因的异源表达及药物代谢活性分析

为了克隆巴马小型猪细胞色素P4503A46基因,建立P4503A46稳定表达肝癌细胞株(Hep G2-P4503A46),并探究其药物代谢活性,通过RT-PCR从肝组织中钓取基因P4503A46,将基因与真核表达载体pc DNA3.1连接并转染Hep G2细胞,经G418筛选10代,获得稳定表达重组细胞株Hep G2-P4503A46,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)探针药物,将探针药物与重组细胞在优化的细胞浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,通过高效液相色谱仪检测其药物代谢(抑制)动力学参数,并将对照组进行比较分析。结果表明,本研究成功从人Bama小型猪肝组织克隆了P4503A46基因,并通过G418筛选,成功建立了细胞稳定表达株,其硝苯地平代谢活性显著高于阴性对照组(P<0.01);因此,成功克隆、并建立了小型猪P4503A46的稳定表达细胞株(Hep G2-P4503A46),该细胞株具有显著的硝苯地平代谢活性。

罗格列酮对大鼠肝细胞色素P4503A活性的影响

[目的 ]探讨罗格列酮对细胞色素 P45 0 3A活性的影响。 [方法 ]在正常大鼠肝细胞微粒体中加入浓度为0 ,0 .1,0 .2 5 ,0 .5 ,1.0 mm ol/ L罗格列酮 ,以红霉素为底物 ,测定细胞色素 P45 0 3A活性。[结果 ]加入不同浓度罗格列酮的大鼠肝微粒体中细胞色素 P45 0 3A活性无显著性差异。[结论 ]罗格列酮对大鼠的肝细胞色素 P45 0

细胞色素P4503A基因表达调控及与抗癫痫药物的关系

细胞色素P4503A酶(Cytochrome P450 3A enzymes)在外源性化合物尤其是药物代谢中起重要作用,临床中约有50%的药物经由CYP3A代谢,其中包括多种抗癫痫药物.本文概述了CYP3A的基因家系的结构、分布和调控表达的异同,CYP3A与难治性癫痫患者药物难治性的可能机制———多药耐药基因和P-糖蛋白的关系,CYP3A4基因表达上的差别与药物作用强度和持续时间、急性毒性的相关性.

重组细胞色素P4503A4和P4503A22细胞微粒体药物代谢动力学比较研究

目的:利用已建立的巴马小型猪细胞色素P4503A22和P4503A4稳定表达重组肝癌细胞株微粒体,分析比较二者的药物代谢动力学特征.方法:以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制剂酮康唑(KCZ)为探针药物,将探针药物与重组P4503A4,P4503A22细胞微粒体在优化的微粒体浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,通过高效液相色谱仪检测其药物代谢(抑制)动力学参数,并将二者进行比较分析.结果:P4503A22的硝苯地平、睾酮的代谢活性均低于P4503A4(p<0.05);酮康唑对P4503A4和P4503A22的硝苯地平代谢具有较强的抑制活性,但酮康唑对P4503A4的抑制活性强于P4503A22(p<0.05).结论:无论是代谢底物或抑制底物活性,重组P4503A22细胞微粒体活性均低于重组P4503A4细胞微粒体活性.

细胞色素P4503A5基因多态性对二氢吡啶类钙拮抗剂药代动力学影响的Meta分析

目的系统评价细胞色素P4503A5(CYP3A5)基因多态性对二氢吡啶类钙拮抗剂药代动力学的影响。方法检索PubMed、Wiley Online Library、Cochrane Library、EMbase、万方数据库、中文科技期刊全文数据库(VIP)、中国学术期刊全文数据库(CNKI),收集各数据库建库至2020年4月5日发表的有关CYP3A5基因多态性对二氢吡啶类钙拮抗剂药代动力学影响的文献,提取血药浓度-时间曲线下面积(AUC0-t)、峰浓度(Cmax)、表观清除率(CL/F)和半衰期(t1/2)等药代动力学参数,应用RevMan 5.3软件对纳入研究文献进行Meta分析,比较野生杂合子基因型(AA,*1/*1)、突变杂合子基因型(AG,*1/*3)和突变纯合子基因型(GG,*3/*3)的差异。结果最终共纳入6篇文献进行Meta分析,涉及252例病人。Meta分析结果显示,CYP3A5*1/*3突变杂合子型与CYP3A5*3/*3突变纯合子型相比,Cmax差异有统计学意义[SMD=-0.41,95%CI(-0.81,-0.00),P=0.05],基因型CYP3A5*1携带者与基因型CYP3A5*3携带者相比,CL/F[SMD=-0.41,95%CI(-0.71,-0.11),P=0.007]和t1/2[SMD=0.49,95%CI(0.21,0.77),P=0.0006]差异均有统计学意义,其余基因型对二氢吡啶类钙拮抗剂的药代动力学影响比较差异无统计学意义。结论现有证据表明,CYP3A5基因多态性对二氢吡啶类钙拮抗剂的药代动力学存在影响,CYP3A5*3/*3突变型人群的二氢吡啶类钙拮抗剂CL/F、Cmax减小、t1/2延长,代谢减慢。本Meta分析结果对临床用药安全性和有效性有一定借鉴意义。

重组细胞色素P4503A4与P4503A39微粒体药物代谢活性比较研究

目的:通过考察已建立的P4503A39和P4503A4稳定表达重组细胞株微粒体药物代谢动力学特征,旨在分子水平为巴马小型猪作为临床药物代谢试验动物提供科学依据。方法:制备重组细胞微粒体,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制剂酮康唑(KCZ)为探针药物,将其与重组P4503A4、P4503A39细胞微粒体在优化的微粒体浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,获得药物代谢(抑制)动力学参数,并将二者进行比较分析。结果:P4503A39和P4503A4体外微粒体药物代谢动力学参数Vmax、Km(S50)、Clint及IC50均表明:P4503A39的硝苯地平、睾酮的代谢活性及酮康唑的抑制活性均显著低于P4503A4(P<0.05)。结论:重组P4503A39细胞微粒体活性显著低于重组P4503A4细胞微粒体活性。