细胞间隙连接通讯与肿瘤

由连接蛋白构成的细胞间隙连接通讯(GJIC)广泛存在于脊椎动物中,可以直接介导细胞间小分子物质的传递,而不需要通过细胞间质。GJIC与肿瘤密切相关,多数肿瘤GJIC能力降低或丧失,连接蛋白不表达或胞内定位,而恢复GJIC可以抑制肿瘤, GJIC已成为肿瘤预防与治疗研究的潜在靶点之一。

Cx43对乳腺癌细胞侵袭和迁移及细胞间隙通讯的影响

目的:探讨Cx43对乳腺癌侵袭、迁移以及细胞间隙通讯功能的影响。方法:用脂质体转染法将Cx43质粒、Cx43 siRNA及阴性对照转染入人乳腺癌细胞株MDA-MB-231。细胞黏附实验、Transwell试验检测细胞黏附、侵袭和迁移能力。分子生物学方法检测MMP-2、MMP-9、BRMS-1的表达。荧光染料传输实验检测不同Cx43表达的细胞间隙通讯的功能。结果:细胞黏附实验结果表明相较于野生型细胞,Cx43 siRNA组黏附能力(0.43±0.07)降低(t=20.801,P=0.002),Cx43质粒组黏附能力(1.63±0.26)增高(t=5.917,P=0.027)。Transwell实验表明相较野生组,Cx43质粒组侵出小室的细胞数增加(侵袭:1.25±0.04,t=16.339,P=0.004;迁移:1.33±0.02,t=22.770,P=0.002),而Cx43 siRNA组侵出小室的细胞数减少(迁移:0.84±0.04,t=11.139,P=0.008;侵袭:0.79±0.04,t=5.743,P=0.029)。分子生物学检测发现Cx43质粒组MMP-2、MMP-9表达增高,BRMS-1表达降低,而Cx43 siRNA组MMP-2、MMP-9表达降低,BRMS-1表达增高。染料传输实验证实相较野生组传输能力,Cx43质粒组传输作用增强;Cx43 siRNA组细胞间的传输作用减弱。结论:Cx43对乳腺癌细胞侵袭及迁移能力存在正调控。这一调控能力可能通过GJIC实现。

细胞间隙蛋白在乳腺癌中的研究进展

乳腺癌在女性恶性肿瘤发生中占据第一,细胞间隙蛋白家族被视为抑癌基因,在乳腺癌的增殖、侵袭和转移及化疗耐药中起重要的作用。本文主要讨论细胞间隙蛋白在乳腺癌中的研究进展,进而寻找细胞间隙蛋白与信号通路间的共通点,为乳腺癌的治疗打开新的研究方向。

细胞间隙连接通讯与口腔黏膜癌变的关系

细胞间隙连接通讯是相邻细胞间直接交换信息、物质和能量的唯一通道,是维持多细胞组织稳定必不可少的调节机制。细胞间隙连接通讯缺陷与肿瘤的发生发展密切相关,但与口腔黏膜癌变相关性的研究较少。笔者就近年相关方面的研究进展进行综述。

d-宁烯、丹参及姜黄素衍生物对ras基因产物膜结合和细胞间隙信息传导的影响

目的旨在寻找新型抗肿瘤药物，进一步研究ｄ宁烯、丹参及姜黄素衍生物的抗肿瘤机理。采用分子生物学方法及划痕标记染料示踪技术，研究了４种人实体瘤起源的细胞系的细胞间隙信息传导（ＧＪＩＣ）、Ｈｒａｓ癌基因表达以及ｒａｓ癌基因产物（Ｐ２１ｒａｓ蛋白）表达状态，并观察了４种天然产物对它们的影响。结果表明，细胞内染料传输功能的丧失与ｒａｓ基因突变率呈正相关；单萜化合物ｄ宁烯和酚类化合物丹参衍生物的抗肿瘤作用可能与抑制Ｐ２１ｒａｓ蛋白膜结合和增强细胞间隙信息传导功能有关。

玄府与细胞间隙的比较

提出玄府 细胞间隙假说。认为玄府从结构的微细性、结构特点的腔隙性以及功能特点等多方面,与现代医学的细胞间隙十分相似,将二者联系起来,有助于加深对玄府的认识。相似并非相等,玄府毕竟是在特定的历史条件下的产物,不可避免地带有主观臆测成分。赋予众多功能于一体的玄府,其功能的全部内涵,远非细胞间隙所能概括。不同医学理论体系下的概念,其内涵是不同的。

小麦-叶锈菌互作的细胞间隙液对细胞过敏性坏死的诱导效应

小麦－叶锈菌互作的细胞间隙液对细胞过敏性坏死的诱导效应王冬梅，王智忻，刘娟（河北农业大学农学系，保定０７１００１）ＴＨＥＥＦＦＥＣＴＯＦＨＹＰＥＲＳＥＮＳＩＴＩＶＥＲＥＡＣＴＩＯＮＯＦＣＥＬＬＩＮＤＵＣＥＤＢＹＩＮＴＥＲＣＥＬＬＵＬＡＲＷＡＳＨＩＮＧ...

细胞间隙连接蛋白在多种类型癌组织中的原位表达研究

背景与目的:恶性肿瘤细胞常有间隙连接蛋白(Connexin,Cx)的异常定位和表达,本研究目的是检测Cx基因家族中的Cx26、Cx32、Cx43和Cx45基因在多种类型癌组织微阵列中的原位表达,期望建立Cx26、Cx32、Cx43和Cx45基因在多种类型癌组织中的蛋白表达谱,探讨其在肿瘤发生、发展中的作用。方法:利用自制的组织微阵列制作仪制作含多种类型癌标本的组织微阵列,免疫组化法检测Cx26、Cx32、Cx43和Cx45基因在292例癌组织及89例癌旁组织中的表达。结果:(1)成功地制作出100点、200点和360点3种不同规格的组织微阵列蜡块和切片;(2)获得Cx26、Cx32、Cx43和Cx45基因在20种癌组织中的原位表达谱,Cx26、Cx32、Cx43和Cx45基因在肠癌、肝癌、胃癌、肺癌及甲状腺癌组织中的表达明显低于其相应的癌旁组织。结论:Cx26、Cx32、Cx43和Cx45基因的失表达对多种癌的发生有重要作用。多肿瘤的组织微阵列为肿瘤基因表达谱如Cx基因的研究提供一种高通量工具。

感染叶锈菌的小麦细胞间隙液对小麦悬浮细胞程序性死亡的诱导

以小麦悬浮细胞为材料,分别用感染叶锈菌小种165的小麦细胞间隙液(IWF165)和未接菌的小麦细胞间隙液(IWFck)对其进行处理,处理后不同时间点取样进行形态学观察和DNA电泳。结果表明,用IWF165处理后的悬浮细胞可观察到明显的染色质凝聚化、边缘化和细胞核解体等现象;同时DNA电泳结果显示IWF165处理后的细胞基因组DNA发生降解并形成明显的DNA梯状条带。而用IWFck处理的悬浮细胞,其细胞核结构完整,染色质分布均匀;DNA电泳没有出现DNA梯状条带。在感染叶锈菌的小麦细胞间隙液中存在着激发子,它能够诱导小麦悬浮细胞发生程序性死亡。

感染叶锈菌的小麦细胞间隙液中激发子的定性及初步分离

感染叶锈菌后小麦叶片细胞间隙液 (IWF)中有激发子存在 ,它 (们 )能诱导寄主PAL、PO活性的增强及细胞过敏性坏死的产生。这种有诱导活性的物质分别用NaIO4 和蛋白酶处理证明含有糖基和蛋白质成分 ,可能是糖蛋白。IWF经凝胶过滤分离后 ,各部分诱导不同的防卫反应的活性强度不等。因此IWF中可能含有几种不同成分的激发子 。

胃食管反流病患者食管上皮Occludin的表达及细胞间隙的改变

目的:研究胃食管反流病(GERD)患者食管上皮细胞紧密连接蛋白Occludin表达的变化及食管上皮细胞间隙的改变.方法:采用免疫组织化学法检测62例GERD患者[其中反流性食管炎(RE组)患者30例,非糜烂性反流病(NERD组)患者32例]及10例正常对照食管下段上皮的紧密连接蛋白Occludin表达,并在光镜下观察切片并采集图像,采用图像分析系统对每例切片测量100个细胞间隙,进行统计学分析.结果:10例正常对照组Occludin呈正常连续的细胞膜表达,NERD组4例正常表达,28例不同程度异常表达,为细胞膜不完整表达、细胞质表达及表达缺失,30例RE均表达异常;RE组和NERD组Occludin阳性率与正常对照组比较,差异均有显著性(P<0.01),而RE组与NERD组间比较,无显著差异.RE组和NERD组平均细胞间隙与正常对照组比较,均有显著性差异(1.51±0.31μm,1.38±0.26μm vs0.77±0.12μm,均P<0.01),而RE组和NERD组间无显著差异.结论:胃食管反流病患者食管上皮Occludin数量减少、分布异常,导致细胞间隙增宽,影响黏膜上皮屏障的完整性,可能是胃食管反流病的发病机制之一.

叶锈菌侵染的小麦细胞间隙液中激发子的分离纯化

【目的】在已经证明小麦与叶锈菌互作的小麦细胞间隙液(IWF)中存在具有蛋白质性质的激发子活性物质的基础上,以期通过试验得到激发子的纯品制剂,为进一步研究激发子的组成和结构、激发子受体以及寄主产生过敏性反应的信号转导机制提供基础条件。【方法】提取叶锈菌小种165侵染的小麦品种洛夫林10细胞间隙液,通过盐析、凝胶过滤柱层析和离子交换柱层析等分离纯化技术,对IWF中具有激发子活性的蛋白质组分进行分离纯化。【结果】分离出能诱导洛夫林10健康叶片PAL、PO活性增高并诱发洛夫林10悬浮细胞程序性死亡的激发子活性组分。该组分经SDS-PAGE电泳呈现单一条带,分子量约为32kD。【结论】经硫酸铵分段盐析、凝胶过滤柱层析和离子交换柱层析等方法,从感染叶锈菌小种165的洛夫林小麦叶片细胞间隙液中分离出具有激发子活性的蛋白质组分。

胃癌和癌前病变患者细胞间隙连接改变与幽门螺杆菌感染的关系

目的:观察胃癌(gastric cancer,GC)和癌前病变(precancerous lesion,PL)患者胃上皮细胞间隙连接超微结构改变,探讨其与幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染的关系。方法:对70例GC,88例PL,33例慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG)患者,进行快速尿素酶试验、碱性品红染色和14C尿素呼气实验以检测H.pylori,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测H.py-lorii CagA基因,并以透射电镜观察胃上皮细胞间隙连接超微结构改变。结果:PL患者胃上皮细胞单位周长连接长度小于CSG患者,细胞间隙最小宽度大于CSG患者。GC患者细胞连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度小于CSG与PL患者,细胞间隙最小宽度大于CSG;CagA+H.pylori感染者细胞连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于CagA-H.pylori感染者,细胞间隙最小宽度大于CagA-H.pylori感染者。PL患者H.pylori根除者胃上皮细胞间隙缩小,细胞连接长度增加,其单位周长连接长度大于未根除者,细胞间隙最小宽度小于未根除者。结论:GC和PL患者胃上皮细胞间隙连接改变与H.pylori感染,特别是与CagA+H.pylori感染有关,H.pylori根除可促进细胞间隙连接形成。

非糜烂性反流病患者食管阻抗基线与酸暴露、上皮细胞间隙的相关研究

目的通过对非糜烂性反流病（non-erosive reflux disease,NERD）患者的食管阻抗基线与酸暴露、上皮细胞间隙相关性分析,探讨食管阻抗监测评价食管黏膜屏障功能的临床应用价值。方法选取2013-2014年我院门诊的非糜烂性反流病患者46例和健康志愿者18例,行24 h食管p H＋阻抗监测和胃镜检查。两项检查相隔1周。胃镜下活检食管下段组织2块,测量食管黏膜上皮细胞间隙。结果 NERD患者的酸暴露时间显著高于健康对照组[4.1（0.2-0.6）%vs 0.4（1.0-5.3）%,P〈0.001],食管远端阻抗基线值显著低于健康对照组[（2 943±759）Ωvs（3 968±1 076）Ω,P〈0.001],食管上皮细胞间隙较健康对照组显著增宽[（1.01±0.20）μm vs（0.67±0.14）μm,P〈0.001]。NERD患者阻抗基线值与酸暴露呈负相关（r=-0.35,P=0.016）,与上皮细胞间隙呈负相关（r=-0.58,P=0.002）。结论 NERD患者食管阻抗基线降低与酸暴露、上皮细胞间隙增宽有相关性,阻抗监测可用于评估食管黏膜完整性。

小麦秆锈病细胞间隙液的提取及注射技术研究

通过真空渗入离心法提取小麦秆锈病病组织的细胞间隙液,并采用注入法将细胞间隙液注入到健康的小麦细胞,研究了小麦秆锈病细胞间隙液对小麦叶片细胞HR的诱导作用,明确了细胞间隙液的提取和注射技术在小麦秆锈病细胞间隙液研究中利用的可行性。

食管远端鳞状上皮细胞间隙增宽对非糜烂性反流病诊断的价值

目的:研究非糜烂性反流病(NERD)食管远端鳞状上皮细胞间隙变化及与食管酸暴露、反流症状严重程度的关系,探讨细胞间隙增宽对NERD诊断的价值.方法:纳入NERD患者(66例)和正常对照者(38例).所有受试者行GerdQ调查、食管24hpH值监测、胃镜检查并在食管齿状线(Z线)和Z上2cm线位置取活检,透射电镜测量鳞状上皮细胞间隙;pH监测阴性NERD患者行质子泵抑制剂诊断试验确诊.结果:(1)NERD组Z线和Z线上2cm的平均细胞间隙分别为(0.90±0.11)μm、(0.92±0.16)μm,正常对照组分别为(0.65±0.08)μm、(0.67±0.08)μm,两组间差异有统计学意义(P<0.05),组内差异无统计学意义(P>0.05);(2)NERD患者Z线和Z线上2cm两部位pH(+)亚组与pH(-)亚组的细胞间隙比较,差异均无统计学意义(P>0.05);GerdQ(+)亚组与GerdQ(-)亚组的细胞间隙比较,差异也均无统计学意义(P>0.05);(3)Z线和Z线上2cm两部位的平均细胞间隙与DeMeester积分均呈正相关性,r分别为0.33(P=0.001)、0.35(P=0.001);与GerdQ评分也均呈正相关性,r分别为0.32(P=0.006)、0.45(P<0.001);(4)Z线平均细胞间隙的cut-off值为0.81μm时,约登指数最大(0.808),诊断的敏感度为80.8%,特异度为100.0%.Z线上2cm平均细胞间隙的cut-off值为0.81μm时,约登指数最大(0.731),诊断的敏感度为75.8%,特异度为97.4%.结论:NERD食管远端鳞状上皮细胞间隙明显增宽,细胞间隙与食管远端胃酸暴露和反流症状的严重程度呈正相关.细胞间隙增宽可作为NERD诊断的一种敏感客观结构指标.

胃食管反流病相关的细胞间隙增宽和紧密连接蛋白

食管黏膜防御能力下降在胃食管反流病(GERD)的发生中起重要作用。食管黏膜防御功能主要由上皮屏障完成,包括上皮细胞膜和紧密连接(TJ)。研究发现,GERD患者食管上皮层TJ蛋白表达和分布异常可能导致上皮细胞间隙增宽(DIS),这也许能作为GERD食管形态结构异常的客观指标。因此,探讨TJ蛋白、DIS与GERD之间的联系具有重要临床意义,可为GERD的诊断、治疗甚至疗效评估提供新的方向。

茶多酚对高转移性人肺癌细胞间隙连接通讯功能的上调研究

应用MTT法体外观察不同浓度茶多酚对PG细胞的杀伤作用 ,激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测用药后PG细胞内Ca2 +浓度、细胞间隙连接通讯(GJIC)、Cx4 3表达和细胞增殖周期分布的变化。结果显示 ,4个浓度的茶多酚对PG细胞均有杀伤作用 ,呈剂量依赖关系。细胞增殖受到明显抑制 ,使细胞阻滞于G0 /G1期 ,不能进入S期及G2 /M期 ,细胞增殖指数明显下降。与对照组相比 ,随着茶多酚浓度的增加 ,细胞内Ca2 + 浓度、GJIC和Cx4 3表达水平逐渐上升。提示茶多酚对PG细胞具有生长抑制作用 。

环境致癌物阻断NIH3T3细胞间隙连接通讯与细胞内游离钙离子关系初探

选用环境致癌物芥子气（ＭＧ）、苯并（ａ）芘（Ｂ（ａ）ｐ）、４－硝基喹啉－１－氧化物（４ＮＱＯ）、二甲基亚硝胺（ＤＥＮ）、环磷酰胺（ＣＰ）、雌二醇（Ｅｓｔ）、四氯化碳（ＣＣｌ４），作用于该细胞１２ｈ后，用划痕标记染料示踪技术（ＳＬＤＴ）检测其对该细胞间隙连接通讯（ＧＪＩＣ）功能的阻断作用，同时测定该细胞内［Ｃａ２＋］ｉ的变化，结果表明，环境致癌物阻断细胞ＧＪＩｃ与［Ｃａ２＋］ｉ变化密切相关。

6种类胡萝卜素对人乳腺癌细胞株细胞间隙连接通讯功能影响的比较

目的:探讨类胡萝卜素对乳腺癌细胞MDA-MB-435S和MCF-7细胞的细胞间隙连接通讯功能的影响。方法:类胡萝卜素分别与乳腺癌细胞MDA-MB-435S、MCF-7共培养,划痕标记染料示踪技术检测类胡萝卜素对乳腺癌细胞间隙连接通讯功能的影响。结果:β-胡萝卜素、虾青素和番茄红素对MDA-MB-435S细胞的细胞间隙连接通讯功能具有较强的促进作用;角黄素、玉米黄素和玉米黄素双棕榈酸酯对MDA-MB-435S细胞的细胞间隙连接通讯功能的影响不明显;β-胡萝卜素、虾青素和角黄素对MCF-7细胞的细胞间隙连接通讯功能具有较强的促进作用;番茄红素、玉米黄素和玉米黄素双棕榈酸酯对MCF-7细胞间隙连接通讯功能的影响不明显。