介质阻挡放电用于细菌灭活的机理研究

为研究低温等离子体灭菌的机理,利用介质阻挡放电(DBD)低温等离子体来进行了细菌灭活实验。试验选取了两种典型细菌:革兰氏阳性的金黄色葡萄球菌和革兰氏阴性的大肠杆菌。将载有细菌悬浊液的盖玻片放置在下平板电极的中央,通过调整电源电压、气隙间距和处理时间来考察电场和等离子体对两种不同细菌的作用;利用电子透射电镜(TEM)观察了等离子体处理后的细菌细胞,以确定细胞的完整性;测量了等离子体处理后的两种细菌悬浊液中蛋白质,核酸和K+的浓度。实验结果表明:在<10s时间内金黄色葡萄球菌死亡率接近100%;<7s内,大肠杆菌死亡率接近100%,取得了良好的灭菌效果。分析认为电场作用不是细菌灭活的主要因素,而等离子体中的氧自由基可以破坏细胞壁和细胞膜,以及细胞质中的蛋白质和核酸,从而起到杀菌的效果。

噻唑橙光化学法对红细胞中病毒及细菌灭活作用的研究

目的探讨噻唑橙(TO)光化学法对红细胞中病毒及细菌灭活效果。方法以伪狂犬病毒(PRV)和辛德毕斯(Sindbis)病毒为指示病毒,分别加入红细胞比积为20%的红细胞悬液中,TO孵育1 h后做476 nm光照射处理;研究病毒灭活动力学特征;做TO浓度(C)、光照强度(I)、光照时间(T)三因素三水平正交试验确定最优灭活条件;最优条件下检测裸照、密闭血袋中、密闭血袋充氧后的病毒灭活效果;最优条件下检测血液污染常见细菌小肠结肠炎耶尔森氏菌、金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌灭活效果。结果病毒灭活动力学研究显示:在60μmol/LTO、1.06E-01 w·m-2·nm-1光强条件下,照射5 min可将大部分PRV和Sindbis病毒灭活,20 min灭活作用达峰值,分别为5.88和5.12 LogTCID50;正交试验显示:裸照时PRV及Sindbis病毒灭活最优条件均为I=1.33E-01 w·m-2·nm-1,T=20 min,C=80μmol/L;在此条件下,可灭活红细胞中PRV≥6.13LogTCID50(裸照,n=4)、(4.75±0.62)LogTCID50(密闭血袋,n=4)、(6.06±0.16)LogTCID50(密闭血袋充氧,n=4);可灭活红细胞中Sindbis病毒(5.41±0.12)LogTCID50(裸照,n=4)、(3.72±0.77)LogTCID50(密闭血袋,n=4)、(5.76±0.25)LogTCID50(密闭血袋充氧,n=4)。在此条件下细菌灭活效果:小肠结肠炎耶尔森氏菌(5.91±0.13)Log10、金黄色葡萄球菌>6.8Log10、表皮葡萄球菌>6.0 Log10。结论 TO光化学法可有效灭活红细胞中病毒,有氧情况下(裸照或充氧)病毒灭活效果好于密闭无氧。TO光化学法可有效灭活红细胞中细菌。

高浓度气体的含量对食物细菌灭活效果分析

研究了食物的细菌灭活效果的优化问题,传统加热细菌灭活虽然能较好的食物中的细菌,但同时影响食物口感和品质。高浓度气体对细菌的灭活可以有效解决这一问题,但是含量控制一直是待解决的难题。通过分析相关过程,采用系数(R2)作为衡量指标考察逻辑斯谛(log-logistic)模型拟合的效果,精确控制含量,分析不同含量的气体对细菌灭活度的影响。实验结果表明:采用逻辑斯谛模型对细菌灭活效果变化进行拟合,拟合值和实验值之间的相关系数达到了0.90以上,差异相当小,可以较好的反映高浓度气体的含量控制处理下菌落总数的失活曲线变化,与其它方法相比,能有效的提高气体含量控制的精度,有一定的实际应用价值。

不同保护剂对313nm激发光下核黄素光化学法细菌灭活能力的影响

目的研究313nm激发光下核黄素光化学法对细菌的灭活作用,探究灭活处理过程中不同保护剂以及盛装材料对灭活效果的影响。方法在核黄素光化学细菌灭活处理过程中加入不同浓度的血液成分保护剂:甘露醇、维生素C、色氨酸、组氨酸,探讨它们对细菌灭活效果的影响;通过细胞培养板与PVC血袋2种盛装材料探讨不同器具对细菌灭活效果的影响。结果在313nm光源激发下,核黄素光化学作用能使血袋中大肠杆菌及表皮葡萄球菌下降3 log/mL。所有保护剂对大肠杆菌和表皮葡萄球菌的灭活效果均无显著影响。液层厚度对灭活效果有重要影响。结论各保护剂对细菌灭活无不良影响,可用于进一步血液成分功能的保护研究。

接种与灭活时间间隔为24或30小时血小板的细菌灭活效果观察

如果采集的血小板可以推迟1天进行病原体灭活，则可对血液中心的物流、人员配置和献血流程进行优化，但是此期间细菌会快速增殖。本研究目的是评估补骨脂素衍生物和紫外光对采集24和30 h后血小板中细菌的灭活效果。

多电极低温等离子体射流性质及其对细菌灭活作用的研究

以新型多电极低温刷状等离子体装置为研究对象,诊断分析其光谱信息以及放电参数对等离子体温度与光谱强度的影响规律,并结合正交灭菌实验的实际效果,对等离子体对细菌灭活作用的产生原因进行研究。结果发现,氩等离子体射流略高于室温,且包含多种氮氧活性自由基,并发现交流电压与温度正相关,却不显著影响光谱强度;结合灭菌实验结果,灭菌效果与直流电压显著正相关、与交流电压不相关、与气体流速负相关,这与温度变化规律相悖而与活性氮氧基团变化规律一致,证明自由基在灭菌过程中起主导作用。

大气压等离子体射流对细菌芽孢灭活机理研究

为研究低温大气压等离子体灭菌机理,设计了一种单电极等离子射流装置。使用该装置对枯草杆菌芽孢进行了细菌灭活实验。利用扫描电镜(SEM)观察了氩等离子体处理前后细菌芽孢的形貌变化;测量了等离子体处理后枯草杆菌芽孢蛋白质泄漏量,并进行了光谱诊断。实验结果表明枯草杆菌芽孢经氩等离子体射流处理5 min后,芽孢杀灭率低于两个量级。温度和紫外光在细菌灭活中作用较小,羟基自由基不起主要作用。SEM结果显示氩等离子体处理5 min后枯草杆菌芽孢形态基本保持完整。根据SEM、蛋白质泄漏量和发射光谱分析结果,推断高能粒子在细菌灭活中起主要作用。高能粒子对细菌细胞壁和细胞膜造成一定的刻蚀作用,并最终导致了枯草杆菌芽孢的失活。

核黄素结合紫外光灭活血小板细菌及膜糖蛋白的变化

目的探讨核黄素光化学法灭活单采血小板污染菌的效果及其膜糖蛋白表达的变化情况。方法将14ml浓度为500μmol.L-1核黄素加到125ml的单采血小板悬液中,再将一定浓度的G+菌(表皮葡萄球菌ATCC12228)和G-菌(大肠埃希氏菌ATCC25922)分别注入上述混悬液中,经(265～370nm)广谱紫外光(6.2J.ml-1)照射8～10min后,测定其浓度,观察灭活效果,并用流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白的变化情况。结果经浓度50μmol.L-1的核黄素结合强度为6.2J.ml-1紫外光照射8～10min,可将一定浓度的模型菌灭活至<1.22 logCFU/ml。结论核黄素结合紫外光照射可以有效灭活细菌,而单采血小板的CD62p、PAC-1的阳性表达率和阴性对照比较差异均无显著性。

亚甲蓝光敏效应对血液中细菌的灭活效果研究

目的 观察亚甲蓝 (MB)光敏效应对血液中细菌的灭活效果。方法 采用定量杀菌试验观察杀菌效果。结果 MB光敏效应作用 4 0min ,对大肠埃希菌、绿脓假单胞杆菌、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的灭活指数分别为 5 2 0、 2 2 1、 0 83和 1 0 8;当血液按 1/4稀释后 ,可使血液中的绿脓假单胞杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌的浓度分别下降 4 0 5、 2 0 9和 3 0 4个对数级。结论 MB光敏效应对血液中革兰阴性菌的灭活效果要优于革兰阳性菌。

亚甲蓝光化学法对血浆中细菌的灭活效果初步观察

目的观察亚甲蓝光化学法灭活血浆中已知细菌的效果。方法用高浓度的革兰阳性菌和革兰阴性菌作为指示菌株,接种入血浆,采用BacT/Alert全自动血培养仪进行细菌筛检,观察细菌灭活效果。结果亚甲蓝结合可见光照射后的血浆中没有检测到细菌,而未灭活的血浆样本通过BacT/alert全自动血培养仪检测到细菌。结论初步证明亚甲蓝光化学法可高效地灭活血浆中的细菌。

福尔马林自然蒸发消毒法对细菌灭活作用的实验探讨

我们采用福尔马林用药量８００ｍｌ／ｍ３［１］的方法观察福尔马林自然蒸发法对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌这三种细菌的灭活效果。结果表明，此法对这三种细菌均有灭活作用，效果确实，只要消毒液不低于８００ｍｌ／ｍ３即可。我们认为此种方法可以作为手术室常用的消毒方法。

pH对土壤中灭活细菌对重金属含量吸附的影响

以兖州煤矿及其周边地区土壤为原材料,研究了pH对灭活细菌对土壤中重金属Cu,Pb,Zn和Cd的吸附量的影响.采取的土样共4个,pH梯度为2,3,4,5,6,7,8,9,10.结果表明,在极端环境中灭活细菌对重金属的吸附性较好,在温和的环境中较差.这为极端环境中重金属的吸附提供了一种依据.

采用^(137)CSγ射线辐照灭活红细胞血液制品中大肠杆菌的实验研究

目的探讨不同剂量γ射线辐照对红细胞血液制品中大肠杆菌的灭活作用,确定红细胞血液制品灭菌的最佳辐照剂量。方法制备含102-106不同数量级大肠杆菌的红细胞血液制品,应用强度为0、15、20、25、30和35Gy的γ射线进行照射,并于照射后0、7、14d检测血液中大肠杆菌的含量。结果红细胞血液制品经照射后大肠杆菌数量发生了不同程度的改变,当细菌量≤103cfu/ml时,25Gy的γ射线强度足以灭活样本内的所有细菌。结论25Gy的γ射线辐照剂量能有效灭活红细胞血液制品中的细菌,是一种安全有效的红细胞血液制品灭菌剂量。

^(137)Csγ射线辐照杀灭机采血小板中细菌的研究

目的探讨不同剂量137Csγ射线辐照对机采血小板中细菌灭活效果及对血小板质量的影响。方法使用20、25、30、35、40 Gy剂量的137Csγ射线分别辐照含有(102~103)CFU/mL铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌的机采血小板,检测辐照前后血小板中的活菌数量和理化指标pH、HSR、血小板最大聚集率、CD62p+、Plt、MPV、PDW,并做统计学分析比较。结果血小板经20、25、30、35、40 Gy的137Csγ射线辐照后,铜绿假单胞菌菌落计数均值分别为314、236、226、160、102 CFU/mL;表皮葡萄球菌计数均值分别为1 440、1 330、1 228、1 175、978 CFU/mL;肺炎克雷伯菌计数均值分别为942、860、750、622、450 CFU/mL。辐照后血小板中活菌数量相比辐照前均明显降低(P<0.05)。不同剂量的137Csγ射线辐照前后血小板pH、HSR、血小板最大聚集率、CD62p+、Plt、MPV、PDW)辐照后变化不大(P>0.05)。结论 20~40 Gy的137Csγ射线辐照机采血小板可较好杀灭铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和表皮葡萄球菌,而对血小板质量无明显影响。

亚甲蓝光化学效应对血液中大肠杆菌灭活效果研究

目的 筛选亚甲蓝 (MB)光化学效应对血液中大肠杆菌的最佳灭活条件。方法 通过正交试验、单因素及双因素作用灭活细菌效果测定。筛选亚甲蓝光化学效应灭活血液中大肠杆菌的最佳条件及影响因素 ,观察其灭活效果。结果 正交实验显示 ,亚甲蓝光化学效应对血液中细菌灭活作用受 MB含量、卤钨灯照射强度和照射时间等因素的影响。试验筛选的最佳处理条件可以使大肠杆菌下降近 5个对数级。亚甲蓝与卤钨灯照射两因素的 T/ E值大于 1,具有协同增效作用。结论 亚甲蓝光化学效应灭活血液中大肠杆菌的最佳条件是 15μmol/ L亚甲蓝 ,4 0 0 0 0 L ux卤钨灯照射强度 ,4 0 min作用时间 ,0 .35 mmol/

不同氧环境下维生素C对核黄素光化学法灭活血浆中大肠杆菌的影响

目的研究313nm作为激发光时,不同氧环境下维生素C(Vc)对核黄素(Rf)光化学法灭活血浆中大肠杆菌效果的影响。方法将含有50μmol/L的RF和0、12.5、25、37.5和50mmol/L维生素C的混合血浆与大肠杆菌液混合后盛装于12孔培养板、排除空气的PVC储血袋(乏氧)和充加纯氧的PVC储血袋(充氧),用313nm波长紫外光辐照,照射剂量为5J/mL,观察不同氧环境和Vc对RF化学灭活大肠杆菌效果的影响。结果在培养板中Vc有促进RF光化学灭活大肠杆菌的效能;在排除空气的PVC储血袋(乏氧)中,Vc促进RF光化学灭活大肠杆菌的效能的作用明显减弱;与乏氧环境相比较,在充加纯氧的PVC储血袋(充氧)中,Vc有促进RF光化学灭活大肠杆菌的效能,当Vc浓度为10mmol/L时,大肠杆菌的滴度下降4.3log/mL。结论在高含氧环境下Vc联合RF经313nm波长光源照射可有效灭活血浆中的大肠杆菌;Vc作为1种病原体灭活的光化学底物的可能性和可行性值得做进一步深入探讨。

全菌体灭活菌苗的现状和新策略(下)

对全菌体灭活菌苗（WCV）防治传染病已进行广泛的研究,WCV是预防疾病的一种经济、安全、有效的方法,但WCV的缺点是,胃肠外免疫能引起不良反应,而口服免疫常需大剂量,且免疫力短暂。近期研究表明,能提高WCV免疫原性和增强口服免疫应答的新方法极有希望提高这些菌苗的效力。

低温等离子体对白色念珠菌影响的电镜观察

目的研究低温等离子体对白色念珠菌结构的影响,探讨低温等离子体对白色念珠菌的灭活机制。方法选择白色念珠菌ATCC10231作为实验菌株,以介质阻挡放电方法产生的低温等离子体对其进行处理,使用扫描电镜(SEM)及透射电镜(TEM)分别观察白色念珠菌细胞表面和细胞内部的变化情况。结果低温等离子体处理30 s后,SEM观察显示一些白色念珠菌细胞表面明显出现缺损,而TEM观察显示一些白色念珠菌细胞的细胞壁及细胞膜断裂,核心溶解,菌体近似空壳。结论低温等离子体可破坏白色念珠菌表面和内部结构,这可能是低温等离子体中的带电粒子的击穿作用和活性氧种的氧化作用所致。