细辛煎煮过程中甲基丁香酚、黄樟醚和细辛脂素的变化研究

目的研究细辛煎煮过程中甲基丁香酚、黄樟醚和细辛脂素的变化。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)柱,甲醇-水系统梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长285 nm,柱温35℃,测定细辛不同时间水煎液中甲基丁香酚、黄樟醚和细辛脂素。结果细辛水煎液中毒性成分甲基丁香酚、黄樟醚的含有量随着煎煮时间的延长不断下降,而有效成分细辛脂素的含有量不断增加。结论细辛入汤剂时久煎可有效减少毒性成分,亦有利于有效成分的溶出。

HPLC法测定4种细辛中马兜铃酸Ⅰ和细辛脂素

目的采用HPLC法测定华细辛、铜钱细辛、毛细辛和辽细辛不同部位马兜铃酸Ⅰ和细辛脂素的量。方法分析在MERCK C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)上实施;流动相为乙腈-0.05%磷酸水,梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min,检测波长为260 nm,柱温30℃。结果马兜铃酸Ⅰ和细辛脂素的线性范围分别为0.01～250μg/mL(r=0.999 7)和0.6～200μg/mL(r=0.999 7),其平均回收率分别为98.8%(RSD为1.1%)和99.8%(RSD为0.7%)。结论 4种细辛中均检测到马兜铃酸Ⅰ,叶中含有量均大于根茎。细辛脂素在毛细辛茎中未检测到.细辛脂素在华细辛和辽细辛根及茎中含有量较叶中高。

RP-HPLC法同时测定辽细辛中L-细辛脂素、L-芝麻脂素和卡枯醇

目的建立同时测定辽细辛中3种非挥发性成分的高效液相色谱方法,为该药材提供质量控制方法。方法以醋酸乙酯为溶剂,对辽细辛药材粉末进行超声提取;采用RP-HPLC法对辽细辛中的L-细辛脂素、L-芝麻脂素和卡枯醇进行同时定量测定。Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(50∶50);体积流量为1.0mL/min;检测波长为240nm;进样量为10μL;外标法定量。结果L-细辛脂素、L-芝麻脂素和卡枯醇分别在3.50～35.0μg/mL(r=0.9997),1.52～76.0μg/mL(r=0.9992)和0.38～7.60μg/mL(r=0.9999)呈良好线性关系,回收率分别为99.7%(RSD=2.7%)、96.7%(RSD=1.9%)和97.7%(RSD=1.5%)。结论该方法简便快速,结果准确,重现性好,可用于辽细辛药材的质量控制。

细辛脂素抗心脏移植急性排斥反应的作用及对黏附分子表达的影响

目的:实验筛选细辛免疫抑制作用的有效成分细辛脂素,探讨其抗心脏移植急性排斥反应作用及对黏附分子的影响。方法:提取细辛中的细辛脂素,健康雄性Wistar大鼠(供体)和SD大鼠(受体)各64只,建立大鼠异位心脏移植模型,将接受心脏移植的SD大鼠分成4组:阳性对照组,不给任何处置;环孢霉素A(CsA)组,术前1 d开始灌服CsA;细辛脂素组,术前1 d开始灌服细辛脂素;混合药物组,术前1 d开始灌服半量CsA和半量细辛脂素。每组各8只,术后第7天处死,另外8只用于观察移植物生存天数。移植心常规石蜡包埋、切片,显微镜观察并进行组织病理分级;免疫组化染色法检测移植物局部细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管内皮黏附分子-1(VCAM-1)含量。结果:移植心存活时间,CsA组、细辛脂素组和混合药物组均较阳性对照组显著延长(P<0.01)。与阳性对照组比较,细辛脂素可减轻心肌病理形态学的损伤。CsA组、细辛脂素组和混合药物组移植心局部ICAM-1和VCAM-1含量较阳性对照组明显减少。结论:细辛脂素可延长移植物存活时间并减轻病理形态的损伤,与CsA有相似的免疫抑制作用。ICAM-1和VCAM-1在发生排斥反应时表达增加,细辛脂素可抑制二者的表达。

九龙化风丸中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、羌活醇、异欧前胡素和细辛脂素的HPLC梯度洗脱法测定

目的 采用高效液相梯度洗脱法测定九龙化风丸（防风、羌活、细辛、大黄、桔梗等）中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、羌活醇、异欧前胡素和细辛脂素的量.方法 Hypersil C18色谱柱（4.6mm×150mm,5μm）,体积流量0.9 mL/min,升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的色谱条件,流动相A为甲醇-乙腈（2∶1）,流动相B为0.5％磷酸溶液,检测波长254 nm.羌活醇和异欧前胡素的色谱条件,流动相A为乙腈,流动相B为0.1％醋酸水溶液,检测波长310 nm,细辛脂素的色谱条件,流动相为乙腈-甲醇（85∶15）,检测波长286 nm.结果 升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在0.0146～0.2920μg （r=0.999 1）、0.0108～0.2160μg （r=0.9993）范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.55％、97.73％,RSD （n=6）分别为1.46％、1.18％;羌活醇和异欧前胡素分别在0.017 4 ～0.348 0 μg（r=0.999 3）、0.0128～0.2560 μg （r=0.9997）范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.62％、98.11％,RSD （n=6）分别为1.43％、1.39％;细辛脂素在0.012 4～0.2480 μg （r=0.999 2）范围内进样量与峰面积线性关系良好,平均加样回收率为97.65％,RSD （n=6）为1.24％.结论 该方法测定结果准确、灵敏、重复性好.

RP-HPLC法测定止痛化瘀搽剂中欧前胡素和细辛脂素的含量

目的：建立止痛化瘀搽剂中欧前胡素和细辛脂素的含量测定方法，为其质量标准制定奠定基础。方法：Kromasil C18柱（4．6mm×250mm，5μm），欧前胡素含量测定流动相为：甲醇-水（65：35），流速为1．0mL／min，检测波长为300nm；细辛脂素含量测定流动相为：乙腈-水，梯度洗脱，流速为1．0mL／min，检测波长为287nm.结果：欧前胡素在25．0—375ng范围内呈良好的线性（r=0．9997），加样回收率为98．96％（n=6），RSD为2．28％；细辛脂素在74．0—1110ng范围内呈良好的线性（r=0．9996），加样回收率为96．12％（n=6），RSD为2．20％。结论：该法操作简便，专属性强，重现性好，可为止痛化瘀搽剂质量标准的制定提供科学依据。

HPLC法测定不同品种商品细辛中细辛脂素和芝麻脂素的含量

目的:测定不同品种的商品细辛中细辛脂素和芝麻脂素的含量,为该药材提供质量控制标准。方法:采用HPLC法进行测定。结果:不同品种的细辛中细辛脂素和芝麻脂素的含量有较大差异。结论:该法快速简便,结果准确,可用于细辛药材的质量控制。

HPLC法同时测定辛芩颗粒中细辛脂素、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的：建立高效液相色谱法测定辛芩颗粒中细辛脂素、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的方法。方法：色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;流速为1.0 ml·min^-1;柱温：30℃;流动相：甲醇-水梯度洗脱;检测波长：0-30 min为254 nm,30-55 min为287 nm;进样量：10μl。结果：升麻素苷在浓度为10.210-163.400μg·ml^-1时线性关系良好,r=0.999 7,平均回收率为100.30%,RSD为1.6%（n=6）;5-O-甲基维斯阿米醇苷在浓度为10.160-162.600μg·ml^-1时线性关系良好,r=0.999 8,平均回收率为101.53%,RSD为1.1%（n=6）;细辛脂素在浓度为5.015-80.240μg·ml^-1时线性关系良好,r=0.999 8,平均回收率为101.12%,RSD为1.2%（n=6）。结论：该方法简单、准确,同时测定3种有效成分的含量,可用于辛芩颗粒的质量控制。

HPLC法测定北细辛中芝麻脂素和细辛脂素的含量

目的：建立北细辛中Ｌ－芝麻脂素和Ｌ－细辛脂素的含量测定方法，为该药材提供质量控制标准。方法：以醋酸乙酯为溶剂，加热回流１２０ｍｉｎ提取；用ＨＰＬＣ法测定：使用ＨｙｐｅｒｓｉｌＢＤＳＣ１８色谱柱（２５０ｍｍ×４６ｍｍ，５μｍ），流动相：乙腈－水（５０∶５０），流速１２ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长：２８７ｎｍ，纸速：２ｍｍ·ｍｉｎ－１，进样量：１０μＬ，外标法定量。结果：两组分的平均回收率分别为芝麻脂素１００４％（ＲＳＤ＝１９％）和细辛脂素１００２％（ＲＳＤ＝１６％）。结论：方法快速简便，结果准确，可用于细辛药材质量控制。

细辛脂素+供鼠脾/骨髓细胞诱导的免疫耐受对大鼠心脏移植存活的影响

目的:探讨心脏移植前1周,输注供鼠脾/骨髓细胞于接受鼠胸腺内,同时灌服细辛脂素诱导免疫耐受对移植物的影响。方法:提取中药细辛中的细辛脂素成分。以健康雄性Wistar大鼠为供者和SD大鼠为受者,建立大鼠腹部异位心脏移植模型。将接受心脏移植的80只SD大鼠分成5组,每组16只。阳性对照组:施行腹部异位心脏移植,不给任何处置;环孢霉素A(CsA)组:术前7d开始灌服CsA;细辛脂素组:术前7d开始灌服细辛脂素25mg/(kg.d);脾细胞诱导组:术前7d开始输注供者脾细胞于受者胸腺内,术前7d开始灌服细辛脂素25mg/(kg.d);骨髓细胞诱导组:术前7d开始输注供者骨髓细胞于受体胸腺内,术前7d开始灌服细辛脂素25mg/(kg.d)。于术后7d,每组各处死8只,另外8只用于观察移植物生存的天数。用MTT比色法检测供受体鼠混合淋巴细胞反应;应用ELISA法检测受体鼠血清中IL-2,IFN-γ,IL-4和IL-10的水平。结果:CsA组和免疫诱导组移植心的存活时间较阳性对照组显著延长(P<0.01)。供受体鼠的混合淋巴细胞反应免疫诱导组较阳性对照组差异显著(P<0.01)。免疫诱导组血清IL-4和IL-10的含量较CsA组显著升高(P<0.01)。CsA组和免疫诱导组血清IL-2和IFN-γ的含量较阳性对照组显著降低(P<0.01)。结论:细辛脂素联合供者的脾细胞和骨髓细胞可成功地诱导受体鼠对心脏移植物的免疫耐受。输注供体鼠的脾细胞和骨髓细胞可起到相似的诱导免疫耐受的作用。

不同炮制方法对细辛中甲基丁香酚和细辛脂素含量的影响研究

目的比较不同炮制方法对细辛中有效成分甲基丁香酚和细辛脂素的含量影响,为细辛减毒保效的最佳炮制方法选择提供实验依据。方法对细辛进行蜜制、酒制、醋制等10种方法炮制处理,然后采用HPLC同时测定其有效成分甲基丁香酚、细辛脂素的含量。结果细辛炮制后,其甲基丁香酚含量酒制后升高,其他炮制方法均有不同程度下降。而细辛脂素含量除了碱制和炒焦外,其他炮制方法均有不同程度升高。结论炮制能够较好地保留细辛中有效成分甲基丁香酚和细辛脂素的含量,同时能使细辛中毒性成分黄樟醚和马兜铃酸A含量降低,因此炮制能够有效的减毒保效。

贮存时间对北细辛中细辛脂素含量的影响

为了探究贮存时间对北细辛药材质量的影响,建立HPLC法测定北细辛中细辛脂素含量,在温度(15±2)℃的条件下放置12个月,分析北细辛中细辛脂素含量变化规律。研究结果表明,运用本文建立的含量测定方法,细辛脂素浓度在0.1~50μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9996),平均加样回收率为98.76%,RSD值为1.81%。放置12个月内细辛脂素具有良好的稳定性,含量并无明显的降低或增加,为北细辛贮藏条件的深入研究提供参考。

不同遮荫处理对华细辛中细辛脂素含量的影响

以3a生华细辛的移栽苗为试材,移栽后采用50%、70%、90%的遮荫度对其进行遮荫处理,比较不同遮荫度对华细辛根茎中主要药效成分细辛脂素含量的影响。结果表明:同一遮荫处理不同时间细辛脂素含量差异不显著,相同时间不同遮荫处理细辛脂素含量差异极显著,以90%遮荫处理的细辛脂素含量最高,50%遮荫处理的细辛脂素含量最低。

SPE-UPLC法测定养血清脑水提浸膏中的毛蕊花糖苷和细辛脂素的含量

目的:建立一种固相萃取结合超高效液相色谱(SPE-UPLC)的方法,测定养血清脑水提浸膏中的毛蕊花糖苷和细辛脂素的含量。方法:采用ProElut C18-U固相萃取柱对样品进行预处理,收集40%甲醇和甲醇洗脱液进行UPLC分析。采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱分别进行测定。毛蕊花糖苷和细辛脂素的检测波长分别为334 nm和287 nm,流动相分别为乙腈-0.2%甲酸水溶液和乙腈-水,梯度洗脱,流速为0.4 mL/min。结果:毛蕊花糖苷和细辛脂素的线性范围分别为1.58~15.8μg和2.12~21.2μg(r>0.999);平均回收率(n=6)分别为95.0%(RSD=2.8%)和96.1%(RSD=2.8%)。结论:该测定方法简便、快速、准确可靠,可应用于养血清脑水提浸膏中毛蕊花糖苷和细辛脂素含量的测定。

通过总挥发油和细辛脂素含量比较野生辽细辛与栽培辽细辛的质量

目的比较栽培的辽细辛与野生辽细辛的质量差异。方法通过研究其挥发油含量和使用HPLC法测定细辛脂素含量,对辽细辛的栽培样品和野生样品进行分析。结果两种细辛脂素含量均达到《药典》标准,但栽培细辛的挥发油含量未达到《药典》标准。

通迪胶囊中细辛脂素含量的高效液相色谱测定

目的建立通迪胶囊中细辛脂素的高效液相色谱(HPLC)法含量测定方法,为该药品中所含细辛药材提供质量控制标准。方法以甲醇为溶剂,加热回流45 min提取,用Hypersil ODS-A柱(C18,200 mm×5.5 mm,5μm);乙腈-水(42.5∶57.5);柱温40℃;检测波长287 nm。结果该方法细辛脂素的线性范围为0.1155～1.2707μg(r=1),线性关系良好;平均回收率为102.96%(RSD为1.2%)。结论结果表明该方法快速简便、准确可靠、重复性好、结果稳定,可用于通迪胶囊中细辛药材质量控制。

高效液相色谱法测定丁细牙痛胶囊中丁香酚和细辛脂素含量

目的建立测定丁细牙痛胶囊中细辛脂素、丁香酚含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法色谱柱采用Capcell Pak MGⅡC18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长为287 nm,流速为1 m L/min,柱温为5℃,进样量为10μL。结果丁香酚和细辛脂素质量浓度分别在5.334~64.008μg/m L和9.625~115.500μg/m L范围内与其峰面积线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率分别为97.93%和98.73%,RSD分别为1.12%和1.65%(n=6)。结论该方法简便可靠、重复性好,可用于丁细牙痛胶囊的质量控制。

HPLC法同时测定丁细牙痛胶囊中细辛脂素、原儿茶醛和原儿茶酸的含量

目的:建立高效液相色谱法测定丁细牙痛胶囊中细辛脂素、原儿茶醛、原儿茶酸含量。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱:Capcell Pak MG Ⅱ C18(4.6 mm × 150 mm, 5 μm);流动相:乙腈^-1%冰醋酸溶液,梯度洗脱;检测波长:287 nm;柱温:35 ℃;流速:1 mL·min^-1;进样量:10 μL。结果:细辛脂素在0.015 25 ~ 0.152 5 mg·mL^-1范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为98.01%, RSD为1.10%(n=6);原儿茶酸在0.020 88 ~ 0.208 8 mg·mL^-1范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为99.34%,RSD为1.48%(n=6);原儿茶醛在0.010 52~0.105 2 mg·mL^-1范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为101.48%,RSD为1.20%(n=6)。结论:本方法简便可靠,重现性好,适用于丁细牙痛胶囊的质量控制。

RP-HPLC法同时测定细辛中甲基丁香酚、黄樟醚和细辛脂素的含量

目的:建立同时测定细辛中甲基丁香酚、黄樟醚、细辛脂素含量的HPLC方法。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5"m)色谱柱,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长285 nm,柱温35℃。结果:甲基丁香酚、黄樟醚和细辛脂素的进样量分别在0.10～2.07μg、0.11～2.20μg和0.054～1.07μg内线性关系良好(r=0.999 9)。平均回收率(n=6)分别为98.4%,97.7%,98.6%;RSD分别为0.78%,0.41%,1.5%。结论:该方法简便、可行,重现性好,为细辛的质量控制提供参考。