基于RNA-seq不明原因复发性流产绒毛组织mRNA基因差异性表达研究

目的:构建不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)孕妇绒毛组织的mRNA差异性表达谱并进行功能分析,为阐明URSA的发生发展机制提供依据。方法:收集2022年3月于新疆医科大学第一附属医院妇科门诊收治的4例URSA(试验组)和4例选择性终止妊娠孕妇(对照组)的绒毛组织样本。应用转录组测序技术(RNA-seq)筛选2组差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并对其进行GO功能注释、KEGG通路分析及蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析,进一步研究差异表达mRNA的功能,并筛选出URSA的关键基因。结果:RNA-seq分析共筛选出3350个DEGs,其中上调基因2259个,下调基因1091个。通过PPI网络分析,筛选出与URSA有关的前10个关键基因:TYROBP、CD74、GH1、GH2、STAT5A、HLA-DRA、STAT5B、HLA-DRB1、CISH和HLA-A。通过GO和KEGG生物学功能分析,发现差异性表达的mRNA参与到多种白细胞分化相关免疫反应通路和同种异体免疫应答等生物学过程。结论:利用RNA-seq获得的URSA的mRNA差异性表达谱,筛选出可能与URSA有关的关键基因及生物学通路,为进一步研究URSA的发病机制和诊疗靶点提供了理论依据。

HSPs mRNA在稽留流产绒毛组织中表达变化及临床价值

目的通过检测热休克蛋白(Heat shock proteins,HSPs)mRNA在稽留流产绒毛组织中表达谱,了解其在稽留流产疾病病理生理机制中的作用。方法用荧光定量PCR技术检测HSP27、HSP60、HSP70、HSP90α及HSPBP1 mRNA在稽留流产及对照组绒毛组织中的表达情况。结果与对照组相比,HSP27、HSP60、HSP70、HSP90α及HSPBP1 mRNA在稽留流产组中表达上调,差异有统计学意义(P<0.01)。结论HSP27、HSP60、HSP70、HSP90α及HSPBP1 mRNA的上调可能与稽留流产的发生有非常密切的关系。监测稽留流产绒毛组织中HSP27、HSP60、HSP70、HSP90α及HSPBP1 mRNA的水平为以HSPs mRNA为靶点治疗稽留流产奠定初步的理论基础。

CNV-seq检测辅助生殖技术助孕自然流产绒毛组织遗传学分析

目的通过低深度全基因组测序CNV检测技术(CNV-seq)分析自然流产绒毛组织的染色体情况,为流产原因做出临床诊断,为下次妊娠提供遗传学指导。方法采用CNV-seq检测早期自然流产胚胎绒毛组织,统计染色体异常情况。回顾性分析2019年1月至2023年6月于滨州医学院附属医院就诊经彩超提示诊断为自然流产的181例女性患者的年龄、孕龄、既往流产次数及受孕方式对胚胎染色体结果的影响。自然妊娠流产108例(108/181),经辅助生殖技术(ART)助孕后流产73例(73/181),其中体外受精-胚胎移植(IVF)助孕42例、卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕24例、人工授精(IUI)助孕7例。181例自然流产患者年龄(32.83±5.34)岁,孕龄(57.39±10.05)d,自然流产次数0~5次。统计学方法采用单因素方差分析、χ^(2)检验。结果181例自然流产绒毛组织均检测成功,74例结果未见异常,107例结果异常,异常率为59.12%。其中染色体数目异常98例,包括三体67例、X单体13例、嵌合体17例(16三体嵌合型7例)、三倍体1例;基因拷贝数变异9例,片段变异范围为2.12~95.92(37.32±24.57)Mb。根据受孕方式不同,分为自然妊娠组与ART助孕组,ATR助孕组共73例,异常40例,异常率54.8%;自然妊娠组共108例,异常67例,异常率62.0%;两组比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.954,P=0.331)。结论染色体异常是胚胎早期流产的主要因素,主要为染色体数目异常;ART助孕不会增加自然流产的风险;CNV-seq方法检测绒毛染色体对明确早期自然流产原因有重大意义。

人类辅助生殖技术受孕的稽留流产患者绒毛组织染色体异常结果分析

目的分析不同辅助生殖技术助孕的稽留流产患者绒毛组织染色体异常结果。方法选取2019年7月至2023年7月该院收治的接受辅助受孕的稽留流产患者260例作为辅助受孕组,再根据接受的不同辅助生殖技术分为体外受精(IVF)组(135例)、人工授精(AIH)组(45例)和卵胞质内单精子显微注射(ICSI)组(80例),并选取自然受孕的稽留流产患者42例作为对照组,采集各组患者绒毛组织,采用高通量测序法进行绒毛组织染色体检测,观察各组患者染色体拷贝数变异(CNV)和数目异常情况。结果辅助受孕组患者染色体异常检出率、CNV异常率、数目异常类型与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。IVF组患者染色体异常检出率、CNV异常率、数目异常类型与AIH组、ICSI组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。辅助受孕组患者中染色体数目异常者三体中以16/22/21-三体异常染色体为主,双三体异常以48,XX+3,+18、48,XXY,+21为主,X单体异常均为45,X;三倍体异常患者中5例患者为69,XXY,2例患者为69,XXX。各组患者染色体异常核型分布情况比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论辅助生殖技术不会增加染色体异常风险,且异常染色体核型分布情况与辅助生殖技术方式无关,可根据患者的整体情况进行辅助受孕方式的选择。

miRNA-432-5p在复发性流产患者绒毛组织中的表达及临床意义

依据我国最新版专家共识《复发性流产诊治专家共识(2022)》[1],复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)被定义为与同一配偶连续发生2次及以上在妊娠28周之前的妊娠丢失,包括生化妊娠。RSA的病因非常复杂,一类与母体相关,一类与胎儿相关,但其致病机制尚不清楚[2]。微小RNA(miRNA)是一类微小核糖核酸,长度为20~25 nt的非编码RNA,涉及对身体发育和功能至关重要的几个过程,包括细胞分裂和分化、组织重塑及妊娠终止等[3]。多个最新研究证实miRNAs在RSA中表达失调[4],通过影响蜕膜细胞因子微生态环境[5]、抑制滋养层增殖迁移[6]和胎盘血管生成[7]等机制调控RSA的发生发展。miRNA-432-5p是较早发现的与肿瘤相关的miRNA,近来有报道在先兆子痫患者中表达升高[8-9]。本研究拟对RSA患者流产物绒毛组织中的miRNAs进行高通量测序分析,选取miRNA-432-5p进行表达量检测,分析其临床意义和机制,现报道如下。

不明原因早期复发性流产患者胎盘绒毛组织中HO-1、MCP-1的表达变化

目的观察不明原因早期复发性流产(UERSA)患者胎盘绒毛组织血红素氧合酶1(HO-1)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达变化。方法选取同期就诊UERSA患者56例(观察组)和人工流产终止妊娠的正常早孕妇女25例(对照组),清宫术后收集两组绒毛组织,用免疫组化染色法观察HO-1和MCP-1在绒毛滋养层细胞和基质细胞中的表达,测定绒毛组织HO-1、MCP-1阳性表达强度及表达面积。结果两组年龄、体质量指数、文化程度、职业类别、吸烟饮酒史、人工流产史、生殖系统感染、孕周、孕次、产次比较差异无统计学意义(P均>0.05)。HO-1阳性染色主要在绒毛组织的滋养层细胞;MCP-1阳性染色主要在绒毛组织的基质和外层细胞,包括滋养层细胞。HO-1阳性染色观察组呈现浅棕黄色,对照组呈现中度棕黄色。MCP-1阳性染色观察组呈深棕褐色,强度较高,分布较均匀;对照组呈浅棕褐色,分布相对较少。观察组MCP-1阳性表达强度、面积均高于对照组(P均<0.05),HO-1阳性表达强度、面积均低于对照组(P均<0.05)。结论UERSA患者绒毛组织中HO-1呈低表达,MCP-1呈高表达。

ACE2在稽留流产患者血清及绒毛组织中的表达及其临床意义

目的:分析血管紧张素转换酶2(ACE2)在稽留流产患者血清及绒毛组织中的表达及其临床意义。方法:选择我院2021年1月—2023年7月接诊的80例稽留流产患者作为观察组,另选同期80例正常早孕要求终止妊娠者作为对照组。检测所有入选者血清及绒毛组织中ACE2表达水平、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、维生素E(VitE)表达水平,使用Pearson相关性分析稽留流产患者血清ACE2与绒毛组织中ACE2、血清及绒毛组织中ACE2与血清SOD、MDA和VitE的关系,通过ROC曲线分析血清及绒毛组织中ACE2对稽留流产的诊断效能。结果:观察组血清及绒毛组织中ACE2表达水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组血清SOD、VitE表达水平均低于对照组,MDA表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关性分析,稽留流产患者血清ACE2表达水平与绒毛组织中ACE2表达水平呈正相关(r=0.745,P=0.000);血清及绒毛组织中ACE2表达水平均与血清SOD、VitE表达水平均呈正相关(P<0.05),与血清MDA表达水平呈负相关(P<0.05);经ROC曲线分析,血清及绒毛组织中ACE2诊断稽留流产的敏感度分别为79.48%、85.43%,特异度分别为56.43%、59.92%,AUC分别为0.810、0.870,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ACE2在稽留流产患者血清及绒毛组织中的表达明显降低,可能与机体氧化应激状态有关,诊断稽留流产的效能较好,值得进一步研究应用。

胚胎停育绒毛组织中PRX3、PLGF、PSG1的表达

目的:分析过氧化物还原酶3(PRX3)、胎盘生长因子胚胎生长因子(PLGF)、妊娠特异性糖蛋白1(PSG1)在胚胎停育患者绒毛组织中的表达。方法:选取2020年1月-2022年8月本院收治的84例胚胎停育患者作为观察组,60例正常早孕行人工流产者作为对照组;采用PCR及western blot法检测两组绒毛组织中PRX3、PLGF、PSG1的mRNA及蛋白水平,logistics模型分析绒毛组织PRX3、PLGF、PSG1与胚胎停育关系。结果:观察组PRX3及PSG1 mRNA(3.43±0.84、3.31±1.34)和蛋白水平(1.74±0.39、2.39±0.54)均高于对照组(1.54±0.42、2.26±0.43、1.01±0.27、1.83±0.39),PLGF mRNA(0.34±0.05)和蛋白水平(0.51±0.11)均低于对照组(0.42±0.06、0.93±0.24);绒毛组织中高PRX3、PSG1水平和低PLGF水平均与胚胎停育有关(均P<0.05)。结论:相较于正常早孕,胚胎停育患者绒毛组织中PRX3、PSG1明显偏高,PLGF水平明显偏低。

宫内妊娠和输卵管妊娠绒毛组织中HIF-1α、Beclin-1、LC-3蛋白表达差异性研究

目的 检测宫内妊娠和输卵管妊娠绒毛组织中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、自噬标志蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白轻链3(LC-3)的表达情况,分析滋养层细胞在宫内、宫外不同环境中的缺氧状态及自噬表达的差异。方法 宫内妊娠绒毛组织取材于2021年9—12月于广州中医药大学第一附属医院妇科门诊就诊的正常宫内妊娠6~8周、要求终止妊娠的6例患者(宫内妊娠组);输卵管妊娠绒毛组织取材于同时期妇科住院部妊娠6~8周、手术确诊输卵管妊娠且切除患侧输卵管的6例患者(输卵管妊娠组)。比较宫内妊娠和输卵管妊娠绒毛组织结构的差异,通过免疫组化、免疫荧光方法检测宫内妊娠和输卵管妊娠滋养层细胞中HIF-1α、Beclin-1、LC-3蛋白的相对表达量。结果 宫内妊娠和输卵管妊娠绒毛组织在病理结构上具有明显差异。免疫组化检测结果显示,输卵管妊娠组绒毛组织中HIF-1α、Beclin-1、LC-3蛋白的相对表达量均显著高于宫内妊娠组(P<0.05);免疫荧光检测结果显示,输卵管妊娠组绒毛组织中HIF-1α、LC-3蛋白的相对表达量均显著高于宫内妊娠组(P<0.05),而Beclin-1蛋白的相对表达量两组间无显著性差异(P>0.05)。结论 输卵管妊娠时滋养层细胞处于更缺氧的环境中,且对细胞自噬起正向促进作用。

胚胎停育患者绒毛组织染色体检测分析

目的分析胚胎停育患者绒毛组织染色体检测结果。方法选取胚胎停育患者的流产绒毛组织240例份,采用基因组拷贝数变异测序检测染色体。结果240例份胚胎停育患者流产绒毛组织中,染色体异常181例份、染色体正常59例份。181例份染色体异常绒毛组织中,染色体数目异常97例份,其中常染色体三体76例份、性染色体单体18例份、三倍体3例份;结构异常120例份;部分标本同时出现染色体数目异常和结构异常。育龄(208例)和高龄(32例)胚胎停育患者流产绒毛组织中染色体异常分别为157例份、24例份。育龄者常染色体三体61例份、性染色体单体16例份、三倍体3例份,高龄者分别为15、2、0例份,两者常染色体三体例份数比较,P<0.05。胚胎停育1次、2次、3次、4次、≥5次患者(136、51、33、15、5例)流产绒毛组织染色体异常例份数分别为100、46、22、9、4例份,胚胎停育2次者分别与胚胎停育3次、4次者比较,P均<0.05。胚胎停育1次、2次、3次、4次、≥5次患者流产绒毛组织染色体数目异常例份数分别为58、26、11、2、0例份,胚胎停育1次者、2次者分别与胚胎停育4次者比较,P均<0.05。CNV一共检测出120例份,其中18例份为致病性,2例份为可能致病,87例份为临床意义未明,13例份为可能良性。结论胚胎停育患者流产绒毛组织染色体异常率较高,异常类型为染色体数目异常或结构异常,常染色体多数以三体发生常见,其中16-三体发生率最高,其次为22-三体、15-三体、21-三体等;性染色体异常以X单体为常见。育龄和高龄胚胎停育患者流产绒毛组织染色体异常无差异,但不同胚胎停育次数患者流产绒毛组织染色体异常存在差异。

复发性流产患者绒毛组织HIF-1α、VHL蛋白的表达及其临床意义

目的:检测复发性流产患者绒毛组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、希佩尔林道抑癌基因(VHL)蛋白表达水平并分析其临床意义。方法:选取2019年5月至2021年11月本院收治的83例复发性流产患者作为观察组,另选取80例行人工流产的正常早孕者设为对照组。收集两组绒毛组织,采用免疫组化法检测绒毛组织HIF-1α、VHL蛋白表达水平,采用Spearman法分析复发性流产患者HIF-1α与VHL蛋白表达的关系,并采用Logistic回归分析复发性流产的影响因素。结果:观察组绒毛组织HIF-1α蛋白阳性表达率高于对照组(P<0.05),VHL蛋白阳性表达率低于对照组(P<0.05);观察组HIF-1α蛋白表达与VHL蛋白表达呈负相关(r=-0.504,P<0.05);观察组孕妇被动吸烟、人工流产≥3次、作息不规律占比均高于对照组(P<0.05);经Logistic回归分析可知,人工流产≥3次、作息不规律及HIF-1α蛋白阳性表达率升高均是发生复发性流产的危险因素(P<0.05),VHL蛋白阳性表达是其保护因素(P<0.05)。结论:复发性流产患者绒毛组织中HIF-1α蛋白表达水平异常升高,VHL蛋白表达水平异常降低,且两者呈负相关,均可能与复发性流产的发生有关。

通过CNV-seq检测绒毛组织染色体畸变诊断稽留流产的价值分析

目的:探讨CNV-seq检测绒毛组织染色体畸变对稽留流产的诊断价值。方法:对2019年1月至2021年3月就诊于茂名市妇幼保健院并采用CNV-seq检测绒毛组织染色体畸变的175例稽留流产患者的临床资料进行回顾性分析,记录其CNV-seq检测结果,并分析CNV-seq检测的诊断价值。结果:175例患者中,成功检测173例,失败2例,检测成功率为98.86%,检测出染色体畸变108例,阳性检出率为62.43%;在染色体畸变中,阳性数目异常共91例,其中包括特纳综合征6例,同源二倍体6例,三倍体15例,2-三体2例,3-三体5例,22-三体10例等。其他异常共17例,其中包括复合异常/嵌合类8例,占7.41%(8/108);缺失类/重复类9例,占8.33%(9/108)。结论:CNV-seq检测稽留流产的绒毛组织染色体畸变,可较深入全面地分析染色体异常与稽留流产的关系,具有较好的诊断价值。

早期自然流产患者绒毛组织中HO-1、MCP-1的表达及复发性自然流产的危险因素分析

目的检测早期自然流产(ESA)患者绒毛组织中血红素氧合酶-1(HO-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达,并探讨复发性自然流产(RSA)的危险因素。方法选取2018年6月至2021年5月遂宁市第一人民医院收治的164例ESA患者作为ESA组,另同期选取164例行人工流产的正常妊娠孕妇作为对照组。采用免疫组化法检测两组绒毛组织HO-1、MCP-1表达。ESA组均随访12个月,根据患者自然流产(SA)次数将其分为RSA组和非RSA组,比较RSA组和非RSA组患者的临床资料,采用多因素Logistic回归分析RSA的危险因素。结果ESA组绒毛组织HO-1阳性率及表达水平均低于对照组(P<0.05),ESA组绒毛组织MCP-1阳性率及表达水平均高于对照组(P<0.05);ESA组患者12个月随访期间有23例发生RSA,发生率为14.02%;RSA组绒毛组织HO-1表达水平低于非RSA组(P<0.05),既往有自然流产史患者占比和MCP-1表达水平高于非RSA组(P<0.05);既往有自然流产史、绒毛组织HO-1低表达和MCP-1高表达均为RSA的危险因素(P<0.05)。结论ESA患者绒毛组织HO-1表达水平降低、MCP-1表达水平升高,HO-1低表达和MCP-1高表达均为RSA的危险因素。

流产患者绒毛组织检测技术研究进展

流产是一种常见的产科并发症,指妊娠不足28周,胎儿体重不足500 g而终止妊娠者。稽留流产(missed abortion)是其特殊情况的一种,指胚胎或胎儿已死亡并滞留在子宫腔内,未能及时自然排出者,临床上根据孕周分为早期稽留流产和中期稽留流产,早期稽留流产是指妊娠 ≤ 12周。其不仅容易影响女性的心理健康与生活质量,并且可能导致女性继发生育障碍。据报道,流产的发生率为10%~15%,其发生原因复杂多样,其中染色体异常在早期流产中最为常见,约占早期妊娠流产的50%,其他因素如母体内分泌异常、生殖道畸形、易栓症、感染、免疫性疾病、或者母亲的年龄、生活方式、环境因素等均可引起流产。随着国家经济的不断发展和社会压力的增加,自然妊娠及行辅助生殖助孕后不明原因稽留流产的人数越来越多,人们对于染色体原因的需求越来越深,但随着流产物绒毛组织检测技术的发展,就其不同技术的适用范围的认识尚有不足。

血小板反应蛋白、血管生成素与复发性流产患者绒毛组织的关系研究

目的:探讨复发性流产(RSA)患者绒毛组织血管生成状况,并分析血小板反应蛋白(TSP)、血管生成素(Ang)与RSA的关系。方法:选取2020年6月至2022年6月在上饶市妇幼保健院妇产科医院行清宫术的116例患者作为研究对象,对照组为正常妊娠后行人工流产术,观察组患者为RSA,每组58例,采用免疫组化SP法检测两组研究对象Ang–1、Ang–2、TSP–1、TSP–2的表达情况,并检测微血管密度(MVD)值,分析其与上述指标的相关性。结果:观察组患者绒毛组织中Ang–1、Ang–2、TSP–2的表达水平均高于对照组(P<0.05),TSP–1表达水平低于对照组;而且观察组患者的MVD值显著低于对照组;Ang–1、TSP–2、Ang–2与MVD值呈负相关性(P<0.05),TSP–1与MVD值呈正相关(P<0.05)。结论:RSA患者绒毛组织中Ang–1、Ang–2和TSP–2高表达,TSP–1低表达时胎儿发生RSA的概率较高,上述指标均是胎儿出现RSA的影响因素。

妊娠早期稽留流产患者绒毛组织中HIF-1α、BNIP3、LC3的表达

目的:检测妊娠早期稽留流产患者绒毛组织中HIF-1α、BNIP3、LC3的表达,探讨滋养层细胞自噬异常与稽留流产的关系。方法:收集正常早孕妇女及稽留流产妇女绒毛组织各30例,采用实时荧光定量PCR法检测HIF-1α、BNIP3 mRNA的表达;采用免疫组化SP法及蛋白印迹法检测HIF-1α、BNIP3及LC3蛋白的表达。结果:两组绒毛组织中均可见HIF-1α、BNIP3及LC3蛋白的表达,HIF-1α主要定位于滋养细胞胞核及胞质,BNIP3及LC3主要定位于滋养层细胞胞质中。与正常早孕组相比,稽留流产组HIF-1α与BNIP3 mRNA和蛋白表达水平以及LC3Ⅱ/Ⅰ均明显下降(P<0.05)。结论:绒毛组织滋养层细胞中HIF-1α/BNIP3信号通路调节的低氧诱导自噬水平下降可能是稽留流产发生的重要机制。

IL-10在反复自然流产人绒毛组织的表达及意义

目的:通过研究白细胞介素-10(IL-10)在反复自然流产和正常流产人绒毛组织和血清中的表达比较来探讨IL-10与不明原因反复自然流产的相关性及其临床意义。方法:采用免疫组织化学技术和逆转录-聚合酶链反应技术检测35例反复自然流产者(实验组)和35例正常流产者(对照组)人绒毛组织中IL-10的细胞学定位以及在mRNA水平的表达;ELISA法定量分析IL-10在两组血清中的表达。结果:免疫组织化学检测结果显示两组组织中均有IL-10阳性表达,实验组IL-10在人绒毛组织中的阳性表达率低于对照组(P<0.05)。RT-PCR结果显示实验组和对照组均有IL-10表达,对比显示实验组IL-10表达低于对照组。ELISA测定结果显示IL-10在实验组的表达低于对照组。结论:IL-10的表达在实验组早孕绒毛组织细胞学定位及mRNA水平检测均较对照组降低,在血清中的表达量也是实验组低于对照组,提示自然流产妊娠妇女存在IL-10细胞因子表达异常,IL-10可能在维持正常妊娠过程中起到重要作用。

不明原因复发性流产患者绒毛组织中miR-210表达及其与血管新生因子的关系

目的:探讨不明原因复发性流产(URSA)患者绒毛组织中miR-210表达及其与血管新生因子的关系。方法:选取2014年3月至2016年4月在潍坊市益都中心医院产科行清宫术的URSA患者53例,同期选取正常早孕而终止妊娠的40例患者为对照组。实时荧光定量PCR法检测绒毛组织中miR-210、HIF-1α和VEGF表达,Western blot法检测绒毛组织中HIF-1α和VEGF蛋白表达,免疫组化法检测绒毛组织中MVD。结果:URSA患者绒毛组织中miR-210 mRNA相对表达量均低于对照组,且流产>3次者的miR-210 mRNA相对表达量均低于流产≤3次的患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。URSA患者绒毛组织中HIF-1α和VEGF mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组,且URSA患者中流产>3次绒毛组织中HIF-1α和VEGF mRNA和蛋白相对表达量均低于流产≤3次的患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。URSA患者绒毛组织中MVD数(26.8±4.4)个,显著低于对照组的(37.2±5.1)个,差异有统计学意义(t=15.394,P<0.001)。Pearson相关分析显示,URSA患者绒毛组织中miR-210与HIF-1α和VEGF表达均呈正相关(r=0.418和0.507,P<0.05),与绒毛组织中MVD数呈正相关(r=0.472,P<0.05)。结论:miR-210在URSA患者绒毛组织中呈低表达,且与流产次数有关,可能通过与HIF-1α和VEGF相互作用而减少MVD数量,导致URSA发生。

miRNA-223-3p在不明原因复发性流产患者绒毛组织中表达以及在血管生成中的作用

目的探讨miRNA-223-3p在不明原因复发性流产患者绒毛组织中表达以及在血管生成中的作用及可能机制。方法选取57例不明原因复发性流产患者,其中,流产2~3次36例,≥4次21例,同期,选取正常早孕行人工流产术患者42例作为对照组,利用实时荧光定量PCR技术检测绒毛组织中miRNA-223-3p、Rps6kb1、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达,免疫组化法检测绒毛组织中微血管密度(MVD)。结果不明原因复发性流产患者绒毛组织中miRNA-223-3p表达量高于对照组,而Rps6kb1 mRNA、HIF-1αmRNA和VEGF mRNA表达量均低于对照组,≥4次不明原因复发性流产患者miRNA-223-3p表达量高于2~3次和对照组,而Rps6kb1 mRNA、HIF-1αmRNA和VEGF mRNA表达量低于2~3次和对照组,均差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化结果显示,不明原因复发性流产患者绒毛组织中MVD为(23.3±6.1)个,远低于对照组的(41.6±5.3)个,≥4次不明原因复发性流产患者绒毛组织中MVD低于2~3次,均差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析显示,不明原因复发性流产患者绒毛组织中miRNA-223-3p表达量与HIF-1αmRNA和VEGF mRNA表达量及MVD均呈负相关(r=-0.496、-0.638和-0.597,P<0.001),HIF-1αmRNA表达量与VEGF mRNA表达量和MVD均呈正相关(r=0.584、0.439,P<0.001);VEGF mRNA表达量与MVD呈正相关(r=0.600,P<0.001)。结论 miRNA-223-3p在不明原因复发性流产患者绒毛组织中表达上调,可能与Rps6kb1/HIF-1α信号通路有关。

MicroRNA-126和血管内皮生长因子在胚胎停育绒毛组织中的表达及相关性研究

目的通过分析孕早期胚胎停育与正常胚胎绒毛组织中microRNA-126(miR-126)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异,探讨其在早期胚胎停育中的相关性。方法收集孕早期胚胎停育和正常胚胎绒毛组织各28例作为胚胎停育组和对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组miR-126和VEGF mRNA表达水平的变化。结果 1两组绒毛组织中均有miR-126表达,胚胎停育组绒毛组织中miR-126的表达高于对照组,但差异无统计学意义。2胚胎停育组绒毛组织中VEGF的表达低于对照组,差异有统计学意义。3胚胎停育组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈负相关;对照组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈正相关。结论 1胚胎停育绒毛组织中VEGF的表达低于正常胚胎。2VEGF的表达变化与胚胎停育的发生有一定的相关性。